目前真菌药敏试验常用哪些方法?

答 :目前真菌药敏试验常用的固基法有纸片扩散法其中以Ｅ ｔｅｓｔ法较常用 ,可用于酵母样真菌和丝状真菌 ;固基琼脂稀释法只用于部分丝状真菌如皮肤癣菌。液基法包括多量法和微量法 ,两者仅终体积有差别 ,多用于酵母样真菌和产孢的丝状真菌。美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)于 1 997公布了酵母菌的液体培养基药物敏感试验推荐方案(Ｍ2 7 Ａ) ,1 998年公布了针对产孢丝状真菌药敏试验的Ｍ38 Ｐ方案。上述两个方案规定了酵母菌和产孢丝状菌药敏试验的各个细节 ,被多个实验室采用 ,重复性较好 ,但是还有许多问题需要解决 ,如试验时间…     

微量法检测曲霉对六种抗真菌药物的敏感性

１９９７年美国国家临床实验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ）公布了Ｍ２７Ａ方案,即酵母菌的液体培养基稀释法抗真菌药物敏感试验标准方案,表明酵母菌的体外药敏试验已趋于标准化,而丝状真菌药敏试验还在不断发展。我们以此方案中的微量法为基础,探讨并建立曲霉的标准化药敏试验方法。一、材料和方法１－试验菌株来源：受试菌株３１株：烟曲霉１４株、黄曲霉８株、黑曲霉５株、构巢曲霉３株和土曲霉２株。试验菌株由临床株和环境株组成,主要由北京医科大学第一医院、中国科学院微生物研究所等提供。２－抗真菌药物包括：５氟胞嘧啶（５…     

美国临床实验室标准化委员会2003年版产孢丝状真菌药敏试验方案简介

美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1997年版推出了关于酵母菌的液体培养基稀释法(全量法与微量法)抗真菌药物敏感性试验方案M27-A。该方案准确性高、重复性好，实验室间结果的一致性可以与抗细菌的药物敏感试验相媲美。之后，NCCLS1998年版又提出了关于产孢丝状真菌的抗真菌药敏试验倡导方案M38-P。该方案包括微量液基稀释法与多量液体培养基稀释法，     

采用NCCLS M27-A方案微量法检测念珠菌对抗真菌药物的敏感性

为了解我国临床分离菌株对常用抗真菌药物的敏感性、观察氟康唑耐药株对伊曲康唑和酮康唑是否存在交叉耐药[1] ,本试验采用美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)1997年公布的Ｍ2 7 Ａ方案的微量稀释法测定了 6种常用抗真菌药物对 80株念珠菌的ＭＩＣ值。一、材料与方法1.试验菌株 :本试验所采用的菌株及其来源如下 :受试菌株为 80株念珠菌 ,包括 :白念珠菌 (Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ) 4 7株(临床分离株 40株、ＡＴＣＣ模式株 2株和 5株氟康唑耐药株 )、近平滑念珠菌 (Ｃ .ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ) 9株 (临床分离株 7株、ＡＴＣ…     

微量显色酵母菌药敏试验方法初步应用

临床酵母菌目前已成为医院感染的主要菌群之一 ,体外药敏试验对于合理筛选抗真菌药物 ,发现耐药菌株等有重要意义[1] 。为此 ,我们参照文献 [2 ]介绍一种“ＹｅａｓｔＯｎｅ微量稀释显色法酵母菌药敏试验”方法 ,并以美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)推荐的“Ｍ2 7 Ａ”方法为参考 ,对其方法学特点作初步评价。一、材料和方法1 菌株来源 :2 0 0 0年 5月～ 2 0 0 1年 5月间从各类临床标本中分离到的酵母菌共 130株 ,按常规方法和ＡＰＩ 2 0ＣＡＵＸ ,或用ＹＢＣ卡经ＶＩＴＥＫ仪器 (生物梅里埃公司 )鉴定 ,其中包括白念珠菌、热带念…     

酵母菌的 NCCLS 药敏试验方法及其应用

应读者要求，特邀王文莉等详细介绍１９９２年美国国家临床试验标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）公布的《酵母菌液基稀释法抗真菌药物敏感试验参考方案》的具体内容。包括试验用抗真菌药物的来源、母液的制备及其贮存方法；培养基的配制及其缓冲液的选择；具体的试验操作步骤及其质量控制；入选的试验用参照菌株等。另外，以附录形式简单介绍了作者所在真菌中心采用此方案进行的１３５株酵母菌的氟康唑药敏试验结果以及应用此方案的体会。总之，ＮＣＣＬＳ方案重复性好、准确性强，虽操作步骤比较复杂，但仍不失为一种可行的药敏试验方法，并为尽早与国际接轨，为致病酵母菌耐药性标准的确立，提供参考。     

美国NCCLS 2002年版抗生素药敏试验操作标准更新内容

美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)于 2 0 0 2年出版的抗生素药敏试验操作标准Ｍ1 0 0 Ｓ1 2文件[1 ] ,变更内容归纳如下。一、仅有“敏感”判定标准的细菌和抗生素的总评论迄今为止 ,一些细菌对某些抗生素尚未发现“中介度”和“耐药”菌株 ,因此在标准中只有“敏感”的判定折点 ,而未设定“中介度”和“耐药”的判定折点。如果临床遇到如下所列的细菌与相应抗生素药敏试验结果不敏感时 ,应当重复菌株的鉴定和药敏结果 ,同时将菌株送往参考实验室 ,用ＮＣＣＬＳ参考稀释法确认结果。仅有“敏感”判定标准的细菌和抗生素及判定折点…     

简介美国NCCLS抗生素药敏试验操作标准(2001年版)变更内容

美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)在 2 0 0 0年召开的抗生素药物敏感试验委员会分会上 ,对 1999年以及以前出版的需氧菌的纸片扩散法 (Ｍ2 )和稀释法 (Ｍ7)药敏试验文件、表格等部分内容作了重要变更 ,更改内容编入 2 0 0 1年 1月出版的第 11版信息增刊 (Ｍ10 0 Ｓ11) [1] 。在Ｍ2文件中有新增的信息 2 2处 ,更改 9处和删除 1处 ;Ｍ7文件中有新增信息 2 2处 ,更改 6处和删除 1处。现将Ｍ10 0 Ｓ11文件中变更之处摘录整理 ,供读者参考。Ａ组主要试验及报告的抗生素 (Ａ组 ) ;Ｂ组主要试验及选择性报告的抗生素 (Ｂ组 ) ;Ｃ组补充试…     

简介美国NCCLS药敏试验法规(1999年1月版)的变动部分

１９９９年１月美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）出版的《药敏试验实施标准;第９次信息补充》（Ｍ１００Ｓ９）文件［１］对当前在临床上有重要意义的耐药菌株的检测做了许多的补充和修改。如新版本对于产超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）株的检测、耐苯唑西林的凝固酶阴性的葡萄球菌（ＭＲＳＣｏＮ）的检测,进行了修改;增添幽门螺杆菌的药敏试验的操作规程和判定标准;补充肠球菌药敏试验的注意事项;补充几种新药的判定标准。１关于肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌中ＥＳＢＬ株的检测方法：新版本中修改要点包括…     

沙门菌属细菌药敏试验的误区

美国实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)抗微生物敏感试验纸片法执行标准中指出 :对沙门菌属的药敏试验仅测试氨苄西林、ＴＭＰ/ＳＭＺ、喹诺酮类 ,对肠道外菌感染加试氯霉素和一种三代头孢菌素。并且明确强调对于氨基糖甙类 ,一、二代头孢类 ,即使体外有活性 ,临床却无效 ,故不宜报告为敏感。由于以前ＮＣＣＬＳ的规则在我国不够普及 ,所以常有错误报告 ,如赵宏等报道 (上海医学检验杂志 ,1999,(2 )∶77) ,330株伤寒沙门菌对庆大霉素、卡那霉素、头孢唑啉的敏感率均为10 0 % ,丁胺卡那霉素为 91 6 7%。陈有土报道 (临床检验杂志 ,2 0 0 0 ,18…     

CTX-M-3和CMY-2型β-内酰胺酶在台湾南部临床大肠埃希菌分离株中的播散

研究背景 :近年来 ,越来越多的非ＴＥＭ和非ＳＨＶ型ＥＳ ＢＬＳ如ＣＴＸ Ｍ型 ,ＴＯＨＯ 1型等在世界范围内发展 ,对产此类ＥＳＢＬＳ的菌株及临床意义目前知之不多。本文首先报道远东地区ＣＴＸ Ｍ 3的存在并检出ＣＭＹ 2型ＡｍｐＣ酶。材料与方法　从 1 999年 1月 9月 ,台湾南部ＮａｔｉｏｎａｌＣｈｅｎｇＫｕｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ医院病理科共收集 2 0 4 7株大肠埃希菌 ,在研究中采用琼脂稀释法测定ＭＩＣ ,ＮＣＣＬＳ推荐的表型确证试验测ＥＬＢＬＳ ,等电聚集电泳 ,ＰＣＲ及ＤＮＡ测序测定 β 内酰胺酶的型别 ,结合试验和质粒分…     

微量法检测念珠菌对三唑类药物敏感性与交叉耐药性

应用美国临床实验室标准化委员会推荐微量法测定酵母菌最低抑菌浓度，并检验其重复性和准确性，观察氟康唑耐药株对伊曲康唑是否存在交叉耐药性。方法参照ＮＣＣＬＳ推荐的药敏试验方案微量稀释法，检测２５株氟康唑耐药性白珠菌及４８株临床分离株对氟及伊曲康唑的敏感性。     

MH肉汤增菌在复方新诺明药物敏感试验中的重要性

美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)规定用Ｋ Ｂ法进行复方新诺明 (ＳＭＺｃｏ)药敏试验之前 ,首先用ＭＨ肉汤增菌 6ｈ ,以去除分离培养基中胸腺嘧啶核苷对ＳＭＺｃｏ的影响。我们对临床分离的 148株致病菌 ,在进行ＳＭＺｃｏ药敏试验时 ,采用直接法 (用ＭＨ和ＬＢ两种培养基检测 )和增菌后用ＭＨ培养基检测 ,对试验结果进行比较 ,报告如下。1　材料与方法1 1　菌株　自本院住院和门诊病人的血液、胸水、腹水、痰液、尿液及各种脓性分泌物中分离共 148株。经Ｖｉｔｅｋ 32仪鉴定其中金黄色葡萄球菌 2 9株 ,凝固酶阴性葡萄球菌 32株 ,…     

Neo-Sensitab纸片法与微量稀释法检测常见酵母菌对酮康唑敏感性的比较

目的　探讨Neo Sensitab纸片法检测酵母菌对酮康唑的敏感性及与美国国家临床实验室标准化委员会 (NCCLS)的微量稀释法的符合率。方法　采用Rosco酵母真菌药敏纸片对 4 2株常见临床分离的酵母菌作了检测 ,同时根据NCCLS的M 2 7A方案采用微量稀释法测定了对酮康唑的最小抑菌浓度 (MIC) ,并对结果作比较分析。结果　Neo Sensitab抗真菌药敏纸片法与微量稀释法检测的 4 2株致病酶母菌对酮康唑的敏感性符合率为 95 .2 4 %。结论　Neo Sensitab抗真菌药敏纸片法具有操作简便、观察时间短、成本低廉等优点 ,在临床具有良好的实用性 ,能及时为临床医生在选择治疗方案时提供参考。     

超广谱β—内酰胺酶的两种实验室检测方法比较

医院实验室多数采用双纸片协同试验检测超广谱 β -内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ) ,而ＮＣＣＬＳ推荐双纸片增效试验为ＥＳＢＬｓ的确证试验。我们根据ＮＣＣＬＳ推荐的纸片扩散法筛出可疑产ＥＳＢＬｓ的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,再用双纸片协同试验与双纸片增效试验方法进行测试 ,结果分析如下。1　材料与方法1 1　菌株　我院 1999年 10月～ 2 0 0 0年 1月从临床各类标本中分离鉴定出的Ｅ ｃｏｌｉ(大肠埃希菌 )和Ｋ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ(肺炎克雷伯菌 ) ,根据ＮＣＣＬＳ 1999年版推荐的纸片扩散法 ,头孢噻肟 (ＣＴＸ)≤ 2 7ｍｍ、头孢他啶 (Ｃ…     

1135株革兰阴性杆菌对头孢菌素耐药情况分析

通过对１９９２～１９９４年院内感染的１１３５株革兰阴性杆菌对头孢菌素的耐药分析，指导临床合理用药。方法：应用ＶＩＴＥＫＡＭＳ－６０自动微生物分析仪，Ｋ－Ｂ法对菌株进行鉴定，药敏试验，并按美国临床实验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ）标准分析，质控，结果，药敏质控符合ＮＣＣＬＳ标准，１１３５株革兰阴性杆菌对头孢呋肟，头孢哌酮等耐药性检测，均经Ｕ检验，Ｐ〈０．０１，表明耐药性明显增加，结论，随头孢菌素广泛使用     

扩散法细菌药物敏感试验质量控制监测及其评价

我们对北京地区卫生部属、市属、部队及卫生系统外的中央部属、厂矿、区县医院药敏试验质量控制情况进行了质量评价(1230药次),现报告如下。一、材料和方法1标准菌株:大肠埃希菌ＡＴＣＣ25922,绿脓假单胞菌ＡＴＣＣ27853。2抗菌药物:1999年美国临床实验室标准化委员会(ＮＣＣＬＳ)[1]推荐的代表性药物。检测大肠埃希菌ＡＴＣＣ25922的5种抗菌药物:氨苄西林、庆大霉素、头孢他啶、ＴＭＰＳＭＺ和环丙沙星;检测绿脓假单胞菌ＡＴＣＣ27853的5种抗菌药物:哌拉西林、庆大霉素、头孢他啶、阿米卡星和环丙沙星。2方法:将大肠埃希菌和绿脓假单胞菌以…     

介绍2000年美国NCCLS所建议的药敏试验药物选择规则

美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)对各属细菌药敏试验中药物的选择做了具体规定 ,并按最新资料每年修正公布。表 1和表 1Ａ所列的是美国食品和药品管理局(ＦＤＡ)批准可做体外药敏的、证实有效的抗菌药物 ,表内小格中的药物只要选择一个做药敏 ,因为它们的结果通常相同     

简介美国临床实验室标准化委员会最新推荐厌氧菌药敏试验方法及评价

由于厌氧菌的分离、鉴定和药敏试验技术较复杂 ,并受试验成本高等条件限制[1] ,国内很多实验室不能开展厌氧菌鉴定和药敏试验工作[2 7] 。即使是国外 ,多数临床医生治疗的依据 ,也是凭经验和文献资料。然而 ,近 10年来 ,厌氧菌的耐药率不断增高。本讲将探讨常见厌氧菌对常用于治疗厌氧菌抗生素的耐药机制 ;简要介绍美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ) 2 0 0 1年最新推荐的药敏试验方法 ,以及对 2种适合常规使用的药敏方法的评价 ,供临床和实验室参考。一、厌氧菌耐药机制厌氧菌耐药机制的形成主要是产酶 ;细胞壁通透性改变 ,使抗生素…     

微量法检测念珠菌对三唑类药物敏感性与交叉耐药性

目的应用美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）推荐微量法测定酵母菌最低抑菌浓度（ＭＩＣ），并检验其重复性和准确性，观察氟康唑耐药株对伊曲康唑是否存在交叉耐药性。方法参照ＮＣＣＬＳ推荐的药敏试验方案微量稀释法（１９９５年版），检测２５株氟康唑耐药性白念珠菌及４８株临床分离株对氟康唑及伊曲康唑的敏感性。结果２５株氟康唑耐药白念珠菌中只有３株菌对伊曲康唑耐药（ＭＩＣ值≥４μｇ／ｍｌ），占１３．０４％，只有少数菌对伊曲康唑存在交叉耐药。４８株临床分离白念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的ＭＩＣ值呈正态分布，有４６株对伊曲康唑的ＭＩＣ值介于０．００７５～４μｇ／ｍｌ，其半数抑菌浓度（ＩＣ５０）为０．１２５μｇ／ｍｌ，有４３株对氟康唑的ＭＩＣ值介于０．２５～１６μｇ／ｍｌ，其ＩＣ５０为２μｇ／ｍｌ。结论ＮＣＣＬＳ微量稀释法有较好的可重复性和稳定性，少数氟康唑耐药株对伊曲康唑有交叉耐药性。