杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)模拟肽兔体内拮抗内毒素作用的研究

目的:观察杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)模拟肽对内毒素(LPS)血症大白兔的治疗作用。方法:以LPS250μg·KG~(-1)剂量静脉注射攻击日本大白兔制造兔内毒素血症模型,分别于LPS攻击后20秒内静脉注射不同剂量的BPI模拟肽;于LPS攻击前及攻击后不同时间内分别静脉注射5mg·kg~(-1)和10mg·kg~(-1)的BPI模拟肽,并观察BPI模拟肽对LPS攻击所致兔体温、中性     

杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)模拟肽体内拮抗内毒素作用的研究

本试验观察杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)模拟肽对内毒素(LPS)攻击小鼠死亡的保护作用。以一个LD_(50)为LPS(20mg·kg~(-1))静脉注射攻击小鼠,分别于LPS攻击后20s内静脉注射不同剂量的BPI模拟肽;于LPS攻击前及攻击后不同时间内分别静脉注射5mp·kg~(-1)和10mg·kg~(-1)的BPI模拟肽,以观察BPI模拟肽对LPS攻击所致小鼠死亡的保护作用、BPI模拟肽对LPS攻击小鼠死亡保护作用的时效关系及BPI模拟肽对LPS攻击小鼠死亡的预防作用。结果表明BPI模拟肽对LPS所致小鼠死亡有明显的保护作用及预防作用,并有一定的量效关系及时效关系。从而可见BPI模拟肽,不仅保留了BPI特异性中和LPS的特性,而且对LPS攻击小鼠具有     

特异性抗内毒素鸡蛋黄抗体的制备

目的：制备特异抗内毒素鸡蛋黄免疫球蛋白（Egg yolk immunoglobulin，IgY），探索防治内毒素血症的新途径。方法：用大肠杆菌J5株、内毒素（Lipopolysaccharide，LPS）及类脂A(Lipid A)作抗原免疫25周龄Roman鸡，改良水溶法提取抗体，进行紫外分光光度计检测、SDS-PAGE及Western blot免疫印迹分析，通过酶联染色反应检测其免疫学活性。结果：大肠杆菌J5株、LPS及Lipid A抗体含量分别为11.4、9.2、9.3mg/mL蛋白黄液，质量分数分别为92.3％、87.13％、90.4％，分子质量为180000u，初步鉴定其对内毒素具有特异性结合作用。结论：用大肠杆菌J5株、LPS及LipidA免疫鸡制备的IgY效价高、特异性强、产量大，将是一种防治内毒素血症的新方法。     

猪源杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)体内外生物活性的研究

革兰氏阴性杆菌感染能导致机体严重的病理改变,包括发热、低血压、休克、DIC、ARDS、MOF甚至死亡。作为革兰氏阴性菌外膜主要成分的内毒素(LPS),近来被认为是导致革兰氏阴性菌脓毒症中最主要的介质,内毒素可触发一系列机体效应分子的释放(包括TNF、IL—6、IL—1等),这些效应分子可介导内毒素血症的致死效应。虽然有效的抗生素可杀灭大部分细菌,但抗生素在杀灭细菌的同时也促使内毒素的释放,使得革兰氏阴性菌脓毒血症的治疗更为棘手。因此寻找一种既能杀菌又能中和内毒素的制剂显得越发重要。杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)就是一种既能杀菌又能中和内毒素的蛋白质,它存在于人、兔、牛等哺乳动物中性粒细胞(PMN)的嗜天青颗粒中。     

小鼠杀菌性或通透性增强蛋白片段BPI_(889-1497)在大肠杆菌的表达及其抗血清的制备

<正>英国科学家Weiss等[1]1978年首次发现并描述了杀菌性或通透性增强蛋白(bactericidal/permeability increasing protein,BPI)。成熟的BPI蛋白由456个氨基酸组成,相对分子质量(Mr)大约56 000。BPI蛋白最早在人中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒中分离得到[2]。研究表明,BPI在人中性粒细胞中占较大比重,其含量可以达到细胞总蛋白的0.15%～1.00%,     

小鼠BPI N端功能片段(muBPI_(25)蛋白)体外杀菌和中和内毒素作用研究

目的:建立胞内杀菌和体外中和内毒素实验模型,检测muBPI25目的蛋白对胞内寄生菌的抑杀作用和对内毒素的中和作用。方法:将pcDNA3.1(+)-muBPI36-259质粒导入RAW264.7细胞,用胞内寄生G+/G-菌感染上述细胞建立muBPI25目的蛋白胞内杀菌实验模型;将pSecTag2B-muBPI36-259与双荧光素酶报告基因质粒共转染RAW264.7细胞,建立体外检测muBPI25蛋白中和内毒素实验模型。结果:胞内杀菌实验模型证实muBPI25目的蛋白对G-伤寒杆菌具有抑杀作用;中和内毒素实验模型证实muBPI25目的蛋白对内毒素具有中和作用。结论:首次证实小鼠BPI N端功能片段,即muBPI25目的蛋白对G-菌具有抑杀作用,对其裂解产物内毒素具有中和作用。     

抗菌肽merecidin诱导人肺腺癌细胞系A549凋亡

目的探讨抗菌肽merecidin对人肺癌细胞系A549的作用及其机制。方法实验分为对照组(Ctrl)、顺铂干预组(cisplatin 40μmol/L)、merecidin干预组(merecidin 25/35μmol/L)、caspase抑制剂组(z-VAD-fmk)、caspase抑制剂+merecidin干预组(z-VAD-fmk+merecidin 25/35μmol/L)。MTT法检测细胞增殖,annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测caspase-3、8、9、激活型caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果抗菌肽merecidin明显抑制A549细胞增殖(P0.05),merecidin处理24 h后的IC_(50)值为34.8μmol/L。与Ctrl组相比,merecidin干预组的凋亡率显著升高(P0.05);与merecidin干预组相比,caspase抑制剂+merecidin干预组的凋亡率并没有下降。caspase-3、8、9蛋白表达无显著变化且未检测到激活型caspase-3蛋白表达。Bcl-2蛋白表达下调(P0.05)及Bax蛋白表达增多(P0.05)。结论抗菌肽merecidin可以抑制人肺腺癌细胞A549的增殖并诱导其凋亡。     

不同溶液小容量复苏对内毒素休克大鼠肾组织病理和氧化应激的影响

目的 探讨7.5％高渗氯化钠、羟乙基淀粉液130/0.4(万汶)和高渗氯化钠羟乙基淀粉不同液体小容量复苏对内毒素休克大鼠肾损害及超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响.方法 30只SD大鼠完全随机分5组(n=6):正常组(N组)、内毒素休克组(LPS,E组)、7.5％高渗氯化钠溶液复苏组(LPS+HSS,HSS组)、羟乙基淀粉液130/0.4(万汶)复苏组(LPS+HES,HES组)、高渗氯化钠羟乙基淀粉40溶液复苏组(LPS+HSH,HSH组).除N组外,各组在静注内毒素(LPS)后进行小容量复苏.记录不同时间点心率及收缩压.复苏60 min后取肾标本行病理学检查,测定肾皮质匀浆MDA浓度和SOD活性,计算肾干湿质量比.结果 内毒素休克大鼠心率增快、动脉收缩压下降;复苏后心率减慢,动脉血压回升.E组局部出现肾小管坏死、肾小球足突融合、基底膜沉积物;复苏组病理改变减轻.E组SOD活性下降[(125.27±32.28) U/ml比(340.53±42.25) U/ml,P＜0.05];MDA含量增加[(1.08±0.15)μmol/L比(0.35±0.08)μmol/L,P＜0.05].小容量复苏后,HES和HSH复苏组MDA含量下降[(0.64±0.18) μmol/L和(0.63±0.15) μmol/L比(1.08±0.15)μmol/L,P＜0.05];HSS、HES和HSH组的SOD活性增强[ (233.06±75.60) U/ml和(210.21±52.73) U/ml和(231.22±77.78) U/ml比(125.27±32.28)U/ml,P＜0.05].结论 内毒素休克大鼠肾损伤明显,不同液体小容量复苏后氧化损伤减轻,肾脏病理改变减轻.     

胆红素和内毒素联合作用对NRK52E细胞缝隙连接功能的影响

目的: 观察胆红素(BR)和内毒素(LPS)联合作用对肾小管上皮细胞(NRK52E)生长及细胞间缝隙连接(GJ)的影响。方法: 体外培养NRK52E细胞,不同浓度的BR和LPS联合干预,用MTT测量细胞生长;观察它们对生长融合细胞(有GJ形成)和生长未融合细胞(无GJ形成)集落形成的影响;采用细胞荧光免疫示踪法分析细胞间GJ的功能。结果: BR 从17.1 μmol/L增加至 513 μmol/L,可浓度依赖性地增加细胞生长;当BR浓度继续增加时,细胞生长逐渐降低。LPS(10-1 000 μg/L)能浓度依赖性地降低NRK52E细胞生长。 BR和LPS 联合作用下,513 μmol/L BR增加100 μg/L LPS作用下的细胞生长(P<0.05),而684 μmol/L BR降低100 μg/L LPS的细胞生长(P<0.05);513 μmol/L BR能增加100 μg/L LPS作用下GJ传递数目(P<0.05),684 μmol/L BR降低100 μg/L LPS作用下的GJ传递数目。 结论: BR和LPS联合作用时,513 μmol/L BR降低LPS的细胞毒性,684 μmol/L BR增加LPS的细胞毒性,其改变可能是通过细胞间缝隙连接发挥作用的。     

维生素D3诱导的U937细胞中CD14表达的实验研究

目的: 探讨维生素D3诱导U937细胞上CD14蛋白的表达及其对内毒素 (LPS)刺激的反应性。方法: 用0. 1μmol/LVitD3与U937细胞共同培养 24h诱导CD14基因的表达, 并观察U937细胞对不同浓度的LPS刺激不同时间的反应性。结果: VitD3能稳定诱导U937细胞表达CD14mRNA和CD14蛋白。经VitD3诱导的U937细胞对LPS刺激的敏感性显著增强, 表现为低浓度LPS刺激即能诱导该细胞核中NF -κB激活, 促进TNF- αmRNA的转录和表达, 并将表达的TNF α释放入培养上清中。结论: VitD3能诱导U937细胞中CD14基因和蛋白的表达, 并增加其对LPS刺激的反应性。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.