反相HPLC法测定3种延胡索生物碱含量

反相HPLC法测定3种延胡索生物碱含量祝晨,何宏贤,金蓉鸾(中国药科大学南京210009)灰绿延胡索CorydalisglaucescensRegel,长距延胡索C.schanginii(Pall.)Fedtesch.及对叶延胡索C.ledebourianaKir.etKar.均产于新疆,其块茎在当地作延胡索药用。我们曾采用酸性染料比色法进行了总生物碱的含量测定￣[1]。为了进一步为其品质评价提供依据以扩大药源,我们又采用反相HPLC法进行了8个国家自然科学基金资助项目生物碱成分的分离及定量分....     

不同规格延胡索中8种生物碱比较

目的 比较不同规格延胡索中原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、去氢延胡索甲素、海罂粟碱、延胡索乙素、四氢小檗碱和延胡索甲素.方法 延胡索浓氨-甲醇提取物的分析采用Agilent 5 TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温30℃;检测波长280 nm.结果 8种生物碱在各自范围内线性关系良好(r>0.999 0),平均加样回收率96.27%~98.89%,RSD 1.25%~2.56%;大部分生物碱的含有量随着延胡索直径的增大而呈现降低的趋势,只有原阿片碱的含有量随着延胡索直径的增大呈现上升的趋势,8种生物碱含有量总和随着延胡索直径的增大呈现降低趋势.结论 该方法操作简便、耗时短、稳定、分离效果好,适合用于延胡索中8种生物碱的同时检测.     

延胡索中生物碱成分的分离与反相高效液相色谱法含量测定

目的建立分离、测定延胡索中四种生物碱成分包括去氢紫堇碱、巴马汀、黄连碱、非洲防己碱含量的方法。方法采用10%氨水湿润药材粉末并用氯仿回流提取总生物碱,高速逆流色谱法分离制备各生物碱成分;利用反相高效液相色谱法测定各生物碱成分的含量。以乙腈-0.03 mol/L磷酸二氢钠(32∶68,每升流动相加入1.670 g十二烷基磺酸钠)为流动相,检测波长345 nm,流速0.6 m l/m in。结果各生物碱成分在测定范围内线性关系良好。结论该方法准确、快速,适用于延胡索药材的质量控制。     

苦参不同组织部位的生物碱含量研究

目的:对苦参不同组织部位中总生物碱与五种单体生物碱进行含量测定。方法:采用酸性染料比色法和高效液相色谱法分析苦参不同组织部位中总生物碱含量以及五种单体生物碱的含量。结果:苦参各组织部位中,五种单体生物碱含量总计依次为:韧皮部29.62mg/g,木质部20.90mg/g,髓部13.29mg/g,木栓层4.885mg/g;总生物碱含量依次为:韧皮部35.14mg/g,木质部33.12mg/g,髓部31.46mg/g,木栓层含量低于线性范围。结论:苦参各组织部位中五种单体生物碱和总生物碱含量高低依次为:韧皮部>木质部>髓部>木栓层。     

HPLC同时测定苦地丁中6种生物碱的含量

目的:建立同时测定苦地丁中6种生物碱成分的HPLC含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,Kromasil C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),以0.02 mol · L-1磷酸二氢钾水溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,检测波长289 nm,柱温为室温.结果:6种生物碱在一定范围内线性关系良好(r＞0.999),平均回收率为98.26％ ～102.10％,RSD 均＜3.0％.结论:该方法可以同时测定苦地丁中6中生物碱的含量,为苦地丁的质量评价提供参考.     

汉中不同规格延胡索质量评价

目的:考察不同种植年限延胡索、一年生大、小规格的延胡索其质量差异。方法:采用高效液相色谱法HPLC,迪马C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇-0.1%磷酸溶液(三乙胺调p H至6.0)=67∶33,流速为1.0 m L·min-1,柱温:30℃;检测波长:280 nm,测定每份样品中延胡索乙素含量并进行比较分析。结果:不同年限延胡索的含量比较,以一年生小子折干率为最高、延胡索乙素含量最高为1.776 9 mg·g-1,而母子折干率为是最低、延胡索乙素含量亦最低为1.537 4 mg·g-1。结论:不同生长年限和一年生大小不同延胡索药材规格其质量具有差异。     

不同生长年限苦参不同部位的生物碱含量

目的: 对不同年限苦参药材茎、叶、芦头、侧根、根5个部分总生物碱与5种单体生物碱进行含量测定。 方法: 采用高效液相色谱法分析不同年限苦参药材不同部位中5种指标性生物碱的含量。 结果: 5种指标性生物碱在不同生长年限 苦参不同部位的分布有不同特点,不同部位槐果碱的含量分布叶>茎>侧根>主根>芦头,苦参碱的分布是叶>茎>芦头>侧根>主根,氧化槐果碱的分布是侧根>主根>芦头>茎>叶,槐定碱的分布是侧根>主根>叶>茎>芦头,氧化苦参碱的分布是侧根>主根>芦头>茎>叶。随着生长年限的增加,各指标性生物碱成分含量随之增加,第4年有效成分增加幅度较小,其中主根中5种指标性成分含量依次为一年生13.58 mg·g^-1,两年生20.49 mg·g^-1,三年生27.74 mg·g^-1,四年生31.32 mg·g^-1。 结论: 上述结果为合理开发利用苦参以及苦参的生长年限提供了实验依据。     

HPLC法测定安中片中延胡索乙素的含量

目的:建立安中片中延胡索乙素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定延胡索乙素的含量。采用Agilent TC-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),紫外检测波长为280nm,以甲醇-0.1%磷酸(60∶40,用三乙胺调节pH至6.6)为流动相,流速为1.0mLomin-1,柱温为30℃,进样量为10μL,按外标法进行检测。结果:供试品中延胡索乙素得到较好的分离与测定,延胡索乙素在0.1285μg～1.2850μg范围内线性关系良好,回归方程为:A=8×106ρ+17772,R=0.9996,平均回收率为99.5%,RSD%=0.9%(n=6)。结论:所建立的方法快速、简便、准确、重现性好、专属性强,可用于评价安中片的质量。     

HPLC法同时测定左金滴丸中5种生物碱的含量

目的:建立同时测定左金滴丸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、药根碱、小檗碱含量的方法。方法:采用Agilent ZORBAXSBC18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-乙腈-0.015molSDS水溶液(20∶36∶44),检测波长:290nm,流速:1mL·min-1,柱温:25℃。结果:5种生物碱成分色谱良好,吴茱萸碱线性范围为0.112-1.12μg、吴茱萸次碱线性范围为0.144-1.14μg、巴马汀线性范围为0.204-2.04μg、药根碱线性范围为0.176-1.76μg、小檗碱线性范围为0.364-3.64μg。平均加样回收率分别为96.4%,98.1%,98.8%,97.7%和99.5%;RSD%分别为1.9%,1.6%,1.5%,1.3%和1.5%。结论:该方法简单易行,结果可靠准确,能够完善左金滴丸的质量标准。     

HPLC同时测定山豆根中7种生物碱及3种黄酮的含量

建立HPLC同时测定山豆根中7种生物碱(金雀花碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、N-甲基金雀花碱、槐醇、苦参碱和槐果碱)及3种黄酮(三叶豆紫檀苷、芒柄花素和马卡因)含量的方法。采用Welch XtimateTMC18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.01 mol·L-1醋酸铵(氨水调p H 8.0)溶液(B)进行梯度洗脱:0~20 min,4%~14%A;20~30 min,14%~25%A;30~45 min,25%~40%A;45~65 min,40%~55%A;65~75 min,55%A;流速1.0 m L·min-1,柱温30℃,检测波长225 nm。方法学验证结果显示,10种成分的分离度良好,且在各自浓度范围内呈现出良好的线性关系,r≥0.999 7,平均回收率在98.60%~102.6%,RSD为0.60%~3.7%(n=6),该方法简便、准确,重复性良好。含量测定结果显示,7种生物碱和3种黄酮成分在不同样品中的含量具有显著性差异。由此表明,不同批次的山豆根药材,其内在质量存在较大差异。该法可用于山豆根药材的多成分同步测定,同时可以为山豆根的全面质量评价和质量控制提供科学依据。     

白屈菜中多种生物碱含量的高效液相色谱法测定

目的 通过测定白屈菜中多种生物碱的含量,以求建立更加完善的白屈菜药材的质量标准.方法 采用反向高效液相色谱法.色谱柱为Inertsil ODS-3(4.6 mm ×250 mm),流动相为乙腈-1％三乙胺水溶液(23∶77,三乙胺水溶液用磷酸调pH至3),流速1 ml/min,柱温:35℃,检测波长:274 nm.结果 白屈菜红碱、血根碱、黄连碱分别在0.013 4～0.252 0μg,0.076 0 ～0.684 0 μg,0.141 6 ～ 2.548 8μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9997,0.9999和0.9999.结论 该方法准确、灵敏、可靠,重复性好,适用于对白屈菜药材的质量评价.     

摘花对不同种源不同生长时期浙贝母不同部位中3种生物碱含量的影响

目的 研究摘花对不同种源浙贝母在不同生长时期的不同部位中3种生物碱含量的影响。方法 采用超高效液相色谱-蒸发光散射（UPLC-ELSD）法,ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×150 mm,1.7 μm）;流动相0.02%三乙胺水溶液（A）和甲醇（B）梯度洗脱（0~2 min,45%A;2~5 min,45%~25%A;5~7 min,25%A;7~17 min,25%~10%A;17~20 min,10%A）,流速0.20 mL·min^-1,柱温35 ℃,样品室温度20 ℃,漂移管温度45 ℃;喷雾器参数40%,进样量为3 μL,同时测定不同生长时期不同种源摘花处理及未摘花的浙贝母鳞茎、须根、茎和叶中贝母素甲、贝母素乙和贝母辛的含量。结果 摘花处理可以明显提高不同种源浙贝母的产量（P<0.05）;现蕾期种源为浙江宁波、浙江磐安和江苏南通的浙贝母摘花处理后鳞茎中生物碱含量较未摘花有明显提高（P<0.05）,种源为重庆奉节的浙贝母摘花与未摘花处理鳞茎中生物碱含量差异无统计学意义;花期种源为江苏南通的浙贝母摘花处理后鳞茎中生物碱含量明显高于未摘花处理（P<0.05）,种源为浙江磐安和重庆奉节的浙贝母摘花后鳞茎中生物碱含量明显低于未摘花处理（P<0.05）,种源为浙江宁波的浙贝母摘花与未摘花处理鳞茎中生物碱含量差异无统计学意义;鳞茎膨大期种源为浙江宁波和浙江磐安的浙贝母摘花处理后鳞茎中生物碱含量明显高于未摘花处理（P<0.05）,种源为江苏南通的浙贝母摘花后鳞茎中生物碱含量明显低于未摘花处理（P<0.05）,种源为重庆奉节的浙贝母摘花与未摘花处理鳞茎中生物碱含量差异无统计学意义;收获期除种源为浙江磐安的浙贝母摘花处理后鳞茎中生物碱含量明显高于未摘花处理外（P<0.05）,其余种源的浙贝母摘花后鳞茎中生物碱含量均明显低于未摘花处理（P<0.05）;各处理的不同种源浙贝母叶中生物碱含量在各生长时期均明显高于鳞茎（P<0.05）。结论 人工摘花处理可以提高浙贝母产量,摘花后多数浙贝母现蕾期鳞茎生物碱含量高于未摘花处理而收获期鳞茎生物碱含量低于未摘花处理,种源为浙江磐安的浙贝母摘花后产量及生物碱含量均明显提高,浙贝母地上部分具有潜在开发价值。     

延胡索中生物碱成分的研究

目的:建立高速逆流色谱结合半制备高效液相色谱法分离纯化延胡索中生物碱的方法。方法:延胡索生物碱经高速逆流色谱法分离,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2∶3∶3∶2)为溶剂系统,上样量300 mg,得到1个混合物和2个生物碱单体。混合物再以半制备高效液相色谱分离,得到2个生物碱单体,所得产物采用ESI-MS,NMR进行结构鉴定。结果:分离得到4个高纯度的生物碱单体:海罂粟碱(125 mg,1)、四氢巴马亭(40.5 mg,2)、d-紫堇碱(23.5 mg,3)、四氢小檗碱(10 mg,4),其纯度分别为96.5%,97.54%,98.3%,97.3%。结论:HSCCC结合半制备高效液相色谱是一种有效的分离制备延胡索生物碱的方法。     

苦参不同部位有效成分含量比较研究

目的:比较苦参不同采收部位中的苦参总生物碱含量,为苦参栽培资源的合理利用提供依据。方法:采用高效液相色谱法分析不同年限苦参不同部位中苦参碱和氧化苦参碱的含量。结果:苦参碱和氧化苦参碱的总量在不同年限苦参不同部位的分布具有类似的规律性,侧根下部侧根上部主根横生根状茎(地中茎)茎芽。主根上部和下部的含量差异不显著,但主根与侧根下部的有效成分含量差异较大;苦参生长的第1年、第2年生物碱含量均有较大增长,3年生苦参含量均能达到《中华人民共和国药典》标准。结论:3年采收苦参较为合理,且3年生材料中地中茎和茎芽的生物碱含量也比较高,可以多途径利用。     

HPLC法测定元胡止痛栓中延胡索乙素的含量

目的研究元胡止痛栓中延胡索乙素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,流动相为甲醇-水-10%醋酸(65:35:2)以10%氨水调节pH值至6.0,280 nm为测定波长,用外标法计算含量。结果延胡索乙素质量浓度在0.044 8~1.120μg范围内与峰面积线性关系良好。结论元胡止痛栓中延胡索乙素的含量测定方法快速、结果准确。     

不同地区商品独活中香豆素含量比较

目的：对不同地区商品独活的质量进行多指标评价。方法：采用高效液相色谱法测定独活中三种香豆素的含量。结果：不同地区商品独活中三种香豆素含量存在一定的差异。结论：建议采用多指标评价的方法进行中药质量的评价。     

高效液相色谱法测定延胡索总生物碱滴丸中巴马汀碱和脱氢紫堇碱含量

目的:采用高效液相色谱法测定延胡索总生物碱滴丸中巴马汀碱和脱氢紫堇碱含量.方法:色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱,流动相为乙腈-水(含0.4％冰乙酸和0.1％三乙胺)(22:78),检测波长为338nm,柱温30℃.结果:盐酸巴马汀碱浓度在0.044 8～0.268 8μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 3,平均回收率为98.29％,硝酸脱氢紫堇碱浓度在0.23 ～1.15μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 4,平均回收率为99.83％.结论:方法简便、准确、重现性好,可用于延胡索总生物碱滴丸中含量测定质控指标.     

不同部位两面针药材中两面针碱的含量测定

目的测定两面针药材各部位的两面针碱含量.方法采用高效液相色谱法,色谱柱为HYPERSILBDSC185μm(4.6mm×250mm),流动相为0.02mol/L磷酸二氢钾-乙腈(6634),检测波长为328nm.结果两面针碱的平均加样回收率和RSD分别为100.24%,1.83%.根中的两面针碱含量最高.结论本方法可用于两面针的质量控制,根为合理用药部位.     

一年生与两年生延胡索生物碱含量比较

2000版中国药典收载的延胡索为罂粟科Paparaceae紫堇属Corydalis延胡索Corvdalis yanhusue．W.T．Wang的干燥块茎,为常用中药。药材多为栽培品,以浙江所产为地道药材。产地调查后发现．现今药农的种植方法为：选取当年个大、形美、色优的块茎留种,留待播种季节时撒播,成熟后一起收为延胡索药材。故药材中有一年生和两年生延胡索,丰     

高效液相色谱法测定妇乐颗粒中延胡索乙素的含量

目的建立妇乐颗粒中延胡索乙素的含量测定方法.方法采用HPLC法,流动相:甲醇-0.1%磷酸(用三乙胺调pH至6.0)(60:40),色谱柱:DiamonsilTM C18(250×4.6 mn,5 μm),流速:1.0 mL/min,柱温:35℃,波长:280 nm,进样量:20 μL.结果延胡索乙素在0.102～1.632 μg范围内线性良好,平均回收率为98.78%,RSD为2.75%.结论该方法简便、可靠,可用于妇乐颗粒的质量控制.