蛋白酶体抑制剂PS-341对多发性骨髓瘤骨髓间充质干细胞多种细胞因子表达的影响

为了探讨蛋白酶体抑制剂PS-341(bortezomib,velcade)对多发性骨髓瘤(MM)患者间充质干细胞(MSC)细胞因子分泌的影响,用含10%FBS的RPMI1640培养液培养11例MM患者MSC,细胞数达5-10×105时以终浓度50nmol/L的PS-341作用4小时,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-6、IL-1β、SCF细胞因子表达。结果表明:PS-341作用后MM病人MSC细胞因子的表达有显著下降,IL-6、IL-1β、SCF的表达与对照组比较,其显著性检验结果分别为P<0.05、P<0.01、P<0.05,其中IL-1β尤为明显;难治复发组与缓解组比较,IL-1β的表达有显著差异,完全缓解(CR)组IL-1β表达受抑制更明显,IL-6、SCF两组间表达无明显差异;PS-341治疗的1例患者MSC在PS-341作用后IL-1β未见表达;IL-1β的表达与否对IL-6、SCF的表达无影响。结论:蛋白酶体抑制剂PS-341下调MM患者MSC IL-6、IL-1β、SCF细胞因子的表达。     

蛋白酶体抑制剂PS—34——治疗骨髓瘤的新方法

多发性骨髓瘤(MM)是一种目前不能治愈的血液系统恶性肿瘤。一种蛋白酶体抑制剂PS-341提供了治疗MM的新方法。PS-341对MM有抑制增殖及信号传导,诱导凋亡,克服耐药,与地塞米松协同抗肿瘤作用,减少骨髓瘤细胞与骨髓基质细胞的粘附及后者分泌IL-6的水平,并能抵抗IL-6的抗凋亡作用。PS-341的作用机制目前研究较多的是其对NF-κB的抑制作用。     

蛋白酶体抑制剂PS-341--治疗骨髓瘤的新方法

多发性骨髓瘤(MM)是一种目前不能治愈的血液系统恶性肿瘤.一种蛋白酶体抑制剂PS-341提供了治疗MM的新方法.PS-341对MM有抑制增殖及信号传导,诱导凋亡,克服耐药,与地塞米松协同抗肿瘤作用,减少骨髓瘤细胞与骨髓基质细胞的粘附及后者分泌IL-6的水平,并能抵抗IL-6的抗凋亡作用.PS-341的作用机制目前研究较多的是其对NF-кB的抑制作用.     

不同浓度硼替佐米对柔红霉素诱导的K562耐药细胞株ERK、JNK及P38表达的影响

本研究旨在观察蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib,PS-341)对柔红霉素(daunorubicin,DNR)诱导的K562白血病耐药细胞株ERK、JNK及P38表达的影响,探讨硼替佐米逆转耐药的分子机制。用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)进行耐药细胞株和硼替佐米细胞毒性的判定。以100nmol/L DNR单用或联合应用1及10nmol/L PS-341作用于K562耐药细胞株36小时,检测各组ERK、JNK及P38的表达情况,检测各组细胞凋亡率。结果表明:与DNR组相比,PS-341联合DNR可抑制ERK和P38的表达,增加JNK的表达(p<0.05)。结论 :PS-341可显著抑制K562耐药细胞株ERK和P38的表达,增加JNK的表达;PS-341通过MAPK途径逆转细胞耐药,促进细胞凋亡。     

硼替佐米对K562细胞株粘附分子ICAM-1表达的影响

目的:探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(万珂,Valcade)对白血病K562细胞株细胞问粘附分子(ICAM-1)表达的影响。方法:用含10?S的RPMI1640培养液体外培养K562细胞,分别用0、10、20、30、50、100 nmol/L的硼替佐米干预K562细胞6h后收集,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析K562细胞ICAM-1表达的变化。并用20 nmol/L浓度硼替佐米作用K562细胞株不同时间(0,6,12,24,48h)分析K562细胞ICAM-1表达的变化。结果:硼替佐米明显抑制K562细胞ICAM-1的表达(P<0.05),在硼替佐米浓度为0～20 nmol/L时成正比关系,当浓度>20 nmol/L各组差异无显著性。以20 nmol/L浓度作用K562细胞株不同时间后,ICAM-1的表达较作用前明显下降.并且这种效应持续存在。结论:K562细胞株ICAM-1基因表达异常增高,硼替佐米可抑制其表达量。     

脂多糖与高迁移率族蛋白B1联用对HepG2细胞释放细胞因子的影响

目的 观察脂多糖(LPS)与高迁移率族蛋白B1(HMGB1)单用或联用对人肝癌细胞释放细胞因子的诱导作用.方法 培养人肝癌细胞株HepG2,用原核重组表达载体pET14b-HMGB1原核表达纯化HMGB1蛋白;用不同浓度的HMGBl蛋白(0、0.01、0.1、1、10 mg/L)或不同浓度的LPS(0、0.1、1、10、100 mg/L)以及1 mg/L HMGB1和10 mg/L LPS联用分别刺激培养的HepG2,24 h后收集细胞上清液,用LiquiChip液相蛋白芯片系统检测上清液中粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)10种细胞因子的表达水平.结果 LPS可以剂量依赖性的方式刺激HepG2分泌IL-6、IL-8表达(P<0.05或P<0.01),而对GM-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-12、TNF-α等作用不明显;不同浓度的HMGB1刺激HepG2后发现,低浓度的HMGB1可明显上调IL-6、IL-8的表达(P均<0.01),但随着浓度升高,这种诱导作用逐渐减弱,并逐渐恢复至对照水平,而对其他8种细胞因子也无明显诱导作用.HMGB1和LPS联用时,高浓度的HMGB1可明显抑制LPS对HepG2分泌IL-6、IL-8的诱导作用(P均<0.01).结论 人肝癌细胞株HepG2对炎性刺激仅能产生很少种类的细胞因子,其中LPS作用可以上调IL-6和IL-8水平,而HMGB1则表现出量效的反作用,并且高浓度的HMGB1可明显抑制LPS对HepG2分泌细胞因子的诱导作用.     

PDCD5和Caspase-3在多发性骨髓瘤中的表达

目的 研究促凋亡基因PDCD5和Caspase-3mRNA在多发性骨髓瘤(MM)中的表达,并讨论其在MM的发生、发展及预后中的意义.方法 从收集40例MM患者及10例正常对照的骨髓标本中取骨髓单个核细胞(BMMCs),采用实时荧光定量PCR(Real time PCR) 的方法检测BMMCs中PDCD5和Caspase-3mRNA的表达,同时收取血浆以检测β2微球蛋白(β2-MG)分泌水平,Durie-Salmon(D-S)分期标准对MM患者进行临床分期.结果 与对照组比较,PDCD5和Caspase-3mRNA在MM组中表达明显减低(P<0.05),差异有统计学意义;复发/难治组患者PDCD5和Caspase-3mRNA的表达仍保持较低水平;初发组与复发/难治组之间表达差异无统计学意义.PDCD5和Caspase-3mRNA表达与患者病程D-S分期和β2-MG(≥或＜4.0 g/L)水平有负相关性(r=-0.86,P<0 05).结论 MM患者PDCD5和Caspase-3mRNA表达水平降低,提示PDCD5和Caspase-3可能参与MM的发生发展,可能作为评判MM患者预后的新指标.     

谷氨酰胺对白细胞介素-1β刺激下大鼠肝细胞一氧化氮的产生及线粒体膜电位的影响

目的 利用原代培养的大鼠肝细胞,观察不同浓度的谷氨酰胺(Glutamine,Gin)在体外对白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)刺激下肝细胞一氧化氮(Nitric oxide,NO)过度产生和线粒体膜电位降低的影响.方法 选用6周龄SD大鼠,采用原位胶原酶循环灌注消化法获取高纯度原代大鼠肝细胞,培养48 h后分别用生理盐水、IL-1β(1 nmol/L)以及IL-1β(1 nmol/L)联合不同浓度的Gln(2 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L)刺激肝细胞24 h,留取细胞和上清液,采用生化法测定上清液丙氨酸转移酶(lanine aminotransfemse ALT)和NO的水平,采用荧光探针Jc-1结合流式细胞仪检测肝细胞线粒体膜电位的变化.对各组数据之间进行方差分析,明确是否具有统计学意义.结果 IL-1β刺激后肝细胞培养液ALT平均浓度为38.2 U/L、N0的平均浓度为72.7 umol/L,均显著高于生理盐水组(分别为7.4U/L和41.7 mnol/L,P<0.01),而肝细胞线粒体膜电位水平却明显低于生理盐水组(强红色荧光细胞比例分别为30.0%和62.8%,P<0.01);同时给与Gln能够抑制IL-1β刺激下肝细胞N0的产生,减轻ALT的升高以及线粒体膜电位的降低,并且这些作用随着Gln浓度的增加而增强.结论 谷氨酰胺对炎症应激导致的肝细胞损伤具有保护作用,这种保护作用可能与抑制肝细胞NO的过度产生改善线粒体呼吸功能有关.     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589对多发性骨髓瘤细胞MM1R的抑制作用

本研究探讨新一代组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589单药或者联合蛋白酶体抑制剂硼替佐米,对多发性骨髓瘤(MM)细胞的抗瘤效应。采用MTT法检测LBH589(10、20、50 nmol/L)及50 nmol/L分别联合硼替佐米(10、20 nmol/L)作用于人多发性骨髓瘤MM1R细胞24,48 h后的细胞增殖抑制作用;采用流式细胞术检测LBH589对MM1R细胞周期和细胞凋亡的影响;采用Western blot分析LBH589(10、20、50 nmol/L)作用MM1R细胞24 h后组蛋白H4乙酰化的程度。结果表明,LBH589单药及与硼替佐米联合均能够抑制MM1R细胞增殖,并与药物浓度和作用时间呈正相关。MM1R细胞经药物作用48 h后,G0/G1期细胞逐渐增多,G2/M期及S期细胞逐渐减少,细胞阻滞在G0/G1期,同时可见MM1R细胞的凋亡率增加,作用呈浓度依赖性,且LBH589与硼替佐米联合作用均较单药作用更加明显(均P<0.001);Western blot分析显示,不同浓度LBH589作用MM1R细胞24 h后组蛋白H4乙酰化的程度上调,呈浓度依赖性。结论:LBH589能够抑制MM1R细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,且与硼替佐米联合对骨髓瘤细胞有协同作用。     

抗β2GPI/β2GPI复合物激活THP-1细胞表达炎性相关因子

目的探讨抗β2糖蛋白I(抗β2GPI)自身抗体与β2糖蛋白I(β2GPI)复合物刺激单核细胞株THP-1表达炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α及可能机制。方法用荧光定量PCR法检测抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞不同时间(0.5、1、1.5、2、6 h)后IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达,用免疫荧光染色法及western blot观察THP-1细胞表达IL-6、IL-8、TNF-α蛋白的情况。荧光定量PCR及western blot观察Toll样受体4(TLR4)途径抑制物(TAK-242)干预抗β2GPI/β2GPI复合物对THP-1细胞的刺激作用。结果抗β2GPI/β2GPI复合物(100μg/mL)刺激THP-1细胞不同时间,可使细胞表达IL-6、IL-8及TNF-αmRNA水平逐渐上升,于刺激2 h时IL-6、IL-8及TNF-α达到峰值(P<0.01),免疫荧光染色及western blot证实细胞表达IL-6、IL-8及TNF-α蛋白水平也明显增加。TAK-242(5μmol/L)可显著抑制抗β2GPI/β2GPI复合物诱导的细胞IL-6、IL-8及TNF-α表达。结论抗β2GPI/β2GPI复合物通过TLR4途径,激活THP-1细胞表达炎性细胞因子IL-6、IL-8及TNF-α,参与抗磷脂综合征的病理机制。     

不同分子量肝素对肾炎患者血小板活化和凝聚功能影响的研究

目的 :探讨普通肝素 (GH)和低分子量肝素 (L MWH)对肾炎患者血小板活化和凝聚的影响。方法 :用全自动血细胞分析仪测定血小板计数 (PL T)、体积 (MPV)、分布宽度 (PDW) ,用流式细胞学方法测定血小板表面颗粒膜蛋白(GMP- 140 )和纤维蛋白原受体 (GP b- a)。结果 :文中显示 L MWH对各型肾炎患者 PL T、MPV、PDW无显著性影响 ,可使血小板 GMP- 140和 GP b- a表达水平上调 ,但未达统计学意义 (P>0 .0 5 ) ;GH可使 GS、MN、PGN患者 PL T减少 ,MPV增大 (P<0 .0 1) ,PDW超过正常值 ,且 5 .1%患者 PL T降至 10 0× 10 9/ L 以下 ,使血小板 GMP- 140和 GP b- a表达水平显著性上调 (P<0 .0 1) ,且显著高于 L MWH治疗后的同病理类型患者 (P<0 .0 1)。结论 :L MWH对肾炎患者血小板活化和凝聚功能无显著性影响 ,GH可显著提高 GS、MN、PGN患者血小板活化和凝聚功能。     

替尼泊甙和顺铂对胃癌BGC-823细胞抑制作用

目的:探讨顺铂和替尼泊甙联合对胃癌细胞BGC-823的体外抑制和诱导细胞凋亡的作用。方法:MTT法测定DDP,VM-26单药及联合用药对BGC-823的体外抑制作用;利用流式细胞仪测定细胞的凋亡。结果:1.250~20.000μg/mlVM-26抑制率为15.99%~80.83%,经1.250μg/mlVM-26处理后凋亡率在0、12、24、48h分别为3.90%、4.42%、7.60%、17.70%;从1.563~25.000μg/mlDDP抑制率为11.71%~82.65%;经1.563μg/mlDDP处理后凋亡率0、12、24、48h分别为3.90%、6.13%、14.48%、15.3%;联合用药时抑制率为49.37%~91.12%,凋亡率为3.90%、11.01%、14.75%、46.11%。联合用药指数(CombinationIndex,CI)为0.430。结论:DDP与VM-26单药可抑制胃癌细胞BGC-823的生长,诱导细胞凋亡;DDP与VM-26联合同时应用在胃癌细胞上产生协同作用。     

达美康缓释片联合甘精胰岛素对2型糖尿病患者血糖、血脂及β细胞功能的影响

目的：探讨对伴血脂异常的磺脲类药物继发失效（SFS）的2型糖尿病（T2DM）患者的治疗方法。方法：改用达美康缓释片（MR）联合甘精胰岛素（IG）睡前注射治疗者20例（IG组）或中性鱼精蛋白锌胰岛素（NPH）30例（NPH组）。结果：12周后两组血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯均下降,IG组低血糖发生较少,治疗后C肽升高显著。结论：MR联合IG有较好疗效,不仅可改善胰岛β细胞功能,还有调脂和心血管保护作用。     

埃索美拉唑对大鼠胃黏膜保护的作用

目的：探讨埃索美拉唑对大鼠胃黏膜保护作用。方法：在乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤前,预先给予埃索美拉唑（20 mg/kg）灌胃,L-硝基-精氨酸甲酯（L-NAME,4 mg/kg）静脉注射。采用激光多普勒血流计（LDF）测定胃黏膜血流量（GMBF）,采用镉粒还原和比色法测定胃黏膜NO-2/NO3-含量,并观察了胃黏膜损伤指数（Ulcer index,UI）、溃疡坏死组织和中性粒细胞浸润严重程度的变化。结果：与模型损伤组比,埃索美拉唑组大鼠UI明显降低（P〈0.01）,溃疡坏死组织和中性粒细胞浸润程度明显减轻（P〈0.05）。预先用L-NAME处理后,埃索美拉唑保护胃黏膜损伤作用明显减弱。向胃内灌注埃索美拉唑,可增加GMBF、胃黏膜NO2-/NO-3,L-NAME可逆转这种作用,但对埃索美拉唑抑制酸分泌作用无明显影响。结论：埃索美拉唑对大鼠胃黏膜具有重要的保护作用,一氧化氮（Nitric oxide,NO）介导了这种作用。     

神经生长因子局部注射对骨折愈合的影响

目的：探讨神经生长因子（NGF）局部注射促进骨折愈合的临床作用。方法：对68例四肢新鲜骨折患者进行骨折端经皮局部注射NGF促进骨折愈合的临床治疗观察。据骨折类型、治疗方法相同或相似的原则设立相应的对照组,对骨痂生长情况、骨折临床愈合的时间进行对比研究分析。结果：两组病例均获随访,两组骨痂出现的时间、骨痂量的多少2周内无明显不同,3周后骨痂量治疗组多于对照组,治疗组各类型骨折临床愈合时间均较对照组有不同程度的缩短,疗效优于对照组,两组对比有统计学差异（P〈0．01）。结论：临床应用神经生长因子经皮局部注射在骨折中后期有促进骨折愈合修复的作用。     

阿立哌唑合并艾司西酞普兰治疗精神分裂症阴性症状对照研究

目的探讨阿立哌唑合并艾司西酞普兰治疗阴性症状为主的精神分裂症患者的疗效及安全性。方法将72例以阴性症状为主的精神分裂症患者随机分为两组各36例,研究组口服阿立哌唑合并艾司西酞普兰治疗．对照组口服阿立哌唑合并安慰剂治疗,观察12周,于治疗前及治疗2、4、6、8、12周末采用阳性与阴性症状量表（PANSS）和副反应量表（TESS）评定临床疗效及不良反应。结果12周末研究组的疗效与对照组无显著性差异,但12周末研究组阴性症状因子分的显著低于对照组（P〈0．01）。两组主要不良反应为轻度失眠、头痛、恶心、锥体外系反应、食欲下降等。结论阿立哌唑合并艾司西酞普兰治疗能显著缓解阴性症状,且不良反应发生率低。     

西酞普兰治疗苯二氮类药物依赖的对照研究

目的：探讨西酞普兰对苯二氮（艹卓）类药物依赖的治疗效果及药物的不良反应.方法：对122例诊断为苯二氮（艹卓）类药物依赖的患者,随机分为治疗组（61例）和对照组（61例）,治疗组给予西酞普兰,对照组给予多虑平,治疗12周.在治疗中定期分别给予汉密尔顿焦虑量表（HAMA）和副反应量表（TESS）评定疗效和不良反应.结果：两种药物的疗效相当,西酞普兰不良反应和减药反应少而轻.结论：西酞普兰对苯二氮（艹卓）类药物依赖的治疗疗效好,副反应轻,患者服药依从性好.西酞普兰是治疗苯二氮（艹卓）类药物成瘾安全有效的药物.     

甲氨蝶呤、环孢素与维A酯治疗中重度银屑病效果的系统评价

目的 比较甲氨蝶呤、环孢素、维A酯治疗银屑病的有效性和安全性.方法 搜索中英文数据库,收集所有与甲氨蝶呤、环孢素及维A酯类药物治疗银屑病有关文献.按照纳入和排除标准筛选.采用Cochrane协作网的RevMAN4.2软件进行统计分析.结果 纳入文献8篇,包括584例患者.比较治疗后的PASI均值,基本痊愈人数、有效率及不良反应等相关指标的原始数据.结论 甲氨蝶呤与环孢素疗效比较差异无统计学意义,环孢素优于维A酯.不良反应比较,三种药物均无严重和不可逆的不良反应发生.     

As2O3对乳腺癌细胞系MDA—MB-435s作用的研究

目的：探讨不同浓度三氧化二砷（As2O3）对人乳腺癌细胞系MDA—MB-435s的生长抑制作用及其机理。方法：不同浓度As2O3作用于体外培养细胞MDA—MB-435s，采用MTT法检测细胞生长，倒置显微镜观察细胞形态，并通过DNA梯状电泳和TUNEL检测凋亡。结果：As2O3剂量依赖性抑制细胞生长；观察到典型的细胞凋亡形态学特征性改变；琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡DNA梯状条带；As2O3作用组的凋亡指数明显高于阴性对照组（P〈0．05）。结论：As2O3具有抑制乳腺癌MDA—MB-435s细胞生长的作用，其机理与诱导细胞凋亡有关。