大鼠肝微粒体CYP450酶对芦荟大黄素体外代谢的影响

目的:通过考察芦荟大黄素在大鼠肝微粒体外代谢的主要条件,研究CYP450酶对芦荟大黄素代谢的影响。方法:随机将12只SD雄性大鼠分为空白对照组和苯巴比妥钠组,对空白对照组(0.5%CMC-Na溶液,10 ml/kg,ig)和PB组(苯巴比妥钠,75.0 mg/kg,ip)进行大鼠肝微粒体的诱导和制备,再将芦荟大黄素与大鼠肝微粒体进行体外孵育代谢,-80℃终止反应,三氯甲烷提取样品。用高效液相-荧光检测器(HPLC-FLD)测定芦荟大黄素含量,流动相为甲醇:0.1%磷酸水(70:30),激发波长435nm,发射波长515nm。结果:测定方法专属性,回收率高,日内和日间精密度良好,稳定性好满足生物样品检测要求。以芦荟大黄素代谢消失率计,在肝微粒体蛋白浓度为0¹.0mg/ml范围内成线性增加趋势,1.01.0mg/ml范围内成线性增加趋势,1.0².5mg/ml趋势不明显;孵化时间02.5mg/ml趋势不明显;孵化时间0³0min成线性增加,且高于60%。芦荟大黄素代谢消失率随其浓度的增加呈线性增加趋势,达到一定浓度后成降低趋势。芦荟大黄素低、中、高浓度在PB、CMC-Na肝微粒中代谢消失率比较均为PPB-CMC-Na<0.01。结论:芦荟大黄素在大鼠肝微粒体中的体外代谢具有酶促动力学特征,CYP450酶对芦荟大黄素的代谢起促进作用,苯巴比妥钠诱导的CYP450亚型酶参与了芦荟大黄素的代谢。     

肝微粒体细胞色素P450研究概况

肝细胞色素P450酶系参与人体许多内，外源性物质（包括药物）的分解和代谢，本文综述了P450酶系在体内的分布。结构。功能成分，命名及对其产生影响的因素等方面的研究进展。     

药物体外肝代谢研究进展

 目的介绍药物体外肝代谢方法的最新进展。方法根据近几年的文献资料进行分析、综合、归纳。分别按肝微粒体体外温孵法及基因重组P450酶系、肝细胞体外温孵法、离体肝灌流及器官组织切片法等进行介绍。结果与结论介导药物体外代谢酶系的研究是药物体外肝代谢的研究热点，其在新药研究与开发及正确指导临床合并用药有着巨大的推动作用。     

覆盆子鞣质对大鼠肝微粒体代谢酶活性的影响

目的探究覆盆子鞣质对大鼠肝微粒体内蛋白含量以及细胞色素p450(CYP450)和细胞色素b5(CYPb5)活性的影响。方法将30只SD雄性大鼠置于SPF环境中喂养1周后,随机分为5组,每组6只,分别为覆盆子鞣质高、中、低剂量组,阳性对照组和空白对照组。覆盆子鞣质高、中、低剂量组分别按150、100、75 mg·kg^-1·d^-1灌胃给药,空白对照组给予等量的生理盐水,连续灌胃给药7 d;苯巴比妥钠对照组连续5 d以80 mg·kg^-1·d^-1剂量经腹腔注射方式给药。结束给药后禁食12 h,利用一氧化碳(CO)还原差示光谱法测量各组肝微粒体中CYP450和CYPb5的含量。结果与空白对照组比较,覆盆子鞣质高、中、低剂量组均能降低CYP450和CYPb5含量,差异有统计学意义(P<0.01),且随着给药剂量的增加,抑制作用也随之增强。结论覆盆子鞣质对大鼠肝微粒体代谢酶CYP450和CYPb5的活性有显著的抑制作用,且呈现剂量依耐性。该结果为覆盆子鞣质的深度开发及临床应用等提供重要的实验依据。     

川芎嗪在大鼠肝微粒体系统中的代谢研究

目的：通过离体和整体实验来研究川芎嗪（TMPz）代谢转化过程,探讨参与TMPz代谢的CYP450亚酶,为临床上合理用药提供科学依据。方法：建立TMPz的UV-HPLC检测方法,测定大鼠血浆和肝微粒体温孵液中TMPz及代谢产物,分析TMPz代谢消除率与各诱导和抑制剂之间的相关性；Nash法测定肝微粒体温孵液中ERY N-脱甲基酶活性,探索其与代谢物生成量之间的相关关系；测定DEX,Ket在体诱导或抑制后,大鼠血中的TMPz药物浓度,计算和比较药动学参数。结果：特异性CYP3A诱导剂DEX组中TMPz代谢物生成速率明显高于对照组,而主要诱导CYP2B的PB,β-NF组与对照组无明显区别；强效的CYP3A抑制剂Ket则显著抑制TMPz的代谢；TMPz的代谢速率与CYP3A的特征性ERY N-脱甲基反应呈现高度的相关性；在体诱导或抑制后TMPz的药动学参数中DEX组的CL(s)大于对照组,t_1/2小于对照组；而Ket抑制的CL(s)小于对照组,t_1/2大于对照组,差异均具有统计学意义。结论： CYP3A是介导TMPz生物转化的CYP450亚酶,川芎嗪与CYP3A酶抑制或诱导药合用可能存在药物间的相互作用。     

089 银杏提取物EGb 761对大鼠肝细胞色素P450及对大鼠和人类固醇代谢和排泄的影响

一些对大鼠的体内、体外试验显示，服用银杏提取物可能影响肝的异生物体代谢和引起药物相互作用，而在人体试验未获得该提取物能调节细胞色素P450（CYP450）酶活性的证据。     

复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响

目的：探讨复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响。方法：利用细胞色素P450在铁蛋白的铁原子被还原与一氧化碳形成复合物时出现一特异性吸收峰的特性，测定复方丹参滴丸对实验大鼠肝微粒体细胞色素P450活性的影响，同时测定其肝指数的变化。结果：复方丹参滴丸能诱导大鼠肝微粒体细胞色素P450的活性，且其作用随给药时间的延长而增强。结论：复方丹参滴丸虽然作为OCT药品，但在长期服用或配伍应用时亦应当慎重。     

复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响

复方丹参滴丸是在复方丹参片基础上制成的一种滴丸剂,由丹参、三七、冰片3味药组成,具活血化瘀之功效,在治疗冠心病、心绞痛方面疗效确切.杨秋慧等[1,2]研究发现复方丹参片能诱导大鼠肝微粒体P450中CYP1A2,CYP2B1活性的增高,而CYP1A家族特别是CYP1A1、CYP1A2对于催化各种内外源物质致癌有重要作用.因此复方丹参诱导CYP1A2、CYP2B1活性增加具有使致癌物质活化的潜在危险性.     

枳椇子乙酸乙酯提取物对大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的：观察枳棋子乙酸乙酯提取物胶囊对大鼠肝微粒体细胞色素P450及其同工酶的影响。方法：大鼠分别灌服给予枳棋子乙酸乙酯提取物胶囊相当于生药量0．14g／kg，0．17g，kg和0．2g／kg，连续10d，用紫外分光光度法测定细胞色素P450及其同工酶的活性。结果：枳棋子乙酸乙酯提取物胶囊对细胞色素P450及NADPH．细胞色素C（P-450）还原酶含量无显著影响；可抑制苯胺羟化酶活性，抑制率可达31．5％；可增加氨基比林N-脱甲基酶活性，可达42．4％；而对红霉素N-脱甲基酶的活性没有明显影响。结论：枳棋子乙酸乙酯提取物胶囊对大鼠肝细胞色素P450、NADPH．细胞色素C（P-450）还原酶及红霉素N-脱甲基酶无明显作用，但对氨基比林N-脱甲基酶活性及苯胺羟化酶活性有显著影响。     

菊花提取物对大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的：观察菊花提取物对大鼠肝微粒体细胞色素P450及其同工酶的影响。方法：大鼠分别灌服给予相当于生药量10g／kg、2g／kg菊花提取物，连续15天，用超速离心法制备肝微粒体，用紫外分光光度法测定细胞色素P450及其同工酶的活性。结果：给药组的P450酶水平和二甲基亚硝胺(NDMA)脱甲基酶活性明显降低，而红霉素脱甲基酶的活性没有明显变化。结论：菊花提取物对大鼠肝细胞色素P450有明显抑制作用，并具有一定的亚族选择性。     

Kavalactone Metabolism in Rat Liver Microsomes

The specific CYP enzymes involved in kavalactone (KLT) metabolism and their kinetics have not been fully examined. This study used rat liver microsomes (RLM) to determine kavain (KA), methysticin (MTS) and desmethoxyyangonin (DMY) enzyme kinetic parameters, to elucidate the major CYP450 isoforms involved in KLT metabolism and to examine gender differences in KLT metabolism. Formation of the major KLT metabolites was first‐order, consistent with classic enzyme kinetics. In both male and female RLM, clotrimazole (CLO) was the most potent inhibitor of KA and MTS metabolism. This suggests CYP3A1/3A23 (females) and CYP3A2 (males) are the main isoenzymes involved in the metabolism of these KLTs in rats, while the roles of CYP1A2, ‐2 C6, ‐2 C9, ‐2E1 and ‐3A4 are limited. Desmethoxyyangonin metabolism was equally inhibited by cimetidine (CIM) and CLO in females, and CIM and nortriptyline in males. This implies that DMY metabolism involves CYP2C6 and CYP2C11 in males, and CPY2C12 in females. CYP3A1/3A23 may also be involved in females. Copyright © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.     

生何首乌、制何首乌对大鼠肝微粒体CYP450的影响

目的研究肝微粒体细胞色素P450（CYP450）以及血液生化酶在生何首乌、制何首鸟致SD大鼠肝损伤中的作用。方法将SD大鼠分为3组,每日灌胃给药30g／kg,连续给药90d,末次给药后处死,称取脏器指数,测定肝脏CYP450、血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、肌酐（CREA）、尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）等含量。结果生何首乌组肝微粒体蛋白显著性下降,CYP450含量显著增高（P〈0．01）,制何首乌组无明显变化;血液生化酶中生何首乌组的血清ALT、AST显著性降低,制何首乌血清ALP显著性升高;生何首乌和制何首乌的血清TP、TG均显著性降低;血清BUN中二者均呈下降趋势,但生何首乌具有显著性;CREA二者均呈显著性下降趋势。结论生何首乌致肝损伤并有CYP450的明显升高。制何首鸟对CYP450无影响。生何首乌和制何首乌能够影响血液生化酶,生何首乌减低ALT、AST,制何首乌升高ALP,二者同时降低TG、BUN和CREA,这意味生着何首乌、制何首乌致大鼠肝物质代谢途径的作用机制有所不同。     

葛根散对急性酒精性肝损伤小鼠肝微粒体 CYP450含量及CYP2E1活性的影响

目的:考察经典解酒方葛根散对急性酒精性肝损伤小鼠肝微粒体细胞色素P450( CYP450)含量及细胞色素P450-2E1( CYP2E1)活性的影响.方法:实验小鼠分葛根散高、中、低剂量组、正常对照组和模型对照组,各给药组分别给予葛根散水煎剂(按生药量计,20,10,5 g·kg-1)ig,对照组代以等体积蒸馏水,每天1次,连续10 d;每天给药30 min后,模型对照组和各给药组以15 mL·kg-1 56％白酒ig,正常对照组代以等体积蒸馏水,以血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及肝脏系数为参考指标,制备急性酒精性肝损伤小鼠模型;取小鼠肝组织检测葛根散对肝微粒体CYP450含量及CYP2E1活性的影响.结果:与正常对照组比较:模型对照组血清ALT、AST水平及肝脏系数显著升高(P＜0.01),肝微粒体蛋白含量无明显变化,CYP450含量及CYP2E1活性显著提高(P＜0.01).与模型对照组比较:葛根散各剂量组血清ALT,AST水平及大剂量组肝脏系数呈明显降低(P ＜0.05或P＜0.01),肝微粒体蛋白含量无明显变化,CYP450含量明显增多(P＜0.01)且有剂量差异性(P＜0.05),CYP2E1活性显著降低(P＜0.01)且有剂量差异性(P＜0.01).结论:葛根散对急性酒精性肝损伤小鼠肝功能具有良性干预作用,能提高酒精性肝损伤小鼠肝微粒体CYP450含量和降低CYP2E1活性.     

药物体外肝代谢研究方法

对近几年的文献资料进行分析、综合、归纳。介绍肝微粒体体外温孵法、肝细胞体外温孵法、离体肝灌流及器官组织切片法。其中,肝细胞体外温孵法是当今药物体外肝代谢研究的热点,对新药研究与开发及正确指导临床合并用药有着巨大的推动作用,将对其进行重点论述。     

利福布汀的代谢研究

 目的通过亚细胞、器官和整体动物3种水平的代谢实验,研究了利福布汀(rifabutin,RBT)自身代谢以及RBT被连续给药后对自身代谢及肝细胞色素P450酶系的影响,为临床的合理用药提供有益的指导。方法36只Wistar大鼠随机分为6组,每组6只。3种水平的实验研究各有空白对照组和RBT给药组(口服灌胃300 mg·kg^-1·d^-1×7 d)。亚细胞代谢研究利用制备的肝微粒体,体外温孵CYP1A2,CYP2D6,CYP2C9,CYP2E1及CYP3A等几种重要亚酶的特异性底物,通过比较其代谢产物的生成速率来评价RBT对这些亚酶的影响;器官代谢研究采用大鼠原位肝脏灌流方法,整体实验动物代谢研究通过颈静脉插管手术,器官与整体代谢都是比较其代谢参数的差异。结果连续口服7 d RBT之后,酶蛋白水平和总体CYP450活力分别为空白对照组的84.60%和410.0%。CYP3A及CYP2D6亚酶活性分别为空白对照组的184.0%及155.7%。器官和整体动物水平都表明RBT连续给药组显著加快了自身药物的代谢,t_1/2分别为空白对照组的58.96%和71.00%,并且器官水平显示AUC也仅为空白对照组的49.06%。结论RBT代谢存在自身诱导,连续服用RBT之后,不仅自身的代谢将会被改变,那些经CYP3A及CYPD2D6代谢的合用药物的代谢也将被改变。     

S(+)盐酸氯胺酮对大鼠肝微粒体细胞色素P450同工酶的影响

 目的研究S(+)盐酸氯胺酮对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)6种主要同工酶的诱导或抑制作用。方法应用HPLC-UV测定CYP450 6种主要同工酶的特异性探针底物右美沙芬(CYP2D)、双氯酚酸钠(CYP2C6)、奥美拉唑(CYP2C)、氨苯砜(CYP3A)、非那西丁(CYP1A2)和氯唑沙宗(CYP2E1)的代谢速率。大鼠iv给予S(+)盐酸氯胺酮25 mg·kg^-1·d^-1,连续给药7 d,评价药物对大鼠肝微粒体CYP450主要同工酶的诱导或抑制作用。结果S(+)盐酸氯胺酮50μmol·L^-1时可明显抑制大鼠肝脏CYP2C,2C6和3A,分别为对照组的61.4%,45.8%和31.3%,其中以对CYP2C的抑制作用最为明显。S(+)盐酸氯胺酮1和10μmol·L^-1对CYP450同工酶无明显影响,仅10μmol·L^-1 S(+)盐酸氯胺酮对CYP2C有轻度抑制作用。S(+)盐酸氯胺酮iv给药7 d后,对大鼠肝微粒体CYP1A2和CYP2C有不同程度的诱导作用,分别诱导137.5%和117.6%,对CYP2E1,3A,2D,2C6无明显影响。结论S(+)盐酸氯胺酮50μmol·L^-1时可明显抑制肝脏CYP2C,2C6和3A,连续给药7 d后可诱导CYP1A2和CYP2C,提示S(+)盐酸氯胺酮与经上述同工酶代谢的药物联合应用时,应注意药物-药物相互作用的可能性。     

隐丹参酮对大鼠肝微粒体CYP酶的影响

目的 研究隐丹参酮(CTS)对大鼠肝微粒体CYP酶各亚型的影响.方法 取SD大鼠,按体重随机分为6组,每组3只,隐丹参酮各剂量组分别灌胃给予隐丹参酮20、60、180、540mg/kg,连续10 d;阴性对照组,灌胃给予羟丙基环糊精水溶液10 mL/kg,连续10 d;阳性对照组从实验第7天开始按80 mg/kg腹腔注射B-NF,于第10天最后1次给药后将大鼠断头处死,取肝脏制备肝微粒体,分别用Cocktail体外孵育法、蛋白免疫印记及逆转录聚合酶链反应观察CTS对CYP酶各亚型酶活性、蛋白表达及基因表达的影响.结果 CTS灌胃后对大鼠肝微粒体CYP1A2有明显的诱导作用,并呈剂量依赖性,CTS 20～540 mg/kg剂量组CYP1A2探针代谢物的量、蛋白表达及基因表达分别较阴性对照组提高60%～430%、130%～320%及10%～150%;隐丹参酮对CYP酶其他亚型无明显作用.结论 CTS能显著地诱导大鼠肝微粒体CYP1A2,提示经CYP1A2代谢的药物在临床上与CTS合用时,可能发生药物之间的相互作用.     

合成冰片对大鼠肝CYP450酶含量及CYP3A1 mRNA表达的影响

[目的]研究冰片对大鼠肝脏细胞色素氧化酶（cytochromeP450,CYP450）含量及其亚型CYP3AImRNA表达的影响。[方法] Wistar大鼠合成冰片（设0．3g／kg和0.03g／kg剂量组,1次／d,连续7d）灌胃,以溶媒羧甲基纤维素纳（CMC-Na）和苯巴比妥钠为对照组,钙沉积法提取肝微粒体,紫外分光光度法测定CYP450含量,实时定量RT-PCR法检测肝脏CYP3AImRNA的表达。[结果]0．3g／kg合成冰片口服可诱导大鼠肝脏CYP450酶含量增高（P〈0．05）,CYP3A1 mRNA表达上调（P〈0．05）。[结论]高剂量合成冰片口服可能影响肝脏药物代谢。     

柳茶提取物对非酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢的影响

目的 观察柳茶提取物对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂质代谢的影响并探讨其作用机制.方法 复制非酒精性脂肪肝动物模型;设正常对照组、模型组、西布曲明阳性对照组和柳茶治疗组,药物干预8周后检测各组肝功能、血脂水平及肝匀浆脂肪含量;制作肝组织切片观察形态学变化;实时荧光定量法测肝脏线粒体、微粒体脂质代谢关键酶LCAD、CYP4A1的m-RNA表达水平.结果 与非酒精性脂肪肝模型组相比.柳茶治疗后动物肝TG和CHOL水平明显降低;血中ALT、AST含量亦降低,TG、CHOL均有显著下降;而HDL-C水平升高;肝脏脂肪变程度减轻;肝组织LCAD、CYP4A1m-RNA表达水平分别为模型组的4.18、6.04倍.结论 柳茶提取物能调节非酒精性脂肪肝动物肝脏的脂肪代谢,减轻肝细胞脂肪变,改善肝功能,其作用机制与上调动物肝脏脂质代谢关键酶LCAD、CYP4A1m-RNA的表达有关.     

半夏泻心汤及不同配伍组对大鼠肝脏 CYP450酶活性的影响

目的:研究半夏泻心汤及不同配伍组对大鼠肝微粒体CYP450亚型酶的影响,从肝脏代谢角度评价半夏泻心汤组方的合理性。方法:将大鼠随机分为全方组、辛开组、苦降组、甘补组及空白对照组,分别灌胃水煎液,运用肝微粒体体外温孵法,对探针底物进行孵育,并结合超高效液相检测方法,测定各探针底物代谢产物的含量,计算代谢速率,以反映各给药组的肝微粒体CYP2C6,CYP2E1,CYP3A1/2亚型酶活性。结果:与空白组相比,全方组,苦降组对各亚型酶均起抑制作用(P<0.01);辛开组对CYP2C6有抑制作用(P<0.01),而对CYP2E1和CYP3A1/2无显著抑制作用;甘补组对CYP2C6和CYP2E1亚型起抑制作用(P<0.01),而对CYP3A1/2无抑制作用。结论:全方对大鼠肝微粒体CYP450酶起抑制作用,比较各配伍组间差异,苦降组抑制作用较其他配伍组显著。