碱性成纤维细胞生长因子对大鼠烫伤创面中基质金属蛋白酶及其抑制剂的影响

目的　观察大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶 (MMP) 2、MMP 7与金属蛋白酶组织抑制因子 2 (TIMP 2 )的变化以及创面外用碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对其的影响。　方法　制作 30 %TBSA深Ⅱ度烫伤大鼠模型 ,分为单纯烫伤组和bFGF治疗组。于伤后 3、6h和 1、3、7、14d取创面皮肤标本 ,检测再上皮化率及胶原含量 ,并采用免疫组织化学染色法检测创面组织真皮内成纤维细胞MMP 2、MMP 7和TIMP 2的表达变化。另取 6只正常大鼠作为假烫组 ,分别检测上述各项指标。　结果　 (1)伤后 3～ 14d ,bFGF治疗组再上皮化率高于单纯烫伤组。 (2 )伤后 3h～ 3d ,bFGF治疗组和单纯烫伤组胶原含量持续下降 ,7～ 14d开始回升 ,但仍低于假烫组 (P<0 .0 5 )。 (3)伤后 1d ,单纯烫伤组MMP 2、MMP 7和TIMP 2表达增多 ,7d时达到高峰 ,持续到 14d。(4 )伤后 3～ 6h,bFGF治疗组MMP 2、MMP 7的表达与单纯烫伤组相似 ;伤后 1～ 14d ,3者的阳性表达强于单纯烫伤组。　结论　烫伤大鼠创面中细胞外基质的活动会影响皮肤的胶原沉积 ;MMP 2、MMP 7、TIMP 2的表达变化是组织修复的重要步骤 ,与bFGF加速创面愈合的过程密切相关。     

肾母细胞瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子和纤维细胞生长因子受体表达分析

肾母细胞瘤 (ＮＢＴ)是婴幼儿泌尿系最常见的恶性肿瘤。我们采用ＲＴ ＰＣＲ技术对ＮＢＴ组织中碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)和纤维细胞生长因子受体 (ＦＧＦＲ)基因进行定量分析 ,探讨其临床意义。资料与方法　 38例ＮＢＴ标本、2 2例肾癌癌旁组织标本 ,均经病理学诊断证实为ＮＢＴ。患儿年龄 1～ 3岁。实验方法 :总ＲＮＡ提取。ｂＦＧＦ、ＦＧＦＲ引物由北京奥科生物有限公司合成。引物序列采用ｐｒｉｍｅｒｐｒｅｍｉｅｒ 5 .0软件处理系统设计 ,并以 β ａｃｔｉｎ为内参照。ＲＴ ＰＣＲ试剂购自大连宝生物有限公司 ,采用 2 0 μ…     

碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞中转化生长因子-β1和碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达的影响

目的　探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对体外成骨细胞中的生长因子 :转化生长因子 β1 (TGF β1 )和bFGFmRNA表达的影响。 方法　将体外培养的新生SD大鼠颅骨成骨细胞 ,用不同浓度的bFGF(5～ 50 μg/L)进行处理 ,利用核酸原位分子杂交 ,检测两种生长因子在细胞中mRNA的表达。结果　依bFGF浓度的增加成骨细胞内TGF β1mRNA表达分别是对照组的 1 .5、1 .6、1 .9和 2 .0倍 ;bFGFmRNA表达则分别是对照组的 1 .2 8、1 .37、1 .40和 1 .51倍。bFGF组中 ,TGF β1和bFGFmRNA的表达量均明显高于对照组 (P <0 .0 1 )。结论　外源性bFGF可以对成骨细胞自分泌bGFG产生影响 ,还能够促进TGF β1的合成     

增殖性肾小球肾炎中碱性成纤维细胞生长因子的表达及其作用

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在人类增殖性肾小球肾炎（ＰＧＮ）中的表达及作用。方法采用原位杂交、免疫组化和放免测定方法检测肾活检组织中的ｂＦＧＦｍＲＮＡ及蛋白质表达、肾小球内细胞外基质（ＥＣＭ）面积和有核细胞数、层粘蛋白（ＬＮ）和前胶原Ⅲ（ＰＣⅢ）含量。结果在以细胞增殖和ＥＣＭ积聚为特征的ＰＧＮ组中ｂＦＧＦ表达水平、ＬＮ和ＰＣⅢ含量均显著高于非增殖性肾小球肾炎（ＮＰＧＮ）组和正常组。结论过度表达的ｂＦＧＦ参与肾小球内细胞增殖和ＥＣＭ积聚，从而影响肾小球肾炎和肾小球硬化进程。     

血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在甲状腺癌中的表达及临床意义。方法　用免疫组织化学SP法检测 90例甲状腺乳头状癌、14例甲状腺未分化癌和 10例正常甲状腺组织中VEGF、bFGF的表达情况 ,并分析其与相关临床病理因素的关系。结果在甲状腺癌组织中VEGF、bFGF表达阳性率分别为 6 3 5 %和 5 9 6 % ,均显著高于正常甲状腺组织( χ2 =12 5 81,P <0 0 1)、( χ2 =12 5 81,P <0 0 1) ;未分化癌组织中VEGF、bFGF的表达阳性率分别为 92 9%和 85 7% ,均显著高于乳头状癌 ( χ2 =6 0 2 9,P <0 0 5 )、( χ2 =4 5 77,P <0 0 5 ) ;VEGF和bFGF表达阳性率均与甲状腺癌淋巴结转移有关 ( χ2 =4 0 2 5 ,P <0 0 5 )、( χ2 =4 712 ,P <0 0 5 ) ;两者在甲状腺癌中的表达阳性率呈明显正相关性 (γ =0 5 96 ,P <0 0 5 )。结论　VEGF、bFGF是评价甲状腺癌生物学行为及预后的两个重要指标     

表皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子在不同发育阶段大鼠皮肤表达特征的比较性研究

目的 研究表皮细胞生长因子（EGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)在胚胎、新生及成年三个不同发育阶段大鼠皮肤的表达特征及其可能的生物学意义。方法 取胚胎、新生和成年大鼠皮肤,经4%多聚甲醛固定、包埋与切片后,用SP免疫组织化学法研究EGF和bFGF的定位与表达特征。结果 EGF的阳性表达可见于胚胎、新生及成年三个发育阶段大鼠皮肤,主要位于表皮棘细胞,真皮成纤维细胞、毛囊上皮细胞和血管内皮细胞胞浆,bFGF在新生和成年大鼠表皮及真皮呈强阳性表达,但在胎鼠皮肤则为弱阳性乃至阴性,结论 EGF在不同发育阶段大鼠皮肤呈强阳性表达,表明其对上皮的发生、表型维持以及损伤后的修复十分重要。而大鼠胚胎皮肤bFGF低表达或缺乏的结果表明它可能是动物胚胎创伤后无瘢痕愈合的原因之一。     

碱性成纤维细胞生长因子在膀胱移行细胞癌中表达及相关性研究

目的 探讨膀胱移行细胞癌(TCC)中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达及其与膀胱癌移行细胞癌生物学行为的关系。方法 应用免疫组化方法及图象分析技术检测54例膀胱移行细胞癌标本中bFGF的表达,并进行分组比较。结果 bFGF的表达在不同的病理分级、临床分期及有否复发组之间均有显著性差异(P<0.05)。结论 bFGF的表达与膀胱移行细胞癌发生发展密切相关,其主要由TCC肿瘤组织分泌,这为临床更好地诊断和治疗膀胱肿瘤提供了新的方向和理论依据。     

碱性成纤维细胞生长因子在肌腱组织工程中的应用

目的综述近年来碱性成纤维生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）在组织工程肌腱相关研究中的进展。方法广泛杏阅同内外相关文献，进行整理、综合与分析。结果bFGF在促进组织工程肌腱标准细胞系的建立，诱导支架材料的合成与降解，增强细胞与支架材料之间的相互作用，加速组织工程材料的再血管化等方面均有明显作用。结论促进内源性bFGF合成、控释外源性bFGF及提高bFGF的生物利用度等方面取得的进展，为bFGF在组织工程中的应用开辟厂良好的应用前景。     

整合素相连激酶和基质金属蛋白酶9在非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系

目的观察整合素相连激酶(ILK)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,初步探讨其与NSCLC预后的关系。方法选取2002年1月至2004年1月于南京医科大学附属第一医院手术切除的75例NSCLC患者标本,采用免疫组织化学方法检测NSCLC组织中ILK和MMP-9的表达水平,根据所得积分光密度(IOD)的中位数将75例患者分为ILK高表达组和低表达组,MMP-9高表达组和低表达组。采用Log-rank检验比较各临床病理特征及ILK、MMP-9表达对生存的影响,并对ILK和MMP-9的表达进行相关性分析。结果 ILK和MMP-9在NSCLC组织中均有表达,相关性分析显示:在本组75例患者中,ILK与MMP-9的表达呈正相关(r=0.79,P0.05)。术后随访75例,随访至2009年1月31日时,中位生存时间30个月。ILK与MMP-9低表达组患者生存时间显著高于ILK和MMP-9高表达组(χ2=15.067,14.031,P0.05);患者性别、年龄、吸烟史和病理类型对其生存期影响差异均无统计学意义(χ2=0.450,0.078,1.460,1.623,P0.05);而肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期ILK及MMP-9表达对患者生存期影响差异均有统计学意义(2χ=3.936,15.169,20.529,15.067,14.301,P0.05)。结论 ILK和MMP-9的表达水平影响NSCLC患者的预后,MMP-9可能通过ILK途径促进肿瘤细胞浸润、转移。因此,ILK和MMP-9的表达检测对评估NSCLC患者预后可能具有重要作用。     

碱性成纤维细胞生长因子基因转染人表皮细胞及其表达

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达载体(pEGFP-C3-bFGF)能否转染体外培养的人表皮细胞并表达.方法 采用脂质体(LipofectamineTM 2000)转染法,将pEGFP-C3-bFGF转染至人表皮细胞系(HEKa细胞)中,在荧光显微镜下观察其瞬时表达及细胞形态.以同期培养的表皮细胞作为阴性对照,免疫细胞化学染色和免疫荧光标记法检测实验组及对照组中β1整合素、CKl9、CK14及CK10在表皮细胞中表达的差异.结果 荧光显微镜下观察基因转染率为31.6%,转染的细胞体积小,呈圆形或圆梭形,核质比大.免疫细胞化学染色结果显示,实验组细胞中CK19、CK14表达增强,CK10表达减弱.免疫荧光染色结果显示,转染阳性细胞β1整合素弱表达分布在胞膜上,CK19、CK14在胞膜和胞质中表达,CK10表达为阴性.结论 pEGFP-C3-bFGF能够转染至人表皮细胞并表达,为探讨bFGF调控表皮细胞去分化的分子机制提供实验参考.     

基质金属蛋白酶2,9及金属蛋白酶组织抑制剂1在肾盂移行细胞癌中的表达及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶2（MMP-2），9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）表达与肾盂移行细胞癌分级、分期及预后的关系。方法 采用免疫组化SP法检测117例肾盂移行细胞癌标本MMP-2，MMP-9发TIMP-1表达水平。患者中男97例，女20例。平均年龄59岁。肿瘤病理分级：G123例、G273例、G321例；TNM病理分期：Ta22例、T127例、T221例、T325例、T422例。结果 肾盂癌组织MMP-2表达阳性率81．2％（95例），MMP-9表达阳性率72．6％（85例），TIMP1表达阳性率72．6％（85例），阳性表达强度和阳性细胞分布不均匀，主要位于肿瘤细胞的胞质，随肿瘤分级、分期增加，MMP-2、MMP-9阳性表达率呈递增趋势，FL与预后相关，差异有统计学意义（P〈0．05）。TIMP-1阳性表达率随分级、分期增加呈递减趋势，但其差异无统计学意义（P〉0．05），TIMP-1表达强度与患者的生存时间无明显相关性。单因素方差分析发现MMP-9／TIMP-1比值与肿瘤临床病理分级、分期密切相关，随着分级、分期增加呈递增趋势（P〈0．05）。结论 MMP-2及MMP-9检测在肾盂癌病理分级、分期中有重要价值。MMP-2、MMP-9及MMP-9／TIMP-1比值在肾盂癌的预后判断中有重要意义。     

非小细胞肺癌组织中血管内皮生长因子和变异型细胞间黏附分子的表达

目的　了解血管内皮生长因子 (VEGF)、变异型细胞间黏附分子 (CD4 4v6 )在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达。方法　采用链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶 (SP)免疫组织化学方法 ,分析VEGF、CD4 4v6在 35例Ⅰ～Ⅱ期、2 7例Ⅲ～Ⅳ期NSCLC患者的癌组织中的表达 ,其中 5 0例患者有淋巴结转移、12例患者无淋巴结转移 ,中、高分化 39例、低分化 2 3例 ;随访 1997年 1月至 1999年 7月期间治疗的 4 2例患者 ,计算 3年生存率 ,用Cox比例风险模型分析生存时间的影响因素。结果　VEGF、CD4 4v6在NSCLC组织中表达阳性率分别为 73% (45 /6 2 )、6 9% (43/6 2 ) ,均明显高于癌旁正常组织 (χ2 值分别为 2 4 2 0 7、2 5 186 ,P均 <0 0 1)。VEGF、CD4 4v6的表达与临床分期及有无淋巴结转移有明显相关 ,有淋巴结转移者的阳性率明显高于无淋巴结转移者 (χ2 值分别为 7 14 6、5 376 ,P均 <0 0 5 ) ;Ⅲ～Ⅳ期患者的VEGF、CD4 4v6阳性率均明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者 (χ2 值分别为6 392、12 15 2 ,P均 <0 0 5 )。VEGF、CD4 4v6阳性患者的 3年生存率 ,均明显低于阴性患者 (χ2 值分别为 4 36、7 2 1,P均 <0 0 5 )。除TNM临床分期、有无淋巴结转移外 ,VEGF及CD4 4v6也为影响患者 3年生存率的独立因素。结论　VEGF、CD4 4     

碱性成纤维细胞生长因子小干扰RNA对胰腺癌细胞血管内皮细胞生长因子表达的调节作用

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)小干扰RNA(siRNA)对胰腺癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响.方法 利用siRNA技术抑制VEGF及bFGF表达,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胰腺癌细胞株VEGF表达变化.结果 Panc-1及PCT-3细胞VEGF mRNA表达受到显著抑制,Panc-1为0.20 ±0.05,PCT-3为0.23±0.02.sw1990及PCT-3分泌VEGF受到显著抑制,sw1990为(1940.67 ±93.84) ng/L,对照组为(2560.67±181.79) ng/L;PCT-3为(174.00±98.73) ng/L,对照组为(779.33 ±317.52) ng/L.结论 bFGFsiRNA能够抑制胰腺癌细胞VEGF核酸及蛋白水平表达.     

信号素3A和基质金属蛋白酶-14在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 检测非小细胞肺癌组织中信号素3A(Semaphorin3A和基质金属蛋白酶-14(MMP-14)的表达关系,探讨联合检测Semaphorin3A及MMP-14对预后的判断价值.方法 94例非小细胞肺癌术后留取的蜡块及临床资料作为观察组,选择80例正常肺组织作为对照组,应用免疫组织化学技术检测二组中Semaphorin3A和MMP-14的表达,分析肿瘤中Semaphorin3A及MMP-14的关系.结果 观察组中Semaphorin3A蛋白表达的阳性率明显低于对照组,观察组中MMP-14表达的阳性率明显高于对照组.观察组中Semaphorin3A及MMP-14表达的阳性率均与肿瘤的胸膜侵犯、淋巴结转移、淋巴结转移个数、分化程度、脉管浸润及PCNA的表达密切相关;Semaphorin3A蛋白的表达与肿瘤的最大直径密切相关;Semaphorin3A及MMP-14的表达具有负相关性,生存分析显示Semaphorin3A及MMP-14的表达与预后相关.结论 非小细胞肺癌组织中Semaphorin3A低表达、MMP-14高表达时促进肿瘤的发生和进展,二者可能具有负向协同作用,术后联合检测Semaphorin3A及MMP-14的表达对判断预后有一定价值.     

P物质对大鼠成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响

目的　探讨P物质 (SP)对大鼠肉芽组织成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子 (bF GF)及其受体 (FGFR 1)表达的影响。方法　采用成纤维细胞体外培养和逆转录 多聚酶链反应(RT PCR)技术 ,观察SP在不同浓度 ( 1× 10 - 9～ 1× 10 - 5mol L)及孵育时间 ( 0、3、6、12、2 4h)情况下刺激成纤维细胞后 ,其bFGF、FGFR 1mRNA表达情况。结果　SP可上调大鼠成纤维细胞bF GF、FGFR 1mRNA表达。SP对bFGF的量 效曲线呈双相分布 ,最大效应浓度为 1× 10 - 7mol L。但SP仅在高浓度 ( 1× 10 - 6 ～ 1× 10 - 5mol L)时促进FGFR 1表达。在最大效应浓度 ( 1× 10 - 7～ 1× 10 - 5mol L)时 ,SP对bFGF、FGFR 1表达的上调作用分别于刺激细胞后 3、12h达高峰。结论　SP对大鼠肉芽组织成纤维细胞bFGF、FGFR 1基因表达存在直接影响 ,其表现形式与SP的刺激浓度及孵育时间有关 ,这可能是SP在创伤修复中发挥作用的机制之一。     

基质金属蛋白酶-9表达与非小细胞肺癌生物学行为及预后的相关性研究

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达与非小细胞肺癌（NSCLC）生物学行为及预后的相关性,判断其能否作为预测NSCLC预后的生物学指标。方法：采用免疫组化染色技术检测79例2000年1月-2003年12月在我院就诊的NSCLC患者癌组织和20例良性肺疾病患者正常肺组织标本中MMP-9的表达水平,比较其与NSCLC临床病理因素和术后5年生存率之间的关系。结果：MMP-9在NSCLC组织中阳性表达率明显高于正常肺组织中的表达;MMP-9的表达水平与NSCLC的TNM分期（r=0．3987,P〈0．05）、淋巴结转移（P〈0．05）和肿瘤最大直径（r=0．3546,P〈0．05）呈正相关,与病理类型（r=0．1904,P〉0．05）和组织分化程度（P〉O．05）无关;生存分析提示MMP-9高表达者生存率明显低于无／低表达者。结论：MMP-9可以成为临床判断NSCLC生物学行为及预后的重要参考指标。     

碱性成纤维细胞生长因子对膀胱癌细胞及膀胱癌患者LAK细胞的作用

碱性成纤维细胞生长因子对膀胱癌细胞及膀胱癌患者ＬＡＫ细胞的作用王志平段国兰陈一戎秦大山刘国栋钮洪光碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）通过自泌或旁泌途径强有力地对恶性肿瘤细胞增殖进行正向调节。新近资料表明一些人类Ｔ淋巴细胞克隆有ＦＧＦ转录，提示ＦＧＦ可...     

不同月龄兔椎间盘组织中碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的表达

目的:观察不同月龄新西兰大白兔椎间盘组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF) 的表达,探讨其与椎间盘退变的关系.方法:40只健康新西兰大白兔,1、3、6、9、12、18、24、30月龄各5只,每只取椎间盘(L5/6、L6/7和L7/S1)组织制作石蜡切片,行HE染色观察各月龄椎间盘组织结构情况,行免疫组织化学染色检测VEGF和bFGF的表达情况,应用图像分析系统测定染色阳性细胞的累积光密度(integrated optical density,IOD).结果:HE染色显示,低月龄(1、3、6月龄)组椎间盘组织增生活跃,软骨终板均可见血管长入,尤其是1月龄组;中间月龄(9、12月龄)组椎间盘结构完整清晰,未见血管;18月龄组椎间盘出现退变,24月龄组椎间盘退变加重,30月龄组椎间盘结构破坏及老化严重,24、30月龄组椎间盘血管重新长入.免疫组化检查显示,bFGF和VEGF的IOD值在1月龄组表达最高(分别为38.22±14.13和57.67±15.36),随后逐渐下降,12月龄组表达最低(其IOD值分别为7.47±4.08和12.41±3.74),以后随月龄增加表达逐渐增多,30月龄组bFGF和VEGF的IOD值分别为27.93±11.64和37.54±7.32.低月龄组和高月龄组bFGF和VEGF的IOD值与中间月龄组比较均有显著性差异(P<0.01).结论:兔椎间盘的结构及血管的发生都随月龄增加发生相应变化;bFGF和VEGF的表达也随月龄增加发生相应改变,两者变化具有相似性.     

低剂量长波紫外线反复照射诱导培养成纤维细胞表达基质金属蛋白酶实验研究

目的：探讨长波紫外线引起皮肤光老化、皱纹形成的机制。方法：以7.2J/cm2长波紫外线单次或多次照射培养真皮成纤维细胞,光镜、电镜观察细胞的形态学变化,原位杂交和免疫组化的方法检测基质金属蛋白酶中的间质胶原酶（MMP-1）、间质溶解素-1（MMP-3）mRNA及其共同的组织抑制因子（TIMP-1）蛋白在各实验组成纤维细胞的表达并进行定量分析。结果：在长波紫外线累积剂量达57.6J/cm2后,培养真皮成纤维细胞开始出现具有细胞衰老特征性的形态改变,但仅经两次7.2J/cm2 UVA照射,培养成纤维细胞就出现MMP-1、MMP-3 mRNA的表达并随累积照射剂量增加逐渐增强,但各照射组的TIMP-1蛋白均仅在照射后48h内呈一过性轻度表达。结论：皮肤光老化皱纹形成可能与长波紫外线照射引起真皮成纤维细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达失衡密切相关。     

碱性成纤维细胞生长因子对嗅神经鞘细胞生长的作用

我们研究了碱性成纤堆细胞生长因子(bFGF)对体外培养的嗅神经鞘细胞(OECs)的作用，报道如下。