低分子肝素对肾小球系膜细胞产生细胞外基质的影响

[目的]了解不同葡萄糖浓度环境下,低分子肝素对人系膜细胞表达纤维连接蛋白(FN)和IV型胶原作用。[方法]培养人肾小球系膜细胞,分为正常葡萄糖组、高葡萄糖组及加低分子肝素组,培养24、48 h收集细胞上清液,用酶联免疫法检测FN和IV型胶原。[结果]高糖组24和48 h FN分别为(1.552±0.546)ng/mL和(2.547±0.968)ng/mL明显高于正常糖组(0.777±0.076)ng/mL和(1.180±0.091)ng/mL(P<0.01);IV型胶原分别为(64.577±5.543)ng/mL和(80.140±6.605)ng/mL,明显高于正常糖组(42.468±5.615)ng/mL和(46.368±5.714)ng/mL(P<0.01)。在低分子肝素1 ng/mL的作用下,高糖组的FN24 h及FN48 h分别降低为(1.070±0.349)ng/mL及(1.918±0.074)ng/mL,IV型胶原24 h及IV型胶原48 h分别降低至(41.993±7.470)ng/mL及(40.490±4.377)ng/mL。低分子肝素提高至10 ng/mL时,高糖组的FN24 h及FN48 ...     

氟伐他汀对糖尿病大鼠心肌单核细胞趋化因子-1表达的影响

目的探讨氟伐他汀对糖尿病大鼠心肌单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的影响及意义。方法 32只大鼠分为正常对照组、糖尿病未治疗组、氟伐他汀小剂量治疗组及氟伐他汀大剂量治疗组,12周后称质量并计算心脏质量体质量比(H/B)和左室质量指数(LVMI),Western blot检测各组心肌MCP-1、纤维连接蛋白(FN)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的表达。结果糖尿病未治疗组H/B、LVMI增高;MCP-1、FN和ColⅢ的表达显著上调。氟伐他汀治疗能降低H/B(P<0.05～0.01)及LVMI(P<0.01);减少糖尿病大鼠心肌MCP-1、FN和ColⅢ的表达(均P<0.01),以上效应具有剂量依赖性。结论氟伐他汀可抑制糖尿病大鼠心肌细胞外基质积聚,MCP-1表达下调可能是其心脏保护的作用机制之一。     

辛伐他汀与阿托伐他汀对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞p27蛋白表达的影响

目的探讨辛伐他汀和阿托伐他汀对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞p27表达的影响。方法将体外培养大鼠肾小球系膜细胞分为正常对照组(葡萄糖浓度5.6mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度30mmol/L)、高糖辛伐他汀组(葡萄糖浓度30mmol/L,辛伐他汀浓度10μmol/L)、高糖阿托伐他汀组(葡萄糖浓度30mmol/L,阿托伐他汀浓度10μmol/L)。每组设置6个复孔,于24、48、72、120h收集细胞,Western blotting法测定大鼠肾小球系膜细胞p27蛋白的表达,逆转录PCR测定p27mRNA的表达。结果高糖组p27蛋白浓度及mRNA水平均较正常对照组升高(P<0.05);高糖辛伐他汀组及高糖阿托伐他汀组p27蛋白浓度及mRNA水平均较高糖组降低(P<0.05)。结论他汀类药物通过调节肾小球系膜细胞p27的表达,可发挥非依赖降脂的肾脏保护作用。     

TGF-β1介导新生大鼠心肌成纤维细胞Ⅰ型和Ⅳ型胶原合成的研究

目的:观察TGF-β1对原代培养的新生大鼠心肌成型与Ⅳ胶原表达的影响。方法:取出生3~7d的SD大鼠心脏,利用酶消化法结合差速贴壁体外培养心肌成纤维细胞;分别用不同浓度的TGF-β1(TGF-β1=10 ng/mL、1ng/mL、0 ng/mL)干预心肌成纤维细胞,分别于干预后5h、24h,采用RT-PCR检测I型胶原和Ⅳ型胶原的表达。结果:1.用0ng/mL(对照组),1ng/mL和10ng/mL的TGF-β1干预心肌成纤维细胞5h,RT-PCR检测I型胶原/β-actin光密度值分别为0.61±0.02,0.73±0.03和0.86±0.04,光密度值随着TGF-β1浓度的增加而增加,各组比较,差异有显著性(P<0.01);干预心肌成纤维细胞24h后,RT-PCR检测I型胶原/β-actin光密度值分别为0.65±.03,0.91±0.02和0.98±0.02,光密度值随着TGF-β1浓度的增加而增加,各组比较,差异有显著性(P<0.01)。2.用0 ng/mL(对照组),1ng/mL and 10ng/mL的TGF-β1干预心肌成纤维细胞5h,RT-PCR检测Ⅳ型胶原/β-actin光密度值分别为0.58±0.06,0.71±0.02,0.87±0.02,光密度值随着TGF-β1浓度的增加而增加,各组比较,差异有显著性(P<0.01);干预心肌成纤维细胞24h后,RT-PCR检测Ⅳ型胶原/β-actin光密度值分别为0.62±0.01,0.83±0.05,0.96±0.02,光密度值随着TGFβ1浓度的增加而增加,各组比较,差异有显著性(P<0.01)。结论:TGFβ1能加强I型和Ⅳ型胶原的表达,在24小时内呈时间和剂量依赖性。     

氟伐他汀对兔动脉粥样硬化血管壁NF-κB及ICAM-1表达的影响

目的:观察氟伐他汀对动脉粥样硬化(As)家兔模型血管壁核因子-kappaB(NF-κB)活性及mRNA、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响,以探讨氟伐他汀抗As的作用机制。方法:雄性新西兰家兔32只,随机分为对照组、高脂饮食组、氟伐他汀组。喂养12周后处死动物并留取主动脉标本,观察组织形态学变化,用免疫组化法观察NF-κB活性、ICAM-1表达,用原位杂交法观察NF-κBmRNA表达。结果:氟伐他汀组与高脂饮食组相比,As病变明显减轻(P<0.01);NF-κB活性由(40.3±5.9)%减弱为(17.3±2.4)%(P<0.01);NF-κBmRNA表达由(41.7±5.5)%减弱为(19.6±1.7)%(P<0.01);ICAM-1表达由(31.6±2.7)%减弱为(16.5±2.1)%(P<0.01)。结论:氟伐他汀抗As作用与抑制NF-κB活性,下调ICAM-1表达有关。     

氟伐他汀抑制Rho激酶信号通路减少HK-2细胞纤维连接蛋白表达

目的:探讨Rho激酶信号通路在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾间质纤维化中的作用,以及氟伐他汀在防治DN肾间质纤维化中的作用机制?方法:体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞),Rho激酶底物肌球蛋白磷酸酶目标亚单位-1(MYPT-1)的磷酸化作为Rho激酶活化的标志?高糖刺激HK-2细胞0?6?12?24 h,不同浓度(10-7?10-6?10-5 mol/L)氟伐他汀干预12 h,Western blot检测p-MYPT-1和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达?后续实验中Western blot检测Rho激酶选择性激动剂(lysophosphatidic acid,LPA)对氟伐他汀调节HK-2细胞p-MYPT-1和FN表达的影响?结果:相对于0 h,高糖刺激HK-2细胞6?12?24 h均可以激活p-MYPT-1,其中12 h到达高峰?高糖刺激FN的表达呈时间依赖性,氟伐他汀抑制高糖诱导的HK-2细胞p-MYPT-1的活化并抑制FN的表达,并呈浓度依赖性?LPA可以拮抗氟伐他汀的作用?结论:Rho激酶信号通路可能是DN肾间质纤维化发生的始动信号之一?氟伐他汀可能通过抑制Rho激酶磷酸化进而抑制FN的表达,从而起到一定的防治DN肾间质纤维化的作用?     

氟伐他汀对高糖诱导的大鼠系膜细胞ERK1/2和CTGF表达的调控

目的：观察氟伐他汀对高糖刺激下的大鼠系膜细胞ERK1/2活性及CTGF表达的影响,阐明糖尿病肾病(DN)的发生机制和早期防治。方法：实验分两部分,第一部分为重复已有的高糖对系膜细胞刺激作用的实验,验证高糖可通过激活ERK通路使系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达增加,且这种变化与高渗状态无关,分组如下：①正常对照组(NG);②高糖组(HG);③高渗组(MN);④NG+ERK抑制剂PD98059组(NG+PD);⑤HG+ERK抑制剂PD98059组(HG+PD)。第二部分观察氟伐他汀干预前、后ERK1/2活性和CTGF蛋白表达的变化,分组如下：①正常对照组(NG);②高糖组(HG);③正常糖+氟伐他汀组(NG+F);④高糖+氟伐他汀组(HG+F);⑤高糖+氟伐他汀及甲羟戊酸组(HG+F+M)。采用Western blotting、RT-PCR方法检测肾小球系膜细胞ERK1/2、CTGF蛋白及mRNA表达量,ELISA方法检测肾小球系膜细胞培养上清纤维连接蛋白（FN）含量,用考马斯亮兰法测定肾小球系膜细胞内总蛋白变化。结果：第一部分实验HG的ERK1/2活性、CTGF蛋白表达较NG明显增加(P<0.01),HG+PD的ERK1/2活性、CTGF蛋白表达较HG明显减少(P<0.01),而MN、NG+PD与NG比较差异无显著性。第二部分实验观察到HG的大鼠系膜细胞ERK1/2活性、CTGF蛋白及mRNA表达量较NG明显增高(P<0.01),且系膜细胞内总蛋白量和FN量明显增高(P<0.01);HG+F的ERK1/2 活性和CTGF mRNA及蛋白的表达较HG明显减少(P<0.01),同时系膜细胞内总蛋白量和FN量减少(P<0.01);HG+F+M的上述指标与HG+F比较差异无显著性。结论：氟伐他汀可能通过抑制ERK1/2活性降低肾小球内CTGF表达及FN含量,减轻肾小球肥大,起到抑制和延缓DN进展的作用。     

阿托伐他汀和卡托普利对高压培养下大鼠系膜细胞外基质的影响

目的 观察阿托伐他汀和卡托普利干预对连续周期性波动的高静水压下大鼠肾小球系膜细胞(RMC)细胞外基质(ECM)的影响.方法 RMC分别在生理压力(40 mm Hg,PP)、中压(60 mm Hg,MP)、高压(80 mm Hg,HP)环境下,不同药物(阿托伐他汀、卡托普利)中培养1、3、5、7 d.采用Western Blotting法测定细胞裂解液中胶原Ⅰ和Ⅳ、纤维连结生长因子(FN)的含量.结果 与PP组第1天相比,PP组第3、5、7天胶原Ⅰ/Ⅳ、FN浓度无明显变化;MP和HP组从第1天开始可见胶原Ⅰ/Ⅳ、FN水平呈时间依赖性升高,7 d达到最高.阿托伐他汀和卡托普利均能抑制MP、HP组胶原Ⅰ/Ⅳ和FN水平上升,胶原Ⅰ在1 d时,阿托伐他汀吸光度(A)值为1.06±0.12,1.16±0.14 vs 0.78±0.05;卡托普利A值为0.96±0.09,1.02±0.13 vs 0.71±0.06(P＜0.05).二者合用可使胶原Ⅰ/Ⅳ和FN水平进一步下降.结论 周期性波动的高静水压可使ECM积聚.阿托伐他汀和卡托普利能减轻高静水压引起的ECM积聚.二者合用存在协同作用.     

松弛素对马兜铃酸诱导的肾小管上皮细胞MMP9/TIMP1表达的影响

目的：探讨松弛素（RLX）对马兜铃酸诱导的肾小管上皮细胞（HK-2细胞）分泌细胞外基质、细胞基质金属蛋白酶-9（MMP9）和金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP1）表达的影响。方法：体外培养人近端肾小管HK-2细胞,根据是否给予马兜铃酸刺激及RLX干预随机分为对照组（无干预）、马兜铃酸组（马兜铃酸10ug/mL刺激48h）、松弛素组（松弛素10ng/mL干预48h）、RLX+马兜铃酸组（RLX 10ng/mL干预48h后再给予马兜铃酸10ug/mL刺激48h）。ELISA法检测各组细胞上清中Ⅳ型胶原、纤连蛋白的表达。免疫印迹技术检测细胞MMP9、TIMP1蛋白的表达。结果：与对照组比较,马兜铃酸组HK-2细胞分泌Ⅳ型胶原[（87.62±4.46） ng/mL 比（26.80±0.59）ng/mL,P<0.05）]、纤连蛋白水平增加[（53.86±0.62）ng/mL 比（23.06±0.18 ）ng/mL,P<0.05）],TIMP1表达上调[相对表达量为（3.72±0.33）比（1.00±0.11）,P<0.05],MMP9表达下降[相对表达量为（0.39±0.00）比（1.00±0.23）,P<0.05]。RLX可降低马兜铃酸组细胞Ⅳ型胶原[（47.32±0.68） ng/mL 比（87.62±4.46）ng/mL,P<0.05）]、纤连蛋白 [（37.61±2.38）ng/mL比（53.86±0.62） ng/mL,P<0.05）] 水平。同时,和非治疗组相比,RLX治疗组TIMP1表达下降[相对表达量为（2.04±0.15）比（3.72±0.33）,P<0.05],MMP9表达升高[相对表达量为（0.71±0.02）比（0.39±0.00）,P<0.05]。结论：RLX可改善马兜铃酸诱导的细胞外基质的失衡,促进细胞外基质的降解。作用机制可能与下调TIMP1 表达及上调MMP9表达有关。     

阿托伐他汀对家兔主动脉粥样硬化消退作用的初步观察

目的通过高脂饮食诱发家兔主动脉粥样硬化,观察阿托伐他汀对病变局部纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响及其抗动脉粥样硬化(AS)的作用。方法24只大耳白兔随机分为常规饲料组、胆固醇饲料组和阿托伐他汀组,饲养16周。观察实验前后血清胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和体质量的变化,处死动物后取主动脉进行病理学检查,采用免疫组化方法检测主动脉壁PAI-1阳性表达百分比。结果16周后阿托伐他汀组血清TC和LDL水平明显低于胆固醇饲料组,分别为(23.51±10.58)mmol/L和(14.27±3.51)mmol/L(P<0.01)、(21.39±10.00)mmol/L和(14.23±4.01)mmol/L(P<0.01)。病理学大体观察,对照组、胆固醇饲料组和阿托伐他汀组斑块/内膜面积比分别为0、0.28±0.37和0.16±0.27,组间比较差异有显著性(P<0.01);光镜下三组内膜厚度分别为4.45±0.58μm、(67.47±7.13)μm和(38.11±6.02)μm、内膜/中膜比分别为(0.0537±0.007)、(0.878±0.370)和(0.391±0.213),组间比较差异有显著性(P<0.01)。免疫组化检测胆固醇饲料组和阿托伐他汀组AS局部PAI-1的阳性表达百分比明显高于对照组(P<0.01);阿托伐他汀组较胆固醇饲料组PAI-1的表达明显减少(P<0.01)。结论阿托伐他汀具有降脂以外的抗AS的作用,抑制PAI-1的过度表达可能是其抗AS的机制之一。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

颅咽管瘤切除术后并发症的处理

目的　讨论颅咽管瘤切除术后并发症的处理原则。方法　分析 36例颅咽管瘤切除术后并发症的临床资料。结果　术后并发尿崩症者 14例、高热 11例、电解质紊乱 8例、消化道出血 3例、癫痫 5例 ,死亡2例。结论　颅咽管瘤术后并发症较多 ,加强早期监测和处理 ,可进一步提高该病的治愈率     

碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨

目的：评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法：通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果：碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论：碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。