转录因子ZIC3和GATA4突变与先天性心脏病的关系

目的探讨锌指转录因子3 (ZIC3)和GATA4突变与先天性心脏病(CHD)的关系。方法选取2016年1月-2018年1月该院住院部收治的188例CHD患者作为研究组,180例体检健康者作为对照组,收集受试者外周血,提取DNA,进行PCR扩增及DNA测序分析。结果 ZIC3测序显示,8例房间隔缺损患者发生杂合错义突变c. 1341AG,位于外显子3; 4例房间隔缺损患者发生杂合错义突变c. 1154CG,位于外显子1,2例室间隔缺损患者发生杂合错义突变c. 890GT,位于外显子2; GATA4测序显示,25例室间隔缺损患者发生杂合同义突变c. 744CT,位于外显子3,13例发生杂合错义突变c. 1220CA,位于外显子4; 7例房间隔缺损发生杂合同义突变c. 839CT,位于外显子3; 3例家族三代房间隔缺损出现错义突变c. 899AC,位于外显子4; 2例房间隔缺损患者发生杂合错义突变c. 1138GA,位于外显子4; 1例动脉导管未闭患者发生新的杂合同义突变c. 685CT,位于外显子2。结论 CHD患者中ZIC3外显子发现3个突变位点,GATA4发现6个突变位点,ZIC3和GATA4突变基因可能与部分CHD致病相关。     

亲代GATA4基因变异对子代发生先天性心脏病的影响

目的 探讨亲代GATA4基因变异对子代先天性心脏病发病的影响.方法 收集137例先天性心脏病患者父/母作为病例组,114例正常新生儿父/母为对照组,对GATA4全部编码链进行PCR扩增,DHPLC检测并对异常峰型进行测序分析,Chromas软件比对发现异常序列变异.结果 在1例法洛四联症患者父亲基因组DNA发现GATA4基因错义突变,c.-487C＞T.导致163位密码子由CCG转换为CTG,编码的氨基酸由脯氨酸转换为丝氨酸P163S(p.Pro163Ser),这个突变对照组未检测到,患者父亲心脏发育正常.发现同义突变c.-99G＞T,两个内含子区域突变S50745A＞T和S50946A＞C,在对照组和病例组均存在,两组比较差异没有显著性.结论 先天性心脏病患者父代也可能存在GATA4基因突变影响子代发病.     

肺炎支原体感染诱发哮喘患儿外周血miR-33a与miR-222-3p及miR-492表达水平及意义

目的分析肺炎支原体(MP)感染诱发哮喘患儿外周血miR-33a、miR-222-3p、miR-492表达水平及意义。方法选取重庆大学附属三峡医院MP感染患儿345例,依据是否诱发哮喘分为诱发组、未诱发组,比较其外周血miR-33a、miR-222-3p、miR-492表达水平,比较诱发组中不同MP-IgM滴度、哮喘发作分期患儿的miR-33a、miR-222-3p、miR-492表达水平,并分析上述指标与哮喘发作期、MP-IgM滴度的相关性,经Logistic回归法分析MP诱发哮喘的独立危险因素。结果诱发组外周血miR-33a表达水平低于未诱发组,而miR-222-3p、miR-492表达水平高于未诱发组(P0.05);MP感染诱发哮喘患儿中,MP-IgM高滴度患儿miR-33a表达水平低于低滴度、中滴度患儿,而miR-222-3p、miR-492水平高于低滴度、中滴度患儿,低滴度、中滴度患儿的miR-33a、miR-222-3p、miR-492水平差异也有统计学意义(P0.05);哮喘急性发作期患儿miR-33a水平低于缓解期患儿,而miR-222-3p、miR-492水平高于缓解期患儿(P0.05);相关分析发现,MP感染诱发哮喘患儿的miR-33a水平与MP-IgM滴度、哮喘急性发作均呈负相关,miR-222-3p、miR-492水平与MP-IgM滴度、哮喘急性发作均呈正相关(P0.05);过敏史、家族鼻炎/哮喘史、接受雾化治疗、miR-222-3p、miR-492为MP诱发哮喘的独立危险因素,而miR-33a为保护因素(P0.05)。结论 MP感染诱发哮喘患儿外周血miR-33a呈低表达,而miR-222-3p、miR-492呈高表达,且三者与MP-IgM滴度、哮喘发作分期有一定关联。     

活动性肺结核外周血miR-28-3p与miR-93-5p及miR-574-5p表达及临床意义

目的探讨活动性肺结核患者外周血微小RNA-28-3p(miR-28-3p)、miR-93-5p和miR-574-5p表达水平及其临床意义。方法选取2017年11月-2019年11月于河南科技大学第一附属医院行肺结核筛查的300例患者,根据肺结核诊断情况分为活动性肺结核组136例与非活动性肺结核组164例,另选取同期医院体检的102名健康人为对照组。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外周血miR-28-3p、miR-93-5p和miR-574-5p水平,分析活动性肺结核与非活动性肺结核患者外周血miR-28-3p、miR-93-5p和miR-574-5p表达并观察活动性肺结核治疗前后其水平变化,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-28-3p、miR-93-5p和miR-574-5p表达水平对区分活动性肺结核疾病预测价值。结果活动性肺结核组吸烟、咳嗽、咯血、肺内空洞、淋巴结肿大占比高于非活性肺结核组(P0.001),而钙化结节、支气管扩张占比低于非活动性肺结核组(P0.001);活动性肺结核组干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、IL-12、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)与外周血miR-28-3p、miR-93-5p、miR-574-5p相对表达水平高于非活动性肺结核组与对照组(P0.05),活动性肺结核组治疗后外周血miR-28-3p、miR-93-5p、miR-574-5p相对表达水平均低于治疗前(P0.05);miR-28-3p、miR-93-5p、miR-574-5p的预测活动性肺结核疾病曲线下面积(AUC)分别为0.906、0.818、0.872(P0.05),且miR-28-3p的AUC高于miR-93-5p(P=0.002)。结论活动性肺结核患者外周血miR-28-3p、miR-93-5p、miR-574-5p表达水平升高且治疗后呈下降趋势,对区分活动性肺结核存在一定的预测价值。     

肺癌与人微小RNA miR-499-3p种子序列遗传变异关系

目的 探讨人微小RNA hsa-miR-499-3p种子序列1个常见单核苷酸多态位点(rs3746444A＞G)的遗传变异与中国南方人群肺癌发病的关联.方法 以病例-对照研究方法收集原发性肺癌患者526例及正常对照526人,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)技术检测hsa-miR-499-3p种子序列的单核苷酸多态( rs3746444 A＞G)的基因型,用SAS 9.13软件进行非条件Logistic回归,校正混杂因素影响,分析基因变异与肺癌发病的关联.结果 以携带野生型纯合子rs3746444AA基因型为参照,携带AG基因型个体发生肺癌的危险度可增加32%(校正OR=1.32,95% CI=1.01～1.84),携带GG基因型的个体患肺癌的危险度增加122%( OR =2.22,95% CI=1.52 ～3.23),且rs3746444 G变异的等位基因个数与肺癌发病危险呈剂量-效应关系(趋势性检验p=3.04 × 10-5).结论 hsa-miR-499-3p种子序列(rs3746444 A＞G)遗传变异可增加人群肺癌发病的危险性.     

miR-142-3p抑制甲状腺癌细胞增殖的研究

目的 研究甲状腺癌细胞株中miR-142-3p的表达水平,探讨miR-142-3p不同表达水平对甲状腺癌细胞增殖能力的影响.方法 采用RT-PCR检测人甲状腺癌细胞K1、TPC-1、BCPAP和人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1中miR-142-3p的表达水平.观察K1细胞分别转染miR-142-3p mimics,...     

宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34a-5p水平检测及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34a-5p水平检测及临床意义。方法选取2011年3月-2014年8月义乌市中心医院宫颈癌患者154例为观察组,分别于手术前以及术后3～4周采集全血,另选健康体检者123例为对照组,体检时采血,测定其血清miR-329-3p和miR-34a-5p及癌胚抗原(CEA)表达水平。结果术前观察组miR-329-3p、miR-34a-5p水平低于对照组,CEA水平高于对照组(P0. 05);术后观察组miR-329-3p、miR-34a-5p水平高于术前观察组,CEA水平低于术前观察组(P0. 05);不同年龄、肿瘤最大径、肿瘤数目特征组中血清miR-329-3p、miR-34a-5p水平相近(P0. 05);而病理学分级越高、TNM分期越高、有淋巴血管间隙浸、有淋巴结转移、有复发,血清miR-329-3p、miR-34a-5p表达水平越低(P0. 05); CEA与miR-329-3p、miR-34a-5p呈负相关(P0. 05); miR-329-3p、miR-34a-5p两者AUC相近(P0. 05),两者诊断结宫颈癌的灵敏度、特异度相近(P0. 05); miR-329-3p、miR-34a-5p阳性组3年生存率及生存期均明显高于miR-329-3p、miR-34a-5p阴性组(P0. 01)。结论 miR-329-3p、miR-34a-5p在宫颈癌患者血清的表达量降低,miR-329-3p、miR-34a-5p在宫颈癌的发生发展过程中起抑制作用,miR-329-3p、miR-34a-5p高表达可提高宫颈癌患者预后; miR-329-3p、miR-34a-5p具有较高的灵敏度、特异度,可作为诊断宫颈癌的生物学标志物。     

卵巢癌患者血清miR-124-3p和miR-150检测的临床意义分析

目的探讨卵巢癌患者血清miR-124-3p和miR-150检测水平变化情况及临床意义。方法选取2016年1月-2017年1月该院肿瘤科收治的68例卵巢癌患者作为研究组,另选取同期在该院体检健康者68例作为对照组。采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)方法检测所有受试者血清miR-124-3p和miR-150表达水平,分析二者表达与卵巢癌病理特征之间的关系,进一步分析二者对卵巢癌患者生存时间及预后的影响。结果研究组血清miR-124-3p和miR-150表达水平明显低于对照组(P0. 05); miR-124-3p和miR-150表达与年龄、病理类型、肿瘤直径均无相关性(P0. 05),与FIGO分期、肿瘤分级、淋巴结转移密切相关(P0. 05); miR-124-3p高表达组预后5年存活率为40. 54%,低表达组预后5年存活率为22. 58%,高表达组存活率高于低表达组(χ2=4. 541,P=0. 033); miR-150高表达组预后5年存活率为42. 86%,低表达组预后5年存活率为27. 27%,高表达组存活率高于低表达组(χ2=4. 669,P=0. 031);年龄与卵巢癌预后无关(P 0. 05); FIGO分期、肿瘤分级、淋巴结转移、miR-124-3p、miR-150是影响卵巢癌患者预后的危险因素(P0. 05)。结论 miR-124-3p和miR-150在卵巢癌患者血清中均表达下调,并与FIGO分期、肿瘤分级、淋巴结转移有关,可作为卵巢癌患者预后的检测指标。     

宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34 a-5p水平检测及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清miR-329-3 p和miR-34 a-5 p水平检测及其临床意义。方法选取2017年2月至2018年2月在鄂东医疗集团黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)手术切除的39例宫颈癌组织标本为研究对象。根据癌旁黏膜组织有无癌前病变将其分组。利用免疫组化对39例标本中的p 53、c-erbB-2、bax表达进行检测。结果 miR-329-3 p和miR-34 a-5 p在宫颈癌组织中表达水平明显低于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌低分化标本miR-329-3 p和miR-34 a-5 p表达水平明显低于分化较好组,差异有统计学意义(P<0.05)。有高危人乳头瘤病毒感染或淋巴转移的宫颈癌标本中miR-329-3 p和miR-34 a-5 p表达水平更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-329-3 p和miR-34 a-5 p可作为宫颈癌患者预后判断的重要参数指标,其对判断宫颈癌的发展有重要意义。     

还原叶酸载体基因多态性与先天性心脏病和唇腭裂关联的研究

目的 检验还原叶酸载体基因(RFC1)A80G多态性与先天性心脏病(CHD)和唇腭裂之间的关联,为寻找CHD和唇腭裂危险因素的遗传易感标志物提供流行病学依据。方法 采用RFLP-PCR方法,对67个CHD患儿家庭、82个唇腭裂患儿家庭和100个正常儿童家庭成员的外周血DNA进行RFC1第80位SNP检测,利用核心家庭标本进行以家庭为基础的关联检验(FBAT),并分析了子代RFC1基因型与母亲孕期前后增补叶酸的相互作用。结果 不增补叶酸的母亲生育CHD儿的危险高于增补叶酸的母亲(OR=2 68,95％CI:1 14-6 41),即母亲孕期未增补叶酸与CHD发生危险的关联有统计学意义(x2=6.213,P=0 013);在FBAT检验中,RFC1 G等位基因与CHD发病危险有统计学关联(Z=2 140,P<0 05),表明RFC1 G等位基因可能是CHD发病的遗传易感基因,未发现唇腭裂与RFC1之间的统计学关联。结论 RFC1 G等位基因可能是CHD发生的遗传易感基因之一,子代RFC1基因GG或GA基因型、母亲孕期叶酸缺乏可能增加CHD的发病危险。     

多发性骨髓瘤患者血清中miR-223-3p和miR-140-5p表达水平与肾功能损害的相关性分析

目的 探讨血清miR-223-3p和miR-140-5p表达水平与多发性骨髓瘤患者肾功能损害的相关性。方法 选取本院于2019年7月—2022年6月收治的165例多发性骨髓瘤患者,按照入院时诊断结果中存在肾损伤与未见肾损伤分为观察组与对照组。比较2组血清中血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白水平以及胱抑素C(Cys-C),检测血清miR-223-3p和miR-140-5p表达水平,分析血清miR-223-3p和miR-140-5p表达水平与多发性骨髓瘤患者肾功能损害的相关性。结果 与对照组比较,观察组患者血清miR-223-3p和miR-140-5p表达水平均降低(P<0.05),血清中Scr、BUN、24 h尿蛋白以及Cys-C水平升高(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤细胞形态、患者血清miR-223-3p、miR-140-5p表达水平差异无统计学意义(P>0.05),低肿瘤分化及与Ⅲ期患者血清miR-223-3p、miR-140-5p表达水平低于高、中分化及Ⅰ期、Ⅱ期患者(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清miR-22...     

脓毒症患者外周血miR-326与miR-370-3p表达及其意义

目的探究脓毒症患者外周血miR-326、miR-370-3p的表达及其意义。方法选取2018年9月-2020年9月唐山市工人医院收治的94例脓毒症患者为研究组,同时募集同期体检健康者45名为对照组,脓毒症患者根据病情严重程度分为无休克组(n=62)和休克组(n=32),根据治疗28 d转归情况分为存活患者(n=70)和死亡患者(n=24);采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测外周血miR-326、miR-370-3p的表达,比较各组患者miR-326、miR-370-3p表达。结果脓毒症患者心率(HR)、外周血miR-326、miR-370-3p分别为(116.52±10.48)次/min、3.41±0.59、2.45±0.47高于对照组(P<0.001),miR-326、miR-370-3p单独及联合诊断脓毒症的AUC分别为0.822(95%CI:0.746~0.899)、0.784(95%CI:0.694~0.875)、0.881(95%CI:0.822~0.940)。无休克组HR、外周血miR-326、miR-370-3p、PCT、急性生理学与慢性健康评分系统(APACHE)Ⅱ评分、序贯器官衰竭评分(SOFA)分别为(114.26±12.52)次/min、3.19±0.47、2.23±0.54、(21.45±4.89)ng/L、(17.84±2.45)分及(6.71±0.84)分低于休克组(P<0.001),存活患者外周血miR-326、miR-370-3p、PCT、APACHEⅡ评分及SOFA评分分别为2.95±0.42、2.11±0.38、(24.58±3.76)ng/L、(16.27±3.68)分及(6.23±0.95)分低于死亡组(P<0.001);脓毒症患者外周血miR-326、miR-370-3p分别与APACHEⅡ评分、SOFA评分呈正相关(P<0.001)。结论 miR-326、miR-370-3p在脓毒症患者异常升高,可能作为脓毒症的早期诊断标志物,并与患者病情及预后密切相关。     

育龄妇女孕早期患病与新生儿先天性心脏病的关联

目的 探讨育龄妇女孕早期患病与新生儿先天性心脏病之间的关联。方法 采用分层多阶段随机抽样方法,以问卷调查方式收集2010－2013年陕西省怀孕且结局明确的育龄妇女及其子女的相关信息。应用倾向值匹配法,对孕早期患病组和未患病组育龄妇女进行1 ∶ 1匹配。以是否生育先天性心脏病患儿为因变量,以母亲孕早期是否患病为自变量,通过逐步校正混杂因素建立logistic回归模型。结果 共纳入28 680对母亲及新生儿,孕早期患病者5 807人（20.25%）。匹配后孕早期患病组和未患病组分别为5 436人。在控制混杂因素后,母亲孕早期患病可增加新生儿先天性心脏病的发病风险（OR=1.86,95% CI：1.23～2.81）,孕早期患感冒（OR=2.19,95% CI：1.46～3.28）、妇科疾病（OR=4.74,95% CI：2.03～11.09）和糖尿病（OR=14.00,95% CI：1.64～119.21）是生育先天性心脏病患儿的危险因素。结论 育龄妇女孕早期患感冒、妇科疾病和糖尿病与子代发生先天性心脏病有关。     

lncRNA DDX11-AS1靶向miR-299-3p调控宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)DDX11反义RNA1(DDX11 antisense 1,DDX11-AS1)靶向miR-299-3p对宫颈癌细胞增殖、迁移侵袭的影响。 方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测宫颈癌组织、癌旁组织中DDX11-AS1和miR-299-3p表达水平。将小干扰RNA阴性对照(si-NC组)、DDX11-AS1小干扰RNA组(si-DDX11-AS1组)、miR-299-3p模拟物组(miR-299-3p组)、miRNA模拟物阴性对照组(miR-NC组)、si-DDX11-AS1+miRNA抑制物阴性对照组(si-DDX11-AS1+anti-miR-NC组)、si-DDX11-AS1+miR-299-3p抑制物组(si-DDX11-AS1+anti-miR-299-3p组)分别转染HeLa细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、transwell实验分别检测细胞活力、迁移侵袭能力。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR验证DDX11-AS1对miR-299-3p的靶向调控作用。 结果 与癌旁组织相比,宫颈癌组织中DDX11-AS1表达显著升高,miR-299-3p表达显著降低(P<0.05)。与si-NC组相比,si-DDX11-AS1组HeLa细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-299-3p组HeLa细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。与si-DDX11-AS1+anti-miR-NC组比较,si-DDX11-AS1+anti-miR-299-3p组HeLa细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著升高(P<0.05)。miR-299-3p是DDX11-AS1的靶基因,DDX11-AS1负调控miR-299-3p表达。 结论 宫颈癌中DDX11-AS1呈高表达。沉默DDX11-AS1通过上调miR-299-3p能够降低宫颈癌细胞增殖、迁移侵袭能力。     

miR-5590-3p介导TGFBR2表达对胃癌细胞HS-746T侵袭和增殖的影响

目的:探讨微小RNA(miR)-5590-3p对转化生长因子βⅡ型受体(TGFBR2)基因表达的抑制作用及对胃癌细胞HS-746T侵袭和增殖的影响。方法:体外培养胃癌细胞系,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胃癌组织和细胞系中miR-5590-3p的表达。采用脂质体转染法分别转染miR-NC和miR-5590-...     

miR-7159-5p介导TRIM26表达对胃癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:观察微小RNA(miRNA)-7159-5p在胃癌组织中的表达,探讨其对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制。方法:收集湖北六七二中西医结合骨科医院2018年3月至2019年11月手术切除的29例胃癌患者的癌组织和癌旁组织。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-7159-5p在癌组织和癌旁组织、癌细...     

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与先天性心脏病的关联研究

目的研究亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)多位点多态性与先天性心脏病的关联。方法采用病例对照研究,根据样本量计算公式估计样本量,选择2012年12月至2013年11月在山东大学齐鲁儿童医院就诊的150例患有单纯性先心病的患儿为病例组,同期在该院儿保科进行查体的150例正常儿童为对照组,两组儿童性别年龄总体差异无统计学意义。利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法检测两组儿童的MTHFR基因C677T、A1298C、G1793A的基因型及其分布。结果 677位点,与野生型纯合子CC比较,杂合子CT个体患先心病的风险较高(OR=2.249,95%CI 1.305~3.877,Ρ=0.003),突变纯合子TT个体患先心病的风险是野生型的3.121倍(95%CI 1.612~6.043,P=0.001)。携带突变等位基因T个体的患病风险是野生型C的1.813倍(95%CI 1.310~2.508,P=0.000)。1298位点突变杂合子AC患病风险是野生纯合子AA的2.177倍(95%CI 1.183~4.077,P=0.011)。携带突变等位基因C个体的患病风险是野生型A的2.017倍(95%CI1.128~3.604,P=0.016)。1793位点突变杂合子GA与野生纯合子GG频率在两组分布差异无统计学意义(P=0.145),等位基因G、A分布差异无统计学意义(Ρ=0.158)。组合基因型分析显示677与1298位点,1298与1793位点对先心病存在联合作用。结论 MTHFR C677T、A1298C突变是先心病的危险因素;MTHFR C677T与A1298C,MTHFR A1298C与G1793A对先心病存在联合作用     

维生素A缺乏或过量与先天性心脏病的关联

近年研究表明,维生素A在胚胎时期参与心脏系统的形态构建,维生素A缺乏或过量均可造成不同程度或不同类型的先天性心脏病。其中胚胎原肠胚期是维生素A作用于心脏发育的特异性时段,它通过激活一系列基因调控途径,进而影响到随后的心脏发育事件。本文对妊娠期维生素A缺乏和过量与先天性心脏病的关系及其作用机制进行简要综述。     

子代还原叶酸载体基因遗传变异与先天性心脏病和唇腭裂的关联

孕期增补叶酸可以有效降低神经管畸形(neu- ral tube defects,NTDs)的初发和再发。也有流行病学证据表明,妇女孕早期服用含叶酸的多种维生素可以减少先天性心脏病(congenital heart de-fects, CHD)和唇腭裂(clef tlip with or without clef tpalate,