小肠缺血预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨小肠缺血预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 健康成年新西兰大白兔18只,体重2.0～2.5 kg,随机分为3组(n=6),Ⅰ组阻断冠状动脉左前降支(LAD)30 min并再灌注2h;Ⅱ组先阻断肠系膜上动脉(SMA)15 min并再灌注15 min(MAO15),其后操作同Ⅰ组;Ⅲ组先给予3次小肠缺血5min再灌注5 min(3MAO5),其后操作同Ⅰ组.记录开胸前(T0)、阻断SMA后即刻(T1)、阻断SMA 30 min后(T2)、阻断LAD前(T3)及心肌再灌注2h后(T4)的HR、和BP;分别于以上各时点采集静脉血测定肿瘤坏死因子(TNF-α)及乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB);T4时心肌染色,电镜下观察超微结构并测定心肌缺血范围和心肌梗死范围.结果 与Ⅰ组和Ⅲ组分别比较,Ⅱ组心肌梗死范围明显减少(P＜0.05),T4时乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶浓度明显降低,T3、T4时肿瘤坏死因子(TNF-α)浓度明显降低(P ＜0.05),电镜下超微结构损伤较轻,心肌缺血范围与Ⅰ组、Ⅲ组差异无显著性.结论 单次小肠缺血15min预处理能减轻心肌缺血再灌注损伤,抑制TNF-α浓度的升高.     

缺血预处理对兔肢体再灌注损伤作用的实验研究

探讨止血带下肢体的缺血预处理对减轻再灌注损伤的作用。实验对对照组、短时间缺血预处理组和地塞米松预处理组,各组兔分别于松止血带前、松止血带后１０、２０、４０、６０ｍｉｎ取腓肠肌测脂质过氧化物（ＬＰＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及超微结构观察。结果发现：对照组与预处理组间有显著性差异（Ｐ〈０．０１或Ｐ〈０．０５）。提示,在长时间应用止血带前进行短时间缺血预处理和地塞米松预处理可减轻再灌注损伤。     

缺血预处理对兔肢体再灌注损伤作用的实验研究

探讨止血带下肢体的缺血预处理对减轻再灌注损伤的作用。实验分对照组、短时间缺血预处理组和地塞米松预处理组,各组兔分别于松止血带前、松止血带后 １０、２０、４０、６０ ｍｉｎ取腓肠肌测脂质过氧化物（ＬＰＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及超微结构观察。结果发现：对照组与预处理组间有显著性差异（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。提示,在长时间应用止血带前进行短时间缺血预处理和地塞米松预处理可减轻再灌注损伤。     

ET-1和TNF-α在肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨内皮素-1(endothelin-1,ET-1)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法 选用雄性Wistar大鼠60只,分为正常对照组和缺血再灌注组,观察了肝脏缺血前与缺血60min再灌注1、3、6、12、24h后血浆ET-1、TNF-α、谷丙转氨酶(ALT)、透明质酸(HA)及肝组织中ET-1、丙二醛(MDA)含量的变化。结果 肝脏缺血再灌注后血浆和肝组织中ET-1、血浆HA、ALT和肝组织中MDA含量均显著增高。结论 肝脏缺血再灌注后,ET-1和TNF-α的生成增加,ET-1可导致肝脏微循环障碍,造成肝窦内皮细胞和肝细胞损伤,而TNF-α促进了这一过程。     

MMP-2、MMP-9在大鼠肾缺血再灌注损伤早期的表达及意义

目的探讨大鼠肾缺血再灌注后肾组织中MMP-2、MMP-9的表达及在肾缺血再灌注损伤中的作用机制。方法48只健康雄性SD大鼠,分组建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,应用免疫组化二步法检测MMP-2、MMP-9表达的变化,测定肾组织髓过氧化物酶(MPO)活性及血清肌酐(Scr)水平,以反映中性粒细胞浸润及肾功能损害的程度变化。结果MMP-2、MMP-9蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血45min再灌注6h有少量表达,再灌注12、24、72h呈阳性表达,以24h达高峰(P<0.05),多表达在皮质深层近曲小管及髓质区。与假手术组比较,缺血再灌注各组Scr水平和MPO的活性升高,且随再灌注时间延长而进一步升高,24h达高峰(P<0.01)。MMP-2和MMP-9蛋白的表达变化与Scr水平呈显著性正相关关系(r分别为0.763和0.874,P<0.01);与MPO活性也呈显著性正相关关系(r分别为0.752和0.693,P<0.01)。结论肾缺血再灌注后肾组织中MMP-2、MMP-9表达增加,提示MMP-2、MMP-9可能与早期肾缺血再灌注后损伤及加重有关。     

3-氨基苯甲酰胺减轻骨骼肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的 研究3-氨基苯甲酰胺(3AB)对鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用,以及组织中凋亡和胀亡的存在情况.方法 54只SD大鼠随机分为空白对照组、缺血再灌注组、3AB组,持续缺血4h,再灌注6、24和48 h.检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CPK)活性,肌肉内丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)活性,进行组织学、免疫组化、超微结构分析.结果 3AB组在再灌注24h和48 h时,在MDA含量下降、SOD活性升高、骨骼肌湿重与干重比值下降、组织学改变范围及免疫组化阳性范围方面,均与缺血再灌注组有明显差异.结论 再灌注开始时应用3AB对于缺血再灌注损伤有明显的保护作用,主要体现在再灌注的稍后期阶段(再灌注24 h和48 h).缺血再灌注过程中,凋亡和胀亡是并存的.     

缺血预处理和缺血后处理对脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:比较缺血预处理和缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注时神经功能缺损及MMP-9表达的影响。方法:SD大鼠随机分为四组,分别是假手术组(S组),缺血再灌注组(I/R组),缺血预处理组(IPC组)和缺血后处理组(IPost组),观察各组神经行为学,测定脑组织含水量、TTC染色观察脑梗死体积,免疫组化染色测定脑组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果 :与S组相比,I/R组大鼠的神经功能损害评分明显升高,脑组织出现大面积梗死,且脑组织含水量明显增加,MMP-9的表达升高;而IPC组及IPost组大鼠的经功能损害较I/R组有明显改善,且脑组织梗死面积减小,脑组织含水量降低,MMP-9的表达强度降低。结论:缺血预处理及缺血后处理均能降低大鼠脑缺血再灌注大脑损伤,改善大鼠的神经行为学。     

缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注后TNF-α和VEGF表达的影响

目的 探讨缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将180只(sprague-dawley,SD)雄性大鼠按照随机数字表法随机分为3个实验组(n=60):假手术组(SH)、缺血再灌注组(IR)、缺血预处理+缺血再灌注组(IP),相应处理后,予行为学评分,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-trip...     

兔脑缺血再灌注后细胞凋亡与TIMP-1表达的特点

目的 探讨兔脑缺血再灌注后细胞凋亡和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达的特点.方法 成年健康新西兰兔103只,应用线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)动物模型,将成功的60只兔MCAO模型随机分为永久性缺血组和缺血再灌注组,各30只.原位末端标记法检测两组脑组织细胞凋亡的情况,免疫组织化学方法检测脑组织TIMP-1表达的情况.结果 脑缺血后脑组织细胞凋亡数逐渐增多,缺血12 h达高峰,以后逐渐减少(F=14.48,q=4.79～9.39,P<0.01).缺血1 h时脑组织TIMP-1阳性细胞数逐渐增多,48 h达高峰(F=52.05,q=4.98～19.43,P<0.01).动物缺血1 h再灌注后,各时间点凋亡细胞数和TIMP-1表达都低于永久性缺血组,再灌注23 h阳性细胞数最多,再灌注47 h下降(F=8.34、53.34,q=3.10～18.70,P<0.01).结论 急性脑缺血再灌注后,细胞凋亡与TIMP-1表达一致.     

抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体减轻大鼠移植肝缺血再灌注损伤的实验研究

目的研究抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体(Anti-TNF-αmAb)对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的作用及机制。方法SD大鼠80只,体重(250±20)g,随机分为受体组与供体组。两两随机配对后再随机分为实验组和对照组,建立原位肝移植模型。实验组供肝经门静脉冷灌注20ml4℃的生理盐水+抗TNF-α单克隆抗体(0.1mg/kg);对照组供肝经门静脉冷灌注20ml4℃的生理盐水。采用全自动生化分析仪,酶联免疫吸附实验(ELISA)法,HE染色,TUNEL法分别测定血肝功能酶(ALT,AST),血浆TNF-α,肝组织病理改变及肝细胞凋亡情况。结果实验组应用抗TNF-α单克隆抗体后血ALT,TNF-α水平显著低于对照组(P<0.01),血AST水平低于对照组(P<0.05),肝组织形态学无明显改变,细胞凋亡显著减少。结论抗TNF-α单克隆抗体能有效减轻大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤,缓解肝功能下降。     

兔肾缺血再灌注损伤时TNF-α、ATPase的变化及黄芪对其的影响

目的：探讨肾缺血再灌注损伤时TNF—α、ATPase的变化和黄芪在兔肾缺血再灌注损伤中的作用。方法：健康成年日本大耳白兔27只，随机均分为手术对照组、单纯缺血再灌注(IR)组和黄芪连注射液处理组(黄芪 IR)。在肾缺血1h再灌注48h后测血清肌酐(Cr)，肾组织肿瘤坏死因子(TNF—α)和ATP酶(Na^ —K^ ATPase、Ca^2 ATPase，Mg^2 ATPase)含量。结果：与对照组相比，IR组Cr、TNF—α显著增高(P＜0．05，P＜0．05)，ATP酶活性下降(P＜0．05)；与IR组相比，黄芪 IR组cr、TNF—α显著降低(P＜0．05)，黄芪 IR组Na^ —K^ ATPase、Ca^2 ATPase活性明显升高(P＜0．05)。结论：黄芪具有减轻肾IR损伤的作用，其机制可能与其减少TNF—α含量、增强ATPase的活性有关。     

缺血预处理中释放的氧自由基对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 :检验预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 ,研究氧自由基对缺血预处理的作用。方法 :采用大鼠肝脏原位缺血再灌注模型 ,评价缺血预处理中释放的氧自由基对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。结果 :缺血预处理明显减少AIJ、AST及LDH漏出 ,减少ATP消耗。氧自由基清除剂MPG可以完全破坏缺血预处理的保护作用。氧自由基可以模拟缺血预处理的保护作用 ,而蛋白激酶C抑制剂多粘菌素B可以阻断氧自由基的保护作用。结论 :缺血预处理中释放的氧自由基可以诱导缺血预处理的保护作用 ,蛋白激酶C参与了该保护机制。     

阿托伐他汀钙短期预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察阿托伐他汀钙短期预处理在调节心肌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、组织金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达中的作用,探讨阿托伐他汀钙发挥心肌缺血再灌注损伤保护作用的可能机制。方法将兔随机分为正常对照组、缺血再灌注安慰剂组和阿托伐他汀钙组。正常对照组开胸后冠状动脉左前降支下穿一线,不结扎;另两组开胸后采用聚乙烯小管与无菌缝线阻断冠状动脉左前降支血流建立心肌缺血再灌注模型,进行30min缺血和180min再灌注。计算心肌缺血范围和心肌梗死范围。采用平均吸光度值评估MMP．2、TIMP．2的表达水平。结果心肌缺血范围在缺血再灌注安慰剂组为（38．61±1．53）％,阿托伐他汀钙组为（37．5±1．5）％,两组间差异无统计学意义（P〉0．05）;心肌梗死范围在缺血再灌注安慰剂组为（50．00±2．00）％,阿托伐他汀钙组为（29．67±2．08）％,两组间差异具有统计学意义（P〈0．01）。缺血再灌注安慰剂组MMP-2的表达（1．17±0．09）显著高于正常对照组（0．23±0．04）与阿托伐他汀钙组（0．21±0．03）（均P〈0．05）;阿托伐他汀钙组TIMP-2的表达（0．24±O．02）显著高于正常对照组（0．18±0．04）与缺血再灌注安慰剂组（0．17±0．02）（均P〈0．05）。结论阿托伐他汀钙短期预处理可能通过抑制基质金属蛋白酶MMP-2的表达、上调组织金属蛋白酶抑制物TIMP-2的表达发挥心肌保护作用。     

丁咯地尔对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织MMP-9与TIMP-1的影响

目的:观察丁咯地尔对大鼠脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响,探讨丁咯地尔的脑保护作用机制.方法:健康SD大鼠108只随机分成假手术组、对照组和丁咯地尔治疗组,每组36只,18只用于检测MMP-9、TIMP-1,18只测量脑组织含水量.大鼠建立脑缺血再灌注损伤模型,缺血时间为1 h,假手术组仅在颈外动脉处穿线;对照组制作脑缺血再灌注模型,不作干预;丁咯地尔治疗组于再灌注时经尾静脉给药(赛来乐3 ml/kg,每ml含丁咯地尔10 mg).分别于再灌注后1 d、2 d和3 d处死,每个时间点6只大鼠,断头取脑,以干湿重法测量缺血侧脑组织含水量;用免疫组化方法检测MMP-9与TIMP-1阳性细胞的表达情况.结果:在各时间点丁咯地尔治疗组脑组织含水量低于对照组,丁咯地尔治疗组MMP-9细胞阳性率低于对照组,而TIMP-1细胞阳性率仅在再灌注后第3 d时高于对照组(P＜0.05).结论:丁咯地尔可能通过调节MMP-9/TIMP-1表达,发挥抗脑水肿作用.     

RhoA-MMP-2信号通路在缺血预处理保护糖尿病大鼠心肌缺血再灌注中的作用

目的 探讨糖尿病心肌缺血再灌注损伤的发生机理,观察RhoA-MMP-2信号转导通路在缺血预处理保护糖尿病大鼠心肌缺血再灌注中的作用.方法 SD大鼠40只,分为非糖尿病心肌缺血再灌注(CIR)组、非糖尿病心肌缺血预处理(CIP)组、糖尿病心肌缺血再灌注(DIR)组和糖尿病心肌缺血预处理(DIP)组.免疫组织化学法检测心肌MMP-2蛋白的表达,Western blot法测定心肌RhoA和ROCK蛋白的表达,检测血清和心肌组织中NO、NOS、SOD和MDA的水平,进行心肌梗死范围的测定.结果 与DIR组相比,DIP组血清和心肌中的MDA含量明显降低,血清和心肌中的SOD活性明显升高.与DIR组相比,DIP组血清和心肌中的NO含量明显降低,血清和心肌中的NOS活性明显降低.与DIR组相比,DIP组心肌中的MMP-2蛋白表达明显降低.CIP组的心肌梗死面积较CIR组降低;DIP组的心肌梗死面积较DIR组降低;与CIP组比较,DIP组的心肌梗死面积显著增加.DIP组中RhoA蛋白的表达明显低于DIR组.DIP组中ROCK蛋白的表达明显低于DIR组.结论 缺血预处理可减轻糖尿病大鼠的心肌缺血再灌注损伤,可能与减轻脂质过氧化和自由基损伤、下调MMP-2、RhoA和ROCK蛋白的表达以及降低心肌梗死的范围等有关.     

缺血预处理对在体兔肺缺血再灌注损伤的保护作用

采用在体兔肺缺血再灌注模型，评价缺血预处理对６０ｍｉｎ缺血６０ｍｉｎ再灌注肺损伤的保护作用。结果显示：预处理组较对照组的氧合功能好。毛细血管通透性的损伤和肺超微结构的损伤较对照组轻微，肺组织超氧化物歧化酶含量亦较高。表明缺血预处理对在体兔肺缺血再灌注损伤有显著的保护作用。     

染矽尘大鼠肺组织中MMP-2/9和TIMP-1/2蛋白的表达

目的探讨肺组织中基质金属蛋白酶(MMP-2/9)和其抑制物基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1/2)在SiO2致矽肺纤维化中的表达及意义。方法清洁级Wistar大鼠64只,随机分为对照组和染尘组。采用暴露式气管内注入法染尘,染尘组每只大鼠注入1 ml SiO2混悬液,对照组注入1 ml灭菌生理盐水。染尘后3,7,14和28 d处死取其肺组织,光镜观察其病理切片;通过ELISA法,测定大鼠肺组织中MMP-2、MMP-9和TIMP1、TIMP-2蛋白的表达。结果与正常对照组比较,染尘组大鼠染毒后3 d肺组织发生局灶性病变,肺泡间隔增厚,间质细胞明显肿胀,局部可见肺泡腔形成细胞性结节,28 d时染尘组大鼠肺泡结构破坏或消失,肺组织以胶原沉积、肺纤维化改变为主,可见巨大纤维性结节;染尘组肺组织内MMP-2,MMP-9,TIMP-1和TIMP-2表达均较对照组增高,结果经秩和检验差异具有统计学意义(P<0.05)。结论矽肺组织内MMP-2/9和TIMP-1/2的高表达,说明其参与了矽肺纤维化的形成。     

缺血预处理对脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的：通过观察Toll样受体4（Toll-like receptors,TLR4）和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化,探讨缺血预处理对大鼠再灌注损伤的保护作用并研究其意义。方法：将36只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为缺血预处理组（CIP组n=12）、缺血再灌注组（I/R组n=12）和假手术组（Sham组n=12）;I/R组采用线栓法阻断大脑中动脉（MCAO）2h建立模型,CIP组先给予MCAO阻断10 min,再灌注72 h后给予与I/R组相同的处理,假手术组仅分离血管。均于术后1d取材检测脑梗死体积、用 Zea Longa评分标准进行神经功能评分以及通过荧光实时定量PCR（Real-time Quantitative polymerase chain reaction）法测定TLR4和TNF-α mRNA水平的表达。结果：缺血再灌注后1 d各组大鼠比较,CIP组大鼠脑梗死体积明显低于I/R组,差异有显著统计学意义（P＜0.05）,CIP组大鼠的神经功能缺损评分明显低于I/R组,二者比较有显著性差异（P<0.05）。TLR4、TNF-α mRNA在CIP组与I/R组的表达明显高于Sham组,差异有显著统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）,而二者在CIP组的表达明显低于I/R组（P＜0.05）。结论：缺血预处理能改善由再灌注损伤引起的功能障碍,可能通过下调促炎因子的表达来减轻脑组织缺血再灌注损伤,从而减轻炎症反应。     

乌司他丁对幕上肿瘤切除术患者血清TNF-α、MMP-9和TIMP-1的影响

目的 探讨乌司他丁对幕上肿瘤切除术患者血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、基质金属蛋白酶(MMP)-9和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1的影响.方法 择期行幕上肿瘤切除术的患者纳入本研究,随机分为对照组(C组)和乌司他丁组(U组).U组在手术开始前30 min内静脉输注乌司他丁6 000 U/kg,C组则静脉输注等容量生理盐水.分别于麻醉诱导前10 min(T0)、剪硬膜即刻(T1)、术毕(T2)、术后24 h(T3)和术后72 h(T4)检测血清TNF-α、MMP-9和TIMP-1浓度.记录术后第1、3天头痛、恶心及呕吐评分,患者ICU停留时间和术后住院时间.结果 50例患者纳入本研究,每组25例.与T0比较,C组T2、T3时点血清TNF-α浓度明显升高(P＜0.05).2组T1时点血清MMP-9浓度均较T0明显升高,U组T3时点血清MMP-9浓度明显降低,2组T1～T4血清TIMP-1浓度均明显升高(P均＜0.05).与C组比较,U组T2、T3时点血清TNF-α浓度及T3时点血清MMP-9浓度明显降低(P均＜0.05),T1、T3时点血清TIMP-1浓度明显升高(P＜0.05).与C组比较,U组患者术后第1天呕吐评分降低(P＜0.05).结论 乌司他丁能够降低神经外科患者术后血清TNF-α浓度,降低术后MMP-9水平,可能具有一定的神经保护作用.