2种方法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的比较

目的比较测序法和Taqman实时荧光PCR法检测表皮生长因子受体(EGFR)基因19、21外显子基因突变的一致性,为寻找适宜临床应用的EGFR基因突变检测方法提供实验依据。方法收集60例非小细胞肺癌患者肿瘤组织,应用测序法和Taqman实时荧光PCR法分别检测EGFR基因19、21外显子基因突变,比较两种方法的有效性。结果两法检测EGFR基因19、21外显子突变结果符合率分别为96.7%(58/60)和98.3%(59/60),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 2种方法均可用于EGFR基因19、21外显子突变检测,测序法更适合指导临床分子靶向治疗。     

EGFR基因突变与肺癌EGFR-TKI获得性耐药的研究进展

<正>随着肺癌分子发病机制的研究,针对这些机制的靶向治疗药物逐渐进入临床,其中表皮生长因子受体(EGFR)是目前研究最多的肺癌治疗靶     

江西地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的探讨江西地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变类型、突变率及其与临床特征的关系。方法收集2014年3月至2015年6月南昌大学第一附属医院非小细胞肺癌患者石蜡包埋组织78例,采用等位基因特异性扩增-聚合酶链反应(ARMS-PCR)方法,对非小细胞肺癌患者肿瘤组织EGFR基因18~21外显子突变进行检测,并分析其突变类型、突变发生率及其与临床特征之间的关系。结果在78例非小细胞肺癌患者中,共有27例发生EGFR基因突变,总突变率为34.6%。其中,第18、19、20、21号外显子突变率分别2.6%(2/78),12.8%(10/78),3.9%(3/78),14.1%(11/78)。一例既有21号外显子突变,又有20号外显子突变,其中,19号外显子的突变均为第746~750密码子的碱基缺失,21号外显子突变类型以L858R为主,且19号外显子的突变率与21号外显子的突变率无统计学差异(P0.05),女性EGFR基因的突变率显著高于男性,不吸烟者显著高于吸烟者,腺癌患者显著高于鳞癌患者(P0.05),而EGFR基因的突变率与非小细胞肺癌患者的年龄、临床分期无相关性(P0.05)。结论江西地区的非小细胞肺癌EGFR基因突变以19、21号外显子为主,常见于女性、不吸烟、腺癌的非小细胞肺癌患者。     

EGFR基因突变与肺癌EGFR-TKI获得性耐药的研究进展

随着肺癌分子发病机制的研究，针对这些机制的靶向治疗药物逐渐进入临床，其中表皮生长因子受体（EGFR）是目前研究最多的肺癌治疗靶点。多中心研究显示，EGFR酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor，TKI）只对部分患者有效，且经过一定时间的治疗后出现疾病进展，即发生了获得性耐药，这种耐药可能与EGFR基因的二次突变有关。     

2016—2018年江苏省血液EGFR基因突变检测室间质量评价

摘要:目的：对 2016—2018年江苏省血液表皮生长因子受体（ EGFR ）基因突变检测室间质量评价的总体情况及存在问题进行分析和探讨，为临床实验室检测流程的规范和检测质量的保证提供依据。 方法：室间质评每年1次，2016年样本盘为4支cfDNA（cell-free DNA）样本，2017和2018年样本盘均为5支含cfDNA的血浆样本，要求各参评实验室收到样本后在规定的时间内检测并将所需填报的信息及测定结果上传至江苏省临床检验中心数据库；依据回报结果计算各实验室的成绩，分析每批样本的总体符合率、假阴性率、假阳性率及问题与风险。 结果：3次室间质评分别收到10份、16份和20份有效回报结果。检测结果完全符合的实验室分别为30.0%（3/10）、37.5%（6/16）和10.0%（2/20）；以得分≥80分为合格，合格率分别为90.0%（9/10）、56.2%（9/16）和50.0%（10/20）；假阴性率分别为70.0%（7/10）、56.2%（9/16）和88.9%（16/18），而假阳性率分别为0%（0/10）、25.0%（4/16）和22.2%（4/18）。测定方法敏感性和cfDNA提取效率不高是假阴性的主要原因，污染和阈值设置缺乏验证是假阳性的主要原因。 结论：针对血液标本的肿瘤相关基因突变检测需选择高敏感性测定方法、优化核酸提取效率、规范检验流程和强化结果的分析和验证。     

PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变

目的分析PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变的敏感性。方法应用PCR-SSCP检测36例肺癌标本的突变情况并与其它文献进行比较。结果在36例肺癌标本中，有11例存在突变，突变率为30.6％（11／36），其中男性2例，女性9例。结论PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变具有较高的敏感性，与其它文献报道一致。     

桂西地区壮族非小细胞肺癌患者EGFR基因突变与临床病理特征的相关性分析

目的 分析桂西地区壮族非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与临床病理特征的相关性。方法 以右江民族医学院附属医院2018年1月至2021年3月收集的NSCLC标本269例为研究对象,采用突变扩增系统聚合酶链反应(ARMS-PCR)法检测EGFR基因18～21号外显子的突变情况,分析基因突变情况与临床病理特征的相关性并做生存分析。结果 269例桂西地区壮族NSCLC患者中EGFR基因总突变率为40.5%(109/269),其中女性突变率高于男性(51.4%vs. 33.5%),腺癌突变率高于肺鳞癌(45.5%vs. 8.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。常见突变位点为19外显子19-Del,占总突变的55.0%(60/109);21外显子21-L858R,占总突变的29.4%(32/109);Logistic回归分析显示,性别、组织分型是EGFR突变的影响因素(P<0.05),与其他临床病理因素无关。EGFR突变型的肺癌患者经靶向治疗后,总生存率高于EGFR野生型(P<0.001)。结论 桂西地区壮族NSCLC的女性、肺腺癌患者EG...     

宁夏某医院225例非小细胞肺癌患者EGFR基因突变检测结果分析

目的分析宁夏某医院非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测结果。方法选择2014年1月至2017年12月在宁夏医科大学总医院住院的NSCLC患者225例进行回顾性分析,用扩增阻滞突变系统-聚合酶链反应(ARMS-PCR)检测EGFR基因突变情况。结果 EGFR基因总突变率50.22%(113/225),最常见突变位点为19外显子19-del及21外显子L858R,突变率分别为21.33%及17.78%,20外显子T790M耐药突变率及20-Ins插入突变(非敏感突变)的突变率分别为3.56%及1.33%;EGFR各外显子双突变共10例;EGFR基因突变率在性别、年龄、民族、季节、标本类型之间差异无统计学意义(P>0.05),在年份、病理类型之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ARMS-PCR可有效应用于临床病理石蜡标本基因突变检测,EGFR基因在19和21外显子存在较高的突变率,其突变亚型能指导小分子表皮生长因子酪氨酸酶抑制剂(EGFR-TKI)的肿瘤靶向治疗。     

血浆表皮生长因子受体基因突变检测质控品的制备及 性能评价

摘要：目的：制备模拟临床血浆样本的EGFR基因突变检测质控品，对其进行应用评估，作为日常检测中质量控制的保证。 方法：收集病理标本中EGFR基因E19del、L858R、T790M主要位点突变的阳性标本，提取DNA后，用正常献血者的报废血浆混匀分装成每管0.5ml，灭活，小量分装保存于-80℃。每次进行EGFR基因突变检测时，随常规标本同时提取扩增分析，评估其均一性及稳定性。 结果：保存于-80℃的自制EGFR突变质控品复融后常规测定, 结果显示其有较好的重复性和稳定性，无明显的批内、瓶间差异。 结论：制备的低浓度EGFR突变质控品能满足临床EGFR突变检测室内质控要求，可以作为日常EGFR突变检测质量控制的有效手段。     

中国人非小细胞肺癌EGFR基因突变与患者特征关系的Meta分析

[目的]采用循证医学的方法,应用Meta分析软件对国内外已发表的高质量的关于中国大陆非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变与患者特征关系的文献进行综合定量分析,为临床筛选靶向治疗有效的患者提供证据,从而使更多的肺癌患者从靶向治疗中受益。[方法]收集2000年～2008年已公开发表的关于中国大陆非小细胞肺癌患者EGFR基因突变的临床研究文献,对符合条件的所有研究结果进行Meta分析。[结果]符合纳入标准的共11篇文献,总样本量949例,EGFR总突变率为28．7％。女性患者的突变率（137／316,43．4％）显著高于男性患者的突变率（133／633,21．0％）,不吸烟患者的突变率（145／329,44．1％）显著高于吸烟患者的突变率（52／398,13．1％）,腺癌患者的突变率（198／459,43．1％）显著高于非腺癌患者的突变率（52／432,12．0％）。[结论]EGFR基因突变,主要存在于女性、非吸烟和腺癌患者中,可将EGFR基因突变作为筛查靶向治疗有效的患者的敏感指标,同时作为肺癌筛查的一种新的肿瘤标志物。     

qPCR-HRM曲线分析技术与普通PCR加直接测序法检测胶质瘤EGFR突变比较

目的:比较实时聚合酶链反应-高分辨率融解(qPCR-HRM)曲线分析技术和普通PCR法加直接测序法检测胶质瘤患者EGFR基因突变类型,探讨适用于临床的EGFR基因突变检测方法,为胶质瘤患者术后放射、化学治疗及预后判断研究提供可靠的依据。方法:用普通PCR加测序法与qPCR-HRM曲线分析技术检测胶质瘤患者EGFR基因突变类型,检测结果比较采用卡方检验。结果:两种方法检测EGFR外显子19基因突变结果比较差异无统计学意义,且qPCR-HRM曲线分析技术比直接测序法更快捷、灵敏。结论:与直接测序法相比,qPCR-HRM曲线分析技术可能更适用于临床检测胶质瘤患者标本EGFR突变性质。     

ARMS法检测肺腺癌EGFR基因突变及临床意义

目的 探讨扩增阻滞突变系统(ARMS)法在肺腺癌中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测的应用及其临床意义。方法 收集2015年1月～2016年8月西安交通大学第一附属医院病理科的肺腺癌标本566例作为研究对象。其中,胸腔积液细胞块标本34例,肺活检标本401例,手术切除标本131例,采用ARMS法进行石蜡标本EGFR基因突变检测,分析EGFR基因突变与肺腺癌患者临床资料的相关性。结果 肺腺癌标本566例中,吸烟腺癌患者239例,非吸烟腺癌患者327例。吸烟患者中,EGFR突变率与患者年龄、性别、手术方式等无明显关联(P>0.05),而与肺癌原发部位关系密切(P<0.05); 非吸烟患者中,EGFR突变率与性别、年龄、标本类型及肺癌原发病灶部位无明显相关性(P>0.05)。结论 ARMS法可有效应用于肺腺癌临床病理石蜡标本中EGFR基因突变检测。吸烟是EGFR突变率的重要影响因子,且对左、右肺均有影响,但是对右肺的影响较大。     

鼻咽癌患者血清EGF和EGFR的检测及临床意义

目的 研究鼻咽癌患者血清中表皮生长因子(EGF)和表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平及临床应用价值.方法 采用ELISA法测定血清中EGF和EGFR的含量.结果 鼻咽癌患者血清中EGF水平(3.93±1.21)μg/L,EGFR水平(1 144.3±213.7)pmol/L明显高于慢性咽炎患者血清中EGF水平(2.21±0.91)μg/L、EGFR(841.6±149.1)pmol/L和健康人血清中EGF水平(2.13±0.74)μg/L和EGFR水平(739.3±144.2)pmol/L,差异有统计学意义(P<0.01),且患者血清中EGF和EGFR中的含量与临床分期呈高度的正相关(rEGF=0.609,rEGFR=0.679);有淋巴结转移患者血清中EGF水平(4.25±1.36)μg/L和EGFR水平(1 248.1±236.4)pmol/L明显高于无转移患者血清中EGF水平(3.11±0.91)μg/L和EGFR水平(1 125.9±202.7)pmol/L,差异有统计学意义(P<0.01);治疗有效者治疗后血清中EGF水平(2.36±1.07)μg/L、EGFR水平(887.7±178.1)pmol/L明显低于治疗前EGF水平(3.74±1.20)μg/L、EGFR水平(1 116.4±215.6)pmol/L,差异有统计学意义(P<0.01);复发后血清中EGF水平(4.35±1.57)μg/L和EGFR水平(1 243.5±250.4)pmol/L明显高于复发前EGF水平(2.41±1.03)μg/L和EGFR水平(919.6±211.2)pmol/L,差异有统计学意义(P<0.01).结论 血清中EGF和EGFR含量的测定可作为鼻咽癌早期诊断和临床分期、放化疗敏感性、疗效、是否复发及预后判断的较理想的血清生物学标志物.     

表皮生长因子受体基因突变与肺腺癌亚型关系的研究

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变类型与肺腺癌亚型的相关性。方法收集2011~2015年该院3 028例非小细胞肺腺癌(NSCLC)患者的肿瘤组织,提取DNA后采用突变阻滞扩增系统(ARMS)检测EGFR基因突变。结果 3 028例NSCLC患者标本中,EGFR基因突变率为39.7%,其中第19号外显子缺失突变543例,第21号外显子L858R点突变535例,共占89.8%;新分类中浸润前病变与微浸润性腺癌、浸润性腺癌的EGFR基因突变比较,差异有统计学意义(P0.05);中分化肺腺癌有较高的EGFR突变率,不同分化程度的EGFR突变率比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论新分类表现出与分子诊断的相关性,不同亚型EGFR突变率有差异,EGFR基因突变与腺癌组织分化程度存在一定的相关性。     

非小细胞肺癌患者外周血游离DNA中检测EGFR基因突变

目的检测非小细胞肺癌患者外周血游离DNA中表皮生长因子受体(EGFR)基因19和21外显子的突变情况,并与相应的肿瘤组织检测结果进行比较,探讨非小细胞肺癌患者应用外周血游离DNA检测EGFR突变的临床意义。方法应用实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术检测32例非小细胞肺癌患者术后肿瘤组织和术前外周血游离DNA中EGFR基因19和21外显子的突变,所有扩增标本均经基因测序法验证。结果 32份外周血标本中,共检测到13份EGFR基因突变,突变率达40.6%,肿瘤组织中有16份EGFR基因突变,突变率达50.0%,外周血和肿瘤组织EGFR基因同时突变的有13份,两者突变一致性达到81.2%,两者间差异无统计学意义(P0.05)。结论外周血游离DNA代替肿瘤组织进行EGFR基因突变检测具有可行性,为无法取得肿瘤组织的非小细胞肺癌患者提供一种更快捷、简便的EGFR基因突变检测方法,其检测结果可为临床选择靶向药物治疗提供依据。     

新疆维吾尔族非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体及KRAS基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨新疆维吾尔族非小细胞肺癌（NSCLC）患者组织中表皮生长因子受体（EGFR）及KRAS基因突变与临床病理特征的关系。方法应用探针扩增阻滞突变系统（ARMS）检测50例NSCLC组织中EGFR基因第18、19、20和21外显子及KRAS基因12、13密码子上7种热点体细胞的突变情况,分析EGFR及KRAS基因突变与维吾尔族NSCLC患者临床病理特征之间的相关性。结果50例标本中,EGFR总检出率为12．0％,其中4例为19外显子缺失突变,2例为21外显子L858R点突变;KRAS总检出率为10％,均位于12密码子Glyl2Ala突变;无1例发生EGFR与KRAS同时突变。腺癌、鳞癌、大细胞癌EGFR及KRAS基因突变检出率分别为27．8％、3．5％、0％和22．2％、3．5％、0％。腺癌患者EGFR基因突变率（27．8％）明显高于非腺癌者（3．1％）,差异有统计学意义。腺癌与非腺癌患者KRAS基因突变比较,差异有统计学意义。维吾尔族患者EGFR及KRAS基因突变与年龄、性别、吸烟状况、TNM分期及ECOG评分均无关。结论与汉族人群相比,新疆维吾尔族NSCLC患者EGFR突变率较低,KRAS突变率较高,类似于欧美高加索人群的突变特点。     

EGFR19基因体细胞突变焦磷酸测序法室内质量控制的建立

目的试建立适用于表皮生长因子受体基因(EGFR19)体细胞突变焦磷酸测序法日常检测的室内质量控制体系。方法选择EGFR19E746_A750del(1)突变为10%的样本作为外部质控品,前20次的检测数据采用即刻法控制其检测质量,建立EGFR19基因体细胞突变焦磷酸测序的L-J质控图。结果该质控品前20次的SI上限和SI下限均在n2s内,用L-J质控图计算在即刻法质控的基础上获得的前20次外部质控品9C/14G的突变比例,其均值(x珋)为11.78%,标准差(s)为1.70%,变异系数(CV)为14.46%。结论用EGFR19质控品绘制L-J质控图,可对实验误差进行控制。     

EGFR的表达与乳腺癌的诊断和治疗

表皮生长因子受体(EGFR)是erbB(neu)家族成员之一,与乳腺癌的发生发展密切相关。综述近年来对EGFR的研究进展和它对乳腺癌的预测和预后价值。     

ctDNA检测晚期NSCLC患者EGFR基因突变的Meta分析

目的探讨循环肿瘤DNA(ctDNA)在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)突变检测中的应用价值。方法检索PubMed、Embase、Medline、万方数据库、中国知网数据库、中国生物医学文献数据库、维普数据库,纳入报道了ctDNA检测晚期NSCLC患者EGFR突变灵敏度与特异度的文献;采用合并灵敏度、特异度、似然比点状图、集成受试者工作特征(SROC)曲线及曲线下面积(AUC)评估ctDNA诊断价值。结果共纳入28篇文献,包括3 644例晚期NSCLC患者,合并后的灵敏度、特异度分别为64.0%(95%CI:0.59～0.70)、98.0%(95%CI:0.95～0.99)。SROC曲线下面积为0.85(95%CI:0.82～0.88),表明ctDNA有较高的诊断价值。结论对于晚期NSCLC患者EGFR突变的检测,ctDNA是一个高特异性及高诊断价值的生物标志物,ctDNA基因检测将是晚期NSCLC患者个体化靶向治疗的重要组成部分。     

荧光实时定量PCR检测肺癌组织表皮生长因子受体基因突变的临床应用价值——附71例分析

目的:建立1种检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突变的荧光实时定量PCR的新方法,并探讨应用这种方法检测肺癌组织EGFR基因突变的临床应用价值.方法:通过自行设计探针及引物,应用荧光实时定量PCR方法,检测71例女性非小细胞肺癌患者的肺癌组织中EGFR基因的第19号和第21号外显子上的突变情况,并与直接测序法比较.结果:中国女性非小细胞肺癌的病人中EGFR基因的突变率为30%(21/71);荧光实时定量PCR与直接测序法的特异度符合率是95%(20/21),敏感度符合率是100%,检测时间为直接测序法的1/12,而且结果判读直观.结论:应用荧光实时定量PCR检测肺癌组织中的EGFR基因特定位点的突变是一种快速、可靠的方法,具有较高的临床应用价值.