白细胞介素13诱导Dami细胞分化并下调转录因子c-myc表达

目的：研究重组人白细胞介素13（recombinant human interleukine-13，rhIL-13）对巨核细胞白血病细胞株Dami细胞分化的影响，以及Dumi细胞白细胞介素13受体α1（Interleukine-13 receptor alpha 1，IL-13 Rα1）的表达，探讨IL-13诱导Dami细胞分化的机制。方法：Dumi细胞经无血清培养20小时后，以rhIL-13分别作用不同时间，提取总RNA，用RT—PCR检测Dumi细胞IL-13受体α1 mRNA、GPⅡb mRNA、c-myc mRNA表达水平。流式细胞仪检测在rhIL-13作用下，Dami细胞GPⅡb表达。免疫组化法检测在rhIL-13作用下，Dumi细胞c—myc的表达。图像分析仪对结果进行分析。结果：①Dami细胞表达IL-13 Rα1 mRNA，rhIL-13作用Dumi细胞4小时，IL-13 Rα1 mRNA表达降低，12小时IL-13 Rα1 mRNA表达恢复。②rhIL-13作用Dami细胞后，巨核细胞的分化标志物GPⅡb mRNA和蛋白质表达增加。③rhIL-13作用Dumi细胞，c—myc mRNA和蛋白质表达降低。结论：白细胞介素13下调c—myc表达。     

重组白细胞介素13促进成纤维细胞增殖及胶原合成

目的：观察重组白细胞介素13（rIL-13）对3T3细胞的作用，探讨肺纤维化的发生机制。 方法： 3T3细胞分为实验组和对照组，分别加入rIL-13 (80 μg/L)及DMEM培养液, 作用24 h、48 h，利用透射电镜观察成纤维细胞的超微结构，用Hoechst 试剂盒观察细胞DNA形态；用MTT法测细胞增殖率，用Western blotting检测成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原以及用放免法检测细胞上清中IL-6、IL-8水平。 结果： 实验组细胞DNA合成增加，细胞核增大，细胞质中可见较多核糖体及线粒体；rIL-13呈剂量依赖方式刺激成纤维细胞增殖，当rIL-13浓度在40-160 μg/L时，细胞增殖率几乎呈直线式增长。对照组及实验组均可检测到Ⅰ型胶原（CoⅠ），对照组分泌胶原的量显著高于对照组（P<0.01）。细胞培养上清中，实验组IL-6、IL-8含量显著高于对照组（P<0.01）。 结论： rIL-13通过促进成纤维细胞增殖及分泌炎性介质和Ⅰ型胶原，可能在肺纤维化的发病机制中发挥关键作用。     

白细胞介素1与炎症反应

白细胞介素1(interleukin 1,IL-1)主要由单核巨噬细胞产生,是分子量约为17kD的活性多肽,据其编码基因和理化性质的不同将它分为IL-1α和IL-1β两类。IL-1不仅是急性炎症反应的起动因子之一,而且参与慢性炎症反应,它还可作为一种激素,远程地作用于机体其它系统,协调机体各组织器官在炎症反应中的作用。本文就这些方面的进展作一概述。     

小鼠白细胞介素17A的原核表达及对RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响

目的 在大肠杆菌中高效表达与纯化小鼠白细胞介素17A(mIL-17A),并研究其对巨噬细胞分泌炎症因子的影响.方法 以活化的脾细胞为模板,通过RT-PCR法扩增小鼠IL-17a基因的编码序列,构建重组表达质粒pET28a/mIL-17a,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达,经亲和层析获得纯化的mIL-17A蛋白.以mIL-17A蛋白刺激体外培养的鼠巨噬细胞RAW264.7,72 h后应用realtime PCR法分析IL-6、巨噬细胞炎症蛋白1(Ccl3)、巨噬细胞炎症蛋白2(Cxcl3)、β防御素2(defensinβ2)的mRNA表达量,并用ELISA法检测培养上清中Ccl3、Cxcl3、IFN-γ、IL-4及IL-6的蛋白质表达水平.结果 在E.coli中成功高效表达了有生物活性的IL-17A蛋白,可促进体外培养的RAW264.7细胞IL-6、Cxcl3、defensin β2 mRNA的表达,并能促进Ccl3、Cxcl3、IFN-γ、IL-4以及IL-6蛋白的表达.结论 成功表达并制备了具备生物学活性的mIL-17A,该蛋白具有刺激巨噬细胞表达趋化因子、防御素及细胞因子的能力.     

白细胞介素13受体在脑胶质瘤靶向治疗中的应用研究

针对胶质瘤细胞表面的特异性标记物进行靶向治疗是目前肿瘤治疗的一个新途径,国外文献报道将免疫毒素与肿瘤细胞表面特异性标记物的单克隆抗体或其配体结合构建融合蛋白可用于肿瘤治疗。白细胞介素13受体(interleukin-13 re-ceptor,IL-13R)是在胶质瘤表面表达的特异性的分子标记物,并与胶质瘤的恶性度呈正相关。国外学者已开展了应用IL-13R在脑胶质瘤靶向治疗中的临床试验研究,笔者对这方面的最新研究进展进行简要综述。     

广西壮族人群白细胞介素-1α与β的基因多态性分布

目的：了解白细胞介素-1α（IL-1α）基因-889位点和IL-1β基因-511位点多态性在广西壮族健康人群中的分布。方法：采用PCR-RFLP方法,对上述两位点进行了检测,计算其基因型和等位基因频率。结果：II-1α（-889）和IL-1β（-511）等位基因C、T频率在壮族正常人群中分别为93．9％、6．1％和53．4％、46．6％;与奥地利、非洲黑人、非洲白人健康人群相比,IL-1α（-889）基因型分布及等位基因频率均存在高度显著性差异;与奥地利、非洲白人健康人群相比,IL-1β（-511）基因型分布及等位基因频率存在显著性差异。结论：广西壮族健康人群IL-1α（-889）基因多态性分布与奥地利、非洲黑人、非洲白人不同;IL-1β（-511）基因多态性分布与奥地利、非洲白人不同。     

重组人白细胞介素-13刺激Dami细胞增殖

目的和方法：研究重组人白细胞介素－１３（rhＩＬ－１３）对Ｄami细胞的作用，在血浆 凝决培养基中分别加入rhＩＬ－１３５０ng/mＬ、１００ng/mＬ、１５０ng/mＬ，计数Ｄami细胞ＤＮＡ中的５－溴－２－脱氧尿嘧啶（５－ＢrdＵ）。结果：血浆凝块培养基中加入rhＩＬ－１３能ami使细胞扩增，５０ng/mＬ、１００ng/mＬ、１５０ng/mＬ rhＩＬ－１３ 实验组Ｄami细胞集落数分别是对照组的１．４２倍、１．８５倍、２．３１倍。５－Ｂrd     

AIgA对巨噬细胞产生白细胞介素1的作用

由单核-巨噬细胞产生的白细胞介素1(Interleukinl,IL—1)在免疫应答及炎症反应的分子调节网络中起着重要作用,与许多临床疾病的发病有关。据报道许多物质可以增     

白介素-13 对与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞SDF-1 和EGF 表达影响

目的:为了探索白细胞介素-13(Interleukin-13,IL-13)在乳腺癌发展中的作用机制,我们研究了IL-13 对与乳腺癌细胞共生长的成纤维细胞表达SDF-1(Stromal cell derived factor 1)和EGF(Epidermal growth factor)的影响。方法:采用体外和荷瘤裸鼠体内人乳腺癌细胞株MDA-MB-231 和人成纤维细胞株CCC-ESF-1(ESF)共培养的方法,用定量PCR(RT-qPCR)方法、流式细胞术和Western blot 方法检测在IL-13 作用下体外共培养的成纤维细胞SDF-1 和EGF 的表达,细胞增殖实验Cell counting kit-8(CCK-8)观察IL-13 对体外共培养的乳腺癌细胞增殖的影响;免疫荧光激光共聚焦显微镜观察在IL-13 作用下荷瘤裸鼠体内与乳腺癌细胞共生长的成纤维细胞SDF-1 和EGF 的表达,检测IL-13 对荷瘤裸鼠肿瘤体积的影响。结果:IL-13 上调体外与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞SDF-1 和EGF 的表达,并促进共培养的乳腺癌细胞的增殖;IL-13 上调荷瘤裸鼠乳腺癌组织成纤维细胞SDF-1 和EGF 的表达,并促进荷瘤裸鼠肿瘤生长。结论:IL鄄13 上调与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞SDF-1 和EGF 的表达,IL-13 对乳腺癌促进作用的分子机制涉及乳腺癌基质成纤维细胞的SDF-1 和EGF。     

成纤维细胞介导的白细胞介素4基因疗法的建立

成纤维细胞介导的白细胞介素４基因疗法的建立上海第二军医大学免疫学教研室上海２００４３３于益芝，曹雪涛，杨嗣坤，徐志工，叶天星本室继成功地建立了成纤维细胞介导的ＩＬ－６基因治疗模型并证明确能增强体内免疫功能后〔１，２〕，又将白细胞介素４（Ｉｎｔｅｒｌｅ...     

重组白细胞介素-17A鼻黏膜免疫抗肺炎链球菌感染的实验研究

目的 观察小鼠重组白细胞介素-17A (rIL-17A)鼻腔黏膜免疫对感染肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Sp)小鼠防御素β-2(Defb2)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)等表达的影响,探讨rIL-17A抗肺炎链球菌感染的机制.方法 SPF级BALB/c小鼠随机分为3组:肺炎组、干预组、对照组,以鼻腔接种的方法建立肺炎模型,采用鼻黏膜免疫的方法进行rIL-17A干预.以real-time荧光定量PCR法检测肺组织Defb2、MIP-1α、MIP-2β mRNA的表达,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)、脾细胞以及纵膈淋巴结细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IFN-γ、IL-4的浓度,并对BALF进行白细胞分类计数和Sp菌落计数,对肺组织进行病理分析.结果 rIL-17A干预组BALF中Sp菌落数较肺炎组明显降低(2.18±0.94 vs 4.37+0.57,P＜0.01),中性粒细胞及巨噬细胞数量显著高于肺炎组(P＜0.01);干预组肺组织Defb2、MIP-1α mRNA表达上调,其中Defb2 mRNA表达量为对照组的53.93倍,与肺炎组比较差异有统计学意义(53.93±4.80 vs 14.49±5.84,P＜0.01);rILL-17A干预组与肺炎组比较,淋巴结细胞培养上清中MIP-1α浓度增高明显(431.80±31.57 vs 291.10±5.62,P＜0.01);MIP-2β浓度在脾细胞和淋巴结细胞培养上清中较肺炎组显著增高(246.20±11.50 vs 183.70±10.64,508.50+20.26 vs 290.90+15.20,P＜0.01),而肺泡灌洗液中浓度变化不显著(P＞0.05);IFN-γ浓度在BALF和细胞培养上清中均较肺炎组显著升高;ILM除淋巴结细胞培养上清中外,BALF和脾细胞培养上清中均较肺炎组显著升高(92.42±3.82 vs 80.68±4.83,106.80±8.07 vs 73.57+7.43,P＜0.01);干预组与肺炎组小鼠支气管及血管周围炎症细胞浸润无显著差异,但干预组组织损伤较轻.结论rIL-17A可通过促进Ddb2以及MIP、IFN-y、IL-4等炎症因子的表达,增加炎症部位白细胞募集,提高Sp清除率来增强肺炎小鼠的抗感染能力.     

白细胞介素13抑制肾小球系膜细胞增殖及白细胞介素6表达

目的:探讨白细胞介素13(IL-13)对体外培养的大鼠系膜细胞的增殖及其产生白细胞介素6(IL-6)的影响。方法:用四甲基偶氮唑(MTT)法测定系膜细胞增殖,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及酶联免疫吸附法(ELISA)测定系膜细胞IL-6mRNA表达及其蛋白水平。结果:IL-13在1、10、100μg/L浓度范围呈剂量依赖性地抑制系膜细胞的增殖;5%FCSRPMI1640培养条件下系膜细胞IL-6mRNA表达及IL-6分泌水平较低,脂多糖(LPS)可刺激系膜细胞IL-6mRNA的表达及提高IL-6分泌水平,而IL-13可抑制LPS诱导的系膜细胞IL-6分泌及其mRNA表达。结论:IL-13抑制体外培养的系膜细胞增殖及LPS诱导的系膜细胞IL-6的产生,IL-13可能对于肾小球肾炎的系膜细胞炎症反应具有拮抗作用。     

重组人白细胞介素-10诱导瘤细胞凋亡

目的 研究重组人白细胞介素-10诱导瘤细胞凋亡的作用。方法利用基因工程技术制备的rhIL-10,分别作用于体外培养的ScaBer、NCIS446、U937瘤细胞,观察瘤细胞的形态改变,MTT法检测rhIL-10对瘤细胞增殖的抑制作用,电泳观察rhIL-10诱导瘤细胞凋亡的情况,TUNEL法检测瘤细胞凋亡百分率。结果电泳出现典型的DNA“lader”,ScaBe,、NCIS446、U937三种瘤细胞的凋亡率为48．5％、45．6％、47．1％,IC50分别为0．043、0．052、0．058mg／mL。结论rhIL-10具有显著抑制瘤细胞生长活性、诱导瘤细胞凋亡的作用。     

载脂蛋白E、白细胞介素-1α基因多态性与成都地区阿尔茨海默病的关联分析

目的　探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)和白细胞介素 - 1α(interleukin- 1α,IL- 1α)基因多态性与成都地区阿尔茨海默病 (Alzheimer's disease,AD)的关系。方法　用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性技术检测成都地区流行病学调查中诊断为 AD的 114例患者和 113名健康老年人 APOE基因和 IL - 1α基因多态性。结果　中度、重度 AD组含 APOEε4基因型频率 (2 8.6 % )显著高于轻度 AD组 (18.5 % )和正常对照组 (14 .2 % ) ,其中中度、重度 AD组与正常对照组差异有显著性 (OR=2 .4 ,95 % CI:1.1～5 .5 )。将ε4等位基因频率与ε2和ε3等位基因频率之和比较 ,中度、重度 AD组与正常对照组的差异有显著性 (OR=2 .6 ,95 % CI:1.3～ 5 .3)。 AD患者组和正常对照组 IL - 1α基因型和等位基因频率分布相似 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论　 APOEε4等位基因与中、重度 AD相关联 ,是中、重度 AD的易感因素。 IL - 1α基因多态性与中国成都地区 AD患者无关联。     

人重组白细胞介素-13在毕氏酵母中的表达及其体外诱导DC分化作用的研究

目的：在毕氏酵母中表达重组人IL-13并探讨其对DC的诱导作用。方法：用基因工程的方法人工合成IL-13的全长片段，并转化至毕氏酵母菌株GS115中，筛选后获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-l3基因工程菌株，用rhIL-l3来替代IL-4体外诱导DC。结果：得到表达量达25mg/L且分泌稳定的rhIL-l3基因工程菌株；rhIL-l3具有rhIL-4同样的体外诱导外周血单核细胞向比增殖分化的作用,MHCII、CDlα、CD80、CD80、CD86等DC表型分析和混合淋巴细胞反应刺激T细胞增殖的作用与IL-4诱导得到的成熟DC并无显著差别，其所诱导的末成熟DC具有很强的摄取抗原能力。结论：获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-l3基因工程菌株，rhIL-l3在体外可有效地诱导外周血单核细胞向DC分化。     

白细胞介素-11促进巨噬细胞M2极化及对痛风性关节炎的保护作用

目的 探讨白细胞介素（IL）-11在痛风性关节炎（GA）中的作用及其机制。方法 45只C57BL/6雄性小鼠,随机分为对照组、模型组和IL-11组。微晶尿酸钠注射用于构建小鼠GA模型,造模后IL-11组小鼠腹腔注射IL-11重组蛋白（20μg/kg）。7 d后进行踝关节肿胀度和功能障碍测定,评估踝关节病理形态;检测血清UA、XO、NO、IL-1β、IL-4、IL-6和IL-10含量;检测小鼠滑膜组织巨噬细胞极化和iNOS、IL-1β、Arginase-1和IL-10 mRNA表达。结果 HE结果显示,模型组小鼠滑膜增生明显,大量炎性细胞浸润;IL-11组小鼠滑膜增生和炎性细胞较模型组显著减少;与模型组比较,IL-11组小鼠炎症评分、踝关节肿胀度和功能障碍评分均显著降低（P<0.05）;与模型组比较,IL-11组小鼠UA和XO含量显著降低,NO含量升高（P<0.05）;与模型组相比,IL-11组小鼠M2/M1比值、Arginase-1和IL-10 mRNA显著升高,iNOS和IL-1β mRNA表达降低（P<0.05）;与模型组相比,IL-11组小鼠血清IL-1β和IL...     

巨噬细胞炎症因子1α对人脑微血管内皮细胞通透性的影响

目的研究巨噬细胞炎症因子1α(MIP-1α)是否具有开通血脑屏障的作用。方法以重组人MIP-1α直接作用于人脑微血管内皮细胞(HBMEC),免疫荧光方法检测紧密连接蛋白ZO-1的分布变化、跨内皮细胞电阻、HRP穿过HBMEC单层的改变、HBMEC细胞CC趋化因子受体5(CCR5)的表达,以及MIP-1α中和抗体和分泌MIP-1α的模式细胞(6T-CEM)与HBMEC单层共同温育时ZO-1的分布变化。结果MIP-1α作用下,HBMEC单层紧密连接结构被破坏,通透性增加,引起HBMEC细胞CCR5受体的表达,MIP-1α中和抗体阻断6T-CEM细胞对HBMEC单层ZO-1分布的改变。结论MIP-1α可能通过CCR5改变HBMEC单层通透性促进T淋巴细胞穿过血脑屏障。     

链球菌组蛋白样蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的影响

目的　研究链球菌HlpA对小鼠腹腔巨噬细胞 (MΦ)产生IL 1的作用。方法　用RINm5F细胞产氮量测定IL 1活性。结果　链球菌HlpA(0～ 10 0 μg mL)在体外以剂量和时间依赖方式促进MΦ产生IL 1(P <0 .0 0 1)。LTA和HlpA的混合物对IL 1的产生呈协同增强作用 (P <0 .0 0 1) ;肝素则起抑制作用 (P <0 .0 0 1)。结论　纯化的链球菌HlpA在体外刺激小鼠腹腔MΦ产生IL 1;HlpA和LTA对MΦ的IL 1产生呈协同增强作用。     

地塞米松双向调节小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素-10的表达

IL 10是从TH2细胞分离到的 ,因能抑制TH1细胞合成和释放细胞因子 ,故又名细胞因子合成抑制因子。IL 10主要针对T细胞、NK细胞、单核巨噬细胞起抑制作用 ,是影响体内TH1和TH2平衡的关键性细胞因子之一。因此 ,对免疫炎症性疾病的发生和发展具有重要的调节作用。我们研究了地塞米松(Dex)对小鼠腹腔巨噬细胞 (MΦ)IL 10表达的影响。材料和方法试剂 :Dex购自上海兴宜制药有限公司 ,脂多糖(LPS)及糖皮质激素受体拮抗剂RU4 86购自Sigma ,RPMI 16 40培养基及总RNA抽提用TRIZOL试剂购自GIBCO BRL ,逆转录试剂盒购自MBIFermenta…