ConA、IL-1刺激T淋巴细胞引起早期Ca~(2+)和环核苷酸含量的变化

本实验观察ConA和IL-1刺激小鼠睥脏T细胞引起的胞内早期Ca~(2+)和环核苷酸含量的变化。ConA和IL-1单独作用使T细胞内Cu~(2+)浓度增大,cAMP含量升高,cGMP含量不变。ConA和,IL-1联合作用,T细胞内Ca~(2+)浓度在10分钟内先是下降而后上升,cGMP亦呈现先下降后恢复正常,二者似有依存关系。     

Ca~(2+)、Mg~(2+)对完整红细胞膜脂区流动性的影响

以1,6.-二苯基-1,3,5-已三烯(DPH)为荧光探剂,用荧光偏振法测定了Ca~(2+)、Mg~(2+)对完整红细胞膜脂区流动性的影响。Ca~(2+)能降低红细胞膜的流动性,而Mg~(2+)则无显著影响,细胞膜流动性的大小与膜上结合的Ca~(2+)量有关,而细胞所处的介质中Ca~(2+)浓度可影响膜上Ca~(2+)结合量。胰岛素对膜的流动性影响可能与膜上结合Ca~(2+)和Mg~(2+)相对量有关。     

中药热毒清对淋巴细胞膜流动性和DNA合成的影响

本文观察了中药热毒清对小鼠脾脏淋巴细胞膜流动性及淋巴细胞DNA合成的影响,并与伴刀豆球蛋白(ConA)和植物血凝素(PHA)的作用进行比较。结果表明:热毒清使脾混合淋巴细胞或T淋巴细胞膜的流动性升高,并能拮抗ConA或PHA诱导的使膜流动性降低的效应。体外,热毒清抑制ConA转化小鼠淋巴细胞的能力,随浓度加大而增强。上述生物效应,在整体实验中并不明显。     

镉对小鼠免疫功能和淋巴细胞钙稳态影响的探讨

本文采用体外试验的方法观察到 50μmol/L的CdCl_2对LACA小鼠脾T淋巴细胞功能抑制26.08％,125～500μmol/L剂量下,对T淋巴细胞转化的抑制呈剂量—反应相关。500μmol/L时,抑制率达100％。50μmol/L CdCl_2可引起T淋巴细胞胞内游离Ca~(2+)浓度显著增高,温育40分钟时,增加80％(P<0.001),60分钟时增加115％,由于此测定是在无Ca~(2+)体系中进行的,所以Ca~(2+)浓度的增高可能是由细胞内钙库释放所致。同时还观察到CdCl_2对T细胞Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase活性抑制和细胞膜脂流动性下降,但其所需CdCl_2剂量水平较高。     

伴刀豆蛋白A与巨噬细胞膜上受体结合对细胞膜的影响

用圆二向色性(CD)技术和荧光技术研究伴刀豆蛋白A(ConA)与巨噬细胞膜上受体结合对质膜的影响。结果表明,ConA与膜受体结合后,膜蛋白分子构象、膜分子活动度及细胞膜对Ca~(2+)通透性都发生变化,这对于深入探讨配体与受体作用对膜分子结构的影响和巨噬细胞激活的分子机理均可能有帮助。     

黄芪对小鼠免疫功能的调节作用

中药黄芪常作为免疫调节剂应用于肿瘤等疾病的辅助治疗。本文采用黄芪小鼠体内外试验,研究了黄芪对ConA、LPS活化淋巴细胞的增殖调节、循环免疫复合物清除和IL-2的诱生和抗体产生的调节。结果表明体内注射黄芪能增强ConA刺激的T淋巴细胞的增殖反应和IL-2的诱生,亦能加强CIC的清除,增强抗体的产生,但对LPS刺激引起的B细胞增殖无明显促进作用。体外试验表明低剂量黄芪(5％)能增强ConA刺激引起的T细胞增殖和IL-2产生,中等剂量(10％)和高剂量(20％)黄芪反而抑制ConA刺激引起的T细胞增殖和IL-2的产生,对LPS刺激引起的B细胞增殖作用三个剂量的黄芪均无明显促进作用。     

运动对小脑皮质和脊髓分离突触体膜流动性和突触体内游离Ca~(2+)的影响

采用超速离心技术分离制备突触体,结合DPH荧光偏振方法和fura-2荧光标记技术分析长期适量运动(跑转笼)对小脑皮质和脊髓分离突触本膜流动性、突触体内游离Ca~(2+)([Ca~(2+)]i的影响。以同年龄对照组心重/体重比率均值的2倍标准差作为运动有效标准。结果显示,和5月龄鼠比较,13月龄鼠小脑皮质和脊髓分离突触体膜流动性均无显著性差异,8mo运动训练后,突触体膜流动性升高(P<0.05)。在小脑,去极化状态(高K~+)下,13月龄鼠分离突触体[Ca~(2+)]i高于5月龄鼠(P<0.05),而静息状态下两者间无差异(P>0.05)。在脊髓,静息、去极化状态下分离突触体[Ca~(2+)]i在两个年龄对照组间无差异(P>0.05)。8mo运动训练后,小脑皮质和脊髓分离突触体在静息、去极化状态下的[Ca~(2+)]i均低于同年龄对照组,但无显著性差异(P>0.05)。结果表明,从青年开始的长期适量运动对突触体膜功能和Ca~(2+)调节系统具有一定的保护作用。     

HL-60细胞诱分化及细胞膜恶性标志逆转的实验研究

本文采用荧光偏振技术和受体荧光定量测定法,动态观察DMSO(二甲亚砜)体外诱导人急性早幼粒白血病细胞系(HL-60细胞)沿粒系统成熟分化过程中细胞膜流动性及膜ConA受体结合量的改变,还测定Molt4和Raji淋巴瘤细胞膜的相应变化.结果表明,随分化细胞百分率增加膜流动性和ConA受体结合量降低,呈现有意义的逆转改变(P<0.01).二株淋巴瘤细胞膜的流动性和ConA受体结合量均明显高于正常淋巴细胞。实验结果证实了膜流动性增高及ConA受体结合量增加是HL-60细胞的膜表型特征,并能随恶性细胞的诱导分化而逆转。     

氨利酮治疗充血性心力衰竭时淋巴细胞内环核苷酸和Ca~(2+)含量的变化与心功能的关系

测定了20例难治性充血性心力衰竭患者应用氨利酮冶疔前后淋巴细胞内环核苷酸和Ca~(2+)含量,同时用热稀释法测定其心指数。氨利酮治疗后淋巴细胞内cAMP和Ca~(2+)含量较治疗前明显升高且与心指数增加的时程相似,治疗前后cAMP和Ca~(2+)与心指数之间均呈显著正相关。提示氨利酮可能通过增加心肌细胞内cAMP和Ca~(2+)浓度发挥正性肌力作用。淋巴细胞cAMP和Ca~(2+)的测定对估计心衰严重程度及判断药物疗效可能有一定意义。     

熊果酸对刀豆蛋白A诱导小鼠T细胞增殖与激活的影响

目的研究熊果酸(Ursolic acid,UA)对小鼠T细胞活化和增殖的影响,并探讨其免疫调节机制。方法以刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠T细胞活化和增殖,用MTT法测定细胞增殖,利用流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69、中期活化标志CD25与晚期活化标志CD71的表达情况。结果在ConA刺激下48 h后,小鼠T淋巴细胞MTT吸收度显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。熊果酸(10～40μM)组与ConA组比较显著降低了MTT吸收度,差异具有统计学意义(P<0.01)。在ConA刺激淋巴细胞18 h后,小鼠T细胞CD3 CD69 表达率显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),ConA刺激36 h后,T细胞CD3 CD25 表达率显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),ConA刺激48 h后,T细胞CD3 CD71 显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。熊果酸组在浓度为10～40μM时与ConA组比较,均能显著降低CD25、CD69、CD71的表达率,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论熊果酸可以显著的抑制多克隆刺激剂ConA介导的小鼠T细胞的活化和增殖。     

Effect of “Re Du Qing” on the activation,proliferation and membrane fluidity of lymphocytes

Summary Effects of Chinese Medicinal Preparation “Re Du Qing” (RDQ) on the activation, proliferation and membrane fluidity of T lymphocytes from human peripheral blood Were studied by means of³H-TdR incorporation and DPH fluorescence polarization. The results showed that “RDQ” can:1) significantly inhibit the activation of T lymphocytes; 2) restrain the proliferation of activated T lymphoblasts in the presence of exogenous interleukin-2 (IL-2); and 3) increase the membrane fluidity of T lymphocytes and antagonize the decreased fluidity of lymphocyte membrane mediated by Con A or PHA. The functional abnormalities of T lymphocytes in some autoimmune diseases such as arthritis and the usefulness of RDQ in the treatment of these diseases were also discussed.     

用Fura-2双波长荧光法测定低剂量电离辐射对小鼠脾细胞游离钙的影响

目的：探讨低剂量电离辐射免疫增强效应的机理。方法：采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ 双波长荧光测定法研究了低剂量电离辐射全身照射后小鼠脾Ｔ淋巴细胞内游离钙离子浓度（〔Ｃａ２＋ 〕ｉ）对次佳浓度Ｃｏｎ Ａ（５ ｍ ｇ／Ｌ）反应性的变化。结果：静息状态下的小鼠脾淋巴细胞内游离钙离子浓度为９５．０±１４．０ ｎｍ ｏｌ／Ｌ,ＣｏｎＡ 可使小鼠脾Ｔ淋巴细胞内游离钙离子浓度增加６９．４±７．６ ｎｍ ｏｌ／Ｌ,上升至峰值时间为７９．２ ｓ。７５、１００ 和２００ ｍ Ｇｙ 全身照射后２４ ｈ,Ｃｏｎ Ａ 诱导的小鼠脾Ｔ淋巴细胞内游离钙离子动员明显高于假照射组（Ｐ＜ ０．０１）。结论：低剂量电离辐射的免疫兴奋效应与其增强淋巴细胞内〔Ｃａ２＋ 〕ｉ动员等信息传递过程有关     

反复吗啡处理对小鼠淋巴细胞Ca~（2＋）含量膜流动性及原癌基因表达的影响

应用递增剂量急性吗啡处理４天后，小鼠胸腺细胞或脾细胞［Ｃａ２＋］ｉ下降，脾淋巴细胞膜脂流动性降低，同时ＣｏｎＡ活化的脾脏Ｔ细胞表达Ｃ－ｍｙｂ和Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ明显减少，提示反复吗啡处置对免疫细胞内的信息传导系统及膜脂系统已产生明显影响。     

高糖对培养肾小球内皮细胞细胞膜流动性影响的研究

目的 观察高糖状态下肾小球内皮细胞过氧化损伤与内皮细胞膜流动性改变的关系。方法 采用体外人肾小球内皮细胞培养,八木组织测量之TBA法测定脂质过氧化物丙二醛、Prendergast法测定细胞膜流动性,Fura-2双波长荧光法检测细胞内钙离子含量的变化。结果 高糖对肾小球内皮细胞可致过氧化损伤,使细胞膜流动性明显增高,细胞内钙含量增加,随着培养时间的延长,糖浓度愈高,作用愈明显。结论 高糖致内皮细胞过氧化损伤影响细胞膜流动性改变,可能是糖尿病肾病发生的始动因素。     

Adjustable action of pi-shen recipe on immune function in mice with L1210 ascites

Proliferation of Con A stimulated splenic lymphocyte was examined by incorporation of 3H-thymidine. Fluorescence polarization of DPH labelled splenic lymphocyte and bone marrow cells was measured. Proliferation of Con A stimulated splenic lymphocyte in DBA inbred healthy mice was higher than that of L1210 mice but fluorescence polarization of DPH labelled splenic lymphocyte in same healthy mice was lower than that of L1210 mice. i.e. membranous lipid lymphocyte fluidity of lymphocyte in the healthy mice was smaller than that of L1210 mice. 9 days after administration of Pi-Shen recipe by tube stomach proliferation of Con A-lymphocyte in the healthy mice has been increased. The recipe adjusted splenic lymphocyte membrane lipid fluidity of L1210 mice to level of those in healthy mice. Effects of Pi-Shen recipe on lipid fluidity of bone marrow cell membrane of L1210 mice were almost similar to that in splenic lymphocytes. These studies suggest that the mechanism on adjustable role of Pi-Shen recipe on T-lymphocyte function related to lymphocyte membrane lipid fluidity.     

肾小管上皮细胞膜流动性与其钙镁ATP酶和丙二醛的相关性研究

在兔肾小管上皮细胞原代培养的体外庆霉素损伤模型中，观察了肾小管上皮细胞膜流动性，钙镁ＡＴＰ酶活性，丙二醛，并应用阿魏酸钠防治大霉素对原代培养肾小管上皮细胞的损伤，发现庆大霉素组二丙醛含量升高（Ｐ〈０．０１），膜流动性及钙镁ＡＴＰ酶活性下降（Ｐ〈０．０１）相关分析表明，膜流动性下降与丙二醛含量升高呈非常显著的负相关（Ｐ〈０．０１）膜流动性与钙镁ＡＴＰ酶活性呈显著的正相关（Ｐ〈０．０５）。而阿魏酸钠显     

正常和恶性淋巴细胞膜的流动性及其对PHA、ConA刺激的反应性

本实验采用疏水性荧光探针DPH(1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene,1,6-二苯基-1,3,5-己三烯)标记小鼠的淋巴细胞膜,根据荧光偏振值的变化比较正常细胞膜和癌变细胞膜流动性及对外界刺激反应性的差别。实验结果表明癌变淋巴细胞膜的流动性明显增高(P<0.001)。用同样浓度的ConA 10mg/L,PHA 40mg/L刺激后,荧光偏振值的变化幅度和方向也不同于正常细胞。本文还对以细胞膜流动性变化作为癌变指标的可能性作了补充说明。     

驻极体诱导3T3细胞内游离钙离子浓度的变化

目的：研究公主体对3T3细胞内游离Ca^2 浓度变化的,体诱导3T3细胞凋亡与游离Ca^2 浓度变化之间的关系。方法：选用－300V和－500V驻极体作用3T3细胞48h,即时依次加入CaCl2,A23187,EDTA,通过流式细胞术检测细胞内Ca^2 浓度的变化和3T3细胞的凋亡量。结果：（1）负极性驻极体作用3T3细胞后,3T3细胞出现10％的凋亡量;（2）驻极体作用3T3细胞以后,细胞质游离Ca^2 浓度升高,Ca^2 浓度的升高不是由于细胞内钙池的释放,而是由于细胞外Ca^2 内流所引起,结论：驻极体诱导3T3细胞凋亡的机制可能是细胞外Ca^2 内上起的。