点突变对HSP70蛋白自身磷酸化和ATP反应的影响

目的通过比较HSP70野生型和突变型蛋白的自身磷酸化及ATP分解合成反应的不同,探讨HSP70的作用机制.方法运用基因定位诱导突变技术,将89和227位组氨酸分别替代以丝氨酸(H89S,H227S),分析野生型和突变型HSP70蛋白的自身磷酸化过程,对两种蛋白的ATP分解和合成变化进行研究.结果突变的H89S蛋白自身磷酸化、ATP分解和合成受到抑制,有剂量反应关系存在;野生型和H227S蛋白的ATP交换过程未受到影响.结论89位组氨酸点突变能显著降低ATP酶交换反应,但它的自身磷酸化可能并非必须的介导位点或只是一个选择性的功能侧链.     

低氧预处理对缺血脑组织HSP70蛋白表达的影响

目的:研究低氧预处理对缺血脑组织热休克蛋白70(HSP 70)表达的影响,探讨低氧预处理的脑保护机制。方法:30只SD大鼠,体重在200~230克,随机分为3组:假手术组(n=10),脑缺血组(n=10),低氧预处理组(n=10)。分别观察3组动物的神经功能评分,按Bederson 6级5分制方法进行,用免疫组化法检测大鼠脑组织凋亡细胞和HSP 70蛋白表达。结果:假手术组的神经功能评分为(0.00±0.00)分,脑缺血组为(2.40±0.97)分,低氧预处理组为(1.40±0.84)分,低氧预处理组与缺血组神经功能评分有统计学差异;预处理组的病变侧海马凋亡细胞数明显少于缺血组而HSP 70蛋白表达明显高于缺血组,两组相比较统计学差异有显著性。结论:低氧预处理能减轻缺血后的细胞凋亡,对脑缺血具有保护作用,其机制可能是增加HSP 70蛋白的表达来实现的。     

低氧预处理对缺血脑组织HSP 70蛋白表达的影响

目的：研究低氧预处理对缺血脑组织热休克蛋白70（HSP 70）表达的影响,探讨低氧预处理的脑保护机制。方法：30只SD大鼠,体重在200-230克,随机分为3组：假手术组（n=10）,脑缺血组（n=10）,低氧预处理组（n=10）。分别观察3组动物的神经功能评分,按Bederson 6级5分制方法进行,用免疫组化法检测大鼠脑组织凋亡细胞和HSP 70蛋白表达。结果：假手术组的神经功能评分为（0.00±0.00）分,脑缺血组为（2.40±0.97）分,低氧预处理组为（1.40±0.84）分,低氧预处理组与缺血组神经功能评分有统计学差异;预处理组的病变侧海马凋亡细胞数明显少于缺血组而HSP 70蛋白表达明显高于缺血组,两组相比较统计学差异有显著性。结论：低氧预处理能减轻缺血后的细胞凋亡,对脑缺血具有保护作用,其机制可能是增加HSP 70蛋白的表达来实现的。     

热休克蛋白(HSP70)在乳腺癌中表达的意义

应用免疫组化Ｓ－Ｐ法。了解ＨＳＰ７０在４０例乳腺癌中的表达情况，并探讨ＨＳＰ７０表达与ｐ５３蛋白、ＥＲ表达之间的关系。结果：ＨＳＰ７０表达率为５５％，ＨＳＰ７０表达与ＥＲ表达有正相关，与Ｐ６３蛋白表达及淋巴结转移负相关。与乳腺癌组织学类型和分化程度无关。     

胆管癌组织中HSP70和caspase-3蛋白表达及意义

目的 观察HSP70和caspase-3在胆管癌组织中的表达, 探讨其相关性及其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测68例胆管癌组织中HSP70和caspase-3的表达.应用SSPS统计软件进行数据处理.结果 1)HSP70蛋白1级染色14例(20.6%),2级染色29例(42.6%),3级染色25例(36.8%).caspase-3蛋白低表达为39例(64.7 %) ,高表达为29例(35.3 %).2)HSP70蛋白表达与胆管癌分化程度呈正相关(r=0.272,P=0.025),而caspase-3蛋白表达与胆管癌分化程度呈负相关(r=-0.257,P=0.034).统计学分析显示,在胆管癌中HSP70和caspase-3蛋白的表达呈明显负相关(分别为r=-0.349,P=0.004).3) Kaplan-Meier 法生存分析发现,HSP70 和caspase-3 蛋白的表达与术后无复发生存时间密切相关( P < 0.01).结论 HSP70表达水平可反映胆管癌细胞的增殖及恶性程度,有一定诊断和预后价值;从高到低分化的胆管癌细胞caspase-3蛋白染色显示其发生发展过程中抑凋亡机制减弱;HSP70 可能通过某些途径抑制胆管癌细胞的凋亡调控,提高了胆管癌细胞在应激状态下的稳定性.     

HSP27和HSP70在老年性白内障和透明晶状体中的表达

目的观察热休克蛋白HSP27和HSP70在老年性白内障和透明晶状体中的表达情况。方法WesternBlot法测定HSP27和HSP70在老年性白内障和透明晶状体中的表达情况。结果老年性白内障的晶状体和透明晶状体中均有HSP27和HSP70的表达。经t检验,老年性白内障晶状体中HSP27(1.08±0.33)的表达与正常对照组(0.61±0.13)相比,差异存在统计学意义(P<0.05),老年性白内障晶状体中HSP70(1.41±0.48)的表达与正常对照组(0.67±0.12)相比,差异亦存在统计学意义(P<0.05)。结论老年性白内障晶状体中HSP27和HSP70的表达高于透明晶状体。     

HSP70蛋白在胃溃疡组织中表达的临床意义

目的探讨胃溃疡组织中HSP70表达的不同与胃溃疡的关系。方法对2008年3月至2009年3月铜川矿务局中心医院收治的106例经电子胃镜确诊的胃溃疡活动期患者进行抗溃疡治疗,随机抽取经电子胃镜检查胃黏膜正常的68例作为对照组。用RT-PCR的方法检测胃溃疡患者治疗前、治疗后HSP70的表达量。结果正常者胃组织HSP70的表达水平明显低于胃溃疡患者HSP70的表达水平（P〈0．01）;治疗前胃溃疡活动期、愈合期、瘢痕期HSP70的表达水平明显低于治疗后（P〈0．01）;治疗后胃溃疡活动期、愈合期、瘢痕期HSP70的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HSP70是一种应激蛋白,可能在胃溃疡组织修复中起到重要作用。     

热休克蛋白（HSP70、HSP27）在食管癌组织中表达的意义

目的：探讨HSP70和HSP27在食管癌组织中的表达情况。方法：采用SP免疫组织化学染色检测59例食管癌组织中HSP70和HSP27。结果：HSP70和HSP27的总阳性率分别为64.41%(38/59)和58.62%(34/58)，HSP70和HSP27的共同阳性率为30.00%(9/30)。结论：在食管癌中HSP70和HSP27普遍表达。     

同步热放化疗对宫颈癌组织C-myc、HSP70蛋白表达的影响

目的:研究同步热放化疗治疗宫颈癌的疗效及其对宫颈癌组织C-myc、HSP70蛋白表达的影响.方法:将40例宫颈癌Ⅲb期随机分为同步热放化疗组(H+CRT组)和同步放化疗组(CRT组),观察比较局部肿瘤消退情况和1,2,3年无进展生存期;采用免疫组化法检测两组治疗前、中宫颈肿瘤组织中C-myc、HSP70蛋白表达.结果:在完成体外照射45Gy时H+CRT组局部肿瘤完全消退率高于CRT组(P＜0.05),但两组患者的1,2,3年无进展生存期差异无统计学意义(P＞0.05).在治疗前,两组C-myc、HSP70蛋白阳性表达强度差异均无统计学意义(P＞0.05).在治疗中,H+CRT组较CRT组的C-myc蛋白阳性表达强度减弱(P＜0.05);H+CRT组较CRT组HSP70蛋白阳性表达强度增强(P＜0.05);H+CRT组治疗中较治疗前HSP70蛋白表达强度增强(P＜0.05).结论:热疗与同步放化疗具有协同增强作用,但1,2,3年无进展生存期无差异.热放化疗能减弱C-myc蛋白阳性表达强度;可以上调HSP70蛋白阳性表达强度.同步热放化疗是否通过干扰肿瘤细胞HSP70通路诱导或对抗凋亡,有待进一步研究.     

阴道超声对人早孕绒毛细胞HSP70的影响

目的:探讨阴道超声照射一定时间(10 min)后不同时间胚胎绒毛细胞HSP70的变化及其与绒毛形态学变化之间的关系。方法:选择拟行人工流产的24例健康早孕妇女,随机分为四组:对照组、24 h流产组、72 h流产组和7 d流产组。应用探头频率7.5 MHz的阴道超声持续照射孕囊10 min,分别于照射后24 h、72 h和7 d取绒毛,对照组未经阴道超声照射。以免疫组织化学法对各组绒毛细胞的HSP70表达水平进行半定量检测,同时于光镜下观察各组绒毛形态学情况。结果:照射后24 hHSP70表达水平最高,此后逐渐下降,在第7天恢复正常。同时,形态学观察发现,照射后24 h绒毛受损最为严重,此后受损程度逐渐减轻,并在第7天恢复正常。结论:阴道超声辐射可引发早孕绒毛的可复性损伤,但HSP70对经阴道超声持续照射后受到损伤的绒毛可能具有保护作用,并可能在绒毛恢复过程中发挥关键作用。     

HSP70在肾脏缺血预适应中的作用

目的 探讨缺血预适应对肾脏HSP70表达的影响.方法 大鼠3个循环的2min缺血加5min再灌注缺血预适应模型,免疫组化观察在体肾脏HSP70的表达.结果 缺血预适应后肾脏HSP70的表达显著升高.结论 缺血预适应可升高缺血再灌注损伤后肾脏HSP70的表达,改善肾功能.     

热休克蛋白70在肝缺血再灌注中的作用

目的：探讨热休克蛋白70（HSP70）在肝缺血再灌注中的作用。方法：阅读国内外有关文献并进行综述。结果：HSP70对肝缺血再灌注具有保护作用。在细胞接受应激刺激后,HSP70表达丰度最高,因此HSP70最受关注。结论：HSP70是目前发现的具有重要保护作用的一类蛋白质,经缺血预处理等的情况下,可诱导组织细胞大量表达,并可能对肝缺血再灌注损伤产生保护作用。     

HSP70、HSP90在肾细胞癌中的表达及其临床意义

目的 分析HSPT0、HSP90在肾细胞癌组织中表达的意义.方法 用免疫组化S-P法检测32例肾细胞癌组织标本中HSP70、HSP90的表达情况.结果 肾细胞癌组织中HSP70、HSP90表达阳性率分别为90.6%(29/32)、84.4%(27/32),明显高于正常肾组织,差异有统计学意义(P<0.05);但其表达程度与肾细胞癌临床分期及细胞类型无明显相关性(P>0.05).结论 HSPT0、HSP90高表达在肾细胞癌的发生、发展中具有促进作用.     

鼻咽癌放疗残灶中HSP70/HSP27蛋白的表达

目的：分析鼻咽癌原发组织HSP70/HSP27蛋白表达与放疗残灶的相关性,探讨HSP70/HSP27表达对鼻咽癌放疗残灶的预测价值。方法：应用SP免疫组织化学法检测58例鼻咽癌原发组织HSP70/HSP27热休克蛋白表达,其中规范放疗后有残存癌灶的28例鼻咽癌为实验组,随访5年无癌灶复发的30例为对照病例。结果：HSP70和HSP27在实验组阳性表达率分别为92.9％(26/28)和53.6%(15/28),而在对照组的阳性表达率为53.3％(16/30) 和53.3%(16/30),HSP70阳性表达率在两组间比较有统计学差异(P<0.05),而HSP27阳性表达率在两组间比较无统计学差异(P>0.05);HSP70和HSP27在实验组共同阳性表达率为50.0%(14/28),对照组为16.7%(5/30),两者比较有统计学差异(P<0.05);两者共同阴性表达率在实验组和对照组分别为3.6%(1/28) 和10.0%(3/30),两者相比无统计学差异（P>0.05）。结论：HSP70在鼻咽癌抗放射损伤中可能起重要作用,检测鼻咽癌组织HSP70蛋白表达对预测鼻咽癌放射后癌灶残存可能有重要价值。     

亚低温对大鼠弥漫性脑损伤后海马CA3区HSP70表达及细胞凋亡的影响

目的观察亚低温对大鼠弥漫性脑损伤(DBI)后海马CA3区HSP70在蛋白质和mRNA水平表达及细胞凋亡的影响,探讨亚低温脑保护的分子生物机制.方法将大鼠随机分成空白对照、假手术、单纯DBI和DBI后亚低温治疗4组,按Marmarou氏方法制作大鼠DBI模型,分别采用免疫组化法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及流式细胞仪(FCM),观察各组动物脑海马CA3区HSP70在蛋白质和mRNA水平的表达及细胞凋亡率.结果与对照组相比,大鼠DBI后海马CA3区HSP70表达水平及细胞凋亡率均升高(P＜0.05).亚低温治疗后,大鼠脑海马CA3区HSP70表达水平较单纯DBI组显著增高(P＜0.01),而细胞凋亡率降低(P＜0.05).结论亚低温对创伤性脑损伤的脑保护机制可能与促进HSP70表达并减少神经细胞凋亡有关.     

脱毛膏对家兔督脉及其两侧旁开皮肤组织热休克蛋白70合成影响的初步观察

目的探讨脱毛膏对后续皮肤相关应激实验的影响。方法免疫组织化学方法检测热休克蛋白70（HSP70），比较经脱毛膏脱毛处理后恢复期4h、16h皮肤HSP70表达的差异以及督脉线及其两侧旁开对照点HSP70表达的差异。结果脱毛后恢复期4h时皮肤高度表达HSP70．恢复期16h时HSP70袁达减少；督脉线与其两侧旁开非经对照点的HSP70表达在恢复期4h和16h时均未见明显差异。结论（1）脱毛膏会刺激皮肤应激合成HSP70．后续的其他实验宜在脱毛后16h进行。（2）脱毛膏脱毛法可用于针灸过程中经脉线上HSP70检测的皮肤处理。     

热处理对HeLa细胞增殖、凋亡及HSP70表达的影响

目的:通过不同温度对HeLa细胞的处理,观察细胞的存活率,细胞凋亡以及HSP70蛋白表达的变化。方法:对HeLa细胞进行培养及不同温度的热处理,采用MTT法测定HeLa细胞的存活,通过免疫组化方法检测HeLa细胞HSP70蛋白表达的变化以及DNA ladder观察HeLa细胞的凋亡变化。结果:45℃高温处理组细胞增殖的抑制最强,HSP70蛋白表达量最高,细胞凋亡程度最高,41℃次之,37℃最低。结论:高温可以增强热休克蛋白HSP70的表达,进而促进细胞的存活,抑制细胞凋亡。     

生物信息学技术在细粒棘球蚴热休克蛋白70重组疫苗研究中的应用

目的 通过基因序列分析,寻找细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)热休克蛋白基因(Heat shock pm-tein7,HSP70),为包虫病防治筛选新的候选疫苗抗原.方法 ①登录 GenBank 公共数据库,检索 EgHSP70目的基因序列.②对克隆基因进行测序,结果输入DNAStax、BioSun分析软件和互联网 SWISS-MODEI 数据库,对重组 EgHSP70 的特性、抗原表位及构象进行预测分析.结果 ①获得了具有完整开放阅读框的 EgHSP70核苷酸序列.②DNAStar分析软件推算氨基酸序列结果显示,EgHSP70由133个理论氨基酸组成,分子量约为14.53kDa.DNAStar、BioSun分析软件确定了重组 EgHSP70 可能的抗原表位.与其他动物热休克蛋白70氨基酸的同源性分析结果显示EgHSP70具有高度的保守性.结论 生物信息学技术在 EgHSP70 重组疫苗研究中有一定的理论和应用价值.