艾烟和香烟对APP/PS1双转基因小鼠海马β-淀粉样蛋白及血清炎症介质的影响

目的：观察艾烟和香烟对APP/PS1双转基因小鼠海马β-淀粉样蛋白及血清炎症介质的影响,从神经炎症角度探讨艾烟防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法：将36只24周龄雄性APP/PS1小鼠按随机数字表法分为模型组、艾烟组、香烟组,12只相同遗传背景的C57BL/6小鼠作为空白组。艾烟组和香烟组分别采用5~15 mg/m3浓度的艾烟及香烟进行干预,空白组和模型组仅抓取固定。各组小鼠干预时间为20 min/d,6 d/周,连续干预8周。采用刚果红染色法观察各组小鼠海马β-淀粉样蛋白沉积情况,采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-8（IL-8）、血清淀粉样蛋白A（SAA）、C反应蛋白（CRP）含量。结果：刚果红染色结果显示,与空白组比较,模型组和香烟组见大量β-淀粉样蛋白斑块沉积,艾烟组偶见散在β-淀粉样蛋白沉积颗粒。与空白组比较,模型组血清TNF-α、IL-8、CRP含量均明显升高（P<0.05）,香烟组血清TNF-α、IL-8、SAA、CRP含量均显著升高（P<0.05）;与模型组比较,艾烟组血清IL-8含量明显降低（P<0.05）;与香烟组比较,艾烟组血清TNF-α、IL-8、CRP含量均显著降低（P<0.05）。结论：艾烟可减少APP/PS1小鼠海马Aβ沉积并减轻炎症反应,提示艾烟对AD脑内神经炎症具有一定的调控作用;香烟则加剧AD脑内病变发展。     

基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨电针对阿尔茨海默病小鼠认知障碍的影响

目的:观察电针对APP/PS1双转基因小鼠结肠和海马中紧密连接相关蛋白Claudin-5、ZO-1及海马Toll样受体4/核转录因子κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)通路的影响,探讨电针改善阿尔茨海默病认知障碍的机制。方法:5月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、电针组,同月龄雄性C57BL/6小鼠作为对照组,每组9只。电针组电针“百会”“大肠俞”“足三里”,15 min/次,每周5次,干预5周。干预结束后,用Morris水迷宫评估小鼠学习记忆能力,尼氏染色法观察小鼠海马区病理形态,免疫组织化学法检测小鼠脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)表达,ELISA法检测小鼠结肠、血清、海马组织中脂多糖(LPS)含量,Western blot法检测小鼠结肠Claudin-5、ZO-1和海马Claudin-5、ZO-1及TLR4/NF-κB/NLRP3通路相关蛋白的表达。结果:与对照组比较,从第3天开始,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05,P<0.01),穿越原平台次数、目标象限停留时间百分比显著减少(P<0.01),结肠、血清及海马组织中LPS含...     

艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除小鼠学习记忆功能与海马β淀粉样蛋白沉淀的影响

目的观察艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除(apolipoprotein E-deficient,Apo E-/-)小鼠学习记忆能力与海马β淀粉样蛋白(β-Amyloid)沉淀的影响。方法将13只8周龄C57BL/6小鼠作为空白对照组,27只同龄Apo E-/-小鼠随机分为Apo E-/-模型组、艾烟组、香烟组。香烟与艾烟组小鼠分别暴露于5~15 mg/m3的香烟与艾烟环境。各组小鼠每天干预20分钟,每周6天,共干预12周。于第13周进行行为学测试,之后处死动物、取材,对其脑组织海马中Aβ沉淀进行刚果红染色。结果与模型组对比,空白对照组、艾烟组、香烟组小鼠均表现出学习潜伏期缩短,记忆潜伏期增长,记忆错误次数减少,差别有统计学意义(P0.05)。模型组小鼠在视野范围内有明显的粉红色弥散样Aβ沉淀,空白对照组明显少于模型组(P0.05)。艾烟组与香烟组在相同海马区域CA3中淀粉样蛋白沉淀均有不同程度的减少,艾烟组中Aβ沉淀较模型组显著降低(P0.05),较香烟组亦有减少(P0.05)。结论艾烟能够发挥Apo E-/-小鼠的海马CA3区保护作用,减少Aβ沉淀进而改善Apo E-/-小鼠学习记忆能力。     

还脑益聪方提取物对APP转基因小鼠脑组织Aβ生成相关因子和学习记忆行为的影响

目的研究还脑益聪方提取物对β淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)转基因小鼠学习记忆能力以及脑组织海马CA1区(hippocampal-CA1 area,CA1)APP、淀粉样前体蛋白β位分解酶1(β-site APP-cleaving enzyme,BACE1)、早老素蛋白1(presenilin-1,PS-1)和β淀粉样蛋白(beta amyloid protein,Aβ)的影响,初步探讨还脑益聪方提取物治疗阿尔茨海默病(Alzheimer′sDisease,AD)的作用机制。方法选用3月龄APP695V717I转基因小鼠模型,按数字表法随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方提取物大剂量组和小剂量组,另设立正常对照组(C57BL/6J小鼠),每组15只。连续灌胃4个月后进行相关指标检测:采用Morris水迷宫观测APP转基因小鼠空间学习记忆行为,采用免疫组织化学法检测APP转基因小鼠海马CA1区APP、BACE1、PS-1和Aβ蛋白的表达水平。结果与正常对照组小鼠比较,7月龄APP转基因模型小鼠在Morris水迷宫实验中穿越原平台位置次数、原平台所在第四象限游泳时间和游泳路程均显著减少(P<0.01);与模型组比较,7月龄盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方提取物大、小剂量组小鼠在Morris水迷宫实验中穿越原平台位置次数、第四象限游泳时间和路程均显著增多(P<0.05)。与正常对照组小鼠比较,7月龄模型组小鼠海马CA1区神经元APP、BACE1、PS-1和Aβ阳性表达显著增强(P<0.01)。与模型组比较,7月龄各药物干预组小鼠APP、BACE1、PS-1和Aβ阳性表达显著减弱(P<0.01)。结论还脑益聪方提取物早期应用可明显改善APP转基因小鼠已下降的学习记忆能力,降低海马CA1区神经元APP、BACE1、PS-1和Aβ的表达,减少Aβ生成,延缓APP转基因小鼠大脑病理进程。     

观察电针“百会”、“涌泉”两穴对不同月龄APP/PS1双转基因小鼠海马Aβ淀粉样沉淀及超微结构的影响

目的观察电针"百会"、"涌泉"两穴对5月龄和10月龄淀粉样前体蛋白/早老蛋白1(amyloid precursor protein/presenilin-1,APP/PS1)双转基因鼠海马β淀粉样蛋白(AmyloidβProtein,Aβ)沉积及超微结构的影响。方法分别将4月龄和9月龄的APP/PS1双转基因小鼠按随机分配法分为模型组、电针组和药物组,以相同月龄同窝阴性小鼠作为对照组,4月龄每组12只,9月龄每组11只。电针组取"百会"、"涌泉"两穴,每次留针时间为15分钟,隔日1次,治疗5周;药物组予多奈哌嗪片0.92 m L/g灌胃,取脑透射电镜片并观察。结果 5月龄透射电镜结果显示:在微血管、神经元突触及神经元超微结构上对照组优于模型组。10月龄透射电镜结果显示:模型组海马出现Aβ淀粉样沉淀——老年斑。结论 5月龄小鼠行为学出现阿尔茨海默病样改变;10月龄APP/PS1双转基因小鼠海马出现老年斑;电针治疗APP/PS1双转基因小鼠可能对海马超微结构有保护作用。     

还脑益聪方提取物对阿尔茨海默病模型小鼠脑组织Aβ、APP及相关分泌酶表达的影响

目的 观察由补肾益气、活血解毒中药组成的还脑益聪方提取物对β-淀粉样前体蛋白(APP)转基因造成的阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)生成的影响,并初步探讨其作用机制.方法 将3月龄AD模型小鼠随机分为模型组、还脑益聪方提取物大、小剂量组(2.8,1.4 g·kg-1)和盐酸多奈哌齐组(0.65×10-3g·kg-1),每组15只;同月龄相同遗传背景的C57BL/6J小鼠15只作为正常对照组.所试药物稀释相同体积灌胃给药,对照组和模型组给以等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续灌胃6个月.采用免疫组织化学法结合彩色图像分析法观察各组小鼠脑组织APP、Aβ、β位点剪切酶(BACE)和早老蛋白1(PS-1)的表达;采用刚果红染色观察各组小鼠脑组织淀粉样沉积的变化.结果 与正常对照组相比,模型组小鼠海马CA1区APP、Aβ、BACE和PS-1表达显著增多(P<0.01),刚果红染色示橘红色染色增多;与模型组相比,还脑益聪方组小鼠海马CA1区APP、Aβ、BACE和PS-1表达显著减少(P<0.05或P<0.01).橘红色染色较少.结论 还脑益聪方提取物可通过减少脑组织的APP含量及抑制β-和γ-分泌酶,从而减少AD模型小鼠脑组织Aβ的生成及淀粉样沉积的形成,这也是其改善AD模型小鼠学习记忆能力的机制之一.     

艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除小鼠自主行为与海马GFAP表达的影响

目的观察艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠自主行为能力与海马中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法将13只8周龄C57BL/6小鼠作为空白对照组,27只同龄Apo E-/-小鼠随机分为Apo E-/-模型组、艾烟组、香烟组。香烟组与艾烟组中小鼠暴露于5~15 mg/m3烟气环境。各组小鼠每天干预20 min,每星期6 d,共干预12星期。于第13星期进行行为学测试,之后处死动物、取材,对脑组织海马中GFAP进行免疫组化法检测。结果空白组小鼠自主活动明显高于模型组小鼠自主活动(P0.05);香烟组没有表现出与模型组、艾烟组的明显差异(P0.05),但低于空白组(P0.05)。艾烟组移动距离高于模型组(P0.05),站立次数低于空白组。模型组小鼠海马中GFAP免疫反应产物积分光密度明显高于空白组与艾烟组(P0.05)。香烟组小鼠海马GFAP表达高于艾烟组与空白组(P0.05)。结论艾烟可能增强小鼠中枢神经系统的兴奋性,减低阿茨海默病模型小鼠海马中GFAP的表达。     

电针对APP/PS1双转基因小鼠脑内海马区炎性反应及水通道蛋白4极性分布的影响

目的:观察电针"百会""肾俞"穴对APP/PS1双转基因小鼠海马区胶质细胞活化、炎性反应因子表达及水通道蛋白4(AQP4)极性分布的影响,探讨电针对阿尔茨海默病(AD)的防治机制。方法:选取20只5月龄C57BL/6雄性APP/PS1转基因小鼠(模型组)及20只野生型C57BL/6小鼠(空白组),再各随机分为对照组和电针组,每组10只。电针组选取"百会""肾俞"穴进行电针干预,每次30 min,每日1次, 6 d为一疗程,共4个疗程。使用新物体识别实验的偏好指数(接触新物体的时间占总测试时间的百分比)评估各组小鼠的短期记忆能力;使用酶联免疫吸附法测定小鼠海马区β淀粉样蛋白(Aβ)_1-40和Aβ_1-42的含量;使用Western blot法测定海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙结合受体分子-1(Iba-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达量;使用免疫组织化学法测定海马区星形胶质细胞和小胶质细胞活化情况以及AQP4极性表达水平的改变。结果:对APP/PS1小鼠,电针组与对照组...     

开心散对APP/PS1小鼠神经炎症和Aβ沉积的作用研究

目的研究开心散对阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)动物模型淀粉样前体蛋白/早老素基因1(amyloid precursor protein/presenilin 1,APP/PS1)双转基因小鼠的作用。方法将3月龄雄性APP/PS1小鼠随机分为模型组、美金刚(3.33 mg/kg)组及开心散低、中、高剂量(0.33、1.00、3.00 g/kg)组,采用同月龄相同遗传背景C57BL/6J小鼠作为对照组和对照给药(开心散1.00 g/kg)组,每组8只。连续ig给药2个月后,Morris水迷宫实验评价小鼠学习记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠海马CA1区神经元形态;刚果红染色法检测小鼠脑组织淀粉样斑块表达;免疫组化学法检测小鼠皮层和海马中β淀粉样蛋白1-40(amyloidβprotein 1-40,Aβ1-40)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和离子钙接头结合调节分子-1(ionized calcium binding adaptor molecule-1,Iba-1)的表达;ELISA法...     

不同艾灸因素对阿尔茨海默小鼠PI3K/AKT通路与皮质β淀粉样蛋白沉淀的影响

目的:观察艾灸、艾烟、无烟灸干预对APP/PS1小鼠大脑皮质PI3K/AKT通路相关指标和β淀粉样蛋白沉淀的影响,从能量代谢的角度探索艾灸不同作用因素在防治阿尔茨海默病中的机制。方法:将32只5个月龄雄性APP/PS1阿茨海默病模型小鼠随机分为模型组、艾灸组、艾烟组、无烟灸组,每组各8只,并将8只同月龄雄性C57BL/6小鼠作为空白对照组。空白组、模型组小鼠每日常规抓取、固定于正常环境;艾灸组与无烟灸组小鼠每日抓取、固定后取关元穴灸治;艾烟组小鼠每日抓取、固定后暴露于10~15 mg/m~3艾烟环境。所有干预20 min/d,6 d/周,共8周。于第10周取材。ELISA法检测各组小鼠大脑皮质中IRS-1、PI3K、AKT、GSK-3α、IDE的含量,刚果红染色检测大脑皮质区β淀粉样蛋白沉淀情况。结果:皮质中IRS-1含量比较显示,模型组低于空白组(P0.01),艾灸组、艾烟组高于模型组(P0.01,P0.05);脑中PI3K含量比较显示,模型组低于空白组(P0.01),艾灸组、艾烟组高于模型组(P0.05);脑中AKT含量比较显示,模型组低于空白组(P0.05),艾灸组、艾烟组、无烟灸组高于模型组(P0.05),艾灸组高于无烟灸组(P0.05);脑中GSK-3α含量比较显示,模型组高于空白组(P0.01),艾灸组、艾烟组、无烟灸组低于模型组(P0.01,P0.05,P0.05)。模型组小鼠在皮质内可观察到明显的橘红色Aβ沉积,空白对照组明显少于模型组(P0.01)。艾烟组、艾烟组、无烟灸组在相同皮质区域中,淀粉样蛋白沉淀均有不同程度的减少。结论:艾灸与艾烟可以调整APP/PS1阿尔茨海默病小鼠的脑部能量代谢,此外艾烟还可以增加对β淀粉蛋白的清除,减缓小鼠皮质内β淀粉蛋白沉淀的产生速度,以延缓AD病理进程。     

六味地黄丸通过TXNIP/NLRP3信号通路对SAMP8小鼠的神经保护作用

目的:探讨六味地黄丸通过调控硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin-interacting protein, TXNIP)/NLR家族Pyrin结构域3(NOD-like receptor, pyrin domain containing 3,NLRP3)炎症通路对快速老化小鼠8(Senescence accelerated mouse/prone 8,SAMP8)的神经保护作用。方法:采用随机数字表法将实验小鼠分为模型对照组、盐酸多奈哌齐0.75 mg/kg组和六味地黄丸0.68、1.35、2.7 g/kg组，用同月龄抗快速老化小鼠(SAMR1)作为正常对照组，连续灌胃给药2个月；采用Morris水迷宫行为学检测小鼠学习记忆能力；通过HE染色和透射电镜观察小鼠脑神经细胞形态及线粒体超微结构；Western Blot法检测小鼠脑组织海马与皮质中TXNIP、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)和白细胞介素-1β(interleulin-1β,IL-1β)蛋白的表达。结果:与正常对照组比较，模型对照组小鼠的逃避潜伏期显著延长，目标象限停留时间与穿越平台次...     

电针对淀粉样前体蛋白转基因小鼠海马微血管淀粉样沉积的影响及其与低密度脂蛋白相关受体1的关系

目的:探讨电针治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法:将13月龄的淀粉样前体蛋白(APP)转基因小鼠随机分为模型组和电针治疗组,以相同月龄和背景的C 57 BL/6小鼠作对照组。电针治疗组取"百会"涌泉"穴,每次留针15 min,隔日1次,针刺3个月。以LashleyⅢ水迷宫测定各组小鼠的学习记忆能力,以免疫组化方法检测海马β淀粉样蛋白(amyloidβprotein,Aβ)、低密度脂蛋白相关受体1(low densi-ty lipoprotein receptor-related protein 1,LRP 1)的表达。结果:模型组水迷宫游出时间较对照组延长(P<0.05),海马沟微血管壁Aβ1-42表达的累积吸光度较对照组升高(P<0.01),海马沟微血管壁LRP 1表达较对照组减低(P<0.01);而电针治疗组的水迷宫游出时间明显低于模型组,海马沟微血管壁Aβ1-42表达低于模型组,海马沟微血管壁LRP 1表达高于模型组(均P<0.05)。结论:电针治疗可能通过提高脑微血管壁Aβ受体LRP 1的清除转运能力,降低APP转基因鼠脑微血管壁的Aβ沉积,从而改善其学习、记忆能力。     

黄连解毒汤对APP/PS1转基因小鼠大脑皮质中TREM2/Akt/GSK3β通路的影响

基于“毒损脑络”阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease, AD)中医病机,黄连解毒汤治疗AD的机制还不清楚。该研究旨在探讨黄连解毒汤调节髓样细胞触发受体2(triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2)/苏氨酸蛋白激酶(protein kinase B,Akt)/糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)通路改善APP/PS1转基因小鼠认知障碍机制。将9月龄APP/PS1小鼠采用随机数字表法分为模型组,黄连解毒汤低、中、高(2.5、5、10 g·kg^-1)组和盐酸多奈哌齐0.75 mg·kg^-1组,同月龄C57BL/6J小鼠为正常组。连续给药1个月后,采用Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠皮质区神经细胞形态,免疫荧光检测β淀粉样蛋白(β-amyloid, Aβ)_1-42、CD86及精氨酸酶1(arginase 1,Arg1)表达情况,实时荧光定量PCR检测小鼠皮...     

黑逍遥散干预APP/PSI双转基因小鼠海马区Aβ降解相关基因和蛋白表达效应的研究

目的观察黑逍遥散对阿尔茨海默症(Alzheimer disease,AD)小鼠海马区β淀粉样蛋白前体(Amyloid beta precursorprotein,APP)、β淀粉样多肽1-42(β-amyloid1-42 Peptide,Aβ1-42)、糖原合成酶激酶-3β(Glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、脑啡肽酶(Neprilysin,NEP)、胰岛素抵抗酶(Insulin-degrading enzyme,IDE)基因和蛋白表达的影响。方法 42只APP/PS1双转基因雄性小鼠称重后,按随机原则分为模型组(10只)、阳性对照组(10只)、黑逍遥散高剂量组(11只)、黑逍遥散低剂量组(11只)。10只同月龄、同种系的野生型C57BL/6雄性小鼠为空白组。连续灌胃3个月后,采用Morris水迷宫进行行为学检测,采用qRT-PCR和Western Bloting分别检测小鼠海马区APP(Aβ1-42)、GSK-3β、NEP、IDE基因和蛋白的表达。结果干预3个月后,小鼠逃避潜伏期:模型组较空白组显著延长,用药各组较模型组显著缩短,差异具有统计学意义(P<0.01);小鼠跨原平台次数:模型组较空白组显著减少,用药各组较模型组显著增多,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与空白组相比,模型组小鼠海马区APP基因和Aβ1-42蛋白,以及GSK-3β基因和蛋白相对表达量显著升高,NEP与IDE基因和蛋白相对表达量显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与模型组相比,各用药组小鼠海马区APP基因和Aβ1-42蛋白以及GSK-3β基因和蛋白相对表达量显著降低,NEP与IDE基因和蛋白相对表达量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论黑逍遥可通过调节Aβ在海马区的异常代谢等作用,减缓AD小鼠认知能力的损伤。     

基于NLRP3/细胞焦亡通路研究荆芥挥发油的抗抑郁作用及作用机制

目的 观察荆芥Schizonepeta tenuifolia挥发油对慢性温和不可预知应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）模型小鼠抑郁样行为的干预作用,探究其调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)炎症小体/细胞焦亡从而抑制神经炎症的作用机制。方法 雄性ICR小鼠制备CUMS抑郁样模型,依据糖水偏好率将造模成功的小鼠随机分为模型组、氟西汀（10 mg/kg）组和荆芥挥发油高、低剂量（100、50 mg/kg）组,同时设置对照组。给予药物干预5周后,进行小鼠糖水偏好实验、强迫游泳实验、悬尾实验与飞溅实验。行为学测试结束后,取血并分离血清,取海马组织。ELISA法测定血清中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;尼氏染色法检测海马CA3区神经元尼氏小体平均吸光度值;免疫荧光法检测海马CA3区NLRP3、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cle...     

基于NLRP3炎性体及细胞焦亡研究犀角地黄汤对流感病毒性肺炎小鼠炎症反应的抑制作用

目的 探究犀角地黄汤对流感病毒性肺炎小鼠炎症反应的作用及作用机制。方法 BALB/c小鼠,随机分为正常组、模型组、犀角地黄汤组、达菲组,除正常组外其余小鼠以流感病毒滴鼻感染,1小时后给药。各组分别以对应的水煎剂或溶液灌胃,每日1次,连续6天。BALB/c小鼠分别在感染后第2、4、6天取材,观察小鼠肺大体病变情况;计算肺指数;光镜下观察肺组织病理切片;RT-PCR法检测肺组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3, NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein, ASC)、半胱天冬氨酸酶1前体(Pro-Caspase-1)和gasdermin D(GSDMD)mRNA水平;ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)和白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)水平。We...     

电针“百会”“涌泉”对4 月龄APP/PS1双转基因小鼠海马LC3 和Aβ影响的研究

目的：探讨电针对4月龄APP/PS1双转基因小鼠海马LC3和Aβ的影响。方法：将16只4月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为电针组和模型组;以8只4月龄雄性C57BL/6小鼠作为正常组。电针组电针“百会”“涌泉”穴,正常组、模型组以与电针组相同的方法束缚,干预均隔日一次,6周后取其脑组织。免疫组化法观察小鼠皮质和海马内LC3的表达情况;免疫荧光双标法观察小鼠海马内LC3和Aβ的共表达情况;Westernblot（WB）法检测小鼠海马内LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的表达水平。结果：免疫组化结果显示,在小鼠海马和皮质中,LC3主要表达于神经元的胞质和轴突。免疫荧光双标法结果显示,LC3和Aβ存在共表达。WB结果显示,正常组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值大于模型组,差异有统计学意义（P＜0.01）;电针组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值大于模型组,但差异无统计学意义（P >0.05,P = 0.19）。结论：5月龄时APP/PS1双转基因小鼠海马内自噬处于抑制状态;电针干预对4月龄APP/PS1小鼠海马内的自噬功能是否存在促进作用,需要进一步实验证实。     

电针“百会”“涌泉”穴对APP/PS1双转基因小鼠海马β淀粉样蛋白及载脂蛋白E水平的影响

目的:观察电针对4月龄APP/PS1双转基因小鼠海马载脂蛋白E(ApoE)及β淀粉样蛋白(Aβ)水平的影响,探讨针刺防治AD的机制。方法:将12只雄性4月龄APP/PS1双转基因阳性小鼠随机分为模型组和电针治疗组,以6只同月龄背景小鼠C57BL/6设为正常对照组,电针"百会""涌泉"或同等条件束缚作为干预手段,每次持续15 min,每日1次,疗程为2周。以酶联免疫吸附测定法(ELASA)测定海马Aβ1-42的含量、ApoE2、ApoE4以及胆固醇-24S-羟化酶(CYP46)的含量。结果:模型组海马Aβ1-42的含量高于正常对照组(P0.01);电针治疗组Aβ1-42的含量低于模型组(P0.01)。模型组海马ApoE2、ApoE4的含量与正常对照组相比,差异无统计学意义,电针治疗组ApoE2、ApoE4的含量均高于模型组(P0.05)。电针治疗组和模型组的CYP46含量均高于正常对照组,但其差异无统计学意义。结论:电针可降低APP/PS1小鼠海马Aβ1-42水平,其机制有可能是通过影响海马Apo E的水平从而实现的。     

督脉电针对APP/PS1双转基因痴呆小鼠行为学和海马区Aβ沉积的影响

目的观察督脉电针对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)小鼠行为学和海马区β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)表达的影响,探讨针刺疗法抗痴呆的作用机制。方法 7月龄雄性APP/PS1小鼠共20只,随机分为模型组,电针组,每组10只。以相同遗传背景的C57BL/6小鼠10只作为正常对照组,选取"百会""印堂""人中",隔天针刺干预1次,共15次。采用Morris水迷宫观察各组小鼠学习记忆能力变化,采用免疫组化法观察各组小鼠海马区Aβ表达含量。结果与对照组比较,模型组逃避潜伏期增长(P<0.01),游泳距离增加(P<0.01),游泳速度无统计学差异,首次跨越原平台时间延长(P<0.01),距原平台平均距离增加(P<0.01),海马区Aβ表达增多(P<0.01);与模型组比较,电针组逃避潜伏期缩短、游泳距离减少(均P<0.01),游泳速度无统计学差异,首次跨越原平台时间减少、距原平台平均距离缩短(均P<0.05),海马区Aβ表达减少(P<0.01)。结论督脉电针干预可降低Aβ沉积,而提高APP/PS1双转基因小鼠学习记忆和空间探索能力。     

电针百会、神庭对脂多糖诱导的抑郁样小鼠行为及海马NOD样受体蛋白3炎症小体的影响

目的 观察电针百会、神庭对脂多糖(LPS)诱导的抑郁样小鼠行为及NOD样受体蛋白3炎症小体(NLRP3)的影响。方法 将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组和氟西汀组，每组8只。模型组、电针组、氟西汀组小鼠每日予腹腔注射脂多糖(LPS)建立急性抑郁小鼠模型，连续5天。在造模同时，电针组每日予百会、神庭穴电针治疗，氟西汀组每日予氟西汀20 mg/kg灌胃，对照组、模型组小鼠每日予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃，连续5天。干预结束后采用旷场实验、强迫游泳实验进行行为学测试，评估各组小鼠行为学变化。采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测海马组织NLRP3、半胱天冬酶-1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)的蛋白表达。结果 旷场实验结果显示，各组小鼠的总运动总路程比较差异无统计学意义(P<0.05)。与对照组比较，模型组小鼠中央区域停留时间明显缩短(P<0.05);与模型组比较，电针组、氟西汀组小鼠中央区域停留时间均明显延长(P<0.05);与电针组比较，氟西汀组小鼠中央区域停留时间延长(P<0.05)。强迫游泳实验结果...