GABA受体基因转染对癫痫大鼠海马区病理变化的影响

目的探讨在下丘脑乳头体上核内转染γ-氨基丁酸(GABA)受体基因后对海人藻酸(KA)致痫大鼠海马病理变化的影响,从而为难治性癫痫的治疗开辟新的途径。方法在右侧杏仁核内注射KA制备癫痫动物模型作对照,GABA基因转染组则利用仙台病毒(HVJ)-脂质体转染法预先在下丘脑的乳头体上核内转染被脂质体包被的GABA受体基因,48h后在杏仁核内注射KA,两组大鼠分别进行HE染色观察。结果 GABA基因转染组大鼠海马区病理改变较KA对照组明显减轻。结论下丘脑内转染GABA受体基因后可以抑制癫痫发作的程度。     

GluR2Q在下丘脑乳头体上核内过度表达对于大鼠颞叶癫痫脑电的影响

目的 探讨下丘脑乳头体内兴奋性刺激对于颞叶癫痫脑电变化的影响。方法 利用HVJ－脂质体转染法在下丘脑乳头体内转染兴奋性氨基酸受体亚基GluR2Q，研究其对于海人酸（kainic acid,KA)诱发的癫痫模型脑电变化的影响。结果 GluR1Q基因转染组大鼠癫痫连续性放电的开始时间明显早于KA对照组，且持续时间较KA对照组明显延长。结论 下丘脑内GluR2Q基因转染能提高其兴奋性，并促进癫痫波在海马内的传播。     

下丘脑内基因转染对大鼠颞叶癫痫海马病理变化的影响

目的 探讨下丘脑过度兴奋对于颞叶癫痫海马病理变化的影响。方法 利用仙台病毒(HVJ)-脂质体转染法在下丘脑的乳头体内转染兴奋性氨基酸受体亚基GluR2Q，研究其对于海人酸(kainic acid，KA)致痫鼠海马病理变化的影响。结果 GluR2Q能加重KA引起的海马齿状回损伤，但是对CA1及CA3区神经元损伤有一定程度的改善作用。结论 GluR2Q可以使下丘脑兴奋性增强，通过对海马齿状回的抑制解除作用促进癫痫波在海马内的传播。     

青霉素致大鼠急性癫痫模型全身性放电起源的实验研究

目的 探讨青霉素致大鼠急性癫痫模型全身性放电起源的定位特征.方法 给10只SD大鼠各铺设皮层、海马和杏仁核电极共7对,用青霉素300万U·kg-1腹腔注射建立急性全身性癫痫模型,同时脑电记录,观察全身性癫痫样放电起始阶段的脑电特征.结果 脑电显示全身性癫痫样放电起始阶段杏仁核最早出现连续性棘波.结论 青霉素诱导的急性全身性癫痫大鼠模型癫痫样放电并非完全同步化,杏仁核为癫痫易感区,可能参与放电起源.     

迷走神经刺激对癫痫大鼠行为及脑电图的影响

目的：观察颈部迷走神经干电刺激对癫痫大鼠行为及额叶、海马、杏仁核脑区放电的影响，为迷走神经刺激（Vagus Nerve Stimulation,VNS)抗痫机制研究提供理论依据。方法：利用脑立体定位手段，将电极埋入大鼠脑部双侧额叶皮质、海马和杏仁核，记录VNS前后由红藻氨酸（KA）诱发复杂部分性癫痫大鼠脑电变化并观察动物行为的改变。结果：VNS后大鼠癫痫强直－阵挛发作次数明显减少，首次发作潜伏期延长，癫痫发作平均持续时间缩短；VNS尤其对杏仁核放电有明显的抑制作用。结论：VNS能有效抑制KA诱发的复杂部分性癫痫发作，并且杏仁核可能是抑痫作用的关键核因。     

下丘脑内基因转染对大鼠癫痫行为的影响

目的探讨下丘脑过度兴奋对于颞叶癫痫行为学变化的影响，从而进一步阐明下丘脑与颢叶癫痫的关系以及谷氨酸受体2亚基Q型(glutamate receptor 2Q，GluR2Q)在癫痫发病中的作用机制。方法20只Wistar大鼠随机分为海人酸(kainic acid or kainite，KA)组(KA对照组)与KA GluR2Q组，分别观察两组大鼠的癫痫行为。结果KA对照组大鼠癫痫发作程度较轻，主要以部分性发作为主且发作次数少，持续时间短，较少出现全面性发作。KA GluR2Q组大鼠癫痫发作程度剧烈，部分性癫痫发作较KA对照组更早、更频繁且由部分性发作转化为全面性发作的比率高于KA对照组。结论通过HVJ-脂质体基因转染技术将GluR2Q基因转染到下丘脑乳头体可以提高其兴奋性，并使该兴奋性冲动通过下丘脑与海马之间的联络纤维传导至海马齿状回及CA3、CA1区，使海马区原有的兴奋性加强，表现为癫痫行为的加重，从而促进了癫痫的发展及传播。     

热凝毁损杏仁核对痫性放电的抑制作用

目的探讨热凝毁损杏仁核对头皮痫性放电的抑制作用。方法对本院2005年1月~2006年5月收治的58例癫痫患者常规进行24小时视频脑电监测、偶极子分析,对有痫性放电的患者机器人辅助立体定向引导深部电极植入杏仁核,记录其电活动,其后热凝毁损杏仁核,复查深部电极和头皮脑电。结果58例癫痫患者全部记录到头皮棘尖波,56例(96.55%)存在杏仁核痫性放电。热凝毁损杏仁核后,其痫性放电消失42例,明显减少14例,无无效者,复查头皮脑电棘尖波消失20例,明显减少32例,无明显差别者6例。结论热凝毁损杏仁核可明显抑制包括颞叶内侧放电的半球痫性放电。     

痫性放电实现异体间转道并致痫动物的研究报道

目的观察青霉素癫痫模型痫性放电能否被引导电极转道至异体大鼠脑内并致痫。方法实验大鼠海马局部注射青霉素建立癫痫模型,通过引导电极拟将痫性放电导入异体大鼠同侧海马,观察实验大鼠的行为学、脑电图变化。结果致痫组、痫能导出组12只大鼠全部点燃,痫能导入组6只大鼠亦出现痫性发作,痫能导出组痫性发作时程缩短,致痫组、痫能导出组、痫能导入组大鼠脑电图均可记录到痫性波;对照组、电极组无痫性发作。结论实验性痫性放电可通过引导电极在异体大鼠脑组织间传导,脑内痫性放电有可能被电极导出。     

脑内移植可抑制癫痫发作

癫痫发作的电生理理论是脑内致痫灶神经元的过度放电和异常扩散。神经组织移植可以改变和抑制神经元的放电和传播,以及改变神经介质的含量从而可抑制癫痫的发生及发展。γ—氨基丁酸(GABA)拮抗剂和毒蕈碱样胆碱能受体兴奋剂等被认为是化学性致痫因子,全身注射这类因子即可诱发出癫痫大发作的实验动物模型。1988年美国NIH的     

海马内注射内皮素-1导致大鼠痫性发作和海马硬化的初步研究

目的 观察大鼠海马内注射内皮素(endothelin,ET)-1是否导致大鼠痫性发作和海马硬化.方法 立体定位在成年大鼠海马CA3区内分别注射1 μL ET-1(200 pmol,15只)、海人酸(kainate,KA 5 pmol,15只)或磷酸盐缓冲液(PBS,0.01 mol,8只),观察大鼠行为学、脑电及对侧海马病理学改变.结果 海马注射PBS后大鼠未见痫性发作,脑电图呈10～15 Hz、150-200μV基本节律.注射ET-1或KA 2 h内大鼠出现不同程度的痫性发作和脑电图异常改变(尖波或尖慢波),KA组3-5级发作率高于ET-1组(86.67% vs 16.67%,P<0.05).部分ET-1和KA组大鼠在给药后2～3周可见癫痫样发作行为学改变.与PBS组比较,El-1和KA组给药后48 h对侧海马各区Nissl染色细胞数明显减少,GFAP表达增强(P<0.05);给药后30 d,对侧CA3区和门齿区苔藓纤维出芽评分高于PBS组(P<0.05).结论 海马注射ET-1可以导致大鼠癫痫样行为改变和海马硬化.     

Rats displaying distinct exploratory activity also have different expression patterns of gamma-aminobutyric acid- and cholecystokinin-related genes in brain regions

The aim of the present study was to evaluate the expression of genes in relation to the exploratory activity of rats. Limbic system-associated membrane protein (LsAMP) gene, gamma-aminobutyric acid-(GABA)- and cholecystokinin-(CCK)-related genes were analyzed in the frontal cortex, amygdala and periaqueductal gray (PAG) after exposure of rats to exploratory challenge. Two groups of animals displaying low and high exploratory activity in the elevated plus-maze were selected for gene expression studies from the population of 43 male Wistar rats. Eight rats were taken randomly from the same cages as animals exposed to the plus-maze, but they were not subjected to the exploratory test. This home-cage control group was also used for gene expression analysis in order to explore a possible impact of the plus-maze exposure. Rats with low and high exploratory activity displayed clearly distinct profiles in gene expression. Most prominent alterations were established in the amygdala where almost all GABA-related and CCK receptor genes were two- to five-fold up-regulated in low exploratory activity rats compared to high exploratory activity and home-cage control group. The expression of several GABA-related genes was also increased in the PAG of animals displaying low exploratory activity compared to the other groups. Moreover, we found reduced expression of GABA- and CCK-related genes in all three brain regions in animals with high exploratory activity compared to the home-cage control group. In addition to these findings, we established a significantly increased expression of the LsAMP gene in the amygdala and PAG of low exploratory activity animals compared with the other groups. In conclusion, low and high exploratory activity rats differed not only by their exploratory activity but also displayed opposite gene expression patterns. Low exploratory activity of rats correlated with the up-regulation of LsAMP and GABA-related genes in the amygdala and PAG and with the up-regulation of CCK receptors in the amygdala. High exploratory activity of rats was related to a significant down-regulation of CCK receptor genes in the amygdala and PAG. These rats also displayed the reduced expression of GABA-related genes in the frontal cortex and PAG.     

海马干细胞移植对癫癎鼠脑电影响的初步研究

目的研究神经干细胞移植对癫癎鼠脑电的影响,为神经干细胞移植治疗癫癎提供理论依据.方法分离、培养新生鼠海马干细胞,将其移植至海人酸(KA)所致癫癎模型鼠的右侧海马,比较移植组及未移植组大鼠在移植前和移植后1周、4周、8周及24周海马及杏仁核的脑电变化.结果海马干细胞移植可减少癫癎动物脑电的痫性发放,并降低癫癎波幅约50%.结论神经干细胞移植对于KA诱发癫癎鼠的癫癎具有一定的抑制作用,但其具体作用机制还有待于进一步的研究.     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作的电生理机制研究

目的　探讨红藻氨酸 ( KA)诱导大鼠复杂部分性癫痫发作的 EEG特点以及可能的电生理起搏点位置。方法　在立体定位指引下 ,将 EEG记录电极植入 1 2只大鼠双侧海马、额叶皮质或杏仁核中 ,其中 8只为实验组 ,4只为对照组。手术后 1周在大鼠清醒状态下 ,连续描记 KA或盐水注射后 EEG 1 2 0 min,观察 EEG波形、波幅以及频率的变化特点并记录每次电发作的起搏点位置。结果　 ( 1 ) KA注射后大鼠 EEG表现出多种形式的放电波形 ,典型波形有单棘波、多棘波、多相棘波、正相棘波、棘节律、节律性慢波、棘慢波等。 ( 2 )大鼠在凝视发作以及自动症发作时海马、杏仁核和额叶皮质均有异常放电。 ( 3) KA注射后大鼠电发作起搏点不固定。 ( 4 )各导放电频率多数情况下一致 ,偶有不一致现象。 ( 5 )存在亚临床放电。结论　 ( 1 ) KA注射后大鼠 EEG表现为多种形式的电发作活动 ;( 2 )大鼠在复杂部分性发作过程中不仅有边缘系统参与 ,也有边缘外额叶皮质参与 ;( 3)KA模型中 ,电发作起搏点不固定 ,KA注射后大鼠脑内可能存在一个异常的神经元网络 ,在网络中存在放电不均衡现象。     

低频重复经颅磁刺激治疗难治性癫大鼠模型及对脑源性神经营养因子和神经肽Y表达的影响

目的研究低频重复经颅磁刺激对难治性颢叶癫癎大鼠的治疗作用,以及对海马脑源性神经营养因子（BDNF）和神经肽Y（NPY）表达水平的影响,以探讨低频重复经颅磁刺激治疗癫癎的可能机制。方法于海马CA3区注射海仁酸制备难治性颞叶癫癎大鼠模型,以低频重复经颅磁刺激方法共治疗10 d（连续治疗5 d、间隔2 d,治疗2周）。分别观察不同处理组大鼠治疗前后海马区脑电图变化及尖波数目;免疫组织化学染色检测手术后第3周时海马CA3区BDNF和NPY表达变化。结果与治疗前尖波数目（T₃:16.16±1.17,T₄:14.94±0.98）比较,低频重复经颅磁刺激治疗后难治性颞叶癫癎大鼠脑电图尖波数目（T₃:9.09±0.67,T₄:8.93±0.91）明显减少（均p=0.000）;海马CA3区BDNF（治疗前后IOD值:49 571.40±2344.02比29 602.07±1932.82）、酪氨酸蛋白激酶B（TrkB,治疗前后IOD值:2946.77±1142.79比18 104.34±934.58）和NPY（治疗前后IOD值:33 823.05±843.45比15 037.14±772.95）阳性细胞数目明显减少（均P=0.000）。结论低频重复经颅磁刺激可以通过降低难治性颞叶癫癎大鼠癎样放电,以及下调海马BDNF、TrkB和NPY表达水平而发挥抗癫癎作用。     

低频重复经颅磁刺激治疗难治性癫癎大鼠模型及对脑源性神经营养因子和神经肽Y表达的影响

目的研究低频重复经颅磁刺激对难治性颞叶癫癎大鼠的治疗作用,以及对海马脑源性神经营养因子（BDNF）和神经肽Y（NPY）表达水平的影响,以探讨低频重复经颅磁刺激治疗癫癎的可能机制。方法于海马CA3区注射海仁酸制备难治性颞叶癫癎大鼠模型,以低频重复经颅磁刺激方法共治疗10d（连续治疗5d、间隔2d,治疗2周）。分别观察不同处理组大鼠治疗前后海马区脑电图变化及尖波数目;免疫组织化学染色检测手术后第3周时海马CA3区BDNF和NPY表达变化。结果与治疗前尖波数目（T3：16．16±1．17,T4：14．94±0．98）比较,低频重复经颅磁刺激治疗后难治性颞叶癫癎大鼠脑电图尖波数目（T3：9．09±0．67,T4：8．93±0．91）明显减少（均P=0．000）;海马CA3区BDNF（治疗前后IOD值：49571．40±2344．02比29602．07±1932．82）、酪氨酸蛋白激酶B（TrkB,治疗前后IOD值：2946．77±1142．79比18104．34±934．58）和NPY（治疗前后IOD值：33823．05±843．45比15037．14±772．95）阳性细胞数目明显减少（均P=O．000）。结论低频重复经颅磁刺激可以通过降低难治性颞叶癫痫大鼠癎样放电,以及下调海马BDNF、TrkB和NPY表达水平而发挥抗癫癎作用。     

颞叶癫痫大鼠不同时期海马细胞外氨基酸类递质的变化

目的探讨海人酸(Kainic Acid,KA)诱发颞叶癫痫大鼠不同时期海马CA3区细胞外谷氨酸(gluta-mate,GLU)、γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)、甘氨酸(glycine,GLY)、天冬氨酸(aspartic acid,ASP)、牛磺酸(taurine,TAU)等递质水平的变化。方法 21只SD大鼠随机分为对照组(9只)和KA组(12只)。KA组大鼠海马CA3区注射0.8μgKA,对照组海马CA3区注射同体积生理盐水,于1天(急性期)、7天(静止期)、30天(慢性期)对大鼠海马CA3区行微透析,用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)测定透析液中GLU、GLY、GABA、ASP、TAU含量的变化。结果急性期:与对照组相比,KA组CA3区细胞外GLU(P=0.004)、GLU/GABA(P=0.002)明显增高,GABA(P=0.001)、GLY(P<0.001)明显减少,ASP(P=0.23)、TAU(P=0.28)与对照组相比无明显差异。静止期:KA组GLU(P=0.003)、GLU/GABA(P<0.001)较对照组明显降低,而GABA(P<0.001)、ASP(P<0.001)、TAU(P<0.001)较对照组明显增高,GLY(P=0.49)与对照组相比无明显差异。慢性期:与对照组相比,KA组GLU(P<0.001)、GABA(P=0.013)、ASP(P<0.001)、TAU(P<0.001)、GLU/GABA(P<0.001)明显升高,GLY与对照组相比无明显差异(P=0.86)。结论海马CA3区兴奋性与抑制性氨基酸类递质失衡可能是癫痫发生发展的重要机制之一。     

大鼠海马干细胞移植治疗颞叶癫痫的初步研究

目的 通过神经干细胞移植至癫痫鼠后与宿主细胞的整合及其对损伤宿主的修复作用，为神经干细胞移植治疗癫痫提供理论依据。方法 分离、培养新生鼠海马干细胞，移植至海人酸(KA)所致癫痫模型鼠的右侧海马内，应用Timm、Nissl、HE染色及动态脑电记录仪记录脑电图。在光镜及电镜下比较正常对照组、移植组及KA未移植组大鼠，在移植后的1周、4周、8周及24周苔状纤维发芽(MSF)、海马CA3区锥体神经元损伤情况及海马、杏仁核的脑电变化。结果 海马干细胞的移植可以显著抑制KA引起的MFS，其抑制作用从移植后第4周开始，第8周时最强，持续至第24周；同时亦明显的减轻了KA所致的CA3区锥体细胞缺失，其作用在第8周最强；KA所致CA3区锥体神经元超微结构的损伤亦得到一定程度的修复；但是，干细胞的移植并未使宿主恢复到损伤前的水平，海马干细胞移植可减少癫痫动物脑电的痫性发放，并降低其癫痫波的波幅约50％。结论 神经干细胞移植对于KA诱发癫痫鼠具有显著的修复作用，其具体作用机制还有待于进一步的研究。     

Neuroprotection of co-activation of GABA receptors by preventing caspase-3 denitrosylation in KA-induced seizures

Previous studies have demonstrated that kainic acid (KA)-induced seizures can cause the enhancement of excitation and lead to neuronal death in rat hippocampus. Co-activation of the inhibitory GABA receptors can attenuate the excitatory JNK3 apoptotic signaling pathway via inhibiting the increased assembly of the GluR6-PSD-95-MLK3 signaling module induced by KA in epileptic rat hippocampal CA1 and CA3 regions. Caspase-3 is a cysteine protease located in both the cytoplasm and mitochondrial intermembrane space that is a central effector of many apoptotic pathways. We designed experiments to elucidate the underlying molecular mechanisms of procaspase-3 activation and neuroprotection of co-activation of GABA receptors against neuronal death induced by KA. In this study, we show that co-activation of GABA receptors can attenuate the Fas/FasL apoptotic signaling pathway and inhibit the increased of thioredoxin reductase activity induced by KA, subsequently inhibit the activation of procaspase-3 by diminishing the denitrosylation of its active-site thiol and decreasing the cleavage of the caspase-3 zymogen to its active subunits. These results indicate that co-activation of GABA receptors results in neuroprotection by preventing caspase-3 denitrosylation in KA-induced seizure of rats.