重症肌无力被动转移动物模型的研究

目的 :探讨血清阳性 (SPMG)和阴性重症肌无力 (SNMG)被动转移动物模型 (P EAMG)的异同。方法 :用ELISA法将重症肌无力 (MG)患者分为SNMG和SPMG两组 ,然后分别用两组患者血清制作P EAMG ,观察两组小鼠的临床表现、电生理及神经肌接头(NMJ)的改变。结果 :SPMG和SNMG组小鼠均表现出明显的肌无力症状 ,低频重复电刺激出现明显衰减反应 ,但SNMG组小鼠肌无力症状较SPMG组明显为轻 ,SPMG和SNMG组小鼠NMJ处棕黄色沉积物明显减少、变细短。结论 :SNMG和SPMG均是自身抗体介导的自身免疫性疾病 ,但两者不完全相同     

肌肉特异性酪氨酸激酶在重症肌无力中的作用(综述)

约有20％重症肌无力(MG)患者血清中检测不到乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)，称之为“血清反应阴性MG”(seronegative MG，SNMG)。有报道71％的SNMG患者血清中存在肌肉特异性酪氨酸激酶(MUSK)抗体(MuSKAb)，MuSKAb阳性SNMG患者的流行病学特征、If缶床特点和治疗效果与由AChRAb介导的MG(seropositive MG，SPMG)有所不同，存在较大争议。     

CD40配体在血清AChRab阳性和阴性重症肌无力发病机制中作用的探讨

目的 :研究CD40配体在血清阳性重症肌无力 (SPMG)和血清阴性重症肌无力 (SNMG)主要致病因素产生中的作用。结果 :无论SPMG或SNMG ,外周血单个核细胞体外培养后上清液中γ干扰素 (IFN γ)、白细胞介素 4(IL 4)、抗乙酰胆碱受体抗体 (AChRab)和抗突触前膜受体抗体 (Prsmab)均比健康对照组非常显著增高 (P =0 0 0 0 )。抗CD40L单克隆抗体 (anti CD40Lmonoclonalantibody ,CD40LMcAb)干预后 ,SPMG组与健康对照组的差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,SNMG组只有PsmRab与健康对照组的差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,而IFN γ、IL 4和AChRab的水平虽有所下降 ,但仍显著高于健康对照组 (P <0 0 5 )。结论 :SNMG的AChRab、IFN γ和IL 4可能还通过其他途径产生 ,存在其他发病机制。     

被动转移法致自身免疫性重症肌无力兔模型的建立

目的 用重症肌无力患者的免疫球蛋白(IgG)建立兔急性被动转移性实验性自身免疫性重症肌无力动物模型.方法 提取重症肌尤力患者血中的IgG,并将其腹膜内注入长耳白兔,观察实验兔的临床症状、AChR-Ab滴度、神经肌肉接头电传导功能和病理形态学的变化.结果 实验兔于被动转移后第2天渐出现肌无力症状,第3～5天肌无力加重.实验组血清AChR-Ab吸光度较卒白对照组和健康对照组显著件增高(P<0.01).重复神经电刺激实验(repetitive nenre stimulation,RNS)动作电位衰减率和单纤维肌电图检查平均连续波间值差异均较空白对照组和健康对照组显著延长(P<0.01).实验组微小终板电位的波幅和频率较空白对照组和健康对照组均显著性降低(P<0.01).实验组单位面积的神经肌肉接头数较空白对照组和健康对照组显著性减少(P<0.05).结论 被动转移重症肌无力患者的IgG可以诱导出重症肌无力家兔模型.     

重症肌无力患者酪氨酸激酶抗体的检测

目的探讨酪氨酸激酶抗体（MuSKAb）在血清阴性重症肌无力（SNMG）发病中的作用。方法采用放射免疫法检测198例重症肌无力（MG）患者血清中抗乙酰胆碱受体抗体（AChRAb）水平，筛选出SNMG血清样本再行MuSKAb水平检测。结果MG患者血清AChRAb浓度明显高于对照组（P〈0．05），其阳性率为81．3％，SNMG患者血清MuSKAb均为阴性。结论MuSKAb可能在中国SNMG患者中的检出率较低。     

用AChR单克隆抗体建立大鼠重症肌无力被动转移模型的研究

目的利用乙酰胆碱受体(AChR)单克隆抗体建立重症肌无力(MG)被动转移模型。方法将AChR单克隆抗体mAb35注入3种品系大鼠腹腔，观察其临床症状并行药理学和电生理学及超微结构鉴定。结果被动转移mAb35后3种大鼠均可出现肌无力症状。其临床症状、药理学特点、电生理特点和超微结构变化均与MG患者相似。结论利用AChR单克隆抗体可在此3种品系大鼠成功建立获得性自身免疫性MG模型。     

苏木醇提物治疗小鼠实验性重症肌无力的研究

目的观察苏木对重症肌无力的治疗效果。方法采用乙酰胆碱受体(AChR)加等量福氏佐剂多次免疫小鼠，复制实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)小鼠模型，将EAMG小鼠随机分为EAMG治疗组及EAMG对照组，治疗组胃内注入苏木醇提物，对照组给予等量生理盐水，治疗4周，观察治疗前后小鼠体重、游泳时间和临床评分变化。结果治疗前治疗组及EAMG对照组小鼠较佐剂对照组及正常对照组小鼠体重减轻、游泳时间缩短、临床评分增高，其差异具有显著性，但EAMG治疗组与EAMG对照组之间比较无显著性差异；治疗后EAMG治疗组症状明显改善，小鼠体重增加、游泳时间延长、临床评分降低，与EAMG对照组比较有显著性差异。结论苏木能明显缓解EAMG小鼠的肌无力症状，促进其功能恢复，是治疗重症肌无力的有效药物。     

血清阴性重症肌无力研究进展

乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor,AChR)抗体阴性的重症肌无力(myasthenia gravis,MG)称为血清阴性重症肌无力(SNMG)。SNMG在发病机制、临床表现和治疗上都与AChR抗体阳性MG不同。近年来研究者在SNMG患者血清中发现多种MG相关抗体,如肌肉特异性酪氨酸激酶(muscle-specific receptor tyro-sine kinase,MuSK)抗体、低亲和力AChR抗体、低密度脂蛋白受体相关蛋白4(low density lipoprotein receptor-related protein 4,LRP4)抗体等。本文就SNMG发病机制与临床表现的研究进展做一简要综述。     

转移因子治疗重症肌无力中免疫作用的探讨

本文用转移因子(TF)配合抗胆碱酯酶药物治疗重症肌无力(MG)73例,其中16例用ELISA法测定了抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab)水平。结果表明:(1)治疗组较对照组症状缓解率明显提高、复发率明显下降(P<0.01)。且未见肌无力危象发生。(2)MG患者血清AChR-Ab水平明显高于正常对照组,经TF治疗后随着临床症状的缓解其AchR-Ab水平也明显下降(P<0.01)。(3)患者外周血淋巴细胞经丝裂原(PHA和PWM)刺激后其产生的AChR-Ab与正常对照组对比无明显差异(P>0.05)。     

伴其他自身免疫性疾病的重症肌无力临床特点分析

目的分析伴其他自身免疫性疾病的重症肌无力患者之临床特点、药物疗效、预后和转归。方法共83例重症肌无力患者,分为伴其他自身免疫性疾病重症肌无力(AIDMG)组(24例)和不伴其他自身免疫性疾病重症肌无力(NAIDMG)组(59例),比较两组患者性别、发病年龄、首发症状、胸腺异常等临床特点、不同治疗措施之疗效和预后。结果两组患者性别(χ2=8.467,P=0.004)、眼睑下垂侧别(χ2=9.830,P=0.007)、发病2年内病程情况(χ2=15.255,P=0.001)差异具有统计学意义,而发病年龄(χ2=1.728,P=0.228)、首发症状(χ2=0.252,P=0.791)、胸腺异常(χ2=3.200,P=0.202)组间差异无统计学意义。两组患者溴吡斯的明(χ2=0.411,P=0.395)、糖皮质激素(χ2=0.156,P=0.513)、静脉注射免疫球蛋白(χ2=0.359,P=0.462)、免疫抑制剂(χ2=0.081,P=0.526)、胸腺切除术(χ2=0.337,P=0.391)等治疗措施之疗效,以及眼肌型重症肌无力进展为全身型重症肌无力比例(χ2=1.826,P=0.148)、进展时间(Fisher确切概率法:P=0.639)、首发症状(Fisher确切概率法:P=0.196)和复发时间(Fisher确切概率法:P=1.000)差异均无统计学意义。结论 AIDMG患者多见于女性,首发症状为眼睑下垂,以双侧同时受累为主;发病2年内较NAIDMG患者更易复发。     

β-银环蛇毒素结合蛋白抗体和乙酰胆碱受体抗体亲和性及其在重症肌无力致病中的意义

为了研究β-银环蛇毒素(β-BuTx )结合蛋白在重症肌无力(MG)致病中的作用和意义。我们用牛膈肌乙酰胆碱受体(AChR)和β-BuTx结合蛋白分别免疫Lewis鼠。结果显示AChR免疫鼠能诱导典型的实验性重症肌无力(EAMG)临床症状和血清中高效价的抗AChR抗体。β-BuTx结合蛋白免疫鼠组血清中虽然也能检测到较高效价的β-BuTx结合蛋白抗体,但未观察到明确的EAMG症状。分析和比较了两组免疫鼠血清抗体的亲和指数后发现,β-BuTx结合蛋白抗体亲和指数明显低于AChR抗体亲和指数。我们认为:β-BuTx结合蛋白在实验动物中具有抗原性,但它的抗体亲和性远较AChR为低,这可能是β-BuTx结合蛋白缺乏致Lewis鼠肌无力的重要因素之一。     

全血灌流免疫吸附治疗被动转移型实验性自身免疫性重症肌无力的研究

目的观察全血灌流免疫吸附治疗实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的疗效。方法用重症肌无力患者血清中的免疫球蛋白(IgG)建立急性EAMG模型,并进行全血灌流免疫吸附治疗,观察其疗效。结果以球形纤维素为载体色氨酸为配基的吸附剂治疗2h,能清除49.85%±2.55%的致病抗体,肌无力症状显著改善;重复神经电刺激实验CMAP衰减率从21.875±3.226(3Hz)、22.250±2.815(5Hz)和24.375±1.685(10Hz)恢复到17.875±1.642(P<0.05)、18.750±1.388(P<0.05)和23.250±1.388;单纤维肌电图示MCD值也从23.125±2.997(3Hz)、26.375±4.172(5Hz)和30.375±4.470(10Hz)显著性地缩短至19.250±1.488(P<0.05)、21.750±2.375(P<0.05)和26.125±2.031(P<0.05)MEPP波幅(μV)也从30.54±3.74显著增加至40.43±3.45(P<0.01),频率(次/s)从17.18±2.87显著增加至18.74±2.75(P<0.01);单位面积的神经肌肉接头数从9.825±3.401增加至10.900±2.879(P<0.05)。结论全血灌流免疫吸附治疗能有效清除被动转移型重症肌无力动物体内致病抗体,并相应改善临床症状,提高神经肌肉电传导功能,增加神经肌肉接头处nAChR数量,为临床重症肌无力的血液净化治疗提供了新措施。     

眼肌型重症肌无力进展为全身型重症肌无力的临床相关因素分析

目的 :探讨眼肌型重症肌无力进展为全身型重症肌无力的临床相关预测因素。方法 :33例初诊为眼肌型重症肌无力的患者经过3年随访,根据疾病进展结局分为眼肌型重症肌无力组(13例)和进展为全身型重症肌无力组(20例)。对与疾病进展可能相关的临床因素进行分析。结果 :进展为全身型重症肌无力组患者初诊时的定量重症肌无力评分、乙酰胆碱受体抗体阳性率、抗核抗体阳性率、合并胸腺瘤的比例以及合并糖尿病的比例均高于眼肌型重症肌无力组(P值均0.05)。结论 :定量重症肌无力评分高、乙酰胆碱受体抗体阳性、抗核抗体阳性以及合并胸腺瘤和糖尿病可能是眼肌型重症肌无力进展为全身型重症肌无力的预测指标。     

血清阴性重症肌无力发病机制的研究进展

血清阴性重症肌无力是一种异质性疾病。大部分患者仍然是一种神经肌肉接头处自身免疫性疾病，但其发病机制不同于血清阳性重症肌无力。患者血清中的 ＩｇＧ和／或非 ＩｇＧ成分可能均参与了其致病过程，靶抗原也具有多样性。     

重症肌无力被动转移大鼠模型眼外肌的易感机制研究

目的探讨眼外肌在重症肌无力发病过程中的易感机制。方法给予SD大鼠腹腔注射mAb35建立重症肌无力被动转移(PTMG)大鼠模型,对照组大鼠注射等量生理盐水。选取PTMG组和对照组大鼠眼外肌、膈肌、胫前肌3种骨骼肌组织。采用乙酰胆碱酯酶(AChE)染色法观察神经肌肉接头(NMJ)并检测NMJ面积和灰度;采用银环蛇毒免疫组化法检测乙酰胆碱受体(AChR)数量;采用电镜观察NMJ超微结构和其AChR情况,并分析比较神经末端面积和突触后膜面积的比值以及突触前后膜长度的比值。结果 AChE染色结果显示,对照组眼外肌NMJ面积相对其他两种骨骼肌更小(P<0.01),PTMG组眼外肌与其他两种骨骼肌NMJ面积比较无统计学差异(P>0.05)。银环蛇毒免疫组化结果显示,PTMG组和对照组眼外肌与其它两种骨骼肌间AChR灰度值比较均有统计学差异(P<0.01)。电镜观察结果显示,PTMG组3种骨骼肌突触前后膜长度比值均较对照组下降(P<0.01),神经末端面积与突触后膜面积比值较对照组增加(P<0.01),其中眼外肌的变化较其他骨骼肌更为显著。结论 PTMG大鼠模型眼外肌易感机制可能与眼外肌和其他骨骼肌间NMJ面积、AChR数量差异造成眼外肌NMJ安全系数较低有关。     

PTMG大鼠模型眼外肌受累证据的研究

目的探讨被动转移重症肌无力(PTMG)大鼠模型眼外肌的受累情况。方法腹腔注射mAb35建立SD大鼠PTMG模型并观察其眼部症状,取大鼠眼外肌(EOM)行HE染色、琥珀酸脱氢酶染色、免疫组化以及置透射电镜下观察EOM神经-肌肉接头(NMJ)处病理变化,并与生理盐水对照组比较。结果 PTMG大鼠出现睑裂缩小和眼球内陷充血、眼部流出血性分泌物的现象;HE染色显示出现眼部症状的PTMG大鼠EOM肌纤维轻度萎缩,肌细胞周围间质有较多淋巴细胞浸润;与对照组比较,琥珀酸脱氢酶染色显示PTMG组大鼠EOMⅠ型肌纤维比例下降,ⅡA型肌纤维比例上升;免疫组化显示PTMG大鼠EOM上可与银环蛇毒结合的乙酰胆碱受体数量显著减少;透射电镜发现PTMG组大鼠EOM出现NMJ突触皱褶短缩,皱褶数量减少等类似重症肌无力的病理改变。结论 PTMG大鼠EOM确有受累并出现重症肌无力典型病理变化,可为进一步在此模型上研究EOM易感机制提供实验基础。     

苏木醇提取物对自身免疫性重症肌无力小鼠淋巴细胞功能影响的实验研究

目的采用中药苏木醇提取物治疗实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)小鼠,观察其T淋巴细胞和B淋巴细胞功能的变化情况,探讨苏木治疗重症肌无力的作用机制。方法80只昆明小鼠被随机分为EAMG治疗组(20只)、EAMG对照组(20只)、佐剂对照组(20只)和正常对照组(20只)。采用乙酰胆碱受体(AChR)加完全福氏佐剂(CFA)的方法多次免疫小鼠,复制实验性自身免疫性重症肌无力小鼠模型;佐剂对照组模型制备成功后仅予完全福氏佐剂。所有小鼠均于末次免疫后7～14d行游泳试验和肌电图检查,进行模型鉴定。EAMG治疗组小鼠于末次免疫后第15天起,每天胃内灌注苏木醇提取物0.2ml/只,EAMG对照组、佐剂对照组及正常对照组胃内灌注等量生理盐水,连续给予4周后处死小鼠,应用MTT比色法检测T淋巴细胞和B淋巴细胞转化功能。结果(1)EAMG对照组小鼠的T淋巴细胞吸光度差值为(0.257±0.025),较佐剂对照组(0.147±0.022)及正常对照组(0.154±0.017)明显增高(P<0.01);EAMG治疗组小鼠的吸光度差值为(0.174±0.040),较EAMG对照组明显降低(P<0.01),但仍高于佐剂对照组和正常对照组(P<0.05);佐剂对照组与正常对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。(2)EAMG对照组小鼠的B淋巴细胞吸光度差值(0.789±0.101)较佐剂对照组(0.502±0.125)及正常对照组(0.493±0.09)明显增高(P<0.01);EAMG治疗组小鼠的吸光度差值为(0.590±0.120),较EAMG对照组明显降低(P<0.01),但仍高于佐剂对照组及正常对照组(P<0.05);佐剂对照组与正常对照组间相比,差异无显著性意义(P>0.05)。结论苏木具有下调实验性自身免疫性重症肌无力小鼠淋巴细胞功能,抑制N2乙酰胆碱受体抗原诱导特异性免疫反应。     

肌肉特异性酪氨酸激酶抗体阳性重症肌无力的特点

近年来,在血清乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)阴性重症肌无力患者体内发现了一个特殊抗原———肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)。MuSKAb阳性重症肌无力患者在流行病学、临床特点、诊断、胸腺病理、治疗效果及预后转归均有自己的特点。     

重症肌无力患者血清中抗心磷脂抗体测定的意义

目的 观察IgG-ACA与重症肌无力患者的关系。方法 应用酶联免疫吸附法,测定了94例重症肌无力(MG)患者和40例健康对照者血清中抗心磷脂抗体水平,(IgM-ACA和IgG-ACA)。结果 94例MG患者及40例健康对照者血清中IgM-ACA均为阴性;94例MG患者中30例IgG-ACA阳性(30/94,31.9％),40例健康对照者中仅2例阳性(2/40,5％),二者差异有非常显著性(P<0.01)。血清IgG-ACA水平与患者的年龄、性别、病型均无关(P>0.05),而与胸腺病理密切相关(P<0.01)。30例胸腺瘤患者中,14例阳性(14/30,46.7％),64例不伴胸腺瘤的MG患者中,16例阳性(16/64,25％),二者相比,差异有非常显著性(P<0.01)。IgG-ACA阳性患者中,1/3滴度较高(至少为正常值的2倍)。结论 通过对IgG—ACA的测定,不仅对MG是否合并胸腺瘤起初步筛选作用,而且是MG患者并发凝血机制方面异常的一个警惕性标志。     

血清10kD蛋白在重症肌无力病人中的特征

目的；探讨血清非免疫球蛋白成分10kD蛋白与重症肌无力的关系。方法(1)用SDS-PAGE分析健康人与MG患者的血清蛋白。(2)用抗体测血清中10kD蛋白水平。(3)观察10kD蛋白对培养的健康人及MG单核血细胞增殖的影响。结果(1)10kD与14kD扫描面积的比值存在明显差异，97％的健康人面积之比>1，而MG患者仅有30％。(2)10kD蛋白浓度在健康人及MG患者两组问不存在有意义的差别。(3)10kD蛋白100μg／ml可抑制健康人未激活的和PHA激活的单核血细胞增殖，但该蛋白和PHA对MG患者的细胞增殖无影响。结论(1)血清10kD与14kD蛋白扫描面积的比值可作为生化诊断MG的辅助参数。(2)10kD蛋白具有调节健康人单核血细胞增殖的生物活性。