15-脱氧-△12,14-前列腺素J2对胃癌细胞生长的抑制作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的配体15-脱氧-△^12，14-前列腺素J2（15d-PGJ2）对人胃癌MGC803细胞生长的影响。方法 逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）及Survivin mRNA表达，Western blot检测PPART、Survivin蛋白的表达。噻唑蓝（MTT）比色法及流式细胞术检测增殖、凋亡。Hoechst33342染色观察凋亡的形态学变化。结果 PPARγ mRNA和蛋白在MGC803细胞均表达，15d-PGJ2（5、10、20、30和40μmol／L）抑制MGC803细胞增殖和诱导其凋亡，增殖抑制率和凋亡率随浓度的增加和时间的延长而升高。MGC803细胞Survivin mRNA和蛋白表达随15d-PGJ2作用浓度的升高而降低。结论 15d-PGJ2可能通过诱导凋亡抑制人胃癌MGC803细胞的生长，Survivin mRNA和蛋白表达变化在此过程中起重要作用，提示15d-PGJ2可能对治疗胃癌有效。     

过氧化物酶体增殖激活物受体γ配体诱导肾癌细胞的凋亡

目的 观察过氧化物酶体增殖激活物受体γ(PPARγ)配体对肾癌细胞凋亡的影响.方法 通过ELISA方法 观察0～100 μmol/L浓度的吡格列酮和曲格列酮(TZDs)对肾癌细胞786-0、A498及正常肾细胞HK-2、HMCC凋亡的影响,Heochst 33342荧光染色、DNA片段化分析检测70.00 μmol/L吡格列酮或80.00 μmol/L曲格列酮处理后肾癌细胞的凋亡,Western blot观察TZDs处理后肾癌细胞凋亡调控蛋白bcl-2/bax的表达变化及Caspase-3活性的改变.结果 超过50.00 μmol/L的TZDs可诱导肾癌细胞出现凋亡,LC_(50)值分别为65.11 μmol/L(曲格列酮/786-O)、67.73 μmol/L(吡格列酮J/786.0)、63.91 μmol/L(曲格列酮/A498)和78.12 μmol/L(吡格列酮/A498),但对正常肾细胞没有影响.荧光染色显示80.00 μmol/L的吡格列酮及70.00 μmol/L的曲格列酮处理后肾癌细胞明显凋亡,伴随bcl-2蛋白的表达水平降低和bax蛋白的增加,Caspase-3的活性明显增强,在48 h可达到基础值的3.5-4.5倍.结论 激活PPARγ可以诱导肾癌细胞的凋亡,PPARγ有可能成为肾细胞癌新的治疗靶点.     

绿脓杆菌菌毛株对肝癌细胞Hep-2生长的抑制作用

目的 观察绿脓杆菌菌毛株菌苗(PA-MSHA)对人肝细胞癌细胞株HepG-2的抑制作用及机制.方法 噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制情况.原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况;透射电镜观察细胞超微结构.Western blot法检测bcl-2、bax、Caspase-3蛋白表达;裸鼠移植瘤内及瘤周药物注射观察不同药物浓度及作用时间的体内抑瘤作用.结果 肿瘤细胞的抑制率与药物浓度和作用时间成正比;高、低浓度实验组和对照组凋亡率差异有统计学意义(P＜0.01);电镜观察可见经PA-MSHA作用后的HepG2细胞呈现典型的凋亡表现;PA-MSHA作用后可引起bax、Caspase-3蛋白表达上调,bcl-2蛋白表达下调;高浓度PA-MSHA可明显抑制裸鼠移植瘤的生长,17 d抑瘤率为60%.结论 PA-MSHA可明显抑制HepG-2细胞的生长,诱导凋亡是其另外一个作用机制.     

过氧化物酶体增殖活化受体γ激动剂罗格列酮对MG63细胞抑制生长及促进凋亡的作用

目的 观察过氧化物酶体增殖活化受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对骨肉瘤细胞株MG63的生长抑制及诱导凋亡作用.方法 取人骨肉瘤MG63细胞,用终质量浓度为0.5、5.0、50.0、100.0 μmol/L罗格列酮分别处理细胞,对照组不给予药物,噻唑蓝(MTT)比色法测定药物作用24、48、72 h对细胞生长的抑制率;流式细胞术(FCM)检测终质量浓度0、0.5、5.0、50.0 μmol/L罗格列酮处理24、48 h细胞周期分布;TUNEL法检测终质量浓度0.5μmol/L罗格列酮处理48 h的细胞凋亡,并计算凋亡指数(AJ).结果 细胞生长抑制率:(1)罗格列酮各浓度作用24、48、72 h,2个时间点抑制率两两比较的差异均有统计学意义(P＜0.01),有随时间增长而增加的趋势,其中0.5μmol/L对细胞的抑制率(％)分别为30.10±0.01、46.70±0.01和48.80±0.02;(2)在各时间点,各浓度组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01),在0.5～50.0 μmol/L浓度组区间,相同时间点的抑制率有随浓度升高而降低的趋势.细胞周期:(1)不同浓度的各细胞周期分布差异有统计学意义(P＜0.01).在24、48h时间点均表现为用药组G0/G1期细胞比例高于对照组,0.5mol/L组细胞比例最高,但随用药浓度增加,G0/G1期比例有下降趋势;用药组S期细胞比例均低于对照组,随用药浓度增加,S期比例有增高趋势;即用药可将细胞周期阻滞在G0/G1期的作用;(2)不同时间点间细胞周期分布变化的差异无统计学意义(F=0.36,P＞0.05).细胞凋亡:0.5 μmol/L组凋亡率(14.33±3.35)％明显高于对照组(2.82±0.63)％(P＜0.01),光镜下可见药物组细胞核固缩及散在的凋亡小体.结论 PPARγ激动剂罗格列酮能明显抑制人骨肉瘤MG63细胞的增殖,诱导该细胞G1期阻滞和细胞凋亡.     

VK2对肝癌细胞株MHCC97H的抑制作用

目的 观察VK2对MHCC97H细胞在生长、黏附、侵袭、凋亡以及Caspase-3活性的影响.方法 噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长;体外细胞黏附及侵袭实验检测细胞的黏附和侵袭能力;Annexin V-FITC Apoptosis Detection K和Caspase-3 Fluorescent Assay试剂盒分别检测细胞的凋亡及Caspase-3活性.结果 当VK2浓度从10-7mol/L增加到10-4mol/L时,细胞生长抑制率由12.5%增加到59.7%(P＜0.01).VK2对细胞的黏附抑制能力呈剂量依赖关系(P＜0.01);100μmol/L的VK2作用细胞3 h后,细胞对Fibronectin黏附抑制率为69.9%.作用48 h后,细胞侵袭抑制率为65.5%(P＜0.01);作用6 h后,细胞凋亡率为(28.5±1.6)%,与此同时,细胞Caspase-3活性为(226.0±6.4),与对照组(92.0±5.8)比较差异有统计学意义(P＜0.01);预先加入Caspase-3抑制剂(Z-VAD-FMK)后,Caspase-3活性无明显变化90.0±4.3(P＞0.05).结论 VK2对体外培养的MHCC97H细胞具有抑制生长、抑制黏附、抑制侵袭和诱导凋亡作用;Caspase-3参与了细胞凋亡的调控.     

百里醌对人骨肉瘤SaOS-2细胞生长的抑制作用

目的 探讨百里醌对体外人骨肉瘤SaOS-2细胞生长的影响及其机制.方法 百里醌作用人骨肉瘤SaOS-2细胞24h后,细胞计数CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;DAPI染色后荧光显微镜下观察细胞形态学变化;Western blot检测SaOS-2细胞中Caspase-3、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和Smac的表达.结果 不同浓度(20、40、80μmol/L)百里醌作用人骨肉瘤SaOS-2细胞24h后,细胞存活率分别为(75.5±4.2)%、(62.1±6.7)%和(52.5±4.9)%;细胞早期凋亡率分别为(8.1±0.7)%、(13.2±1.1)%和(20.2±1.7)%;百里醌作用后,SaOS-2细胞出现典型凋亡的形态学改变;百里醌可明显上调Caspase-3和Smac在SaOS-2细胞中的表达,而显著抑制XIAP的表达.结论 百里醌具有抑制体外人骨肉瘤SaOS-2细胞生长和促进细胞凋亡的作用,可能是通过上调人骨肉瘤SaOS-2细胞中Caspase-3和Smac的表达和下调XIAP的表达而实现.

Abstract：

Objective To investigate the inhibitory effect of thymoquinone on the growth of human osteosarcoma cell line SaOS-2 in vitro.Methods After human osteosarcoma SaOS-2 cells were treated with different concentrations of thymoquinone, the proliferation was measured by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. The flowcytometry (FCM) was used to determine apoptosis of SaOS-2 cells. The morphological changes of SaOS-2 cells were observed under the fluorescence microscopy after DAPI staining. Western blotting was used to detect the protein expression of Caspase-3, X-linked inhibitor of apoptosis protein (XIAP) and Smac.Results Thymoquinone obviously suppressed proliferation of SaOS-2 cells in a dose-dependent manner, and the apoptosis rate was (8.1±0.7)%, (13.2±1.1)% and (20.2±1.7)% respectively when the concentrations of thymoquinone exposed were 20, 40 and 80 μmol/L. After treatment with thymoquinone, the expression of Caspase-3 and Smac was up-regulated in SaOS-2 cells, and thymoquinone treatment significantly decreased the XIAP levels in SaOS-2 cells.Conclusion Thymoquinone has the anti-tumor effect on the human osteosarcoma SaOS-2 cells in vitroprobably by up-regulating the expression of Caspase-3 and Smac and down-regulating the expression of XIAP.     

重组超抗原SEB-scFv融合蛋白体外靶向抑制胃癌细胞的研究

目的 观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的体外抑制作用.方法 噻唑蓝(MTT)法观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的增殖抑制作用;DNA ladder法观察融合蛋白对胃癌细胞凋亡的影响,电子显微镜法观察融合蛋白处理后胃癌细胞的形态变化;流式细胞仪分析胃癌细胞凋亡率.结果 胃癌细胞的增殖抑制率随SEB-scFv融合蛋白作用浓度的增加而逐渐增大,且对不表达MG7相关抗原的肿瘤细胞不表现杀伤效应.1.0、10 mg/L高浓度融合蛋白组DNA凝胶电泳呈现明显的梯状条带.被融合蛋白活化的免疫效应细胞攻击后的胃癌细胞表现出典型的凋亡特征性变化.融合蛋白0.1、1.0、10 mg/L组细胞G0/G1期前有明显的凋亡峰出现,三者凋亡率分别达到51.62%、54.21%和61.55%.而生理盐水组凋亡率仅为1.44%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SEB-scFv融合蛋白在效应细胞介导下,能对表达MG7相关抗原的胃癌细胞显示出有效的体外生长抑制作用,且在此过程中伴随有胃癌细胞的凋亡.     

15-脱氧-△^12,14-前列腺素J2对兔耳增生性瘢痕的作用

目的探讨γ过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator activated receptor-7,PPAR-γ）的配体15-脱氧-△^12,14-前列腺素J2（15-deoxy-△^12,14-prostagliandxinJ2,15d—PGJ2）对兔耳增生性瘢痕I型胶原、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）、α平滑肌肌动蛋白（a—smooth muscle actin,α—SMA）表达的影响,探讨15d—PGJ2防治增生性瘢痕的可能性。方法选取新西兰大白兔18只,在兔耳腹侧面制作2cm×3cm全层皮肤缺损创面,每耳2个,共计72个,建立兔耳增生性瘢痕动物模型,随机分为2组,一组为实验组,另一组为对照组,分别用15d—PGJ2和生理盐水行瘢痕内注射,1次／d,共7次。停药后第7、14、21天两组同时取材;每组每次切取12个组织块。应用免疫组织化学检测I型胶原、CTGF和α—SMA的表达。结果各组兔耳腹侧创面愈合后均不同程度出现类似人增生性瘢痕的组织块。与对照组相比,15dPGJ2注射后瘢痕体积缩小,变软变平,色泽轻度变浅。在各个时间点15d—PGJ2组I型胶原、CTGF和α-SMA的表达均较对照组低,且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PPAR-γ的配体15d—PGJ2可降低瘢痕内I型胶原、CTGF和α—SMA的含量,引起瘢痕萎缩,有一定防治瘢痕的作用,可能为临床治疗增生性瘢痕提供一条新的途径。     

15-脱氧-△12,14-前列腺素J2对兔耳增生性瘢痕Ⅰ型胶原表达的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的配体15-脱氧-△12,14-前列腺素J2(15d-PGJ2)对兔耳增生性瘢痕Ⅰ型胶原表达的影响,探讨15d-PGJ2防治增生性瘢痕的可行性.方法 选取新西兰大白兔18只,在兔耳腹侧面制作2 cm×3 cm全层皮肤缺损创面,每耳2个,共计72个,建立兔耳增生性瘢痕动物模型,随机分组,分别用15d-PGJ2及生理盐水行瘢痕内注射,1次/d,共7次.停药后第14、21天两组同时取材;每组每次切取18个组织块.应用免疫组织化学、荧光定量聚合酶链反应(PCR)及Western blot检测Ⅰ型胶原的表达.结果 与对照组比较,15d-PGJ2注射后瘢痕体积缩小,变软变平,色泽轻度变浅.Ⅰ型胶原主要分布于真皮的细胞间质、成纤维细胞胞质中,血管壁上亦见阳性信号,在各个时间点15d-PGJ2组Ⅰ型胶原mRNA和蛋白的表达均较对照组低,且差异有统计学意义(P<0.05).结论 PPAR-γ的配体15d-PGJ2可降低瘢痕内Ⅰ型胶原的含量,引起瘢痕萎缩,从而防治瘢痕.     

5-氮-2-脱氧胞苷调控p53-baX凋亡通路DNA甲基化对胆管癌细胞生长的影响

目的 探讨甲基转移酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷(DAC或5-aza-dc)对胆管癌细胞QBC939生长的影响及其机制.方法 应用噻唑蓝(MTT)比色法检测DAC在不同浓度(0.1、0.5、1.0、5.0、25.0、100.0μmol/L)及不同时间(24、48、72 h)下对胆管癌细胞QBC939存活率的影响,透射电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪观察细胞生长周期及凋亡率的变化;甲基化聚合酶链反应检测DAC作用前后p53-bax凋亡通路DNA甲基化变化.结果 DAC对QBC939细胞生长的抑制有浓度和时间依赖性,其半数抑制率(IC50)为72h 5μmol/L;经DAC作用后电镜下胆管癌细胞凋亡增加;胆管癌细胞凋亡发生率由DAC处理前的4.31%上升至处理后的43.04%;DAC作用前p53-bax凋亡通路中p14、DAPK抑癌基因甲基化,DAC作用后p14、DAPK抑癌基因脱甲基化.结论 DAC对胆管癌QBC939细胞的生长具有抑制作用,这一抑制作用是由于DAC脱甲基化造成的,DAC对胆管癌QBC939细胞p53-bax线粒体凋亡通路DNA甲基化的影响使细胞凋亡功能得以恢复.     

曲古抑菌素A联合卡介苗对膀胱癌细胞的抑制作用及机制

目的 观察曲古抑菌素A(TSA)和卡介苗(BCG)及两者联合对膀胱癌细胞的影响,并探讨其作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTY)比色法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测膀胱癌细胞凋亡的变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞Fas mRNA、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)mRNA表达的变化,Western blot检测细胞Fas、XIAP蛋白水平的变化.结果 TSA和BCG及两者联合能明显抑制膀胱癌细胞生长,呈时间和剂量依赖,相对中高剂量两者联用表现为协同作用(艹).FCM检测示两者联用较单用凋亡比例明显增加,处理24 h后,总凋亡率从(14.88±1.34)%(BCG)和(28.15±2.13)%(TSA)升高到(61.06±4.29)%(TSA+BCG),差异有统计学意义(P＜0.01);RT-PCR结果示TSA和BCG及两者联合处理能显著诱导Fas mRNA的表达和显著抑制XIAP mRNA的表达,两者联合与单用比较差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot进一步在蛋白水平证实了上述结果.结论 TSA和BCG可通过诱导细胞凋亡而发挥体外抗膀胱癌作用,其作用机制可能涉及相关基因(Fas、XIAP)表达的调控.     

15-脱氧-△~(12,14)-前列腺素J2对兔耳增生性瘢痕结缔组织生长因子及胶原表达的影响

核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)作为负调节信号,在组织和器官纤维化中发挥抗纤维化作用,但在增生性瘢痕中的作用尚不清楚.我们采用兔耳增生性瘢痕模犁,观察PPAR-γ的配体15-脱氧-△~(12,14)-前列腺素J2(15d-PGJ2)对增生性瘢痕结缔组织生长因子(CTGF)及胶原表达的影响,以期为进一步的临床治疗提供理论依据和实验基础.     

选择性环氧合酶-2抑制剂对胶质瘤生长的影响

目的　观察选择性环氧合酶 (COX) -2抑制剂塞来昔布对人脑胶质瘤细胞株U2 5 1生长、细胞周期的影响以及对其凋亡的诱导。方法　采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT )比色法检测塞来昔布对细胞生长的抑制 ;用免疫组织化学检测细胞增殖核抗原 (PCNA)的表达 ;用流式细胞仪检测塞来昔布对其凋亡的诱导。结果　MTT检测表明细胞生长抑制率呈现一定的时间、剂量依赖性。PCNA检测发现经塞来昔布处理后PCNA指数明显下降 (P <0 .0 5 )。2 0 0 μmol/L塞来昔布处理胶质瘤细胞 8h后 ,流式细胞仪检测出现典型的凋亡亚二倍体峰 ,且峰值随处理时间的延长而增加 ,细胞凋亡率随处理时间的延长而呈现增加趋势 ,方差分析各组间差异具有统计学意义。结论　塞来昔布能有效抑制体外培养的人脑胶质瘤细胞生长 ,并呈时间浓度梯度 ;塞来昔布能诱导其发生凋亡。     

扭曲肉芝甲酯对人结肠癌LoVo细胞生长的抑制作用及其机制

目的 探讨扭曲肉芝甲酷抗结肠癌LoVo细胞增殖活性及其机制.方法 将LoVo细胞随机分为对照组和处理组(10、30、50μmol/L 3个亚组).对扭曲肉芝甲酯处理后LoVo细胞凋亡率、细胞周期、凋亡蛋白表达的改变进行定量分析.结果 经10、30、50 μmol/L扭曲肉芝甲酯处理24h后,LoVo细胞凋亡率分别为(2.32±0.93)％、(11.03±0.14)％和(16.29±1.98)％,对照组凋亡率为(2.09±0.97)％,而50 μmol/L扭曲肉芝甲酯处理0、6、12、24h后凋亡率分别为(2.67±0.97)％、(5.08±1.03)％、(5.04±0.83)％和(13.50±1.16)％(P＜0.05).荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡性改变;扭曲肉芝甲酯在0、10、50及100 μmol/L时将LoVo细胞抑制在G2/M期(9.53±3.97)％、(10.26±1.89)％、(11.36±2.56)％、(15.39±1.56)％ (P ＜0.05),该期的比例逐渐增高;Western blot法结果显示扭曲肉芝甲酯处理后结肠癌LoVo细胞的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶( Caspase)-8、Caspase-3表达升高.结论 扭曲肉芝甲酯以浓度依赖性和时间依赖性的方式抑制结肠癌LoVo细胞增殖,抑制细胞周期G2/M期,通过Caspase-8/Caspase-3来诱导细胞凋亡.     

肿瘤坏死因子基因转染对人胆管癌细胞生长的影响

目的　研究肿瘤坏死因子 α(TNF α)基因过表达对人胆管癌细胞生长的影响。方法构建逆转录病毒 TNF α(pLNCX TNF α)复合体 ,转染人胆管癌细胞得到稳定表达 ,通过聚合酶链式反应 (PCR)、流式细胞仪 (FCM )、免疫组织化学等方法检测基因表达、细胞生长增殖和细胞凋亡等情况。结果　pLNCX TNF α基因转染人胆管癌细胞后 ,pLNCX空质粒转染组、pLNCX TNF α基因转染组的细胞均能扩增出 70 8bp的基因片断 ,而未转染组则无 ;pLNCX TNF α基因转染组的细胞克隆抑制率为 64 % ,与对照组和 pLNCX空质粒转染组相比 ,差异性非常显著 (P <0 .0 1) ;转染的人胆管癌细胞G1期比例从 2 9.0 7%增加到 5 4.2 4% ,G2 M期和S期比例分别从 5 2 .0 3 %下降到2 .0 2 %、18.3 2 %下降到 10 .3 4% ;凋亡细胞数从 5 .83 %增加到 3 4.76%。结论　TNF α基因通过诱导肿瘤细胞发生凋亡并导致其发生G1期阻滞在肿瘤基因治疗方面发挥作用。     

2-脱氧-D-葡萄糖联合氟尿嘧啶对胃癌细胞MGC-803凋亡影响的实验研究

目的探讨糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖（2-DG）与氟尿嘧啶（5-Fu）单独及联合应用对人胃癌细胞MGC-803增殖及凋亡的影响。方法实验设立2-DG组、5-Fu组、联合组（2-DG＋5一Fu）及空白对照组,将2-DG（10mmol／L）及5-Fu（5．0μg／L）单药及联合用药作用于人胃癌细胞MGC-803,MTT法检测各组MGC-803细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果2-DG和5-Fu均可使胃癌细胞增殖受到抑制并可诱导细胞凋亡,两药合用后其作用明显增强。结论2-DG能有效抑制人胃癌细胞MGC-803细胞生长增殖,并诱导其凋亡;2-DG与5-Fu联合应用抗肿瘤作用明显增强。     

熊果酸纳米脂质体微粒对小鼠黑色素瘤细胞生长的抑制作用及其机制

目的探讨熊果酸纳米脂质体微粒(UA-PL-NP)对体外培养的黑色素瘤细胞生长的抑制作用及其机制。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞(B16),采用噻唑蓝(MTT)比色法观察熊果酸纳米脂质体微粒对其增殖活性的影响,Western blot法观察其对基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响,同时采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。实验中采用顺铂作为阳性对照。结果MTT检测熊果酸纳米脂质体微粒对B16细胞增殖有明显抑制作用,并呈浓度和时间依赖性,UA-PL-NP作用24hIC50值为7.68 mg/L,顺铂作用24 h IC50值为9.33 mg/L;流式检测UA-PL-NP浓度为7.68 mg/L,作用24 h后B16鼠黑色素瘤细胞的凋亡率为(53.20±7.13)%;浓度9.33 mg/L顺铂作用24 h的凋亡率为(36.10±5.85)%;阴性对照组24 h凋亡率为(7.87±2.31)%;Westerm blot检测对照组MMP-9蛋白含量是UA-PL-NP组3.106倍,是顺铂组的2.022倍;顺铂组MMP-9蛋白含量是UA- PL-NP组的1.537倍。结论熊果酸纳米脂质体微粒能促进瘤细胞的凋亡从而抑制B16鼠黑色素瘤细胞的增殖,并降低MMP-9蛋白的表达,具有抑制肿瘤侵袭和转移的作用。     

~(131)Ⅰ-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对荷MCF-7乳腺癌模型的抑瘤作用

目的 观察~(131)Ⅰ-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对MCF-7乳腺癌荷瘤裸鼠模型肿瘤生长的抑制作用.方法 采用过氧化氢标记法制备~(131)Ⅰ-17-AAG;将30只荷瘤裸鼠随机分成3组:~(131)Ⅰ-17-AAG治疗组,二甲基亚砜(DMSO)对照组和单纯Na~(131)Ⅰ治疗组.尾静脉注射相应试剂后,观察28 d,比较肿瘤的体积,计算抑瘤率;Western blot检测肿瘤组织Akt2蛋白表达情况;观察肿瘤组织病理变化;TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡.结果 给药28 d,肿瘤体积依序分别为(63.75±8.62)、(96.79±14.75)、(83.12±10.89)mm~3;~(131)Ⅰ-17-从G组与DMSO对照组和~(131)Ⅰ组两组间比较,差异有统计学意义(F=23.13,20.58,P＜0.01);DMSO对照组和~(131)Ⅰ组比较,差异无统计学意义(F=3.43,P＞0.05);~(131)Ⅰ-17-AAG治疗组Akt2蛋白表达较对照组明显降低.结论 ~(131)Ⅰ-17-AAG能有效抑制裸鼠MCF-7乳腺癌的生长,对治疗人MCF-7乳腺癌有较好实践意义.     

右旋柠烯乳剂对人胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用

目的　研究右旋柠烯乳剂 (D limonene)对人胰腺癌生长和转移的抑制作用并探讨其作用机制。方法　采用人胰腺癌完整组织块建立人胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型。移植后第 5天开始分别用生理盐水灌胃 (剂量为每天 0 .3ml/只 ,对照组 )、5 氟尿嘧啶腹腔注射 (剂量为每天 3 0mg/kg ,5 FU组 )、D limonene灌胃 (剂量为每天 15ml/kg ,D limonene组 )、D limonene灌胃 5 FU腹腔注射 (剂量同前 ,联用组 ) ,共用 7周。移植后第 8周处死动物 ,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率 ,检测胰腺癌细胞凋亡指数 (AI) ,免疫组织化学检测肿瘤组织微血管密度 (MVD)与血管内皮生长因子 (VEGF) ,并观察荷瘤鼠腹膜、肝、其他脏器肿瘤转移及腹水情况。结果　对照组、5 FU组、D limonene组、联用组的原位肿瘤瘤重分别为 2 .73± 0 .2 3、2 .5 5± 0 .2 8、1.49± 0 .0 9、1.48± 0 .2 1;抑瘤率分别为 0、7%、45 %、46% ;AI分别为 (3 .49± 0 .3 3 ) %、(7.13± 1.17) %、(2 0 .5 0± 2 .3 9) %、(19.97± 3 .44 ) % ;MVD分别为 2 2 .3 0± 2 .76、19.88± 3 .75、8.5 1± 5 .47、9.12± 5 .71;VEGF分别为 48.3 5± 6.12、47.44± 5 .2 7、3 3 .68± 8.65、3 4.2 6± 7.2 4;腹膜转移率分别为 10 0 .0 %、62 .5 %、3 0 .0 %、2 2 .2 %     

阿霉素联合4-羟苯维胺酯对膀胱癌细胞生长抑制与凋亡的影响

目的　通过观察盐酸阿霉素 (ADM )联合 4 羟苯维胺酯 (HPR )对人膀胱移行癌细胞的生长抑制和诱导凋亡作用 ,探讨两药对膀胱行癌细胞是否存在协同作用。方法　应用四甲基偶氮蓝比色 (MTT)法检测 0 .0 5mg/L阿霉素及 10 -6、5× 10 -6、10 -5mol/L不同浓度 4 HPR对膀胱癌细胞株T2 4的细胞毒作用 ,应用流式细胞仪检测 4 HPR、阿霉素或两药联合应用时对T2 4细胞生长抑制率。结果　单用 5 μmol/L的 4 HPR、0 .0 5mg/L阿霉素诱导T2 4细胞凋亡率分别为 8%和 2 1% ,两药联合后凋亡率达 5 2 % (P <0 .0 5 )。 0 .5mg/L阿霉素对T2 4细胞凋亡率为 5 2 % ,联合1、5 μmol/L的 4 HPR后凋亡率上升至 81%和 94% (P <0 .0 5 )。 结论　 4 HPR能诱导T2 4细胞凋亡 ,存在浓度和时间依赖性 ,4 HPR与阿霉素联合用药对膀胱癌细胞有明显生长抑制和凋亡诱导的协同作用 ,能缩短产生抑瘤效果的作用时间 ,减少阿霉素的用量。