Mcl-1表达沉默对肺癌细胞生长的抑制作用

目的：研究Mcl?1对肺癌细胞PC?9增殖和凋亡的影响。方法利用Western印迹检测人正常肺上皮细胞及4种肺癌细胞株中Mcl?1的表达; CCK8细胞增殖实验、平板克隆形成实验观察Mcl?1表达沉默对PC?9细胞增殖的影响;并运用流式细胞仪观察Mcl?1沉默对PC?9细胞凋亡的影响。结果 Mcl?1在肺癌细胞株A549和PC?9中的表达水平较高;干扰Mcl?1表达能抑制PC?9细胞的生长（ P＜0?05）;经Mcl?1 siR?NA处理后PC?9细胞克隆形成率显著低于阴性对照组,差异有统计学意义（ P＜0?05）。流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示,下调Mcl?1的表达水平可以明显提高PC?9肺癌细胞的凋亡比例。结论在肺癌细胞中沉默Mcl?1的表达,能够抑制肺癌细胞的增殖并促进肺癌细胞的凋亡,提示Mcl?1可能成为潜在的肺癌治疗靶点。     

肺癌间质血管与肺癌的转移

我们对32例肺鳞癌及癌周正常肺组织的免疫组化研究表明:肺癌间质血管内皮细胞Ⅷ因子表达明显增强,主要组织相容抗原(HLA-DR)几乎不表达,Ⅳ型胶原在基底膜上的表达与鳞癌的分化程度密切相关,分化越低,其间质血管基底膜越不完整,这些形态和功能的改变都有利于肺癌细胞的浸润生长和转移。但从核仁形成区的研究才明:无论肺癌的分化程度如何,其间质血管内皮细胞核内均为一个Ag-NORs颗粒。推测间质血管内皮细胞的生物学行为并没有改变。     

Caveolin‐1 is an Important Factor for the Metastasis and Proliferation of Human Small Cell Lung Cancer NCI‐H446 Cell

Caveolin‐1 (CAV‐1) has been reported to play an important role in the development of a variety of human cancers. CAV‐1 expression is revealed to be reduced or absent in the malignant tumor cells of small cell lung cancers (SCLC). This study was performed to investigate the influences of the stable expression of CAV‐1 on the metastasis and proliferation of SCLC in vitro. The wild‐type CAV‐1 gene was successfully transfected into the NCI‐H446 cells and was stably expressed in the NCI‐H446 cells. The effects of CAV‐1 on the morphology, proliferation, and metastasis potential for NCI‐H446 cell were evaluated by crystal violet staining, MTT analysis, transwell assay, and scratch wound assay, respectively. Western blot and gelatin zymography were used to examine the expression changes of the metastasis‐related MMP‐3 and E‐cadherin. Stable expression of CVA‐1 was observed in the H446‐CAV‐1 cells, which enlarged the cell shape with filopodia. The proliferation of H446‐CAV‐1 was inhibited, while its migration and invasion abilities were promoted in vitro. The re‐expression of CAV‐1 reduced the expression of E‐cadherin, while it increased the protein expression and enzyme activity of MMP‐3. Taken together, the cellular proliferation of the NCI‐H446 could be inhibited by the re‐expression of CAV‐1. CAV‐1 might increase the cell metastasis potential through the interaction with E‐cadherin and MMP‐3 genes. These in vitro findings confirm the involvement of CAV‐1 in the proliferation and metastasis of SCLC. Anat Rec, 2009. © 2009 Wiley‐Liss, Inc.     

Efficacy of Surgical Treatment for Brain Metastasis in Patients with Non-Small Cell Lung Cancer

Purpose

Patients with non-small cell lung cancer (NSCLC) and simultaneously having brain metastases at the initial diagnosis, presenting symptoms related brain metastasis, survived shorter duration and showed poor quality of life. We analyzed our experiences on surgical treatment of brain metastasis in patients with NSCLC.

Materials and Methods

We performed a single-center, retrospective review of 36 patients with NSCLC and synchronous brain metastases between April 2006 and December 2011. Patients were categorized according to the presence of neurological symptoms and having a brain surgery. As a result, 14 patients did not show neurological symptoms and 22 patients presented neurological symptoms. Symptomatic 22 patients were divided into two groups according to undergoing brain surgery (neurosurgery group; n=11, non-neurosurgery group; n=11). We analyzed overall surgery (OS), intracranial progression-free survival (PFS), and quality of life.

Results

Survival analysis showed there was no difference between patients with neurosurgery (OS, 12.1 months) and non-neurosurgery (OS, 10.2 months; p=0.550). Likewise for intracranial PFS, there was no significant difference between patients with neurosurgery (PFS, 6.3 months) and non-neurosurgery (PFS, 5.3 months; p=0.666). Reliable neurological one month follow up by the Medical Research Council neurological function evaluation scale were performed in symptomatic 22 patients. The scale improved in eight (73%) patients in the neurosurgery group, but only in three (27%) patients in the non-neurosurgery group (p=0.0495).

Conclusion

Patients with NSCLC and synchronous brain metastases, presenting neurological symptoms showed no survival benefit from neurosurgical resection, although quality of life was improved due to early control of neurological symptoms.     

非小细胞肺癌多耐药基因产物(P-gp)表达与多种预后因素的关系

探讨非小细胞肺癌（NSCLC）多药耐药基因-1（MDR-1）产物P-糖蛋白（P-gp）在术前未经治疗的非小细胞肺癌组织中的表达及与多种预后因素间的关系。采用免疫组化法检测P-gp在56例NSCLC组织中的表达及其与性别、病理类型、病理分级、淋巴结状况、细胞增殖指数（Ki67）、肿瘤细胞修复能力（TOPOⅡ、MGMT）、表皮生长因子受体（EGFR）、肿瘤的免疫状态（HSP70）以及参与肿瘤恶变、凋亡及转移的癌基因和抑癌基因（P53、Bcl-2、C-erb-2、MDM2）的相关性。结果显示,P-gp在非小细胞肺癌组织中的阳性表达率是53.6%（30/56）,P-gp与TOPOⅡ之间（r=0.279,P=0.037）、P-gp与EG-FR之间（r=0.320,P=0.016）、P-gp与HSP70之间（r=0.279,P=0.037）以及P-gp与C-erb2之间（r=0.249,P=0.043）有相关性。结论：非小细胞肺癌组织中P-gp的表达与多种基因的表达密切相关。采用MDR-1逆转剂可增加非小细胞肺癌的化疗敏感性,行多基因联合检查可为预测非小细胞肺癌预后及指导化疗提供实验依据。     

沉默 NEK2 通过调节 Wnt 信号通路抑制非小细胞肺癌的细胞增殖

目的 探讨沉默有丝分裂相关激酶 2 ( never in mitosis related kinase 2, NEK2) 对非小细胞肺癌 (non-small cell lung cancer, NSCLC) 细胞生物学行为的影响及其可能机制。 方法 收集 27 对 NSCLC 和邻 近的正常组织, 免疫组化检测组织 NEK2 表达, 收集临床病理数据。 生物信息学分析研究 NEK2 在肺腺癌 中的表达和预后价值。 通过 NCI-H1299 和 A549 细胞体外转染 siRNA 敲低 NEK2, 通过免疫印迹及 qPCR 实 验验证敲低效果, CCK-8 评估细胞增殖能力, 流式细胞术评估细胞凋亡及周期, 蛋白印迹测定 Wnt 信号通 路相关蛋白表达。 结果 在肺腺癌组织中的 NEK2 表达显著高于癌旁组织, ⅡB-ⅢB 级组显著高于ⅠA-ⅡA 级组, 从 TCGA 数据库获得的数据也显示肺腺癌患者的 NEK2 明显高于相应的对照组, 并与预后不良显著 相关。 转染 NEK2 siRNA 显著降低了 NCI-H1299 和 A549 细胞的增殖, 细胞阻滞在 G0 / G1期, 细胞凋亡率增 加。 此外, 转染 NEK2 siRNA 的 NCI-H1299 和 A549 细胞中 Wnt 和 β-catenin 的表达水平显著下调, 而 p-GSK3β 的表达水平上调。 结论 siRNA 干扰 NEK2 的表达可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖, 其机制可能是 通过抑制 Wnt / β-catenin 通路的促进细胞凋亡和周期阻滞。     

甘草酸对人肺癌细胞增殖和侵袭抑制作用的机制探讨

目的　探讨甘草酸对高转移人肺癌细胞 (PGCL3)增殖抑制、抗侵袭和诱导凋亡的作用 ,并探讨其抗增殖和侵袭作用的机制 .方法　用 0 .5mmol/L和 1.0mmol/L甘草酸处理PGCL3细胞 96h ,进行细胞增殖抑制试验、软琼脂集落形成试验、侵袭、粘附和运动试验 ,以及组织蛋白酶B活性的测定 ,观察药物对PGCL3细胞增殖和侵袭能力的影响 .上述两浓度处理细胞 4 8h ,用吖啶橙 -溴化乙锭荧光双染法和末端脱氧核苷酸转移酶标记法 (TUNEL法 )检测细胞凋亡 .结果　甘草酸使PGCL3细胞增殖抑制率升高 (p <0 .0 5和p <0 .0 1)和软琼脂集落形成率显著下降(p <0 .0 1) ,呈剂量依赖性 ,半增殖抑制浓度 (IC50 )为 1.8mmol/L ;甘草酸明显减弱细胞侵袭能力 (p <0 .0 1) ,涉及侵袭关键环节的细胞粘附、运动和组织蛋白酶B分泌均受明显抑制 (p <0 .0 5和p <0 .0 1) ;甘草酸还使细胞凋亡率显著升高 (p<0 .0 1) .结论　甘草酸具有抑制PGCL3人肺癌细胞增殖和侵袭作用 .其抑制增殖的机制是通过对细胞分化和凋亡的诱导作用 ;其抗侵袭机制是对侵袭的多个基本环节起抑制作用 .     

TrkB/BDNF在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨肿瘤标记物TrkB/BDNF在非小细胞肺癌癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化(SP法)和Realtime-PCR方法检测非小细胞肺癌组织和癌旁组织中TrkB/BDNF的mRNA表达水平,并分析其在相关临床因素间的差异。结果:非小细胞肺癌癌组织TrkB/BDNF表达阳性,且明显高于癌旁组织。TrkB/BDNFmRNA水平在有否脑转移和不同TNM分期之间存在明显差异(P<0.05);而在性别、年龄、吸烟、肿瘤大小、分化程度、病理组织学类型间无显著差异(P>0.05)。结论:TrkB/BDNF在非小细胞肺癌癌组织中高表达,并与其脑转移、TNM分期有关,两者可能在非小细胞肺癌的侵袭及转移(尤其脑转移)中发挥重要作用。     

同步放化疗联合扶正肺癌方治疗局部晚期非小细胞肺癌的效果

目的 分析同步放化疗联合扶正肺癌方治疗局部晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法 选择2017年10月~2019年6月在我院诊治的60例局部晚期非小细胞肺癌患者,采用随机数字表法分为对照组和观察组,各30例。对照组采用同步放化疗治疗,观察组在对照组基础上联合扶正肺癌方治疗,比较两组临床治疗总有效率、生存质量（总体健康、心理健康、社会功能、活力、情感职能、躯体功能）、中位生存时间以及不良反应发生情况。结果 观察组治疗总有效率为76.67%,高于对照组的63.33%,差异有统计学意义（P<0.05）;生存质量总评分、中位生存时间均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;观察组不良反应发生率（16.67%）低于对照组（33.33%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 同步放化疗联合扶正肺癌方治疗局部晚期非小细胞肺癌疗效确切,可一定程度提高治疗总有效率,改善生存质量,延长生存时间,降低临床不良反应,具有临床应用的优势。     

去甲斑蝥素抑制蛋白激酶C影响乳腺癌细胞侵袭转移的研究

目的探讨去甲斑蝥素（norcantharidin,NCTD）抑制乳腺癌细胞侵袭与转移的机制。方法应用迁移实验、趋化实验、transwell转移模型分别检测NCTD对不同侵袭力乳腺癌细胞株MCF-7、SKBR3和MDA-MB231的粘附、迁移和侵袭的影响;用Western blot检测NCTD作用前后乳腺癌细胞PKCζ表达的变化。结果 SKBR3和MDA-MB231的趋化、侵袭能力明显高于MCF-7;用NCTD处理后,三种乳腺癌细胞体外迁移、粘附和侵袭均受到不同程度抑制（P〈0.05）;NCTD对SKBR3和MDA-MB 231细胞迁移、侵袭抑制作用明显高于MCF-7细胞株（P〈0.05）,SKBR3和MDA-MB231细胞之间差异则无统计学意义（P〉0.05）。使用PKCζ抑制剂myristolated pseudosubstrate（PSζ）可促进NCTD抑制SKBR3和MDA-MB231的侵袭和迁移能力;经NCTD处理后,三种乳腺癌细胞PKCζ表达均降低。结论去甲斑蝥素可明显抑制人乳腺癌细胞株的细胞侵袭和迁移能力,其机制可能通过抑制PKCζ信号传导途径实现,与PKC抑制剂联用,可以增强治疗肿瘤的疗效。     

Expression of ITGB1 predicts prognosis in colorectal cancer: a large prospective study based on tissue microarray

Background: ITGB1 is a heterodimeric cell-surface receptor involved in cell functions such as proliferation, migration, invasion and survival. The aim of this study was to assess ITGB1 expression in colorectal cancer and correlate it with clinicopathological features, as well as to evaluate its potential prognostic significance. Materials and methods: In this study, we examined the expression of ITGB1 using tissue microarrays containing analyzed specimens by immunohistochemistry. ITGB1 expression was further correlated with clinicopathological and prognostic data. The prognostic significance was assessed using Kaplan-Meier survival estimates and log-rank tests. A multivariate study with the Cox’s proportional hazard model was used to evaluate the prognostic aspects. Results: ITGB1 expression was present in 88.5% of the analyzed specimens. Significant differences in ITGB1 expression were found between normal mucosa and carcinomas (P<0.001). High ITGB1 expression was associated with poor prognosis, and it independently correlated with shortened overall survival and disease-free survival in colorectal cancer patients (P<0.001). More so, ITGB1 expression, bowel wall invasion, lymph node metastasis and distant metastasis were independent prognostic factors for overall survival. Additionally, significant differences in ITGB1 expression were observed in adenomas and tumors from patients with familial adenomatous polyposis compared to normal colon mucosa (P<0.05) Conclusion: The results of this study indicate that ITGB1 overexpression in colorectal tumors is associated with poor prognosis, as well as aggressive clinicopathological features. Therefore, ITGB1 expression could be used as potential prognostic predictor in colorectal cancer patients.     

CXCR4对小鼠腹水型肝癌细胞淋巴转移潜能的影响

目的探讨趋化因子受体CXCR4表达水平对小鼠腹水型肝癌细胞淋巴转移潜能的影响。方法采用RT-PCR,流式细胞仪检测趋化因子受体CXCR4在小鼠腹水性肝癌细胞株Hca-F和Hca-P细胞的表达。通过归巢实验测定用抗体封闭CXCR4表达前后细胞特异性的向淋巴管迁移能力。结果CXCR4及其mRNA在高转移潜能小鼠肝癌细胞系Hca-F的表达高于低转移潜能小鼠肝癌细胞系Hca-P的表达。CX-CR4中和抗体能够抑制Hca-F细胞在体内向淋巴结转移。结论CXCR4在Hca-F、Hca-P细胞表面表达水平不同,可能是导致它们向淋巴管转移的潜能不同的影响因子之一,CXCR4表达水平与Hca-F、Hca-P细胞的特异性淋巴管转移潜能有关。     

Alu序列甲基化水平与两种乳腺癌细胞系转移能力高度相关

目的 探讨Alu序列甲基化与乳腺癌转移潜能的关系.方法 用亚硫酸氢盐修饰联合限制性内切酶分析法(combined bisulfite restriction analysis,COBRA)、亚硫酸氢盐修饰结合直接测序法(bisulfite sequencing,BSP)检测两株转移能力不同的乳腺癌细胞系MCF7和MDA-MB-435S中Alu甲基化状态,每个样品挑取10个克隆测序.结果 MCF7和MDA-MB-435S中Alu甲基化水平均明显低于报道的正常人体细胞Alu甲基化水平,但MCF7中Alu的甲基化水平明显高于MDA-MB-435S.同时,Alu甲基化位点在基因组中分布不均匀.结论 乳腺癌的转移潜能可能与Alu序列的去甲基化以及去甲基化位点的分布相关,值得进一步探讨.     

BI-1蛋白及其相关调控因子在非小细胞肺癌细胞系中的表达研究

目的 研究凋亡抑制因子BI-1与及其相关调控因子Bcl-2 、Bcl-XL在非小细胞肺癌细胞系中的表达差异，分析BI-1与Bcl-2、Bcl-XL的相互作用关系；方法 以9种非小细胞肺癌细胞系（NSCLC）为实验材料，采用RT-PCR和western blot 技术在cDNA和蛋白水平检测三种基因的表达；结果 发现BI-1在NSCLC中高表达，Bcl-2表达较低（在A549、PAa、GLC-82和SPC-1-A几乎检测不到），Bcl-XL表达较稳定，且明显高于Bcl-2；结论 在NSCLC细胞中，BI-1主要与Bcl-XL形成蛋白复合体作用于凋亡通路。     

气管内吸入IL-12重组腺病毒对实验性肺转移癌的治疗作用

为研究气道内应用IL 12重组腺病毒 (AdIL 12 )对实验性肺转移癌的治疗作用。我们在小鼠气管内滴入AdIL 12 ,以ELISA法测定局部及外周血IL 12及相关因子水平 ,在C5 7BL/ 6小鼠尾静脉注射Lewis肺癌 3LL细胞建立肺转移癌模型 ,观察气管内应用AdIL 12对实验性肺转移癌的治疗作用 ,包括肺转移结节、动物存活期、生存率变化等 ,比较自然杀伤活性(NK )和特异性细胞毒 (CTL )活性的差异。结果显示 :(1)气管应用AdIL 12后肺灌洗液中测到IL 12 ,且浓度高于外周血水平 (P <0 0 1) ,对照组肺灌洗液及外周血中均未检出 ;(2 )气道应用AdIL 12对实验性肺转移癌有治疗作用 ,可使肺转移结节减少、动物的生存期延长及存活率升高 ,并增强了NK、CTL活性。本研究表明气道内应用AdIL 12对实验性肺转移癌有治疗作用。     

非小细胞肺癌中BRCA1表达与铂类耐药及预后关系

肺癌是世界上发病率和死亡率最高的肿瘤,我国是肺癌的高发国家。铂是目前最常用的非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤化疗药物。铂类药物的耐药是多种机制共同作用的结果。人乳腺癌易感基因1(BRCA1)是一种抑癌基因,有细胞损伤修复、细胞蛋白调控、细胞凋亡等多重作用。BRCA1是非小细胞肺癌患者铂类药物敏感性的最佳敏感指标之一。BRCA1与肿瘤分期联合检测可作为预测患者生存期。     

67 ku层黏连蛋白受体与肿瘤侵袭和转移

层黏连蛋白是细胞外基质重要的成分之一。67 ku层黏连蛋白受体(67 ku laminin receptor,67 LR)是层黏连蛋白的一个非整合素受体。它是一种多功能蛋白,既参与核糖体的组装、成熟过程,又参与细胞的信号转导,还可作为多种病毒的细胞膜受体。可以和层黏连蛋白相互作用,调节肿瘤的增殖、黏附、微血管形成,加速细胞外基质的降解,促进肿瘤的侵袭转移,其作用机制可能与MAPK信号通路有关。67 LR在多种肿瘤中高表达,还可以作为肿瘤免疫治疗的靶标。     

非小细胞肺癌p53蛋白表达量及倍体测定与预后关系

目的　通过非小细胞肺癌p53蛋白表达量及倍体测定,结合临床病理学特点,探讨患者预后的影响 因素。方法　应用流式细胞术检测120例非小细胞肺癌的p53蛋白表达量及DNA倍体。结果　淋巴结转移组 p53蛋白表达量高于无转移组,COX单因素分析表明,p53蛋白表达量、倍体及临床TNM分期均与预后有关,COX 多因素分析发现,仅p53蛋白表达量是独立的预后因素。结论　p53蛋白高表达可能是非小细胞肺癌患者预后不 良的主要因素之一。