谷胱甘肽硫-转移酶研究进展

谷胱甘肽硫 -转移酶 (ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳ -ｔｒａｎｓｆｅｒａｓ ｅｓ,ＧＳＴｓ)是一组具有多种生理功能的蛋白质 ,主要存在细胞液中。在哺乳类动物各组织中均含有不同种类的ＧＳＴｓ,其含量和活性亦各不相同。其中以肝脏中含量最高 ,约占肝脏可溶性蛋白的 5%。ＧＳＴｓ能催化还原型的谷胱甘肽 (ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ,ＧＳＨ)的巯基 ( -ＳＨ)结合到疏水的化合物上 ,使亲电子的化合物变成亲水的物质 ,易于从胆汁或尿液中排泄[1 ] 。通过这种方式将体内各种有潜在毒性的物质及亲脂性化合物降解排出。某些ＧＳＴｓ同功酶含有非硒依赖…     

红细胞酶测定法及中国人正常值 Ⅲ.谷胱甘肽还原酶

红细胞谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)为谷胱甘肽代谢中一个重要的酶,它催化以下反应: GSSG NADPH H~ (?)2GSH NADP~ GSH(还原型谷胱甘肽)参与红细胞的氧化还原反应,对于保护红细胞不受氧化性损害,维持红细胞膜的稳定性具有重要的作用。已有人报导,GR缺乏者出现药物性溶血,而且GR缺乏还同再生障碍性贫血、白细胞减少症、血小板减少症、急性白血病、I型血友     

成都地区青年人群中血浆和红细胞还原/氧化型谷胱甘肽的含量及其氧化-还原电位的分布

目的 :测量谷胱甘肽还原型和氧化型在血浆内和红细胞内的含量 ,探讨GSH/GSSG及其氧化还原电位在健康人群的分布情况。方法 :在组织内谷胱甘肽荧光测量法的基础上 ,加以改进 ,对血浆和红细胞内的GSH/GSSG进行测定 ,并计算出GSH/GSSH的氧化还原电位。同时 ,探讨了冷冻保存和去蛋白处理对血浆和红细胞内GSH和GSSG的影响。结果 :改进后的方法具重复性好 ;准确性高 ,回收率在 98.7%和 97.5 % ;标准曲线呈明显线性等良好的测定效率。用本法对 42名年青年健康志愿者的新鲜血浆和红细胞液的谷胱甘肽进行测定 ,结果为 :血浆内GSH的范围为 8.64± 1 .40 μmol/L ,GSSG的范围为 1 .0 8± 0 .2 4μmol/L ,GSH/GSSG的比值为1 0 .2 7± 1 .5 4;红细胞内GSH的范围为 6.81± 1 .3 8μmol/LRBC ,红细胞内GSSG的范围为 0 .77± 0 .3 9μmol/LR BC ,GSH/GSSG的比值为 9.0 2± 3 .61。血浆GSH/GSSG的氧化还原电位为Eh =-2 1 3 .9mV± 4.94mV ;RBC液的Eh =-2 2 1 .4mV± 3 .1 6mV ,血浆内和红细胞内的GSH/GSSG比值以及电位值都呈正态分布。血浆和红细胞在 -80℃条件下保存后对GSH和GSSG的测定有一定影响 (p <0 .0 5 )。结论 :本文建立的GSH/GSSG测定方法具有良好的重复性、准确性 ;测得的青年人血浆和RBC液的GSH/GSSG比值以及     

硫代甲基化的药物遗传学:人体红细胞硫代甲基转移酶活性的遗传度

硫代甲基化是许多含巯基药物和毒物代谢的重要途径,例如巯甲丙脯酸和D青霉胺在人体内形成其5甲基衍生物。脂肪族化合物的硫化甲基化是由硫化甲基转移酶(TMT)催化的。TMT是膜结合的酶,这个酶已在实验动物和人体红细胞和肾脏所获得的膜标本上进行了研究。人体红细胞膜能催化许多药物的S甲基化,其中包括巯甲丙脯酸,D和L青霉胺、N乙酰胱氨酸以及安体舒通的巯基代谢物等。红细胞膜就存在     

慢性丙型肝炎患者氧化损伤的研究

目的 探讨慢性丙型肝炎(CHC)患者体内氧化损伤的情况.方法 52例CHC患者,按丙氨酸转氨酶(ALT)水平分为A组(ALT上升组)和B组(ALT正常组).正常对照组为20例健康志愿者.利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定研究对象血清黄嘌呤氧化酶(XOD),丙二醛(MDA),氧化型谷胱甘肽(GSSG),谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),谷胱甘肽巯基转移酶(GST),谷胱甘肽还原酶(GR)及维生素C(Vc)水平,并作出统计分析.结果 CHC患者血清XOD,MDA,GST和GR水平较正常对照组显著升高,而GSH,GSH-Px和Vc水平则明显降低.同时,A组患者血清XOD,MDA,GSSG,GST及GR水平较B组患者显著上调,而GSH,GSH-Px和Vc水平则显著下调.在CHC患者中,血清XOD,MDA,GSSG,GST水平与ALT水平呈正相关,血清GSH,GSH-Px,Vc与ALT水平呈负相关;血清XOD,MDA,GSSG,GR,GST水平与AST水平呈正相关,血清GSH-Px水平与AST水平呈负相关;血清GR水平与GGT水平呈正相关,血清GSH水平与GGT水平呈负相关;血清MDA,GR水平与AKP水平呈正相关.在CHC组中,仅血清XOD水平与血清HCV RNA水平间存在正相关关系.结论 CHC患者体内存在一定程度的氧化损伤,随血清ALT水平的升高,机体氧化损伤程度进一步加重.     

甲基丙烯酸环氧丙酯对大鼠肝脏谷胱甘肽含量的影响及其可能的生物学意义

大鼠一次经胃给予50mg/kg剂量的GMA(Glycidyl Methacrylate),两周后测定显示,其肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)含量显著降低,氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量明显增加,总谷胱甘肽库(GSH+GSSG)和GSH/GSSG比值亦显著减小,实验还表明,上述改变可能与GMA对不同种类DNA的损伤和基因变异作用密切相关。     

一种新的、敏感的检测HBsAg方法-嵌合抗体红细胞免疫技术的建立及初步应用

本文用异型双功能交联剂N-琥珀酰3-(2-Wbv啶基二硫)丙酸酯(SPDP)制备的高效价单克隆抗乙肝表面抗原-多克隆兔抗绵羊红细胞(Mc抗HBs-Pc抗SRBC)嵌合抗体替代ELISA中的酶标抗体,用绵羊红细胞(SRBC)代替酶的底物作为指示剂,建立了一种新的,敏感的固相嵌合抗体红细胞免疫技术(CEIA)。经初步检测HBV感染病人血清中的HBsAg,     

镰状红细胞的抗氧化剂系统

含有高亲和力的异常血红蛋白的红细胞膜易遭受强度增加的氧化剂作用。已经知道,HbS对红细胞膜的亲和力增强,而像状红细细对膜脂质的过氧化作用特别敏感。正常血红蛋白的自发性自身氧化则能产生氧的自由基,而含有异常血红蛋白的红细胞却处在氧化剂强度增加的情况下。因此,作者评价了20例杂合子型镰状细胞贫血患者的红细胞抗氧化剂系统的行为。对20名男性杂合子型镰状细胞贫血患者和68名正常男性对照组的红细胞超氧物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶与谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)活性,     

慢性乙型病毒性肝炎患者趋化因子IP-10、Rantes与氧化损伤的关系研究

目的 观察慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者血清趋化因子IP - 10、Rantes和氧化损伤的改变,探讨趋化因子和氧化应激在CHB发病机制中的作用.方法 采集70例CHB患者和10例健康志愿者血液标本,采用ELISA法检测血清趋化因子IFN-γ诱导蛋白10(IP-10)、正常T细胞表达分泌的活化调节因子(Rantes)表达水平及还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平,并进行相关性分析.结果 CHB患者血清IP-10、Rantes水平均明显高于健康对照者,并且IP-10、Rantes水平分别与丙氨酸转氨酶水平呈正相关.CHB患者GSH、GSH/GSSG水平均明显低于健康对照者,降低的GSH、GSH/GSSG水平分别与患者ALT水平呈负相关.IP-10、Rantes水平分别与GSH、GSH/GSSG呈负相关.结论 趋化因子和氧化应激相互作用,参与慢性乙型病毒性肝炎的发生和发展.     

老化红细胞的分离和鉴定

根据本实验室的工作,老化红细胞表面可结合自身IgG的特点,建立了一种新的分离年轻及老化红细胞的方法。由于Protein A可与IgG有特异结合,用活化的Sepharose 6MB结合Protein A制成亲和层析柱,以此分离老化红细胞。同时对分离的红细胞作了谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氨酶、6-磷酸脱氢酶的活性和变形性及吞噬情况的比较。     

谷胱甘肽胞外发酵研究进展

<正>谷胱甘肽(glutathione,GSH),即γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸,是广泛存在于生物体内的生物活性三肽化合物。半胱氨酸残基上的巯基使其在生物体内发挥重要的生理功能,如抗氧化[1]、解毒[2]和免疫调控[3]等。谷胱甘肽已经被广泛应用于医药、食品和化妆品行业。有关谷胱甘肽生物合成和代谢的开拓性研究是由Meister和Anderson[4]完成的,从而可实现其酶催化法或发酵法生产,随后日本科学家进行了很多相关的研究,并于20世纪80年代初实现了谷胱甘肽的商业化发酵生产。     

乙二醛酶Ⅰ的多态现象及其与疾病的关系

乙二醛酶 I(glyoxalase Ⅰ,简称 GLO)又称为乳酰谷胱甘肽裂解酶(lactoyl-glu-tathione lygase),是乙二醛酶系中的第一个酶。这个酶系广泛分布在动植物及微生物中,催化α-酮基醛类转化为α-羟基酸。自从1975年 K(?)mpf 等在发现人红细胞的 GLO 存在多态现象以来,已对其进行了许多研究,发现控制 GLO 多态现象的基因与 MHC 连锁在     

有机硅固胰酶衍生物的研究

发现在有机硅单体或聚合物分子上引入各种生物酶,其生成物具有高效、特异催化性能,有的达到固定酶的作用。用甲基三乙氧基硅烷、正硅酸乙酯和胺烷基三乙氧基硅烷等有机硅化合物共水解缩合制得的含有氨基的有机硅树脂(后称硅树脂)。将这些硅树脂作为固定酶的载体,通过N、N′-二环己基羰二亚胺(简称DCCI)把胰酶上的游离羧基与硅树脂上的游离氨基缩合成肽键,合成了具有生物活性的有机硅固胰酶衍生物。其反应示意如下:     

总谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽的测定方法

谷胱甘肽在机体内的广泛分布和多功能性愈来愈引起医学和生物学工作者的注意。特别是近年来许多研究课题都涉及到细胞对活性氧和自由基的防御作用。测定生物样品中还原型和氧化型谷胱甘肽(简称GSH和GSSG)含量变化是机体氧化物牵累(oxidant stress)的重要指标。     

D-半乳糖调控SD大鼠大脑皮质巯醇抗氧化物(酶)致衰老的作用研究

构建D-半乳糖(D-gal)致衰老模型,探讨D-gal诱导衰老的分子机制,为临床治疗阿尔茨海默病(AD)提供理论依据。腹腔注射D-gal构建SD大鼠衰老模型,采用Morris水迷宫实验(MWM)进行行为学检测,采用化学比色法检测大脑皮质一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、铜锌-过氧化物岐化酶(Cu,Zn-SOD)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽s-转移酶(GSH-ST)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA),总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢(H2O2)的含量。结果显示:衰老模型组与正常对照组比较:逃避潜伏期明显延长(P<0.05),在第III象限逗留的时间明显减少(P<0.05),跨越平台次数明显减少(P<0.05);皮质MDA、H2O2和NO的含量增加(P<0.05),SOD、GSH、GSH-ST、GSH-Px和T-AOC的含量降低(P<0.05),而NOS的含量没有明显变化(P>0.05)。结果提示,D-gal能通过调控内源性巯基抗氧化物(酶)和NO的表达,减退学习记忆能力,而诱导SD大鼠神经系统的衰老。     

还原型谷胱甘肽靶向氧化应激对肝癌干细胞的作用

目的探讨还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)干细胞性的作用。方法采用总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(T-GSH/GSSG)测试盒检测细胞内T-GSH/GSSG水平;应用CCK-8实验评估细胞活力及干细胞培养基培养干细胞球(HCC sphere);运用流式细胞技术分析CD133阳性细胞亚群比例。结果 HCC细胞中内源性T-GSH/GSSG水平比正常细胞显著升高。外源性补充GSH减少胞内活性氧物质(reactive oxygen species, ROS)并抑制HCC细胞活力及HCC sphere形成。进一步分析发现GSH显著降低CD133~+肝癌干细胞(liver cancer stem cells, LCSC)的亚群比例。结论 HCC细胞中ROS水平及抗氧化防御能力增强。外源性GSH能够降低胞内的ROS水平,并抑制HCC细胞活力及干细胞性,降低LCSC在HCC细胞中的亚群比例。为靶向异常氧化应激(oxidative stress,OS)及肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)治疗HCC提供了新靶点。     

大鼠附睾组织中Cu,Zn-SOD和CAT免疫金银法定位

哺乳类动物体内存在一个完整的抗氧化防御系统,防止氧及其代谢物对机体的毒性反应。机体中的抗氧化系统包括非酶性和酶性抗氧化剂,其中抗氧化酶主要有超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxi-dase,GSH-Px)、谷胱甘肽转硫酶(glutathionetrasferase,GSH-Tr)等。本文选取了SOD和CAT两个酶作为研究对象,研究它们在附睾组织中的定位。附睾和附睾精子内的抗氧化酶系,对精子产生的活性氧具有一定的控制和清除作用,使附睾精子内的自由基变化维持在一定的生理水平,有助于…     

谷胱甘肽改善线粒体功能障碍减轻小鼠酒精性肝损伤

目的制备小鼠酒精性肝病动物模型,给予还原型谷胱甘肽,观察模型小鼠肝线粒体功能及肝损伤恢复情况。方法C57BL/6J雄性小鼠30只随机分为对照组(Control)、模型组(ALD)、干预组(Glutathione),每组10只。实验结束后处死小鼠进行取材,对小鼠及肝脏进行称重,对肝脏进行病理分析,TUNEL染色检测模型组和干预组肝细胞凋亡情况。检测血液生化指标ALT、AST、TG,比较各组肝组织谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的比值(GSH/GSSG)。结果与对照组相比,模型组小鼠肝重比升高,与模型组相比,干预组小鼠肝重比降低(P<0.05)。模型组小鼠肝脏有气球样变性和脂质沉积,细胞凋亡数量明显多于对照组,干预组小鼠肝脏空泡样病变和脂质沉积减轻,细胞凋亡数量少于模型组(P<0.05)。血清ALT、AST和TG水平模型组比对照组升高(P<0.05),干预组比模型组下降(P<0.05)。肝组织GSH/GSSG水平模型组比对照组显著下降,干预组比模型组显著上升(P<0.05)。结论谷胱甘肽减轻小鼠酒精性肝病模型肝损伤,与改善线粒体功能障碍相关。     

恶性肿瘤组织的氧化还原态及其抗氧化能力的改变

目的：探讨恶性肿瘤组织的氧化-还原态及其抗氧化能力的改变。 方法： 42例原发性消化道恶性肿瘤（食管癌13例、胃癌14例及结直肠癌15例），以其相对应的癌旁正常粘膜组织为对照，测定其谷胱甘肽氧化还原对（GSH、GSSG）的含量及辅酶Ⅱ氧化还原对（NADPH、NADP+）的含量，并据此计算出GSH/GSSG、NADPH/NADP+比值以及GSH/GSSG氧化还原电位值、NADPH/NADP+氧化还原电位值。 结果： 癌组织中的GSH、NADPH含量明显高于癌旁组织(P＜0.01)。GSH/GSSG、NADPH/NADP+的氧化-还原电位轻度还原偏移(P＜0.05)。而GSSG含量及NADP+含量则与对照组无明显差异(P＞0.05)。 结论： 消化道恶性肿瘤组织的GSH、NADPH含量明显升高，提示其抗氧化能力明显增强；而在此基础上，其氧化-还原电位仅较癌旁组织轻度偏向还原方向，提示癌组织内仍存有较明显的氧化应激态。     

精神分裂症伴2型糖尿病抗氧化酶与空腹血糖的分析

目的:探讨伴有2型糖尿病的精神分裂症患者抗氧化酶与空腹血糖的关系。方法:收集精神分裂症伴2型糖尿病患者67例(受试组),健康对照组59例(正常对照组),两组性别、年龄的差异无统计学意义。检测空腹血糖(FBG)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)水平,及空腹血糖(FBG)与过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的相关性。结果:1受试组空腹血糖(FBG)较正常对照组升高(t=18.92,P=0.000),受试组过氧化氢酶(CAT)较正常对照组降低(t=-3.54,P=0.000);受试组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)较正常对照组降低(t=-4.28,P=0.000);2Pearson相关分析表明,受试组过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)与空腹血糖(FBG)存在负相关(r=-0.66,-0.74;P=0.000)。结论:精神分裂症伴2型糖尿病患者抗氧化酶降低,存在氧化应激;抗氧化酶的水平与空腹血糖存在负相关,氧化应激可能参与抗精神病药物引起糖代谢异常的中间机制。