乙型肝炎肝硬化患者外周血树突状细胞亚群的鉴定及其临床意义

目的：探讨检测乙型肝炎肝硬化患者外周血树突状细胞（DC）亚群的临床意义。方法采用流式细胞分析技术检测42例乙型肝炎肝硬化患者、45例慢性乙型肝炎患者和30例健康人外周血 DC 细胞亚群和淋巴细胞亚群的构成,比较三者间的差异。结果乙型肝炎肝硬化患者外周血 DC1和 DC2百分数分别为（0.2±0.1）%和（0.2±0.04）%,慢性乙型肝炎患者为（0.3±0.1）%和（0.2±0.1）%,均显著低于健康人群[（0.4±0.1）%和（0.3±0.1）%, P＜0.01];13例 HBeAg 阳性乙型肝炎肝硬化患者外周血 DC2亚群细胞绝对计数为（5.62±1.28）个/μL,显著低于29例 HBeAg 阴性的乙型肝炎肝硬化患者[（8.75±2.32）个/μL,P＆lt;0.05],但是两者 DC1细胞水平无明显差别;乙型肝炎肝硬化患者外周血 CD4＋T 淋巴细胞和 CD8＋T 淋巴细胞计数分别为（588.4±124.2）个/μL 和（338.5±97.4）个/μL,均显著低于慢性乙型肝炎患者[（686.7±106.5）个/μL 和（432.1±102.6）个/μL,P＜0.05],而且乙型肝炎肝硬化患者和慢性乙型肝炎患者外周血 CD8＋T 细胞数均显著低于健康对照人群[（560.2±105.6）个/μL,P＜0.05]。结论乙型肝炎肝硬化患者外周血 DC1和 DC2数量减少,伴 CD8＋T 细胞数降低,可能是导致肝硬化形成的原因之一。     

不同临床类型HBV感染者外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的研究HBV感染者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义.方法在33例慢性乙型肝炎轻度、50例中度、32例重度、64例肝硬化、51例慢性乙型肝炎肝衰竭和30例健康人,采用特异性荧光抗体标记法和流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群.结果慢性乙型肝炎重度、乙型肝炎肝硬化和慢性乙型肝炎肝衰竭患者与正常对照组比,CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞数和CD4^＋/CD8^＋比值显著下降（P〈0.05）,以慢性乙型肝炎肝衰竭下降最显著;HBeAg阴性患者外周血CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋细胞数较HBeAg阳性患者显著减少（P〈0.05）;HBV DNA载量与患者外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞数和CD4^＋/CD8^＋比值均无明显相关性.结论严重的HBV感染者存在不同程度的细胞免疫功能低下及免疫调节紊乱,细胞免疫功能下降程度与病毒复制水平无明显相关.     

原发性肝癌和乙型肝炎肝硬化患者外周血淋巴细胞凋亡率、T细胞亚群和NK细胞的水平变化和临床意义

目的通过检测乙型肝炎肝硬化和合并乙型肝炎病毒感染的原发性肝细胞癌患者的外周血的粒细胞、单核细胞、NK细胞、T细胞及其亚群和淋巴细胞及其凋亡率,探讨两者在细胞免疫方面的差异.方法用Ficoll Hypaque离心法分离外周血单个核细胞(PBMNC),流式细胞仪检测外周血T细胞及其亚群、NK细胞和淋巴细胞、单核细胞和粒细胞,AnnexinV/FITCKit检测凋亡细胞.结果乙型肝炎肝硬化患者的外周血单核细胞、粒细胞、淋巴细胞、CD3-CD16 CD56 NK细胞、CD3 T细胞、CD3 CD4 T细胞、CD3 CD4 T细胞和CD4 CD8 T细胞比值,均与正常对照组无显著性差异(P＞0.05);但淋巴细胞凋亡率明显低于对照组(P＜0.01).原发性肝癌外周血CD3-CD16 CD56 NK细胞、单核细胞和CD4 /CD8 T细胞比值与肝硬化组和正常对照组比较,均无显著性差异(P＞0.05),而粒细胞明显升高(P＜0.05);CD3 T细胞、CD3 CD4 T细胞和CD3 CD8 T细胞均较另两组明显减少(P＜0.05),淋巴细胞及其凋亡率均明显低于另两组(P＜0.01).结论乙型肝炎肝硬化患者的外周血细胞免疫只发生不显著的变化,但淋巴细胞的凋亡率明显降低.原发性肝癌外周血的细胞免疫和淋巴细胞凋亡率均明显低下.     

乙型肝炎患者外周血T细胞亚群的分析及意义

目的研究乙肝患者外周血T细胞亚群的变化,进而了解其细胞免疫状态水平。方法用流式细胞仪对228例不同乙肝患者的外周血T细胞亚群CD+3、CD+4、CD+8绝对细胞计数及CD+4/CD+8比值进行检测,并将检测结果与e抗原、HBV-DNA含量、YMDD变异情况进行比较,以探讨各组之间的关系。结果与正常对照组相比,急性乙型肝炎(AHB)患者外周血T细胞亚群CD+3、CD+4、CD+8绝对细胞数升高(P<0.01);而慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)、原发性肝癌(PHC)患者依次降低,以LC、PHC两组降低最为显著(P<0.01);CD+4/CD+8比值AHB、CHB、LC、PHC 4组有依次升高的趋势。同时e抗原(-)、HBV-DNA(-)、YMDD变异株乙肝患者外周血T细胞亚群绝对细胞数明显低于e抗原(-)、HBV-DNA(-)、YMDD野生株乙肝患者(P<0.01或P<0.05);而CD+4/CD+8比值均高于对照组。结论不同乙肝患者体内存在T细胞亚群失衡及细胞免疫功能紊乱。     

非霍奇金淋巴瘤患者化疗前后T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化及临床意义。方法选取初诊病理确诊为NHL的患者60例作为NHL组,同期健康体检者60名为对照组,采用流式细胞术检测两组对象T细胞亚群及NK细胞的表达情况,比较对照组与NHL组不同病理类型患者化疗前后表达的差异。结果 NHL患者化疗前CD3+、CD4+、NK细胞百分比显著低于对照组(P0.05);CD8+、调节性T细胞(Treg细胞)百分比显著高于对照组(P0.05)。化疗后,NHL患者CD3+、CD4+、NK细胞百分比显著增高(P0.05);CD8+、调节性T细胞(Treg细胞)百分比显著降低(P0.05)。B-NHL组患者CD3+、CD4+、CD8+细胞百分比显著高于Treg组患者(P0.01);NK、Treg细胞百分比显著低于Treg组患者(P0.01)。化疗前,化疗有效和无效患者T淋巴细胞亚群及NK细胞表达情况比较差异无统计学意义(P0.05)。化疗后,化疗有效患者T淋巴细胞和NK细胞表达情况明显改善(P0.05),而化疗无效组患者无明显变化(P0.05);化疗有效患者CD3+、CD4+、Treg细胞百分比显著高于化疗无效患者(P0.05或0.01)。结论细胞免疫功能低下是非霍奇金淋巴瘤发病的一个重要因素,不同病理类型患者外周血T细胞亚群及NK细胞表达情况以及化疗效果不同,检测患者T细胞亚群及NK细胞表达情况有助于判断治疗效果和预测预后。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的研究乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义.方法对140例乙型肝炎患者和64例健康者,采用特异性荧光抗体标记、流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群的改变.结果与正常对照组比较,慢性肝炎、肝炎肝硬变、慢性重型肝炎患者外周血CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值均有显著性下降(P＜0.05),以肝炎肝硬变下降最显著,急性乙型肝炎T细胞亚群数量和比值变化不明显(P＞0.05).HBV DNA(+)与HBV DNA(-)患者外周血T细胞亚群数量和比值变化比较无显著性差异(P＞0.05).结论乙型肝炎病毒感染后机体T淋巴细胞功能低下主要见于慢性病毒感染状态,其下降程度与病毒复制水平无明显关系.     

老年带状疱疹患者急性期T细胞亚群变化及其与疱疹相关性疼痛的关系

目的 检测老年带状疱疹患者急性期外周血T细胞亚群水平,观察患者急性期机体细胞免疫状态与带状疱疹急性期疼痛(AHP)和后遗神经痛(PHN)的关系。 方法 选择急性期老年带状疱疹患者60例,根据AHP视觉模拟评分(visual analogue scales,VAS)分为轻中度AHP组：VAS评分≤6分,重度AHP组：VAS评分＞6分;再根据随访结果是否发生带状疱疹后PHN分为非PHN组和PHN组。选取年龄、性别相匹配的门诊健康体检者25例作为对照组。记录患者AHP最严重时VAS评分,采用流式细胞测定技术测定急性期外周血T细胞亚群CD3+、CD4+和CD8+百分比及计算CD4 +/CD8+比值。 结果 各组年龄、性别差异无统计学意义(P＞0.05);轻中度AHP组、重度AHP组、非PHN组和PHN组CD3+、CD4+、CD8+表达与对照组比较均降低(P＜0.05),重度AHP组CD4+表达低于轻中度AHP组(P＜0.05) ;CD4 +/CD8+比值轻中度AHP组、非PHN组均高于对照组(P＜0.05),重度AHP组低于轻中度AHP组(P＜0.05),PHN组低于非PHN组(P＜0.05);PHN组AHP VAS评分高于非PHN组(P＜0.05)。 结论 老年带状疱疹患者急性期普遍存在细胞免疫功能低下,表现为T细胞亚群百分比降低;重度AHP患者细胞免疫状态更低。PHN患者在疱疹急性期存在更严重的局部损害和更低下免疫应答。     

乙型肝炎肝硬化患者外周血T细胞亚群变化

目的 探讨乙型肝炎肝硬化患者外周血T细胞亚群的变化。方法 2015年8月～2018年2月我院诊治的乙型肝炎肝硬化患者120例和同期健康体检者120例,使用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群。结果 肝硬化组外周血CD4⁺T淋巴细胞百分比为(35.3±2.4)%,显著低于健康人组【(42.9±3.2)%,P<0.05】,CD8⁺T淋巴细胞百分比为(36.4±3.2)%,显著高于健康人组【(32.9±4.2)%,P<0.05】,CD4⁺/CD8⁺细胞比值为(0.9±0.1),显著低于健康人组【(1.3±0.2),P<0.05】。结论 乙型肝炎肝硬化患者存在T细胞亚群计数的显著变化,可能也存在相应的免疫功能紊乱,系肝功能受损后的结果抑或是诱因,值得研究。     

外周血DNT细胞和T细胞亚群检测在乙型肝炎病毒感染者诊断中的意义

目的：探讨乙型肝炎病毒感染者外周血CD3＋CD4-CD8-T细胞（DNT）和T细胞亚群的变化及意义。方法使用流式细胞仪检测136例乙型肝炎病毒感染者,包括33例无症状携带者、28例急性乙型肝炎患者、28例轻度慢性乙型肝炎患者、25例中度慢性乙型肝炎患者、22例重度慢性乙型肝炎患者和39例健康人外周血DNT细胞及T细胞亚群。结果健康人群和急性乙型肝炎患者外周血DNT细胞比例分别为（4.82±3.43）%和（4.75±2.71）%,显著低于无症状携带者[（5.43±3.31）%,P〈0.05]和慢性乙型肝炎患者（P〈0.05）;轻度慢性乙型肝炎患者DNT细胞比例为（7.97±4.12）%,显著低于重度慢性乙型肝炎患者[（11.36±5.01）%,P〈0.05];中度慢性乙型肝炎患者DNT细胞比例为（8.41±4.93）%,也显著低于重度慢性乙型肝炎患者（P〈0.05）;健康人、急性乙型肝炎患者和无症状携带者之间 T 淋巴细胞亚群分布无明显差异,但随着慢性乙型肝炎患者病情加重,外周血 CD3＋、CD3＋CD4＋CD8-细胞比例降低（P〈0.05）,CD3＋CD4-CD8＋细胞比例升高（P〈0.05）。结论外周血DNT细胞比例的升高与乙型肝炎病毒感染者慢性化及慢性乙型肝炎患者的疾病进程有关。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血淋巴细胞亚群的变化,以了解细胞免疫在乙型肝炎发病中的作用。方法使用流式细胞仪检测100例乙型肝炎患者和20例正常人外周血CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群百分比。结果 15例急性肝炎患者T淋巴细胞亚群与正常对照组比,差异无统计学意义(P>0.05),而43例慢性肝炎、26例乙型肝炎肝硬化和16例慢性肝衰竭患者CD3+淋巴细胞百分率分别为56.15±8.94%、48.85±9.01%和55.86±9.03%,均显著低于正常对照组的66.35±8.93%(P<0.05);慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD4+淋巴细胞百分率分别为30.46±7.51%、26.71±7.03%和29.03±7.64%,,均显著低于正常对照组的35.72±7.52%(P<0.05);慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD8+淋巴细胞百分率分别为21.93±5.06%、18.71±5.53%和21.15±5.62%,均显著低于正常对照组的24.58±4.92%(P<0.05);慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD4+/CD8+比值分别为1.34±0.60、1.35±0.53和1.34±0.58,均低于正常对照组的1.58±0.47(P<0.05)。结论 HBV感染者体内存在T细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱,提示细胞免疫参与了乙型肝炎的发病和疾病进展。     

外周血淋巴细胞亚群在慢性HBV感染过程中表达的变化分析

目的探讨HBV感染患者外周血淋巴细胞亚群在疾病进展过程中的表达变化。方法选取2018年1月-2019年4月在天津市第二人民医院住院的慢性HBV感染患者共132例,其中慢性乙型肝炎患者47例,乙型肝炎肝硬化患者44例,乙型肝炎肝硬化相关原发性肝癌患者41例。另选取同期健康体检者42例作为对照组。采用流式细胞术检测4组外周血淋巴细胞亚群精准计数,比较4组外周血淋巴细胞亚群的表达水平。正态分布的计量资料,组间方差不齐采用Welch方差分析,两两比较采用GamesHowell检验。非正态分布的计量资料多组间及进一步两两比较采用Kruskal-Wallis H检验。计数资料组间比较采用χ2检验。相关性分析采用Spearman检验。结果与对照组和慢性乙型肝炎组相比,肝硬化组和肝癌组CD3^+、CD4^+T淋巴细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组相比,肝癌组CD8^+T淋巴细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);与慢性乙型肝炎组相比,肝硬化组和肝癌组CD8^+T淋巴细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组和慢性乙型肝炎组相比,肝硬化组和肝癌组CD19^+B淋巴细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组相比,肝硬化组和肝癌组CD16^+CD56^+NK细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05);与慢性乙型肝炎组比较,肝癌组CD16^+CD56^+NK细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。4组疾病进展与外周血CD3^+T淋巴细胞、CD4^+T淋巴细胞、CD8^+T淋巴细胞、CD19^+B淋巴细胞、CD16^+CD56^+NK细胞呈明显负相关(r值分别为-0.414、-0.503、-0.269、-0.435、-0.402,P值均<0.01)。结论随着疾病的进展,慢性HBV感染患者免疫状态发生变化。外周血淋巴细胞亚群精准计数能够反应机体的免疫状态,可作为慢性HBV感染临床病情演变、治疗效果及疾病预后的参考依据。     

中国乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群频率参考值范围

目的 调查中国乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群频率参考值范围.方法 利用流式细胞术检测2846例乙型肝炎患者和117例健康人群外周血淋巴细胞亚群数值,调查我国健康人群和乙型肝炎人群的参考值范围.结果 调查了16～60岁健康人群和HBV感染相关的急性肝炎、慢性肝炎、重型肝炎和肝硬化人群外周血CD3+T淋巴细胞、CD3+CD...     

Peripheral blood lymphocyte populations in end-stage liver diseases

GOALS/BACKGROUND: The aim of this study was to decipher whether end-stage liver failure modifies peripheral blood lymphocytes (PBL) in a homogeneous manner, independently of the base pathology, or, if on the contrary, PBL subsets show a different profile in each hepatic disease. METHODS: We studied PBL subsets in 71 patients with end-stage liver disease, before liver transplant, and 74 healthy controls by flow cytometry. The results were statistically compared between patients and controls, and cohorts of patients classified according to their base pathology. RESULTS: We observed lower absolute numbers in all lymphocyte populations in patients compared with controls. We found an increment of CD3+ activated cells (P<10) and CD45RO+CD4+ (P<10) in chronic hepatitis C virus versus controls; hepatitis B virus showed high TCRgammadelta+ and CD8+ T cells with respect to controls (P=0.008 and P=0.029, respectively); alcoholic cirrhotic patients showed low CD8+, mainly CD45RA+CD8+ (P=0.007) and high CD45RO+CD4+ (P<10) compared with the normal population; autoimmune diseases showed lower CD3+ and TCRalphabeta+ (P=0.002 and P=0.0001) than controls. CONCLUSIONS: Regardless of the base pathology, patients with end-stage liver disease show a low absolute number of lymphocyte populations compared with controls. However, PBL profiles are different, characteristic, and specific of every disease causing chronic liver failure.     

慢性乙型肝炎患者外周血及肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和乙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞的表达及意义

目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL在慢性乙型肝炎患者外周血和肝组织中的表达和临床意义.方法 流式细胞分析技术和流式细胞术细胞因子测定法(CFC)检测157例HBV感染者(包括急性乙型肝炎20例、慢性乙型肝炎115例、乙型肝炎肝硬化22例)和20例健康对照组外周血和部分肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达.组间分析采用t检验.结果急性乙型肝炎,慢性乙型肝炎轻、中、重度患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞分别为(2.87±0.94)%、(3.53±1.56)%、(4.59±2.98)%和(3.65±1.73)%,明显高于对照组的(2.36±0.60)%(t值分别为2.04、5.97、3.30和3.17,P<0.01);慢性乙型肝炎轻、中、重度和乙型肝炎肝硬化患者外周血HBV特异性CTL为(0.189土0.152)%、(0.103±0.110)%、(0.118±0.120)%和(0.098±0.101)%,明显低于急性乙型肝炎患者的(0.815±0.360)%(t值分别为10.09、11.87、9.17和8.96,P<0.01).肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达高于外周血.结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过抑制CD8+T淋巴细胞在机体抗病毒过程中发挥重要作用.     

慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清可溶性细胞间粘附分子-1的检测

目的 探讨可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)在慢性乙型肝炎和肝硬化中的临床意义。方法 应用酶联免疫吸附法检测56例慢性乙型肝炎和18例肝硬化患者血清sICAM-1水平,并同时检测肝功能和T细胞亚群。结果 慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清sICAM-1水平明显高于正常人(P<0.01/0.05),且随着肝细胞损伤程度的加重而升高,与T细胞亚群无相关性。结论 血清sICAM-1水平可反映慢性乙型肝炎患者的肝细胞坏死程度。     

Peripheral blood lymphocyte subsets in patients with chronic hepatitis C – effects of interferon treatment

Abstract: Thirty-three patients with chronic hepatitis non-A, non-B/C were included in a randomized controlled study of recombinant alpha-2b interferon treatment 3 MU three times weekly for 36 weeks. In lysed whole blood, lymphocyte subpopulations were enumerated by flow cytometry detecting fluorescein or phycoerytrin conjugated monoclonal antibodies directed against seven different epitopes. Patients with chronic active hepatitis were significantly older than patients with chronic persistent hepatitis (p>0.05). Before treatment, the proportions of different subsets of lymphocytes were within the normal reference values and the CD4/CD8 ratio was also normal. No increased activation of T-cells was noticed. Patients over 50 years of age, however, had a significantly increased (p>0.01) proportion of HLA-DR + lymphocytes, mainly B-cells. Treatment decreased the absolute number of peripheral blood leukocytes and lymphocytes. There was also a significant decline in the proportion of CD8 + lymphocytes and NK-cells, and a significant increase in the proportion HLA-DR + cells and of the CD4/CD8 ratio. The increased proportion of HLA-DR + cells, however, did not reflect peripheral T-cell activation; instead, it was due to increasing B lymphocyte numbers.