载紫杉醇超声微泡造影剂对人肝癌HepG2细胞周期及形态的影响

目的 探讨超声辐照紫杉醇微泡造影剂,对人肝癌细胞株HepG2细胞周期的影响和形态学变化.方法 体外培养人肝癌HepG2细胞,将细胞分4组,即空白对照组,紫杉醇组,超声空白微泡组,超声载紫杉醇微泡组.流式细胞仪检测不同处理组细胞周期分布,透射电镜观察不同处理组形态学变化. 结果 超声载紫杉醇微泡组细胞阻滞在G2/M期;超声载紫杉醇微泡能够诱导肿瘤细胞发生凋亡,并有凋亡小体形成.结论 超声辐照载紫杉醇微泡造影剂对人肝癌细胞株HepG2有明显阻滞作用,并诱导肿瘤细胞发生凋亡.     

超声辐照载紫杉醇微泡对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨超声辐照载紫杉醇微泡对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响及其作用机制.方法 将体外培养的大鼠胸主动脉VSMCs用血小板衍生生长因子-BB刺激后分组如下:对照组(A组)、超声辐照+微泡组(B组)、超声辐照+载紫杉醇微泡组(C组)、单纯载紫杉醇微泡组(D组)和紫杉醇组(E组).采用频率1MHz、声强0.3W/cm2的连续波超声辐照VSMCs 120s,用流式细胞仪、Annexin V/PI染色和免疫细胞化学技术检测各组细胞周期、细胞凋亡以及凋亡相关蛋白表达的变化.结果 与A组比较,各组S期细胞比例均显著降低(P＜0.01),B组G0/G1期细胞比例显著增高(P＜0.01),D组和E组G2/M细胞比例显著增高(P＜0.01),C组G0/G1期细胞比例和G2/M细胞比例均显著增高(P＜0.01).与A组比较,B组和C组VSMCs凋亡率显著增高(P＜0.01),Bax蛋白表达显著上调、而Bcl-2蛋白表达则显著降低(P＜0.01).结论 超声辐照载紫杉醇微泡可诱导VSMCs凋亡,其机制可能是微泡介导的超声空化效应,致Bax蛋白表达上调及Bcl-2蛋白表达下调.     

沉默单酰基甘油脂肪酶mRNA对肝癌大鼠的作用及机制

目的研究沉默单酰基甘油脂肪酶(MAGL)mRNA对大鼠肝癌的作用及其机制。方法 CBRH7919大鼠肝癌细胞原位移植法建立大鼠肝癌模型,建模后免疫组化检测肝癌组织及正常肝组织甲胎蛋白(AFP)表达。分为PBS液组;MAGL-shRNA质粒微泡组;空白微泡+超声辐照组;MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照组(A);MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照组(B);MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照组(C)。每只大鼠经尾静脉注射1 ml相应试剂,并对空白微泡+超声辐照组和MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照A、B、C组的大鼠肝区给予超声辐照。前4组:免疫印迹检测大鼠肝癌组织MAGL表达,荧光定量PCR检测MAGL mRNA表达情况,ELISA检测癌组织游离脂肪酸(FFAs)。解剖并比较各组大鼠的肿瘤大小、转移情况。B组给予高脂饮食1 w后与C组一同处死,比较其肿瘤组织MAGL表达情况、FFAs含量以及肿瘤大小。结果肿瘤病理检测符合原发性肝癌。前四组:免疫印迹检测显示,MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照组A的MAGL蛋白表达趋势明显降低;PCR结果显示,该组MAGL-mRNA明显低于其他3组(P0.05);ELISA显示该组FFAs含量明显低于其余各组(P0.05);该组肿瘤平均大小及转移率明显小于其余三组(P0.05)。后两组:高脂饮食组癌组织MAGL蛋白表达、FFAs浓度明显高于正常饮食组,且前者肿瘤明显大于后者(P0.05)。结论沉默MAGL mRNA能够明显抑制大鼠肝癌生长;高脂饮食能够逆转MAGL沉默基因的治疗作用;MAGL作用机制可能是通过调控FFAs及下游因子实现。     

过表达Bmi-1促进CD133~+CD44~+HCT116结肠癌干细胞发生上皮间质转化

目的探讨Bmi-1促进结肠癌干细胞发生迁移、侵袭的作用及机制。方法常规培养结肠癌HCT116细胞,成球培养基法(SFM)和磁珠分选法(MACS)富集和筛选CD133~+CD44~+HCT116结肠癌干细胞;流式细胞学鉴定结肠癌干细胞CD133和CD44表型,体外平板克隆实验和CCK8法鉴定细胞增殖克隆能力,裸鼠体内成瘤实验鉴定细胞致瘤能力。构建过表达Bmi-1质粒并转染CD133~+CD44~+HCT116结肠癌干细胞,Western blotting验证细胞中Bmi-1、E-cadherin及Vimentin的表达情况。平板划痕实验和Transwell实验评价转染后不同细胞的迁移和侵袭能力。结果 CD133~+CD44~+HCT116结肠癌细胞具有更强的体外克隆增殖能力和体内致瘤能力,可作为结肠癌干细胞研究模型;过表达Bmi-1后促进CD133~+CD44~+HCT116结肠癌干细胞的E-cadherin表达下降,而Vimentin表达上升;过表达Bmi-1后细胞24 h迁移速度为(18.44±0.59)μm/h,明显高于对照组(1.88±0.21)μm/h和普通组(1.92±0.36)μm/h(P0.05),同时其侵袭细胞数(37.67±2.51)也明显高于对照组(9.33±0.58)和普通组(7.67±0.58)(P0.05)。结论 Bmi-1介导CD133~+CD44~+HCT116结肠癌干细胞发生上皮间质转化(EMT)而促进肿瘤侵袭、转移。     

转染过表达WWOX质粒的胆囊癌细胞株GBC-SD迁移、侵袭能力变化及其机制

目的 观察转染过表达WW域的氧化还原酶(WWOX)质粒对胆囊癌细胞株GBC-SD迁移、侵袭能力的变化,并探讨其机制.方法 胆囊癌细胞株GBC-SD分为实验组、NEG组、空白对照组,实验组转染WWOX过表达质粒,NEG组转染空载质粒,空白对照组不做处理.采用细胞划痕实验测算各组细胞迁移率,以细胞迁移率表示细胞迁移能力.采...     

细胞自噬与结肠癌Lovo细胞迁移和侵袭的相关性研究

目的探讨不同自噬状态对结直肠癌Lovo细胞迁移和侵袭能力的影响。 方法将Lovo细胞分为自噬增强组、正常细胞组和3-甲基嘌呤自噬抑制组。用激光共聚焦显微镜观察绿色荧光颗粒,用Q-PCR检测Beclin1 mRNA表达水平,透射电镜观察自噬溶酶体,Transwell实验评价Lovo细胞迁移与侵袭能力。 结果绿色荧光颗粒数以自噬增强组最多,其次为正常细胞组,而自噬抑制组最少。Beclin1 mRNA表达量自噬增强组为(1.23±0.12)个,正常细胞组为(1±0.13)个,自噬抑制组为(0.98±0.1)个。自噬增强组可见大量的自噬溶酶体,明显多于正常细胞组和自噬抑制组。迁移实验细胞计数：自噬增强组高于正常细胞组(138.0±16.7与90.7±12.9,P＝0.026)和自噬抑制组(138.0±16.7与92.7±26.7,P＝0.030)。侵袭实验细胞计数：自噬增强组高于正常细胞组(147.0±13.0与99.0±20.5,P＝0.028)和自噬抑制组(147.0±13.0与95.7±25.6,P＝0.021)。 结论结肠癌Lovo细胞自噬增强促进肿瘤细胞迁移和浸润,可能是局部浸润和远处转移的机制之一。     

超声介导的载药微泡对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的抑制作用

目的 探讨超声介导的载药微泡对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的抑制作用.方法 以人卵巢癌A2780细胞建立裸鼠皮下转移瘤模型.将建模的40只小鼠随机平均分为4组并给予不同处理方式,A组:向裸鼠尾静脉中注入顺铂溶液和超声微泡后予超声辐照;B组:向裸鼠尾静脉中注入顺铂溶液和超声微泡,不予超声辐照;C组:向裸鼠尾静脉中注入生理盐水后予...     

Cdc42基因在表皮生长因子促进HepG2细胞丝状伪足形成中的作用

目的:探讨表皮生长因子(EGF)对HepG2细胞丝状伪足形成和细胞体外侵袭能力的影响以及细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在其中的作用.方法:将Cdc42 siRNA转染HepG2细胞株,RT-PCR和Western blot检测EGF组、EGF+siRNA干扰组、siRNA干扰组及空白对照组细胞Cdc42 mRNA转录以及蛋白的表达水平,微丝绿色荧光探针(actin-tracker green)染色检测HepG2细胞丝状伪足形成,侵袭小室检测细胞体外侵袭能力.结果:经EGF处理后HepG2细胞可见明显丝状伪足形成,EGF组细胞Cdc42 mRNA及总蛋白(Total-Cdc42)表达量无显著变化,但活性Cdc42(Active-Cdc42)显著增高(0.713±0.021vs0.423±0.015,P<0.05),siRNA干扰细Cdc42表达及活性受到明显抑制(0.118±0.017 vs 1.128±0.024;0.351±0.021 vs 0.936±0.024,均P<0.05),并抑制EGF诱导的细胞丝状伪足形成,EGF组细胞体外侵袭能力显著高于其余各组(98.43+3.11vs61,09±3.58,50.53±2.34,62.73±2.64,均P<0.05).结论:EGF通过激活Cdc42诱导HepG2细胞丝状伪足形成并增强其体外侵袭能力.     

外源性骨形态发生蛋白9转入肺鳞癌细胞对其活性的影响及作用机制

目的观察骨形态发生蛋白(BMP)9对人肺鳞癌细胞株YTMLC-90迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法 RT-PCR和Western印迹法检测YTMLC-90细胞和正常人支气管上皮细胞(NHBE)中BMP9 mRNA和蛋白表达水平;以转染重组腺病毒Ad-BMP9的YTMLC-90细胞为研究组,转染Ad-GFP为阴性对照组,未转染为空白对照组;采用划痕愈合实验检测3组细胞迁移能力,Transwell实验检测迁移和侵袭能力,同时检测迁移相关因子基质金属蛋白酶(MMP)2 mRNA和蛋白表达情况;Western印迹法检测3组细胞BMP-Smad信号通路中Smad 1/5磷酸化水平。结果YTMLC-90细胞中BMP9 mRNA和蛋白表达量均明显低于NHBE细胞(P<0.05)。Ad-BMP9转染YTMLC-90细胞后胞内BMP9蛋白表达量明显高于阴性对照组(P<0.01)。空白对照组48 h的细胞划痕愈合率与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);研究组细胞划痕愈合率明显低于阴性对照组和空白对照组,穿过小室膜和基质胶的YTMLC-90细胞数均明显少于阴性对照组和空白对照组,MMP2表达量明显低于阴性对照组,MMP2mRNA和蛋白表达量均明显低于阴性对照组(均P<0.05)。YTMLC-90细胞高表达BMP9后其p-Smad 1/5表达量明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。结论外源性BMP9转入人肺鳞癌细胞株YTMLC-90可有效抑制其迁移和侵袭能力,激活BMP-Smad信号通路是该抑制作用的机制之一。     

miR-126在人结肠癌细胞中的表达及其对结肠癌细胞生物学行为的影响

目的探讨microRNA(miR)-126在人结肠癌细胞中的表达以及对结肠癌细胞生物学行为的影响。方法通过实时定量RT-PCR检测结肠癌患者的结肠癌组织以及癌旁组织中miR-126的表达情况。通过慢病毒转染构建miR-126稳定过表达细胞系,并进一步通过体外实验研究miR-126对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果与癌旁组织比较,miR-126在结肠癌细胞中表达率(55%)显著低于癌旁组织的87.5%(P0.05);miR-126的表达与患者是否发生转移及结肠癌临床Dukes分期显著相关(P0.05)。利用慢病毒转染构建的miR-126过表达SW480细胞系进行体外实验显示miR-126可以抑制SW480细胞的增殖,转染组与空白对照组12 h、24 h、48 h吸光度值差异均有统计学意义(P0.05);miR-126可以抑制结肠癌细胞迁移和侵袭的能力。Transwell实验中,转染组与空白对照组细胞迁移数差异均有统计学意义(P0.05)。结论 miR-126可明显抑制结肠癌细胞的发生发展,影响结肠癌细胞的生物学行为。     

过表达CD44v6基因对人大肠癌SW480细胞侵袭迁移能力的影响

目的:研究CD44v6基因过表达对SW480细胞侵袭和迁移能力的影响.方法:慢病毒介导的CD44v6过表达细胞(CD44v6组)和空载体对照细胞(NC组)由前期实验构建.采用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)表达、实时荧光定量PCR检测CD44v6 mRNA表达水平、免疫荧光检测Flag标签蛋白三种方法重新鉴定过表达细胞模型;CCK-8法检测细胞增殖活性;划痕试验和Transwell试验检测细胞侵袭和迁移能力.结果:绿色荧光蛋白观察显示细胞转染效率近100%;实时荧光定量PCR显示CD44v6组细胞CD44v6 mRNA表达水平较对照组.显著升高(P0.001);Flag标签蛋白免疫荧光染色显示过表达CD44v6蛋白主要定位于细胞膜.CCK-8结果显示2组细胞增殖无明显差异;划痕试验结果显示CD44v6组细胞划痕愈合指数较对照组显著增高(P0.05);Transwell试验结果显示CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较对照组显著增高(均P0.05),且CD44v6抗体处理后,CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较前显著减低(均P0.05).结论:CD44v6基因过表达能显著增强SW480细胞侵袭和迁移能力.     

氯喹增强LOVO细胞对5-氟尿嘧啶化疗敏感性的作用

目的研究结肠癌细胞LOVO在氯喹(CQ)作用下对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性变化及机制。方法用MTT法分别检测CQ和5-FU作用24 h和48 h对LOVO细胞的增殖抑制作用。实验分为4组:空白对照组、CQ组、5-FU组和联合作用组。CQ、5-FU及两者联合作用于LOVO细胞后,通过细胞划痕实验和Transwell分别检测细胞迁移和侵袭的变化,采用流式细胞术和TUNEL方法检测细胞凋亡,采用Western blot检测细胞自噬及凋亡相关蛋白的表达情况。结果在不同浓度CQ、5-FU作用下LOVO细胞增殖受到抑制,且呈现剂量依赖性,48 h时CQ和5-FU的IC50分别为11.8μg/ml和2.5μmol/L。与空白对照组相比,CQ、5-FU作用后细胞迁移率和细胞侵袭能力显著降低,且两药联用组的抑制效应更显著。流式细胞术检测显示,CQ组、5-FU组细胞凋亡率分别为(17.85±1.04)%、(17.36±0.96)%,显著高于空白对照组(4.11±0.23)%,两药联用组凋亡率为(25.03±2.27)%,两药联用组与CQ、5-FU单用组相比,细胞凋亡率更高,差异均有统计学意义(P<0.01)。TUNEL检测显示,CQ组、5-FU组细胞凋亡指数显著高于空白对照组,两药联用组与CQ、5-FU单用组相比细胞核凋亡指数更高。Western blot检测显示CQ和5-FU处理后导致P53、Bax、caspase3、caspase9和P62蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2、LC3和Beclin-1蛋白表达水平则显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 CQ能抑制结直肠癌细胞LOVO的增殖、迁移、侵袭和自噬,促进其凋亡,并能增强细胞对化疗药物5-FU的敏感性。     

表没食子儿茶素没食子酸醋对人胃癌细胞迁移、侵袭和cripto蛋白表达的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸醋(EGCG)对人胃癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法将人胃癌BGC823细胞分为两组,实验组加入20、40、80μmol/L的EGCG处理,以RPMI1640代替EGCG处理细胞作为空白对照组,采用划痕试验法检测癌细胞迁移能力,以Transwell法检测癌细胞侵袭能力,用免疫荧光方法检测癌细胞cripto基因蛋白水平变化。结果实验组细胞迁移距离、细胞穿过滤膜个数、cripto基因蛋白阳性率明显低于对照组,且均呈剂量依赖性,P均<0.05。结论 EGCG可明显抑制胃癌BGC823细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与下调cripto基因表达有关。     

miR-204靶向GPRC5A对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨微小RNA-204(miR-204)对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法 体外培养人正常结肠上皮细胞(FHC)和人结肠癌肿瘤细胞(HCT116);将HCT116细胞随机分为对照组、miR-204 mimic组和miR-204 NC组;利用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组HCT116细胞miR-204及G蛋白耦联受体C型家族(GPRC)5A表达情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组HCT116细胞的增殖情况;划痕实验检测各组HCT116细胞的迁移能力;Transwell法检测各组HCT116细胞的侵袭能力;Western检测各组HCT116细胞GPRC5A蛋白的表达情况;采用双荧光素酶报告实验验证miR-204与GPRC5A的靶向关系。结果 与正常组相比,各组HCT116细胞miR-204表达水平显著降低(P<0.05)。与对照组和miR-204 NC组相比,miR-204 mimic组HCT116细胞miR-204表达水平显著升高(P<0.05),细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、GPRC5A mRNA及GPRC5A蛋白表达水平显...     

脱氧胆酸在人结肠癌细胞株HCT116迁移和侵袭中的作用及其机制研究

背景:脱氧胆酸(DCA)是参与肠肝循环的一种次级胆汁酸。近年研究发现DCA可促进结肠癌细胞增殖,然而其在结肠癌细胞迁移和侵袭中的作用尚未明确。目的:探讨DCA在人结肠癌细胞株HCT116迁移和侵袭中的作用及其机制。方法:以DCA刺激HCT116细胞较长时间(1~28 d),以DMSO处理的细胞作为阴性对照。采用CCK-8实验检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移力,Transwell实验检测细胞侵袭力,蛋白质印迹法检测上皮型钙黏蛋白(E-cad)、神经型钙黏蛋白(N-cad)和维生素D受体(VDR)表达。结果:经12.5μmol/L DCA作用的HCT116细胞,增殖、迁移和侵袭力均较DMSO组显著增强(P0.05)。DCA组E-cad和N-cad表达水平随DCA作用时间的延长而升高,第28 d时明显高于DMSO组;DCA组VDR表达水平在第1 d时较DMSO组有所上升,其后呈下降趋势,第28 d时较DMSO组明显降低。结论:较长时间(7 d)的DCA刺激可促进结肠癌细胞迁移和侵袭,其机制可能与上调N-cad表达和下调VDR表达有关。     

超声微泡联合干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌微环境的影响及循环Irisin水平的相关性研究

目的探讨超声微泡联合骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死大鼠心肌微环境的影响及循环血清鸢尾素(Irisin)水平的相关性。方法通过密度梯度离心结合贴壁培养技术来分离、纯化与培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),得到符合心肌梗死移植的种子细胞。将40只心肌梗死模型制备成功的Wistar大鼠随机分为4组:A:超声微泡+MSCs组(US/MB+MSCs);B:单纯MSCs组(MSCs);C:超声微泡组(US/MB);D:空白对照组(C)。治疗4 W后,酶联免疫吸附法(ELISA)检测治疗前后血清Irisin水平,免疫组化染色技术(IHC)对血管内皮生长因子(VEGF)及CD34表达水平进行检测,计数微血管密度(MVD); Western Blot与ELISA对VEGF蛋白表达水平进行检测。结果超声微泡+MSCs组CD34的表达及微血管密度和VEGF蛋白的表达高于其他组,差异有统计学意义(P0.05)。超声微泡+MSCs组Irisin水平表达亦最高(P0.05)。VEGF值与Irisin值呈正相关(r=0.902)。结论超声破坏微泡联合MSCs移植可通过促进心肌VEGF来刺激血管新生,同时血清Irisin升高,二者呈正相关。     

microRNA-1Ob促进人低转移肺癌细胞株95-C的增殖及侵袭

目的 探讨microRNA-10b(miRNA-10b)对人低转移肺癌细胞95-C的增殖、细胞周期、凋亡以及侵袭及迁移能力的影响.方法 用脂质体法将miRNA-10b真核表达质粒瞬时转染入95-C,实验设置空白对照组、空载体转染组和miRNA-10b质粒转染组,转染后荧光显微镜下观察转染效率,实时定量RT-PCR检测各组细胞miRNA-10b的表达,细胞增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力.结果 转染后miRNA-10b质粒转染组细胞增殖速度明显增快,细胞凋亡率降低,细胞侵袭及迁移能力增强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miRNA-10b可以促进95-C细胞的增殖,降低细胞凋亡,增加95-C细胞的侵袭及迁移能力.     

HSP90α的表达对食管癌细胞侵袭转移能力的影响

目的:探讨热休克蛋白90α(heat shock protein 90α,HSP90α)在食管癌(esophageal carcinoma,EC)细胞侵袭转移中的作用机制.方法:分别采用RT-PCR和Western blot检测HSP90α在具有不同侵袭转移潜能的EC细胞株CE81T-0和CE81T-4中mRNA水平和蛋白质水平的表达差异;细胞转染技术将siRNA-HSP90α转染入CE81T-4细胞中,并分为实验组、阴性对照组、空白对照组;并用RT-PCR和Western blot检测3组细胞中HSP90αmRNA水平和蛋白质水平的表达差异,验证是否转染成功.MTT法检测3组细胞的增殖活力,流式细胞术分析细胞周期、凋亡的改变,划痕实验和Transwell体外侵袭实验检测转染后CE81T-4细胞迁移和侵袭的变化.结果:CE81T-4细胞中的HSP90α的mRNA和蛋白质表达水平明显高于CE81T-0细胞(P0.05);siRNA-HSP90α成功转染CE81T-4细胞后,RT-PCR和Western blot检测3组结果显示,实验组中HSP90αmRNA水平和蛋白水平表达量显著低于空白对照组和阴性对照组(P0.05);MTT实验结果显示,实验组细胞的增殖能力明显减弱,与其他两组比较差异具有统计学意义(P0.05);HSP90α基因表达沉默后,细胞凋亡率为32.67%,较空白对照组和阴性对照组明显增加(P0.05);实验组细胞周期被阻滞在G0/G1期;Transwell体外侵袭实验显示实验组侵袭迁移的细胞数显著低于空白照组与阴性对照组(P0.05);划痕实验结果显示,72 h后实验组细胞的迁移力较其他两组明显降低.结论:HSP90α的下调会降低EC细胞的转移侵袭能力.     

超声破裂微泡介导骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死兔心室重构和血管新生的影响

目的:观察超声破裂微泡介导的骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对兔急性心肌梗死后心室重构和血管新生的影响。方法:取日本大耳白兔52只随机均分为4组:超声组(US组):采用超声波经兔胸壁辐照;微泡组(MB组):经静脉输注微泡造影剂;超声微泡联合组(US+MB组):经静脉输注微泡造影剂后采用超声辐照破裂微泡;空白对照组:不予超声及微泡处理。各组取骨髓体外培养BM-MSCs。结扎兔左冠脉前降支建立急性心肌梗死(AMI)模型,分别于再灌注1h后对各组动物采取超声或微泡处理后(对照组不予处理),经梗死相关动脉注射BM-MSCs悬液。术后24h和4周,测量各组兔左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVESd)、室间隔厚度(IVST)和左室后壁厚度(LVPWT)。术后4周,处死动物检测各组兔左心室质量(LVM)、左心室质量指数(LVMI)、兔新生血管数目和血管内皮生长因子(VEGF)浓度。结果:术后4周,与US组、MB组和空白对照组相比,US+MB组LVEDd[(12.77±0.65)mm、(12.97±1.00)mm、(12.78±0.71)mm比(11.71±0.54)mm]、LVESd[(9.63±0.57)mm、(9.92±0.90)mm、(9.69±0.51)mm比(8.39±0.32)mm]、IVST[(2.69±0.11)mm、(2.65±0.14)mm、(2.63±0.10)mm比(2.48±0.07)mm]和LVPWT[(2.74±0.19)mm、(2.66±0.12)mm、(2.68±0.16)mm比(2.51±0.11)mm]明显减小(P<0.05或<0.01),LVM[(5931.76±120.61)mg、(6022.35±116.87)mg、(6076.28±122.73)mg比(4930.66±172.30)mg]及LVMI[(2.17±0.19)mg/g、(2.24±0.07)mg/g、(2.33±0.25)mg/g比(1.83±0.01)mg/g]明显降低(P<0.01),新生血管数目[(4.00±1.61)个、(4.20±1.23)个、(4.18±1.72)个比(8.82±2.52)个]明显增多(P<0.01),VEGF浓度[(0.33±0.17)μg/g、(0.32±0.08)μg/g、(0.29±0.05)μg/g比(0.65±0.24)μg/g]明显升高(P<0.01)。结论:超声微泡破裂介导的BM-MSCs移植可提高梗死心肌VEGF表达,促进血管新生,改善心肌梗死后心室重构,提高心脏功能。     

NEDD9表达下调对结肠癌生物学行为的影响

背景:NEDD9在细胞迁移、趋化、凋亡、细胞周期中发挥重要作用,NEDD9 siRNA可有效降低基因表达,并从不同水平上促进细胞凋亡、阻断肿瘤细胞迁移和侵袭。目的:探讨NEDD9在结肠癌组织中的表达以及siRNA干扰NEDD9表达对结肠癌Caco-2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:收集2017年1月—2018年1月漯河市郾城区人民医院确诊的结肠癌组织和相应癌旁组织。常规培养结肠癌Caco-2细胞,采用LipofectamineTM2000转染细胞,并将细胞分为对照组、阴性对照组和siRNA干扰组。采用qRT-PCR法检测结肠癌组织和细胞中NEDD9 mRNA表达,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法检测NEDD9、MMP-9、Bcl-2、Bax、TIMP1蛋白表达。结果:结肠癌组织NEDD9 mRNA表达显著高于癌旁组织(P 0. 05)。与对照组相比,siRNA干扰组NEDD9 mRNA表达明显降低(P 0. 05),细胞增殖、迁移和侵袭能力受到明显抑制(P 0. 05),细胞凋亡增强(P 0. 05),NEDD9、MMP-9、Bcl-2蛋白表达显著降低(P 0. 05),Bax、TIMP1蛋白表达显著增加(P 0. 05)。结论:NEDD9基因可通过凋亡相关基因Bcl-2和Bax以及侵袭相关基因MMP-9和TIMP1来调控结肠癌Caco-2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。