雌激素对子宫内膜癌细胞膜雌激素受体α调控的时效和量效关系

目的:研究17β-雌二醇(17β-E2)对细胞膜雌激素受体α(mERα)调控的时效和量效关系.方法:以10^-6 mol/L 17β-E2分别作用于Ishikawa细胞0 min,3 min,10 min,30 min,2 h,12 h和48 h,以10^-12 mol/L,10^-10 mol/L,10^-8 mol/L和10^-6 mol/L 17β-E2分别作用Ishikawa细胞30 min,对各组细胞均进行免疫荧光染色,以流式细胞仪分别测定细胞膜荧光染色阳性率及平均荧光强度.结果:给予17β-E2后随时间延长mERα的荧光强度逐渐增加(P＜0.05),于给药后30 min达到最高值,给药2 h后逐渐下降;在低浓度17β-E2作用下(尤其是10^-10 mol/L),mERα的表达量较高,随着17β-E2浓度的升高,mERα的表达量反而下降.结论:mERα在17β-E2作用30 min时表达最强,其后逐渐减弱;mERα在生理浓度的17β-E2作用下表达最强.     

血管紧张素II受体1 抑制剂对雌激素作用下的子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

 目的探讨雌激素及血管紧张素域受体1（AT1-R）抑制剂saralasin 对HEC-1A细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方
法应用免疫细胞化学方法检测AT1-R、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（p-Akt）、细胞外信号调节
激酶（ERK）蛋白在HEC-1A 细胞中的表达;应用MTT 法、流式细胞技术检测雌激素作用于HEC-1A 细胞不同时间后细胞增殖、
细胞周期和凋亡的变化,以及saralasin对雌激素诱导下的HEC-1A 细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响;Western blot 分析雌激素
作用后HEC-1A细胞中ERK、p-Akt 蛋白表达的变化,及saralasin 对雌激素诱导下的HEC-1A细胞中ERK、p-Akt 蛋白表达的影
响。结果AT1-R、PI3K、p-Akt、ERK蛋白在HEC-1A细胞中均有阳性表达;雌激素能够促进HEC-1A细胞增殖,使G0~G1期的
细胞比例下降,S 期的细胞比例升高,凋亡减少,ERK蛋白的表达上调;而saralasin 可明显地抑制雌激素诱导的HEC-1A细胞的
增殖,使细胞周期停滞在G0~G1期,S 期的细胞比例下降,凋亡增多,ERK蛋白的表达下调。结论雌激素可以通过AT1-R促进
HEC-1A 细胞增殖,AT1-R 抑制剂saralasin 可以抑制雌激素的促细胞增殖作用,并促使HEC-1A 细胞发生凋亡,其机制可能是通
过阻断丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路引起ERK蛋白表达的下调,从而抑制细胞增殖,因此saralasin 可能有助于雌激素受
体低表达的子宫内膜癌的治疗。     

Cx43及雌激素和孕激素受体在子宫内膜癌中的表达

子宫内膜癌是常见的妇科肿瘤之一，近年来，众多研究者认为子宫内膜癌有上升趋势，预计子宫内膜癌将会成为妇科肿瘤的研究重点之一。其发病机制目前仍未完全明确。近年来，学者们认识到子宫内膜癌的细胞分化程度、肌层浸润深度、淋巴结转移、宫颈浸润等是影响其预后的重要因素，     

RCAS1在子宫内膜癌组织中的表达及其与雌激素受体亚型相关性研究

目的探讨RCAS1与雌激素受体亚型在正常子宫内膜、增生症内膜和内膜癌组织中的表达及相关性,分析它们在内膜癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化、RT—PCR法检测20例正常子宫内膜组织、42例子宫内膜增生症组织及50例内膜癌组织中RCAS1和雌激素受体α（ERα）雌激素受体β（ERβ）的表达,免疫印迹法检测各组内膜中RCAS1蛋白的表达。结果免疫组化显示RCAS1在正常、简单型和复杂型增生内膜中均为P表达模式,不典型增生内膜中30％（6／20）为D表达模式,内膜癌中均为D模式。正常内膜、简单型和复杂型增生、不典型增生、内膜癌RCAS1蛋白高水平表达率分别为0％（0／20）,9．1％（2／22）,45．0％（9／20）,68．0％（34／50）,各组间差异有统计学意义（P〈0．05）。RCAS1蛋白高表达与患者肌层侵犯深度、脉管侵犯、ERα阳性相关（P〈0．05）。免疫印迹法、RT—PCR结果与免疫组化结果一致。RCAS1mRNA的表达水平与ERamRNA呈显著正相关,而与ERβmRNA表达未显现相关性。结论RCAS1高表达与表达模式的改变可能参与子宫内膜从良性到恶性转变的过程,RCAS1协同ERα表达与子宫内膜癌的发展、浸润转移有关。     

雌激素受体β在子宫内膜异位症中的作用及意义

子宫内膜异位症(EMs)是妇科常见病、疑难病。雌激素在EMs的发生和发展过程中起着十分重要的作用,并通过经典的雌激素受体ERa和ERβ介导的基因或非基因传导通路发挥生物学效应。通过促进炎性反应,减少凋亡,增加异位内膜的黏附、侵袭及血管生成能力,使得子宫内膜异位症具有类似恶性肿瘤的远处转移和种植生长能力,促进了子宫内膜异位症的发生、发展。     

雌激素受体α和β及其变异体在子宫内膜癌组织的表达

目的:比较雌激素受体两种亚型α和β及其变异体在子宫内膜癌组织的表达,验证子宫内膜癌发生的双受体学说,为寻找新的有治疗和/或预防子宫内膜癌的雌激素拮抗剂提供理论依据.方法:用RT-PCR、DNA测序和限制性内切酶酶切鉴定等方法分析子宫内膜癌和正常子宫内膜组织雌激素受体及其变异体mRNA的表达.结果:(1) 与正常子宫内膜组织比较,子宫内膜癌组织ERα及其变异体与ERβ的共表达率分别为34%和67%,差异有显著性,(P<0. 05);(2) ERαm RNA在子宫内膜癌组织的相对表达水平为0.880±0.168,ERβmRNA为0.553±0.108 ,差异显著 (P<0.05);(3) 在正常子宫内膜和子宫内膜癌组织中未检测出ERβ变异体.(4)野生型( wild-type, wt)ERαmRNA表达水平较各类△ERαmRNA表达高(P<0.05或0.01);(5) ERα变异体的类型包括△2ER α单独缺失、△4ERα和△5ERα的联合缺失、△7ERα的单独缺失以及△7ERα和部分△8ERα的联合缺失 ,在正常子宫内膜和子宫内膜癌组织无区别.结论:(1) 子宫内膜癌的发生受wt ERβ和wt ERα及其变异体的共调节;(2) 子宫内膜癌组织ERα的表达水平明显高于ERβ,而且ERα有4种剪接形式,推测子宫内膜癌的发生与ERα关系更密切.     

大鼠输卵管结扎术后子宫内膜雌激素受体、血浆雌二醇水平及其形态学的变化

目的：探讨输卵管结扎术后子宫内膜形态学变化及月经失调的发病机理。方法：分别对12只正常大鼠及14只扎管后大鼠的动情前期和动情期血浆雌二醇（estradiol,E2)和子宫内膜雌激素受体（endometrial estrogen receptor,EEr)应用放射免疫分析法（radioimmunoassay,RIA)和过氧化物酶－抗过氧化物酶法（peroxidase antiperoxidase,PAP)进行测定,观察了子宫内膜的形态学变化。结果,动情前期血浆E2水平和EEr含量明显高于动情期,子宫内膜粘膜在乳头及空泡状粘液细胞在动情前期较多,动情期明显减少,扎管后动情前期血浆E2水平基本不变,但EEr含量明显减少,粘膜在乳头较对照组动情前期明显增多,空泡状粘液细胞减少;扎管后动情期血浆E2维持在一个较高的水平,EEr含量及粘膜在乳头均较对照组动情期增加,结论：结扎术后输卵管卵巢系膜间血管网被破坏,影响子宫的血供及激素由卵巢到子宫的传递,并破坏卵巢的黄体化过程,雌,孕激素比较失调,EEr合成发生障碍,导致子宫内膜的功能紊乱。     

雌激素受体相关受体α和雌激素受体α在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的:探讨孤儿核受体-雌激素受体相关受体(ERR)α及雌激素受体(ER)α在子宫内膜癌发生、发展中的作用以及临床应用价值.方法:采用免疫组化法检测35例子宫内膜腺癌组织中ERα和ERRα的表达,评估其与临床病理参数之间的关系.结果:Ⅰ期子宫内膜癌组织中ERα的阳性表达率明显高于Ⅱ～Ⅳ期者(P＝0.005);而ERRα的阳性表达率明显低于Ⅱ～Ⅳ期者(P＝0.007).ERα (+)和ERRα (-)组中Ⅰ期子宫内膜癌的比例、G1～2级者及肌层浸润深度＜1/2者的数目均明显高于ERα (-)ERRα (+)组(P＝0.000,P=0.031和P=0.022).结论:ERα可作为子宫内膜癌预后良好的指标,而ERRα可能是子宫内膜癌预后不良的指标,二者联合监测有可能提高临床预测价值.     

雌激素受体和孕激素受体在子宫内膜癌中的形态定量分析

用酶联亲和组化法对子宫内膜癌２８例、增生过长２４例石蜡切片进行ＥＲ、ＰＲ检测。阳性染色分布位于胞浆和（或）核内，以胞浆内分布为多。２８例内膜癌ＥＲ阳性２０例（７１．４３％），ＰＲ阳性１７例（６０．７１％），ＥＲ、ＰＲ含量与组织学分组分级有关（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。测定肿瘤内ＥＲ、ＰＲ可确定肿瘤分型、推测预后，并可作为临床内分泌治疗的一个客观指标。     

磷脂酰肌醇3激酶抑制剂对17β-雌二醇作用下Ishikawa、HEC-1A细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002 对17β-雌二醇(E2)作用下子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,初步探讨阻断PI3K/Akt通路治疗子宫内膜癌的可能性. 方法:应用MTT法(10-10 mol/L、10-8 mol/L、10-6 mol/L、10-4 mol/L的E2或10-6 mol/L E2及0.1 μmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L的LY294002)、流式细胞技术(0 mol/L、10-8 mol/L、10-6 mol/L E2或10-6 mol/L E2及0 μmol/L、1 μmol/L、50 μmol/L LY294002)观察LY294002对E2作用下子宫内膜癌细胞Ishikawa、HEC-1A增殖、凋亡和细胞周期的影响.结果:随着E2浓度的增加,Ishikawa细胞A(570 nm)值逐渐升高并呈时间依赖性(F=3.915,P=0.043),G0-G1期比例下降(F=50.926,P≤0.001),S期比例升高(F=17.836,P=0.001);而HEC-1A细胞周期各期比例无变化(P＞0.05).随着 LY294002浓度的增加,2种细胞A(570 nm)值逐渐下降并呈现时间依赖性(F=10.398,P=0.001;F=5.542,P=0.043),而且G0-G1期比例(F=32.024, P≤0.005;F=14.725,P≤0.017)升高,S期(F=30.132, P≤0.001;F=24.72,P≤0.01)比例下降.50 μmol/L和100 μmol/L LY294002作用2种细胞48 h后,凋亡细胞百分比均增加(P＜0.001).结论:LY294002可以抑制E2对子宫内膜癌细胞的增殖,促使其发生凋亡,抑制细胞周期进展,使细胞周期停滞在G1期.PI3K/Akt信号传导通路可作为治疗子宫内膜癌的新靶点.     

左旋炔诺孕酮,雌二醇对离体子宫内膜细胞增殖的影响

[目的]观察左旋炔诺孕酮(LNG),雌二醇(E2)在体外对子宫内膜上皮细胞及间质细胞的影响.[方法]对20例人子宫在位内膜离体组织进行体外分离培养,细胞汇合后消化,一部分用盖片法培养,用特异性抗体鉴定细胞纯度,一部分在相同的生长期加入不同浓度的LNG,E2,培养24,48,72 h,用MTT法测定LNG,E2对子宫内膜上皮细胞及间质细胞增殖活性的影响;用流式细胞仪及DNA切口末端标记法测定LNG,E2对子宫内膜上皮细胞及间质细胞的增殖及凋亡作用.[结果]LNG浓度为5×10-5mol/L时,抑制细胞生长速度,促进细胞的凋亡;随药物作用时间延长,抑制作用加强,凋亡率增加.E2浓度为5×10-5mol/L时,促进细胞的增殖.两种激素同时作用,抑制细胞生长速度,促进细胞的凋亡.[结论]特定浓度的LNG对子宫内膜细胞生长有抑制作用,并诱导子宫内膜细胞凋亡;特定浓度的E2对子宫内膜细胞生长有促进增殖作用.     

正常月经周期中人子宫内膜雌激素受体的改变

用酶联雌二醇(E_2-HRP)亲和组化法测定了37例人正常月经周期中子宫内膜上皮细胞的雌激素受体(ER)变化。结果表明在正常月经周期中,ER 阳性腺体率有明显改变,可见两个上升相,分别在增殖中期和分泌中期;增生晚期和分泌早期阳性腺体明显减少;分泌晚期与分泌中期比较,阳性腺体率有所下降。在周期中,腔上皮细胞均呈阳性显色,分别在增殖中期和分泌中期显色较强。     

大鼠输卵管结扎术后子宫内膜雌激素受体、血浆雌二醇水平及其形态学的变化

目的：探讨输卵管结扎术后子宫内膜形态学变化及月经失调的发病机理。方法：分别对12只正常大鼠及14只扎管后大鼠的动情前期和动情期血浆雌二醇（estradiol,E2)和子宫内膜雌激素受体（endomeral estrogen receptor,EEr)应用放射免疫分析法（radioinmmunoassay,RIA）和过氧化物酶－抗过氧化物酶法（peroxidase antiperoxidase,PAP)进行测定，观察子宫内膜的形态学变化。结果：动情前期血浆E2水平和EEr含量明显高于动情期；子宫内膜粘膜大乳头及空泡状粘液细胞在动情前期较多，动情期明显减少；扎管后动情前期血浆E2水平基本不变，但EEr含量明显减少，粘膜大乳头较对照组动情前期明显增多，空泡状粘液细胞减少；扎管后动情期血浆E2维持在一个较高的水平，EEr含量及粘膜大乳头均较对照组动情期啬 。结论：结扎术后输卵管卵巢系辜血管网被破坏，影响子宫的血供及激素由卵巢到子宫的传递，并破坏卵巢的黄体化过程，雌、孕激素比例失调，EEr合成发生障碍，导致子宫内膜的功能紊乱。     

EIA法测定子宫内膜癌雌激素受体水平研究

随着酶免疫技术及单克隆抗体技术的迅速发展,荧光组化法、亲和组化法及酶免疫法(EIA)已渗透到雌激素受体(ER)研究领域。EIA可定量检测ER水平,且与经典的葡聚糖-活性炭分离法(DCC)有良好的相关性。因此,本文采用EIA检测子宫内膜癌组织胞浆中ER水平,以期指导临床子宫内膜癌的激素治疗和正确估价子宫内膜癌的预后。     

子宫内膜癌的雌激素,孕激素受体含量及其与临床和病理的关系

Estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR) assays were performed by direct fluorescent histochemical methods in 20 endometrial carcinomas and 9 endometria of para-carcinomas. ER + and PR + were found in the patients who had not received chemotherapy and/or radiotherapies. In 4 adenosquamous carcinomas, the contents of ER and PR of adenocarcinoma components were higher than those of squamous carcinoma components. Blocking tests proved the specificity of ER and PR for estradiol and progesterone respectively. The levels of ER and PR in endometria of para-carcinomas were higher than those in carcinomas. There were higher levels of ER and PR in early clinical stage than in advanced stage, in cases free from cervical involvement than in cases cervical involvement, and in well differentiated carcinomas than in poorly differentiated carcinomas. ER and PR contents did not correlate with the depth of myometrial invasion or menopausal status. In the patient group followed up for half a year or more, 4 patients with high-level ER and PR had a good response to 17 alpha-progesterone caprate. The patients with ER + and PR + had a longer survival period than those with ER- and PR-. Our results indicated that the assay of ER and PR might be valuable for predicting the response to endocrine therapy and prognosis for patients with endometrial carcinoma.     

反义寡核苷酸对子宫内膜癌细胞雌激素受体亚型α特异性调控的研究

目的:初步建立子宫内膜癌雌激素受体亚型α(estrogen receptor α, ERα)弱表达细胞模型,探讨ERα在子宫内膜癌发病机制中的作用,研究17β-雌二醇(17β-estradiol, E2)及三苯氧胺(tamoxifen, TAM)在子宫内膜癌发病过程中与ERα的关系。方法:设计针对ERα的反义寡核苷酸 (antisense oligodexyribonucleotides, AS-ODN),转染入子宫内膜癌HEC-1B细胞,Western blot 测定转染后细胞ERα的表达;检测转染反义寡核苷酸后E2和TAM对子宫内膜癌细胞生长影响的变化。结果: (1)针对ERα翻译启动区设计的反义寡核苷酸可以选择性下调ERα的表达。 (2) E2和TAM可以促进子宫内膜癌细胞系HEC-1B的生长。转染ERα-AS-ODN后可抑制E2对子宫内膜癌细胞HEC-1B的促生长作用,这种抑制作用以转染后的24,48及72 h尤为明显。转染ERα-AS-ODN可抑制TAM对子宫内膜癌细胞HEC-1B的促生长作用,这种抑制作用在转染后的48 h最为明显。结论: 初步建立了ERα弱表达的子宫内膜癌细胞模型。反义核酸技术可以作为一种有效的特异性下调子宫内膜癌细胞中ERα的实验手段。在HEC-1B细胞中,ERα抑制E2和TAM的促进子宫内膜癌细胞生长的作用。     

子宫内膜癌的雌激素、孕激素受体含量及其与临床和病理的关系

作者采用Lee荧光组织学法测定29例子宫内膜癌及其中9例癌旁内膜的雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)含量。结果发现:术前未经放、化疗的子宫内膜癌都含有ER,PR;腺鳞癌中腺癌成分的ER和PR含量高于鳞癌成分。雌二醇(E_2)和孕酮(P)阻断试验证实ER和PR具有特异性。癌旁内膜的ER和PR含量高于子宫内膜癌。ER和PR阳性水平在早期癌、子宫颈管无累及和高分化癌内较高,与肌层浸润程度及月经状况无关。在19例追踪半年至1年半的病例中,显示ER、PR阳性水平较高的病人预后较好,内分泌治疗也初见效果,但尚需要积累更多病例观察分析。     

子宫内膜癌PCNA表达和雌孕激素受体的研究

目的：探讨子宫内膜癌（endometrial carcinoma,EMC)增殖活性以及雌、孕激素受体的表达与临床病理特性、预后的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测74例子宫内膜癌增殖细胞核抗原（proliferating cell nucleus antigen,PCNA)、雌激素受体（estrogen receptor ,ER)、孕激素受体（progesterone receptor,PR)含量。结果：PCNA在对照组和EMC中的阳性率分别为30.0%和82.4%,差异有显著性（P＜0.01);在不同分化程度的EMC中PCNA阳性表达率差异无显著性,但PCNA阳性指数（PI）评分,WD明显低于MD,LD,差异有显著性（P＜0.001),且与EMC分化程度呈负相关（r=-0.52,P＜0.01);PCNA PI评分与EMC临床期别之间呈正相关（r=0.55,P＜0.01)。EMC中ER,PR阳性例数分别为49例（66.2%)和56例（75.7%),PCNA表达与ER,PR受体之间呈负相关,r值分别为-0.42(P＜0.05)和-0.51(P＜0.05)。结论：ER和PR阳性、PCNA PI评分较低的子宫内膜癌,肿瘤细胞异型性小;反之,表现为侵犯邻近组织、扩散、转移等恶性生物学行为。ER,PR和PCNA表达之间有明显互补性。PCNA表达结合ER,PR检测具有方法简单、组织无需特殊处理等特点,适于对常规病理切片作回顾性研究,对鉴别肿瘤性质、预测预后均一定实用价值。     

子宫内膜和子宫肌的雌激素、孕激素受体研究

作者用葡聚糖-活性炭分离方法,测定了36例子宫内膜和51例子宫肌的雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)。结果显示:子宫内膜ER和PR都高于子宫肌。配对资料表明:增殖期和分泌期子宫内膜ER和PR比子宫肌对应指标高。子宫内膜和子宫肌增殖期PR高于分泌期,ER也有类似差别,但无统计学意义(P>0.05)。子宫内膜ER和PR周期变化曲线与体内雌、孕激素变化相仿,但其高峰稍后于激素。提示子宫内膜和子宫肌的ER和PR含量与雌、孕激素在该部位作用大小和体内激素水平相平行,子宫内膜ER和PR伴随月经周期中雌、孕激素变化而呈有规律的周期性变化。