柴胡疏肝散含药血清对NG108-15神经元多靶点干预的药物化学研究

目的:探索中药复方柴胡疏肝散配伍对神经元多靶点作用的物质基础和化学机制.方法:采用高效液相色谱对该复方含药血清、水煎剂和含药血清对NG108-15神经元细胞株干预后细胞内药物成分进行检测.结果:在血清和NG108-15神经元细胞中发现多种柴胡疏肝散水煎剂原型成分和移形成分.结论:实验证明柴胡疏肝散含药血清进入NG108-15细胞内部的药物有效成分有多种,符合霰弹靶点理论.     

柴胡舒肝散含药血清对乳腺癌MCF-7细胞的体外抑制作用及Bcl-2与VEGF的影响

目的 探讨柴胡舒肝散含药血清对人乳腺癌MCF-7细胞株体外抑制作用及Bcl-2与VEGF的影响.方法 选取SD雌性大鼠48只,随机分为空白对照组、他莫昔芬组和柴胡疏肝散高、低剂量组.利用他莫昔芬片和不同浓度的柴胡疏肝散进行干预,留取含药血清检测MCF-7细胞凋亡,Bcl-2的蛋白表达及血清中血管内皮生长因子(VEGF)...     

柴胡疏肝散对大鼠胃Cajal间质细胞活性及细胞内钙离子浓度的影响

目的观察柴胡疏肝散含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)活性及细胞内钙离子(Ca2+)浓度的影响。方法按照血清药理学通法制备大鼠含药血清,将血清分为柴胡疏肝散组(浓度为5%、10%、20%)、多潘立酮组(10%)、空白组,急性分离并采用酶解法提取胃窦ICCs进行常规培养,免疫荧光染色法鉴定ICCs,MTT法测定ICCs对数生长曲线,以含药血清继续培养对数生长期的ICCs 3天后,通过CCK-8法检测ICCs活性,激光共聚焦显微镜进行Fluo-3荧光检测ICCs细胞内Ca2+变化,比较各组含药血清对大鼠胃窦ICCs生长的影响。结果成功分离、培养和鉴定ICCs后,通过各组含药血清作用,与空白组同期比较,多潘立酮组、柴胡疏肝散组ICCs活性与细胞内Ca2+荧光强度均显著增强(P0.05);与多潘立酮组同期比较,10%、20%柴胡疏肝散组ICCs活性与细胞内Ca2+荧光强度均显著增强(P0.05);与5%柴胡疏肝散组同期比较,10%、20%柴胡疏肝散组ICCs活性(48、72 h)与细胞内Ca2+荧光强度均显著增强(P0.05)。结论柴胡疏肝散可以通过增强细胞内Ca2+浓度促进ICCs活性,促进其分化生长。     

柴胡疏肝散通过mir124调控海马神经元内p-CREB、BDNF表达的机制研究

目的:探索Mir124对大鼠海马神经元内p-CREB、BDNF蛋白的影响和作用机制以及中药柴胡疏肝散对此通路的干预作用。方法:培养海马神经元,并予中药柴胡疏肝散含药血清干预,转染rno-mir124建立mir124高表达系,实时定量RT-PCR检测mir124表达水平,Western-blot检测p-CREB、BDNF蛋白表达。结果:海马神经元经转染rno-mir124后成功建立了mir124高表达系,转染后p-CREB和BDNF蛋白表达降低,差异有显著性;而予柴胡疏肝散含药血清处理可抑制mir124表达,并进一步降低p-CREB,但空白血清加转染mir124组与柴胡疏肝散处理加转染mir124组之间比较,BDNF蛋白表达差异无统计学意义。结论:海马神经元内mir124表达升高,可以降低CREB磷酸化,进一步降低BDNF蛋白表达,从而影响海马神经元的可塑性,而中药柴胡疏肝散可以抑制mir124的表达,促进CREB磷酸化。     

基于生物方剂分析药理策略的柴胡疏肝散抗抑郁疗效质量标志物研究

目的在生物方剂分析药理(bioanalyticalpharmacology,BAP)策略的指导下,检测柴胡疏肝散水提物中具有抗抑郁作用的可吸收生物活性物质,为柴胡疏肝散抗抑郁疗效的质量标志物(quality marker,Q-Marker)评价提供依据。方法运用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定柴胡疏肝散水提取物中的28种成分;大鼠ig柴胡疏肝散水提取物,定性分析大鼠血浆中的化合物,筛选生物活性物质,探索具有抗抑郁作用的Q-Marker。结果从柴胡疏肝散水提物中的28种成分中确定了吸收入血的22个成分,筛选出的10个生物活性物质具有与柴胡疏肝散类似的抗抑郁疗效。结论芍药内酯苷、阿魏酸、柚皮苷、橙皮苷、水合橙皮内酯、甘草酸、柴胡皂苷A、川陈皮素、橘皮素、甘草次酸为柴胡疏肝散抗抑郁作用的Q-Marker。     

加味柴胡疏肝散及其拆方对心肌缺血合并抑郁症大鼠ACE2-Ang(Ⅰ-Ⅶ)-MasR轴的影响

目的:通过观察加味柴胡疏肝散及其拆方对高血脂状态心肌缺血合并抑郁症大鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)-血管紧张素(Ⅰ-Ⅶ)[Ang(Ⅰ-Ⅶ)]-线粒体组装受体(MasR)轴的影响,探讨其防治心肌缺血合并抑郁症的可能作用机制.方法:108只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,加味柴胡疏肝散组(11.7 g·kg-1),拆...     

柴胡疏肝散含药血清对衣霉素诱导NG108-15神经元内质网应激模型泛素基因表达的影响

目的:运用中药血清药理学方法研究柴胡疏肝散含药血清对内质网应激的保护作用并探讨其机制。方法:实验用衣霉素(TM)对NG108-15神经细胞进行诱导,建立内质网应激(ERS)细胞模型,柴胡疏肝散含药血清为干预组,采用逆转录聚合酶链式反应方法观察泛素(Ub)的m RNA表达水平。结果:各浓度柴胡疏肝散含药血清干预组Ub m RNA表达与模型组相比,表达水平明显上调,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:柴胡疏肝散方药对内质网应激引起的神经元损伤有显著的保护作用,其机制可能与泛素-蛋白酶体通路(UPP)相关联。     

柴胡疏肝散调控Notch通路抑制慢性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化的研究

目的 观察柴胡疏肝散对慢性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化病变的抑制作用,并探讨其对肝组织Notch通路的调控作用。方法 采用高脂饮食喂养50只成年SD大鼠建立慢性脂肪性肝炎模型,对建模成功者采用随机数字表分为模型组、阳性组及柴胡疏肝散低、中、高剂量组,另取8只成年SD大鼠记为正常组。阳性组予以罗格列酮2 mg/kg灌胃,柴胡疏肝散低、中、高剂量组分别予以3.15、6.30、12.60 g/kg柴胡疏肝散药液灌胃,模型组和正常组每100 g大鼠体质量予以1 mL质量分数为0.9%的氯化钠溶液灌胃,均每天1次,持续10周。HE染色观察建模情况;ELISA法检测各组大鼠干预后血清肝功能;放射免疫法检测各组大鼠干预后血清肝纤维化指标和羟脯氨酸（Hyp）含量;改良氯胺-T法检测肝组织Hyp含量;HE染色观察各组干预后肝组织病变,天狼猩红染色观察肝纤维化病变;采用RT-qPCR法及Western blot法分别检测各组干预后肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Notch1、Notch3、发状分裂相关增强子-1(Hes1)、α-肌动蛋白（α-SMA）mRNA和蛋白表达。结果 干预后模型组血清肝功能和肝...     

补骨脂-肉豆蔻药对含药血清指纹图谱研究

目的建立补骨脂-肉豆蔻药对含药血清指纹图谱并分析补骨脂-肉豆蔻药对的入血成分。方法对20只SD大鼠分别ig 10个不同批次的补骨脂-肉豆蔻药对提取物,采用UPLC法比较体外供试品、含药血清和空白血清指纹图谱,分析其入血成分。结果测定给药后入血成分并建立UPLC指纹图谱,标出13个共有峰(相似度均在0.90以上),其中10个峰来源于体外供试品中原型成分,3个峰为代谢产物。结论首次采用血清药物化学方法,建立了补骨脂-肉豆蔻药对血清指纹图谱,反映补骨脂-肉豆蔻药对口服给药吸收入血情况,为其体内药效物质研究奠定基础。     

柴胡疏肝散对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织SIRT1/p53通路相关蛋白的影响

目的探讨柴胡疏肝散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织沉默信息调节因子蛋白1(SIRT1)/p53通路相关蛋白表达的影响。方法将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、柴胡疏肝散组(9.6 g·kg-1),每组8只。正常对照组给予基础饲料,模型组和柴胡疏肝散组给予高脂饲料,柴胡疏肝散组同时给予柴胡疏肝散浸膏剂灌胃。16周后处死大鼠,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量和肝组织TC、TG含量;取肝组织行HE和油红O染色观察组织学改变;蛋白质印迹法检测肝组织SIRT1、p53、乙酰化p53(Ac-p53)蛋白表达。结果与模型组比较,柴胡疏肝散组肝组织病理学结果表明,脂质沉积明显减轻,血清LDL-C和肝组织TC、TG显著降低(P0.05,P0.01),肝组织SIRT1蛋白表达水平显著上调(P0.01),而Ac-p53蛋白表达水平下调(P0.05)。结论柴胡疏肝散能够减轻高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝组织脂质沉积,调控肝组织SIRT1/p53通路相关蛋白的表达水平可能是其作用机制之一。