基于STAT3/Survivin信号途径欣胃颗粒对胃癌前病变大鼠胃黏膜的影响

目的 探究欣胃颗粒对胃癌前病变(PLGC)模型大鼠胃黏膜中信号传导转录激活因子-3(STAT3)、存活素(Survivin)表达的影响。方法 采用N-甲基-N′-硝基-N′-亚硝基胍(MNNG)为主的联合造模法建立PLGC模型大鼠120只,按随机数字表法分成空白组、模型组、欣胃颗粒组和维酶素组,欣胃颗粒组分为低、中、高剂量组,共6组,每组20只大鼠,分别给予模型大鼠生理盐水、欣胃颗粒低、中、高剂量、维酶素连续治疗,12周后,观察大鼠胃黏膜病理变化,及胃黏膜STAT3、Survivin基因的表达情况。结果 与空白组比较,模型组、欣胃颗粒组、维酶素组STAT3 mRNA、Survivin mRNA表达水平相对均增高(P<0.05);与模型组比较,欣胃颗粒组、维酶素组STAT3 mRNA、Survivin mRNA表达水平相对均偏低(P<0.05);与维酶素组比较,欣胃颗粒组STAT3 mRNA、Survivin mRNA表达水平相对均偏低(P<0.05);与欣胃颗粒中剂量组比较,欣胃颗粒高、低剂量组表达水平相对均偏高(P<0.05),各组间差异具有统计学意义(P&l...     

利金方对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型JAK2-STAT3-RORyt信号通路的影响北大核心CSCD

目的探讨利金方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症细胞抑制作用的影响。方法将105只SPF级Wistar大鼠随机分为7组:空白组、模型组、利金方低剂量组、利金方中剂量组、利金方高剂量组、JAK2抑制剂组、STAT3抑制剂组,每组15只。除空白组外,其余各组通过烟熏等复合因素建立COPD大鼠模型。造模结束后,空白组、模型组给予生理盐水灌胃,利金方低剂量(3 g/mL)组、利金方中剂量(10.5 g/mL)组、利金方高剂量(21 g/mL)组分别给予不同浓度利金方灌胃,JAK2抑制剂组、STAT3抑制剂组分别予酪氨酸磷酸化抑制剂(AG490)试剂和STAT3信号传导通路抑制剂(WP1193)试剂腹腔注射。给药7天后,分别检测大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达,肺组织中JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清与支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-17含量。结果与空白组比较,模型组肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达与肺组织中JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达,及血清与BALF中IL-17分泌均升高(P<0.05);与模型组比较,用药组大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达和肺组织JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清、BALF中IL-17含量均下降(P<0.05,P<0.01);与利金方低剂量组比较,利金方高剂量组大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达和肺组织JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清、BALF中IL-17含量均下降(P<0.01);与利金方中剂量组比较,利金方高剂量组大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达和肺组织JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清、BALF中IL-17含量均下降(P<0.01)。结论利金方能够通过调控细胞免疫中上游JAK2-STAT3-RORyt信号通路,抑制炎症细胞分泌从而起到抗免疫炎症作用。     

欣胃颗粒对胃癌前病变大鼠胃黏膜关键因子Akt、P-GP表达的影响

目的探讨欣胃颗粒对胃癌前病变(PLGC)大鼠胃黏膜Akt、P-gp表达的影响。方法将健康的雄性Wistar大鼠120只根据体质量编号,按随机数字表法将Wistar大鼠随机分为4组。除空白组外,其他3组均自由饮用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG),采用标准的饲料雷尼替丁喂养,热盐水灌胃,同时配合饥饱失常的复合造模法进行造模。至16周结束,随机抽取模型组大鼠4只做胃黏膜病理组织学检查,确认模型成功后全部停止造模及干预药物。模型制备成功后随即处死所有大鼠,剖腹取胃,应用免疫组织化学法、Western Blot法检测胃黏膜组织中Akt、P-gp基因和蛋白的表达情况。结果模型组胃黏膜Akt、P-gp的表达较其他各组显著升高,欣胃颗粒可降低Akt、P-gp基因和蛋白的表达。结论欣胃颗粒可通过下调PLGC大鼠模型胃组织Akt、P-gp基因和蛋白的表达,从而促进抗细胞的增殖。     

基于JAK2/STAT3信号通路探究半夏泻心汤对慢性萎缩性胃炎大鼠的影响

目的：探讨半夏泻心汤对慢性萎缩性胃炎大鼠的保护作用及其对Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路的影响。方法：72只大鼠随机选取12只作为空白组,其余大鼠采用N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）溶液联合饥饱失常饮食控制法及雷尼替丁灌胃法建立慢性萎缩性胃炎大鼠模型,造模共12周。将造模成功的大鼠随机分为模型组、维酶素组、半夏泻心汤高剂量组、半夏泻心汤中剂量组、半夏泻心汤低剂量组。各给药组大鼠灌胃给予相应药物,空白组及模型组大鼠灌胃给予等体积生理盐水,1次/d,连续6周。HE染色观察大鼠胃黏膜组织病理变化;免疫组化检测Bax、Bcl-2蛋白表达;ELISA法检测大鼠胃组织中SOD、CAT、GSH-Px、MDA水平及TNF-α、IL-1β、IL-6水平;Western blotting法检测胃组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平。结果：与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜变薄,上皮细胞及腺体排列紊乱,腺体数目明显减少,可见大量炎症细胞浸润,SOD、CAT、GSH-Px水平及胃组织Bax蛋白表达均明显降低（P<0.01）;T...     

丹芪祛瘀止痛颗粒对慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠PTEN、RUNX3基因甲基化的影响

目的:探讨丹芪祛瘀止痛颗粒对PLGC大鼠胃黏膜组织PTEN、RUNX3基因甲基化及PTEN、RUNX3基因mRNA表达的影响。方法:将80只大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、维酶素组、丹芪祛瘀止痛颗粒组。除空白组外,其余各组均创建实验性大鼠PLGC模型。造模后,维酶素组和丹芪祛瘀止痛颗粒组给予相应药物灌胃,空白组和模型组以0.9%Nacl溶液灌胃,1次/d。灌胃12周后,观察各组胃组织病理学改变,MSP法检测PETN、Runx3基因甲基化及RT-PCR法检测PETN、Runx3 mRNA表达。结果:维酶素组、丹芪祛瘀止痛颗粒组均能改善胃黏膜组织炎症、萎缩、肠上皮化生、异型增生,其中以丹芪祛瘀止痛颗粒组最佳;造模后,模型组PTEN、RUNX3基因甲基化比率明显高于空白组(P<0.01),药物干预后,维酶素组甲基化比率下调,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);丹芪祛瘀止痛颗粒组与模型组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01),且丹芪祛瘀止痛颗粒组PTEN、RUNX3基因甲基化比率明显低于维酶素组(P<0.01)。RT-PCR结果显示,模型组大鼠PTEN mRNA、RUNX3 mRNA较模型组显著下降(P<0.01),药物干预后PTEN mRNA、RUNX3 mRNA显著上调,其中以丹芪祛瘀止痛颗粒组效果最佳,差异具有统计学意义(维酶素组P<0.05,丹芪祛瘀止痛颗粒组P<0.01)。结论:丹芪祛瘀止痛颗粒可明显改善PLGC大鼠胃黏膜组织萎缩、肠上皮化生及异型增生情况,其作用机制可能是通过降低基因甲基化比率,上调PTEN、RUNX3基因mRNA表达实现的。     

消痞颗粒对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜组织miR-21-PTEN-PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨消痞颗粒治疗胃癌前病变的可能作用机制。方法 70只Wistar大鼠随机分为空白组10只,造模组60只。造模组采用以200μg/ml的N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍溶液每只5ml/(kg·d)灌胃,配合自由饮用0.05%氨水溶液及食含0.03%雷尼替丁的颗粒状饲料,三种因素联合建立胃癌前病变大鼠模型。44周末将造模成功的41只大鼠随机分为模型组14只、维酶素组14只、消痞颗粒组13只。模型组大鼠予生理盐水3ml/(kg·d)灌胃,维酶素组予维酶素片0.3g/(kg·d)灌胃,消痞颗粒组予消痞颗粒9g/(kg·d)灌胃,共给药12周。采用RT-PCR法检测大鼠胃黏膜组织miR-21、张力蛋白同源基因(PTEN)基因表达,采用ELISA法检测大鼠胃黏膜组织磷酸肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)蛋白表达。结果各组大鼠胃黏膜组织miR-21、PTEN基因表达及AKT、PI3K蛋白表达差异均有统计学意义(P0.01)。与空白组比较,模型组和维酶素组miR-21基因表达升高,PTEN基因表达降低(P0.01);模型组、维酶素组、消痞颗粒组AKT、PI3K蛋白表达均升高(P0.01)。与模型组比较,消痞颗粒组miR-21基因表达降低,PTEN基因表达升高,AKT、PI3K蛋白表达均降低(P0.01),而维酶素组各指标与模型组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论消痞颗粒可能通过抑制胃黏膜组织miR-21异常表达来调控PTEN基因,从而对PI3K/AKT信号通路进行干预来逆转胃癌前病变的发生。     

欣胃颗粒对胃癌前病变大鼠胃黏膜关键因子NF-κB、COX-2表达的影响

目的:探讨欣胃颗粒对胃癌前病变(PLGC)大鼠胃黏膜NF-κB、COX-2表达的影响。方法:将健康的雄性Wistar大鼠120只根据体质量编号,按随机数字表法将Wistar大鼠随机分为4组。除空白组外,其他3组均自由饮用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG),采用标准的饲料雷尼替丁喂养,热盐水灌胃,同时配合饥饱失常的复合造模法进行造模。至16周结束,随机抽取模型组大鼠4只做胃黏膜病理组织学检查,确认模型成功后全部停止造模及干预药物。模型制备成功后随即处死所有大鼠,剖腹取胃,应用免疫组织化学法、Western Blot法检测胃黏膜组织中NF-κB,COX-2基因和蛋白的表达情况。结果:模型组胃黏膜NF-κB,COX-2的表达较其他各组显著升高,欣胃颗粒可降低NF-κB,COX-2基因和蛋白的表达。结论:欣胃颗粒可通过下调PLGC大鼠模型胃组织NF-κB、COX-2基因和蛋白的表达,从而促进胃黏膜上皮细胞凋亡与抗细胞增殖。     

化痰消瘀方对胃癌前病变大鼠PTEN、FAK及paxillin表达的影响

目的观察化痰消瘀方对胃癌前病变大鼠PTEN、FAK及paxillin表达的影响,从分子生物学水平探讨其逆转胃癌前病变的作用机制。方法选择90只4~5周龄SD雄性大鼠,随机取15只作为空白组,其余大鼠均采用N-甲基-N’-硝基N-亚硝基胍综合饥饱失常、浓盐水灌胃的方法制备胃癌前病变大鼠模型。将造模成功大鼠随机分为模型组,中药高、中、低剂量组及维酶素组,每组13只。空白组正常饮食,余均造模成功后,模型组给予生理盐水灌胃,中药高、中、低剂量组分别给予3 m L/kg、2 m L/kg、1 m L/kg化痰消瘀方灌胃,维酶素组给予10 m L/kg维酶素灌胃,均灌胃8周。采用HE染色法观察大鼠胃黏膜病理改变情况,应用免疫组化法检测胃黏膜组织中PTEN、FAK及paxillin的表达情况。结果 HE染色显示空白组大鼠胃黏膜无癌前病变改变,模型组均出现不同程度的胃癌前病变改变,中药高、中剂量组和维酶素组胃黏膜癌前病变情况均较模型组明显改善(P均0.05),且中药高剂量组改善程度高于其他各给药组(P均0.05)。免疫组化结果显示PTEN在空白组强阳性表达;模型组鲜有表达;中药高、中、低剂量组表达量逐渐降低,但高于模型组(P均0.05);中药高剂量组PTEN表达量高于其他各给药组(P均0.05)。FAK、paxillin在空白组极少表达,模型组表达量较空白组显著增加(P均0.05);中药高、中、低剂量组二者表达量均明显低于模型组(P均0.05),其中高剂量组表达量明显低于其他各给药组(P均0.05)。结论中药化痰消瘀方可显著改善胃癌前病变大鼠胃黏膜组织病理学情况,其作用机制可能是激活抑癌基因PTEN,调节FAK的去磷酸化,通过FAK/Src信号通路下调paxillin来诱导细胞凋亡。     

基于血管内皮细胞代谢途径探讨莪蚕健胃方治疗大鼠胃癌前病变的机制

目的:通过研究莪蚕健胃方对胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)模型大鼠胃黏膜组织中磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶3(phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 3,PFKFB3)、肉碱脂酰转移酶1A(carnitine palmityl transferase A,CPT1A)及谷氨酰胺酶1(glutaminase1,GLS1)蛋白表达的影响,探讨莪蚕健胃方防治PLGC的作用机制,为莪蚕健胃方的应用及推广提供理论依据。方法:将60只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组10只、造模组50只。正常对照组给予蒸馏水自由饮用,造模组采取复合造模法造模,连续自由饮用120 mg/L N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)20周。造模期间,自16周开始,每周选取2只大鼠,取胃黏膜送病检观察模型是否建立;至20周,确定造模成功后,随机取造模组2只大鼠检测以再次确认模型建立成功。将造模组剩余大鼠随机均分为模型对照组、胃复春组、莪蚕健胃方低剂量组、莪蚕健胃方高剂量组。自第21周起,正常对照组、模型对照组给予2 mL蒸馏水灌胃。胃复春组按0.06 g/(kg·g)量给予胃复春汤剂灌胃,灌胃容积2 mL。莪蚕健胃方低、高剂量组依次按8.05,16.10 g/(kg·d)胃灌胃莪蚕健胃方汤剂,灌胃容积2 mL。各组均1次/d,连续10周。观察大鼠的一般情况;麻醉后取胃组织,运用苏木精-伊红染色法观察大鼠胃黏膜组织病理学形态,采用免疫组化测定大鼠MVD、PFKEB3、CPT1A及GLS1蛋白表达情况。结果:在PFKEB3、CPT1A、GLS1蛋白表达方面,与正常对照组对比,模型对照组中CPT1A及GLS1蛋白表达量均显著增高,差异显著(P<0.01),PFKFB3蛋白表达量增高,差异有统计学意义(P<0.05);经胃复春和莪蚕健胃方干预后,与模型对照组对比,胃复春组、莪蚕健胃方高剂量组CPT1A及GLS1蛋白表达量显著降低,差异显著(P<0.01),PFKFB3蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05),莪蚕健胃低剂量组PFKEB3、CPT1A、GLS1蛋白表达量无明显差异(P>0.05);胃复春组和莪蚕健胃高剂量组的PFKEB3、CPT1A、GLS1蛋白表达量无明显差异(P>0.05)。结论:①在胃癌前病变阶段新生血管生成活跃,此阶段PFKFB3、CPT1A及GLS1蛋白均呈现高表达;②莪蚕健胃方能明显降低胃癌前病变胃黏膜组织中的PFKFB3、CPT1A及GLS1蛋白表达量;③莪蚕健胃方能有效治疗PLGC,可能通过下调PFKEB3、CPT1A及GLS1蛋白表达量,进而干预PLGC血管内皮细胞代谢,抑制血管生成,从而起到干预PLGC向胃癌发展的进程。     

香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织PI3K信号通路相关因子表达的影响

目的观察香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃组织血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)的影响,探讨该复方防治CAG的作用机制。方法将120只Wistar大鼠分为空白组和模型组,采用综合法制作CAG动物模型,将成模大鼠分为模型组、维酶素组和香砂六君子汤高、中、低剂量组,空白组和模型组大鼠给予10 mL/(kg·d)蒸馏水灌胃,香砂六君子汤高、中、低剂量组分别给予24、12、6 g/(kg·d)香砂六君子汤灌胃,维酶素组给予0.30 g/(kg·d)维酶素灌胃,连续120 d。ELISA检测大鼠胃组织VEGF含量,RT-PCR和Western blot分别检测大鼠胃组织PTEN、PI3K、AKT基因和蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠一般状况较差,胃黏膜变薄,上皮细胞及腺体排列紊乱、稀疏,腺体数目明显减少,黏膜肌层增厚向固有层延伸,可见大量炎性细胞浸润,胃组织PTEN基因及蛋白表达显著降低(P0.01),VEGF含量和AKT、PI3K基因及蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,香砂六君子汤高剂量组大鼠胃组织PTEN基因表达显著升高(P0.01),VEGF含量和AKT、PI3K基因及蛋白表达显著降低(P0.01)。结论香砂六君子汤通过改善模型大鼠生存状况及胃黏膜病理状态,上调胃组织PTEN表达,下调VEGF、AKT、PI3K表达,发挥治疗CAG的作用。     

温胆汤对肥胖痰湿证大鼠相关炎症因子及JAK2/STAT3通路关键分子STAT3表达的影响

目的:观察温胆汤对肥胖痰湿证大鼠外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素(IL)-6,IL~(-1)7,IL-22等相关炎症因子以及下丘脑组织Janus激酶2/信号传导子及转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路关键分子STAT3 mRNA和蛋白表达的影响,探讨温胆汤干预肥胖痰湿证的内在作用机制。方法:将100只大鼠随机分成2组(空白组30只和造模组70只),空白组采用基础饲料喂养,造模组采用高脂饲料喂养,共6周,制作肥胖痰湿证动物模型。造模成功后,视体质量情况,按顺序淘汰体质量过轻者,遴选出16只肥胖大鼠,并随机分成模型组和温胆汤干预组,每组8只;另在空白组大鼠中随机选取8只设为正常组。温胆汤干预组按剂量15 g·kg~(-1)(以生药量计算)进行灌胃,模型组和正常组均给予等量蒸馏水进行灌胃,每天1次,共6周。麻醉处理前12 h禁食不禁水,麻醉后进行样本取材,检测并计算大鼠体质量,Lee's指数和肥胖率,根据试剂盒要求采用全自动生化分析仪检测大鼠总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠外周血血清中相关细胞因子TNF-α,IL~(-1)7,IL-22,IL-6的表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测大鼠下丘脑组织中STAT3 mRNA的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定大鼠下丘脑组织中STAT3蛋白的表达。结果:高脂饲料喂养成功复制了肥胖大鼠模型,造模组大鼠肥胖率 20%,且与空白组比较,造模组体质量和Lee's指数显著升高(P 0. 05,P 0. 01)。与正常组比较,模型组大鼠体质量显著升高(P 0. 01),血脂水平显著改变(P 0. 01),相关炎性因子(TNF-α,IL-6,IL~(-1)7和IL-22)的水平显著升高(P 0. 01),下丘脑组织中STAT3 mRNA和蛋白的表达显著升高(P 0. 01)。与模型组比较,温胆汤干预组大鼠体质量和Lee's指数显著下降(P 0. 05,P 0. 01),血脂水平显著变化(P 0. 01),相关炎性因子(TNF-α,IL-6,IL~(-1)7和IL-22)的水平显著下降(P 0. 01),下丘脑组织中STAT3 mRNA和蛋白的表达显著下降(P 0. 01)。结论:温胆汤可改善肥胖大鼠痰湿病理状态,其作用机制可能与调节JAK2/STAT3信号通路进而改善机体的慢性炎症状态有关,为温胆汤干预肥胖痰湿证提供了实验依据。     

加味茵陈蒿汤对湿热哮喘大鼠气道白细胞介素-6, 信号转导因子-3表达的影响及与气道炎症的关系

目的: 探讨加味茵陈蒿汤对湿热哮喘大鼠气道急性炎症的影响及其可能的机制。 方法: 50只健康雄性SD大鼠随机分成5组,每组10只,分别为空白组、湿热哮喘模型组、加味茵陈蒿汤低、高剂量组(6.29,12.58 g ·kg^-1 ·d^-1)、地塞米松组(0.08 mg ·kg^-1 ·d^-1)。多因素干预建立湿热哮喘大鼠模型,实验第16天开始给药,末次激发24 h以内处死大鼠,腹主动脉采血,留取肺组织检测。对各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞进行计数和炎性细胞分类,酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定BALF中细胞因子白细胞介素(IL)-2,IL-4,IL-5,IL-6,干扰素-γ(IFN-γ)水平,免疫组织化学染色检测气道信号转导因子-3(STAT3)蛋白表达,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,RT-PCR定量检测肺组织STAT3水平。应用SPSS 17.0软件进行统计分析。 结果: 与正常组比较,模型组IL-4,IL-5,IL-6水平升高(P<0.05),IL-2,IFN-γ水平降低(P<0.05),气道STAT3蛋白、肺组织STAT3 mRNA水平升高;与模型组比较,各给药组大鼠IL-4,IL-5,IL-6水平降低(P<0.05),IL-2,IFN-γ水平均升高(P<0.05),且哮喘大鼠BALF中IL-6,气道STAT3蛋白,肺组织STAT3 mRNA分别与BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞,淋巴细胞,IL-4,IL-5,IL-6呈正相关(P<0.01),与IL-2,IFN-γ呈负相关(P<0.01)。各给药组均可降低气道炎症及STAT3信号通路表达,地塞米松组疗效最优,其次为加味茵陈蒿汤低剂量组。 结论: 加味茵陈蒿汤能明显降低气道炎症,其作用机制可能与抑制IL-6/STAT3信号通路表达从而调节Thl/Th2细胞因子失衡有关。     

熊胆粉对肝癌移植瘤裸鼠STAT3通路的影响

目的观察熊胆粉对肝癌皮下移植瘤裸鼠信号转导与转录激活因子3（STAT3）通路及其下游靶基因的影响,探讨熊胆粉治疗肝癌的作用机制。方法采用人肝癌细胞株HepG_2构建裸鼠皮下移植瘤模型,待皮下移植瘤形成后,将裸鼠随机分为熊胆粉组和对照组,每天分别给予熊胆粉和生理盐水,连续给药3周,每周测量体重和瘤体积2次,给药结束,剥取瘤体称量瘤重及计算抑瘤率;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法（TUNEL）检测瘤组织的细胞凋亡情况;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Bcl2-associated X蛋白（Bax）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（BcI-2）、周期蛋白依赖性蛋白激酶4（CDK4）、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）mRNA表达;免疫组化测定磷酸化的信号转导与转录活化因子3（p-STAT3）、增殖细胞核抗原（PCNA）、Bax、Bcl-2、CDK4、cyclinD1蛋白表达。结果熊胆粉显著抑制肿瘤的体积和瘤重,与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。TUNEL法结果显示熊胆粉显著促进肝癌细胞凋亡。RT-PCR结果显示熊胆粉促进Bax表达而抑制Bcl-2、CDK4、cycIinD1 mRNA表达。免疫组化结果显示熊胆粉促进Bax表达而抑制p-STAT3、PCNA、BcI-2、CDK4、cyclinD1蛋白表达。结论熊胆粉可以通过调控STAT3通路抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡。     

紫草素抑制STAT3信号通路对人绒毛膜癌

目的:观察紫草素抑制信号传导和转录激活因子-3（STAT₃）信号通路对人绒毛膜癌JEG-3细胞迁移和侵袭能力的影响,探讨其抗绒毛膜癌的可能机制。方法:体外培养JEG-3细胞,加入0.2、0.4μg·mL^-1紫草素作为实验组,阴性对照组加入等体积0.1%二甲基亚砜,甲氨蝶呤组（MTX组）作为阳性对照组加入2μg·mL^-1MTX。采用划痕修复实验、Transwell小室体外侵袭实验,观察紫草素对JEG-3细胞迁移和侵袭能力的影响。采用免疫组织化学分析STAT₃和酪氨酸磷酸化STAT₃（p-STAT₃）阳性细胞的表达。进一步采用Real-Time PCR分析STAT₃mRNA和pSTAT₃mRNA的表达。结果:紫草素可显著抑制JEG-3细胞迁移和侵袭能力（P<0.05或P<0.01）,降低STAT₃和pSTAT₃阳性细胞的表达以及STAT₃mRNA和p-STAT₃mRNA的表达（P<0.05或P<0.01）。结论:紫草素能明显抑制JEG-3细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与抑制STAT₃信号通路有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对肝星状细胞LX-2中STAT1信号的影响

目的 通过考察绿茶提取物中主要活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯（（一）-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人源肝星状细胞株LX-2中STAT1信号的影响,探讨EGCG抗肝纤维化的新作用机制。方法 用不同浓度的EGCG处理LX-2细胞,利用蛋白印迹法检测磷酸化STAT1、总STAT1以及procollagen-α1,α-SMA蛋白表达;利用RT-PCR检测干扰素-γ（IFN--γ）的mRNA表达水平。进一步通过蛋白印迹法考察JAK1/2抑制剂AG490对EGCG调控磷酸化STAT1以及procollagen-α1、α-SMA蛋白表达的影响。通过荧光素酶报告基因方法检测EGCG对STAT1二聚化的影响。结果 EGCG剂量依赖性和时间依赖性地增加了LX-2细胞中磷酸化STAT1的表达,并增强了IFN-γmRNA表达水平。同时EGCG剂量依赖性地降低了LX-2细胞中procollagen-α1和α-SMA蛋白表达。JAK1/2抑制剂AG490阻断EGCG诱导的磷酸化STAT1上调,同时逆转了EGCG对procollagen-α和α-SMA表达的抑制。此外,EGCG增加了LX-2细胞核蛋白中STAT1的二聚体化程度。结论 EGCG可以通过促进LX-2细胞中STAT1磷酸化以及二聚体形成,并增加IFN-γ的表达抑制肝星状细胞功能。