灵芝孢子油、破壁灵芝孢子粉及灵芝孢子提取物对小鼠急性胃溃疡的保护作用

目的 探讨灵芝孢子油、破壁灵芝孢子粉及灵芝孢子提取物对小鼠急性胃溃疡的影响。方法 雄性ICR小鼠随机分为12组：对照组,模型组,奥美拉唑（阳性药,4 mg·kg^-1）组,灵芝孢子提取物低、中、高剂量（0.2、0.4、0.8 g·kg^-1）组,破壁灵芝孢子粉低、中、高剂量（0.6、1.2、2.4 g·kg^-1）组,灵芝孢子油低、中、高剂量（0.2、0.4、0.8 g·kg^-1）组,每组20只。ig给药,每天1次,对照组和模型组给予等体积的生理盐水。连续给药7 d后,禁食12 h,除对照组外,每组随机选取10只小鼠ig无水乙醇（10 mL·kg^-1）建立急性胃溃疡模型,1.5 h后取材;每组余下10只小鼠ig吲哚美辛（40 mg·kg^-1）建立急性胃溃疡模型,3 h后取材。观察小鼠的一般状况、胃出血和溃疡情况,进行胃损伤评分,计算损伤抑制率和损伤发生率。结果 各组小鼠给药过程中无异常。小鼠给予无水乙醇后,模型组和奥美拉唑组10 min后开始出现行动变缓,肢体活动不协调,呼吸加深、频率减慢等症状,而给予灵芝孢子提取物、破壁灵芝孢子粉和灵芝孢子油的小鼠在30 min后才陆续出现症状;给予吲哚美辛的小鼠自主活动减少,各组之间无差别;对照组小鼠行为活动如常。与对照组比较,小鼠经无水乙醇、吲哚美辛ig导致非常明显的胃溃疡,胃损伤评分显著升高（P<0.01）,损伤发生率为100%;与模型组比较,预防性给予灵芝孢子提取物、破壁灵芝孢子粉、灵芝孢子油可明显降低胃出血或溃疡等胃黏膜损伤,其中灵芝孢子提取物高剂量组、破壁灵芝孢子粉组、灵芝孢子油组的胃损伤评分显著降低（P<0.01）,损伤抑制率显著提高（P<0.01）,损伤发生率明显降低。结论 灵芝孢子油、破壁灵芝孢子粉及灵芝孢子提取物能有效抑制小鼠急性胃溃疡的发生,灵芝孢子油效果最佳,破壁灵芝孢子粉次之,并且对于无水乙醇导致的急性胃溃疡抑制作用尤为显著。     

灵芝孢子多糖抗移植性肿瘤实验研究

目的 研究灵芝孢子多糖的抗癌作用。方法 采用小鼠抗移植性肿瘤实验方法。结果 灵芝孢子多糖分别以150 mg·kg^-1、300 mg·kg^-1和600 mg·kg^-1剂量连续12天灌胃给药,对小鼠移植性肝癌Heps的抑瘤率为53.77%～65.25%;连续8天灌胃给药,对小鼠移植性肉瘤S₁₈₀的抑瘤率为50.39%～55.04%,皆呈良好的抑瘤作用。灵芝孢子多糖可分别提高Heps和S₁₈₀荷瘤小鼠的脾指数和胸腺指数。结论 灵芝孢子多糖有良好的抑瘤作用,并可增强Heps和S₁₈₀荷瘤小鼠的非特异性免疫功能。     

灵芝孢子油三萜类化合物的高效液相指纹图谱研究

建立灵芝孢子油所含三萜类组分的高效液相指纹图谱,利用Agilent高效液相色谱仪对10批次灵芝孢子油进行了分析。结果显示,10批次的灵芝孢子油样品均出现10个主要特征峰,相对保留时间分别为0.41,0.33,0.32,0.30,0.29,0.26,0.26,0.28,0.32和0.60,并且10批次的灵芝孢子油样品的10个主峰面积均在80%以上,重叠率均在90%以上。     

破壁灵芝孢子油急性毒性与致突变性的研究

目的观察破壁灵芝孢子油的急性毒性及致突变作用。方法分别进行急性毒性实验、骨髓嗜多染红细胞微核实验、精子畸形实验。结果破壁灵芝孢子油对雌雄小鼠经口半数致死量(LD50)均大于10g/kg体重,为实际无毒级物质;骨髓嗜多染红细胞微核实验和精子畸形实验未发现破壁灵芝孢子油对小鼠有致突变作用。结论破壁灵芝孢子油是一种安全而且具有很高药用和食用价值的物质。     

灵芝孢子多糖抗移植性肿瘤实验研究

目的研究灵芝孢子多糖的抗癌作用。方法采用小鼠抗移植性肿瘤实验方法。结果灵芝孢子多糖分别以150 mg.kg-13、00 mg.kg-1和600 mg.kg-1剂量连续12天灌胃给药,对小鼠移植性肝癌Heps的抑瘤率为53.77%~65.25%;连续8天灌胃给药,对小鼠移植性肉瘤S180的抑瘤率为50.39%~55.04%,皆呈良好的抑瘤作用。灵芝孢子多糖可分别提高Heps和S180荷瘤小鼠的脾指数和胸腺指数。结论灵芝孢子多糖有良好的抑瘤作用,并可增强Heps和S180荷瘤小鼠的非特异性免疫功能。     

灵芝孢子油的研究进展

灵芝孢子油是通过超临界二氧化碳流体萃取技术从破壁的灵芝孢子中提取的油状脂质物,具有抗肿瘤、增强免疫及保肝护肝等多种生物活性.本文综述近年来灵芝孢子油在提取工艺、化学成分及药理活性方面的研究状况,以期为下一步灵芝孢子油的研究工作提供线索.     

灵芝孢子油指纹图谱研究及其混淆品鉴别

目的 建立灵芝孢子油HPLC指纹图谱并鉴别其油类混淆品。方法 采用ACCHROM Unitary-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-异丙醇(51：49)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,蒸发光散射检测器的HPLC方法。结果 建立了灵芝孢子油脂肪酸酯类成分HPLC指纹图谱,确定了8个共有峰,分别为三亚油酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-棕榈酸甘油酯、1,2-二油酸-3-亚油酸甘油酯、1-棕榈酸-2-油酸-3-亚油酸甘油酯、三油酸甘油酯、1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯、1,2-二油酸-3-硬脂酸甘油酯。灵芝孢子油混淆品的图谱与灵芝孢子油指纹图谱有明显区别。结论 建立的灵芝孢子油脂肪酸酯类成分指纹图谱能很好地区别灵芝孢子油和其混淆品。     

灵芝孢子油急性毒性及致突变性研究

目的了解灵芝孢子油的毒理学安全性。方法小鼠急性毒性试验和遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验)。结果灵芝孢子油的小鼠经口LD50>20 g.kg-1BW,为实际无毒级物质;在Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验中均呈阴性反应,未显示致突变作用。结论灵芝孢子油基本无毒性和无致突变性。     

灵芝孢子油对H22荷瘤小鼠肿瘤生长及瘤细胞VEGF表达的影响

目的观察灵芝孢子油对荷H22瘤小鼠肿瘤生长及瘤细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨该药抑制肿瘤的作用是否与抑制肿瘤血管生成有关。方法小鼠右腋皮下接种H22瘤细胞(浓度1×107/ml),0.2 ml/只,给药12天后,处死动物,剥离瘤块称重,计算肿瘤生长抑制率,用免疫组织化学法检测各组小鼠肿瘤组织中VEGF的表达程度。结果与模型组比较,灵芝孢子油对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01)。造模后各组小鼠VEGF均为阳性表达,灵芝孢子油各组可降低小鼠H22瘤组织中VEGF的阳性表达(P<0.05,P<0.01)。结论灵芝孢子油对H22移植性癌细胞生长有抑制作用,可降低瘤细胞中血管生成调控基因VEGF的表达。     

灵芝孢子油对人肺腺癌LTEP-a2细胞凋亡的影响

目的 观察灵芝孢子油对人肺腺癌细胞LTEP-a2增殖、凋亡与miR-16及其靶基因表达的影响,从miRNA角度揭示灵芝孢子油的抗肿瘤机制.方法 灵芝孢子油处理人肺腺癌细胞LTEP-a2 24和48 h后,采用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况,real-time PCR 检测miR-16及其靶基因bcl2和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 灵芝孢子油呈剂量、时间性地抑制人肺腺癌LTEP-a2细胞的增殖;当灵芝孢子油浓度达到2 μL·mL-1,细胞形态发生明显变化;Annexin-V/PI双染检测提示,灵芝孢子油在低浓度下就可促进细胞凋亡;灵芝孢子油可显著上调LTEP-a2细胞中miR-16的表达并相应下调bcl2和VEGF基因的表达.结论 灵芝孢子油能显著抑制人肺腺癌细胞LTEP-a2细胞增殖,引起细胞形态学改变.其作用机制之一是上调miR-16的表达、下调Bcl2和VEGF的表达,从而促进肺癌细胞凋亡,达到抗肿瘤的效果.     

HPLC测定灵芝孢子油中灵芝酸C1的含量

目的 建立灵芝孢子油中灵芝酸C1的含量测定方法。方法 采用Agilent Zorbax-SB C8 ( 150 mm×4.6 mm,3.5 μm)色谱柱,以乙腈- 0. 1%醋酸（25：75）为流动相,流速为1. 0 mL·min-1 ,检测波长256 nm,柱温22℃。结果 灵芝酸C1在1～25.04μg· mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为97.47%。不同来源的灵芝孢子油中灵芝酸C1含量有一定差别且灵芝酸C1含量均较低,部分样品中不含有灵芝酸C1。结论 该方法简便准确,重现性好,可为灵芝孢子油的质量控制提供参考依据。     

灵芝孢子油对大鼠肝纤维化的干预作用

目的 探讨灵芝孢子油对大鼠肝纤维化的影响。方法 选择40% CCl₄皮下注射诱导SD大鼠肝纤维化形成,造模同时用低、中、高剂量（0.33,0.67,2.00 g·kg^-1）灵芝孢子油灌胃干预（每组10只）,观察血浆谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、丙二醛（MDA）、透明质酸（HA）和肝组织MDA、羟脯氨酸（HyP）等的变化,肝组织HE和Masson染色观察病理变化。结果 灵芝孢子油能显著降低CCl₄所致的肝纤维化大鼠血浆AST、ALT、MDA、HA水平（P<0.05）,降低肝组织HyP、MDA含量（P<0.05）,肝脏病理显示纤维化程度明显减轻（P<0.05）。结论 灵芝孢子油对CCl₄诱导的大鼠肝纤维化具有保护作用。     

破壁灵芝孢子质量标准研究

目的:探讨建立破壁灵芝孢子的质量控制方法.方法:采用薄层色谱法,以灵芝对照药材为对照,鉴别破壁灵芝孢子,考察破壁灵芝孢子的含水量、总灰分、色泽均匀度与粒径分布.采用紫外-可见分光光度法测定破壁灵芝孢子三萜类化合物的含量.结果:各检查相方法成熟;供试品色谱中,在与灵芝对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;以紫外-可见分光光度法测定破壁灵芝孢子中三萜类物质(以齐墩果酸(C30H48O3)计)方法简单,可靠.结论:该质量标准的研究为破壁灵芝孢子质量标准的制定以及破壁灵芝孢子三萜类成分的深入研究提供了参考.     

灵芝孢子粉抗肝纤维化作用的实验研究

目的观察破壁灵芝孢子粉对CCL4诱导的大鼠肝纤维化的影响。方法CCL4诱导大鼠肝纤维化动物模型,观察破壁灵芝孢子粉对大鼠肝纤维化形成过程中转化生长因子β1、金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响及肝脏组织学变化。结果破壁灵芝孢子粉明显减少肝脏胶原沉积,可以明显降低TGF-β1．TIMP-1的表达(P<0．05)。结论破壁灵芝孢子粉可通过下调TGF -β1、TIMP-1抑制胶原合成及加强胶原分解,从而抑制肝纤维化形成。     

HPLC-ELSD测定灵芝孢子油中甘油三酯的含量

目的 采用HPLC-ELSD法研究灵芝孢子油中甘油酯组成。方法 采用ACCHROM Unitary- C₁₈色谱柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈－异丙醇(51:49),流速1.0 ml/min,柱温30℃,检测器为蒸发光散射检测器。结果 甘油三亚油酸酯、1,2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-棕榈酸甘油酯、1,2-二油酸-3-亚油酸甘油酯、1-棕榈酸-2-油酸-3-亚油酸甘油酯、甘油三油酸酯、1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯、1,2-二油酸-3-硬脂酸甘油酯的线性范围分别为0.02870～0.8610 μg、0.1468～4.404 μg、0.05075～1.523 μg、0.2796～8.388 μg、0.2421～7.263 μg、0.6132～18.40 μg、0.3416～10.25 μg、0.06915～2.075 μg(r₂ = 0.9993,0.9988,0.9994,0.9993,0.9989,0.9989,0.9990,0.9995),加样回收率分别为103.3%,99.4%,103.3%,97.9%,100.7%,105.1%,96.4%和106.2%,RSD分别为4.9%,5.4%,3.8%,5.0%,5.7%,4.0%,4.6%和3.3%。灵芝孢子油中8个甘油酯中相对含量较高的依次是1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯、甘油三油酸酯、1,2-二油酸-3-亚油酸甘油酯、1-棕榈酸-2-油酸-3-亚油酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-油酸甘油酯,约占8个成分总量的90%。结论 该方法简便、专属性、重复性良好,可为灵芝孢子油的品质鉴定及油脂掺伪鉴别提供理论依据。     

聚多糖锌抗小鼠移植性肿瘤实验研究

饮食性缺锌是世界性问题。目前常用的补锌剂多为无机锌,以酵母为微量元素载体,我院研制出富锌酵母。该制品不但具有微量元素营养的生物学效应,还大大降低了无机锌所表现的毒性,同时富锌酵母还有多种药理作用。本文报导用富锌酵母制备的聚多糖锌对小鼠移植性肿瘤的作用结果。 1 材料和方法 1.1 动物:昆明种小白鼠,雌雄各半,体重18～22g,由省药检所动物室提供。 1.2 瘤株:小白鼠肝癌H_(22),瘤株由贵阳医学院病理教研室惠赠,小鼠肉瘤S_(180)株由遵义医学     

HPLC法测定灵芝孢子油中甘油三油酸酯含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定灵芝孢子油中甘油三油酸酯含量的方法。方法:色谱柱为Kromasil100-5C18,流动相为乙腈-异丙醇(53∶47),流速为1.0mL/min,蒸发光散射检测器检测。结果:甘油三油酸酯在2.290~13.740μg范围内线性关系良好,r=0.9996,平均回收率为99.10%,RSD为1.65%。结论:该方法准确可行、重复性好,可作为灵芝孢子油及其制剂质量评价的方法之一。     

灵芝破壁与不破壁孢子显微鉴定的制片效果比较

在灵芝孢子粉的显微鉴定中,对水、甘油醋酸、水合氯醛、95％乙醇等4种试剂的制片效果作了比较,总结出灵芝破壁与不破壁孢子显微鉴定的制片技巧,以和同行商榷。1 材料、仪器与试剂 灵芝孢子粉。电子天平(BP2211北京赛多利斯天平有限公司)生物显微镜(GALEN-Ⅲ型南京江南光电(集团)股份有限公司)。蒸馏水、甘油醋酸、水合氯醛、95％乙醇。     

破壁灵芝孢子粉胶囊的TLC鉴别研究

目的研究破壁灵芝孢子粉胶囊的TLC鉴别方法。方法通过对集中提取及展开系统的比较，发现最佳方法。结果对破壁灵芝孢子粉的TLC鉴别应选择用GF254板，用石油醚（60-90℃）：甲酸乙酯：甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂。结论该法具有操作步骤简单、分离时间短的优点，而且TLC的鉴别效果很好，也能很好把破壁灵芝孢子粉和灵芝区别开来。