骨碎补总黄酮治疗骨质疏松症作用机理实验研究进展

随着社会人口的老龄化,具有人体衰老特征的骨质疏松症的发病率越来越高,如何进行防治已成为当今医学领域研究的热点。从血生化、生物力学、形态学、细胞生物学、分子生物学等多角度说明骨碎补总黄酮对骨质疏松症的药理作用,从科学的角度探究其治疗机制,为该药临床推广应用提供一定的佐证。     

升麻提取物对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的作用

毛茛科升麻属多种植物的根茎在我国传统中药中作为治疗妇女崩漏、子宫下坠等症的妇科良药。在欧洲,升麻属植物总状升麻Cimicifuga racemosa(Turcz.)Maxim.也用于治疗妇女更年期综合征,其提取物制成的产品已在欧美上市[1]。最近研究发现其中的三萜类成分具有抗骨质疏松活性。本实验利用去卵巢诱导大鼠骨质疏松症模型,研究升麻提取物(含升麻三萜苷71.2%)对去卵巢致骨质疏松大鼠股骨生物力学及血清雌二醇(E2)水平的影响,以探讨其作用机制,为开发防治骨质疏松的药物提供理论依据。1材料与方法1.1药材、试剂及仪器:升麻提取物(山东省天然药物工…     

补肾益肝方对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的:探讨补肾益肝方对骨质疏松症的治疗作用.方法:以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV%、TRS%、TFS%、MAR、OWS和mAR.结果:大鼠切除卵巢后,胫骨TBV%显著降低,TRS%以及TFS%、MAR、OWS和mAR均显著增高,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症.给大鼠灌服补肾益肝方后,能使上述情况发生逆转,即能使TBV%显著增高,使TRS%以及TFS%、MAR、OWS和mAR均显著降低.结论:补肾益肝方对骨质疏松症具有良好的治疗作用.     

温补肾阳方对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的：探讨温补肾阳方对骨质疏松症的治疗作用。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV％、TRS％、TFS％、AFSN、MAR、BFR、OWS和mAR。结果：大鼠切除卵巢后,胫骨TBV％降低,TRS％以及TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR均显著增高,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症。给大鼠灌服温补肾阳方后,能使上述情况发生逆转,即能使TBV％显著增高,使TRS％以及TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR均显著降低,并能使之降低到与正常大鼠相当的水平。结论：温补肾阳方对骨质疏松症具有良好的治疗作用。     

黔岭藿合剂对大鼠卵巢切除诱发实验性骨质疏松症的影响

黔岭藿合剂是一个治疗骨质疏松症的复方。实验表明：大鼠去势后三个月可建立绝经后高转型骨质疏松症模型。治疗三个月后，中药组、尼尔雌醇组较模型组空腹尿钙／肌肝、羟脯氨酸／肌肝比值均明显降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；血清雌二醇、骨矿含量和骨密度亦升高；而中药组血清骨钙素高于尼尔雌醇组、模型组（Ｐ＜０．０５）；尼尔雌醇组血清碱性磷酸酶均低中药组、模型组（均为Ｐ＜０．０５）。黔岭藿合剂能改善骨质疏松模型大鼠的骨丢失状态，起到保护骨骼作用。     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因水平的影响

目的:应用cDNA array技术分析骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因水平的影响。方法:制作去卵巢大鼠模型,24周后,活杀动物,腹主动脉取血6 mL,并取出脊髓4锄,抽提totalRNA,分离mRNA,进行检测。结果:空白对照组血样与模型组的差异为70个基因,空白对照组与骨碎补总黄酮组的差异为9个基因。骨碎补总黄酮灌服后大鼠模型基因过度表达基本恢复正常。该实验cDNA array分析中脊髓基因基本无差异。结论:骨碎补总黄酮灌服6 个月后大鼠模型基因过度表达能基本恢复正常。表明骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因表达水平有一定的影响。     

杜仲、千年健对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

目的:探讨具有温补肾阳作用的单味中药杜仲、千年健对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理。方法:将72只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组、杜仲组以及千年健组6组。给药3个月后,采用骨组织形态计量学方法对不脱钙骨切片进行形态计量,免疫组化和原位杂交法检测大鼠胫骨OB和MSC OPG、RANKL蛋白及其mRNA表达。结果:与模型组相比,杜仲组、千年健组胫骨TBV%显著增高,TRS%明显降低,千年健组TFS%、MAR、OSW明显降低,杜仲组无显著性变化;千年健组OB和MSC OPG蛋白及其mRNA的表达显著升高,RANKL蛋白及其mRNA表达明显降低;杜仲组OB和MSC RANKL蛋白及其mRNA表达明显降低。结论:千年健不仅可以增加OB和MSC OPG蛋白及其mRNA表达,还能抑制RANKL蛋白及其mRNA的表达,而杜仲是通过抑制OB和MSC RANKL蛋白及其mRNA表达达到治疗骨质疏松症作用的。     

骨碎补治疗去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

目的：观察骨碎补对去卵巢后骨质疏松大鼠骨密度、微结构和生物力学性能的影响,研究骨碎补对治疗骨质疏松的作用。方法：30只6月龄SD大鼠随机分为3组：去卵巢组（OVX）、假手术组（SHAM）和骨碎补治疗组（OVX＋D）。骨碎补治疗3个月后,检测各组大鼠的骨密度、微结构、生物力学性能的变化,并比较各组间差异。结果：OVX＋D组的的骨密度、微结构、生物力学指标与OVX组比较差异有统计学意义,与SHAM组比较差异无统计学意义。结论：骨碎补可以增加去卵巢后骨质疏松大鼠的骨密度,改善微结构,提高生物力学性能,对实验动物的骨质疏松有治疗作用。     

淫羊藿、骨碎补对去睾丸大鼠骨质疏松症的影响

目的:观察补肾中药淫羊藿、骨碎补单用及合用对去睾丸SD大鼠骨质疏松症的影响。方法:将50只6月龄的雄性SD大鼠随机分为:正常组、病理组、淫羊藿组、骨碎补组以及淫羊藿合骨碎补5组。通过造模及分别用药12周后检测各组骨密度、骨形态计量学参数的变化并比较各组间差异。结果:淫羊藿组、骨碎补组、及淫羊藿合骨碎补组不同程度地抑制去睾丸大鼠的股骨、胫骨的BMD的下降(P<0.05),只有淫羊藿合骨碎补组与其他用药组BMD存在统计学差异(P<0.01);各药物干预可明显改善骨小梁面积百分率、骨小梁数目、骨小梁周长指标的降低,淫羊藿合骨碎补组组可见骨小梁厚度显著性增高(P<0.01)。结论:各药物治疗组对去睾雄性大鼠的骨质疏松症有一定疗效,且淫羊藿、骨碎补两者合用疗效更佳。     

补肾密骨液对切除卵巢大鼠实验性骨质疏松症骨质无机元素的影响

本文观察了补肾密骨液对切除卵巢大鼠诱导的实验性骨质疏松症骨质无机元素的影响，并与尼尔雌醇组、盐水组、模型组、正常组对照。用药三月后处死全部大鼠，测定胫骨骨质中的Ｃａ、Ｎａ、Ｋａ、Ｍｇ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｃｕ诸元素的含量。结果显示，中药组Ｃａ、Ｍｇ、Ｍｎ、Ｃｕ含量明显高于模型组及盐水组（Ｐ均＜０．０５），且与尼尔雌醇组比较无显著性差异。表明实验性骨质疏松症在病理发展和逆转过程中，Ｃａ、Ｍｇ、Ｍｎ、Ｃｕ这四种元素代谢十分活跃；提示在补肾密骨液作用下这四种元素含量增高，可能是该方治疗骨质疏松症的疗效机理之一。     

骨立对去卵巢大鼠骨质疏松症防治作用的实验研究

运用骨立冲剂对切除卵巢大鼠复制的类似“肾虚”骨质疏松症模型进行干预,并与西药对照组结果进行比较,通过对血清中反映骨代谢的生化指标及骨小梁形态检测结果进行综合分析,证实骨立防治原发性骨质疏松症的疗效并探讨其防治机理。方法:将60只大鼠按随机原则分成假手术组(Sham组)、造模组(Model组)、骨立高剂量组(H-GSL组)、骨立中剂量组(M-GL组)、骨立低剂量组(L-GL组)和己烯雌酚阳性对照组(DES组),共6个组,每组10只。去卵巢造模后按不同要求进行干预,12周后观察各组结果并做比较分析。结果:骨立能明显提高去卵巢大鼠的雌激素水平,纠正去卵巢后骨的高转换率,以保持适度的骨转换,减少骨质丢失,并阻止大鼠骨小梁结构的破坏;骨立高剂量组与己烯雌酚组E2水平相当(P>0.05)。结论:骨立能有效阻止骨质疏松症的发生与发展,其机制可能主要是通过抑制骨高转换率而实现其作用的。     

补肾壮骨胶囊对去势雄性大鼠骨质疏松症的影响

目的：了解补肾壮骨胶囊对卵巢切除大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法：采用临床检验方法测定补肾壮骨胶囊对卵巢切除大鼠血清钙、磷、血清碱性磷酸酶的影响，用骨形态计量学方法检测补肾壮骨胶囊对卵巢切除大鼠右后肢股骨治疗反应。结果：与假手术组相比，模型对照组的血钙、血磷显著下降，碱性磷酸酶升高。相对骨体积明显缩小（P＜0.01)。与模型对照组相比，补肾壮骨胶囊高、低剂量组血钙、血磷显著升高，碱性磷酸酶下降，相对骨体积明显增加（P＜0.05)。结论：补肾壮骨胶囊对卵巢切除大鼠骨质疏松症有明显的防治作用。     

秦皮对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨

目的:初步探讨秦皮治疗骨质疏松症的作用机理。方法:健康雌性SD大鼠40只按随机数字表法分为空白对照组、假手术组各10只、造模组20只,造模组大鼠行双侧卵巢切除术制作骨质疏松症模型,造模结束后再将造模组大鼠按随机数字表法分为模型组和秦皮组各10只,开始给予相应药物。给药3个月后取左侧胫骨检测骨组织形态计量学指标,取右侧胫骨检测大鼠胫骨骨髓中OPG和RANKL的蛋白表达。结果:模型组大鼠胫骨TBV%、胫骨骨髓中OPG蛋白表达显著低于假手术组,而RANKL蛋白表达及TRS%、TFS%、OSW和MAR均明显高于假手术组。与模型组比较,秦皮组大鼠胫骨TBV%、OPG蛋白表达明显增高,但仍显著低于假手术组;而RANKL蛋白表达、TRS%、TFS%、OSW和MAR均明显降低。结论:秦皮对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用,其作用途径是对OPG/RANKL通路进行调节,促进OPG蛋白表达而抑制RANKL蛋白表达,从而抑制过度增强的破骨细胞活性,防止骨量的快速丢失。     

仙灵强骨口服液对去势老龄大鼠骨质疏松症的预防作用

目的以去卵巢老龄大鼠为实验对象,观察仙灵强骨口服液对绝经后骨质疏松症的影响。方法50只7月龄SD大鼠去除卵巢后,随机分为5组:模型组、尼尔雌醇组、仙灵强骨口服液高剂量组、仙灵强骨口服液中剂量组、仙灵强骨口服液低剂量组,同时设假手术组。手术结束后第3天开始给药,连续90d。所有大鼠给药80、87d时两次ip四环素20mg/kg进行骨荧光标记;给药末日股动脉放血,收集血液,分离出血清,测定ALP及StrACP;取出大鼠股骨及第四腰椎骨进行骨密度、骨形态计量学、骨生物力学测定。结果仙灵强骨口服液能显著降低血清StrACP水平,提高椎骨刚性,增加股骨,破坏载荷及刚度,增高骨小梁体积,降低单标表面、双标表面、类骨表面、类骨质宽、成骨表面、吸收表面、矿化率及矿化时间。结论仙灵强骨口服液对绝经后骨质疏松症模型大鼠有预防作用。     

骨碎补总黄酮治疗老年性骨质疏松症（低转换型）生命质量的评价

目的从生命质量角度评价骨碎补总黄酮治疗老年性骨质疏松症的效果。方法选择老年性骨质疏松症（低转换型）者70例。采用随机对照的方法,分为治疗组（口服骨碎补总黄酮）36例,对照组（口服钙尔奇D）34例,依据对腰背痛及腰痛综合评分进行动态观察;依据＂疼痛VAS线段分级法＂对腰背痛进行量化动态观察;依据＂Barthel指数评定法＂对老年性骨质疏松症日常生活活动能力（ADL）进行观察,评价骨碎补总黄酮治疗老年性骨质疏松症的临床效果。结果 ＂疼痛六点行为评分法（BRS-6）＂观察显示,治疗前患者的腰背痛及腰痛多在Ⅲ～Ⅴ级之间,疼痛无法忽视,对日常生活有一定的影响。运用骨碎补总黄酮治疗3个月后疼痛分级多降至Ⅰ～Ⅱ级,自觉疼痛基本消失。＂疼痛VAS线段分级法＂观察显示,治疗前静止时腰背痛、久坐时腰背痛、步行时腰背痛均呈现中度疼痛,翻身时腰背痛、起身时腰背痛、弯腰时腰背痛、腰背压痛与叩击痛多表现重度疼痛,而以弯腰时腰背痛、腰背叩击痛尤为显著,部分病人腰背痛对睡眠会有一定影响。运用骨碎补总黄酮治疗3个月后,各种行为方式引起的腰背痛均有不同程度的改善。＂Barthel指数评定法＂对日常生活活动能力（ADL）进行观察显示：治疗前多数病人Barthel指数评分为60～40分,表现中度残疾,有功能障碍,生活需要帮助;治疗3个月后积分可达到90分以上,生活基本自理,生活独立性有一定程度的改善,生活质量有很大提高。结论骨碎补总黄酮能够全面提高老年性骨质疏松症患者的生命质量,缓解腰背痛,提升独立性生活水准。     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨密度和细胞因子IL-6、IL-4、TNFα水平的影响

目的:通过去卵巢大鼠骨质疏松模型,研究骨碎补总黄酮对骨密度和血清IL-6、IL-4、TNFα水平的影响.方法:采用X线骨密度测量仪测定大鼠股骨、腰椎骨密度;应用放免法,通过自动酶免分析仪测定血清IL-6、IL-4、TNFα水平,在550nm光下读取OD值,应用标准曲线计算含量.结果:骨碎补总黄酮能显著提高大鼠股骨、腰椎骨密度,作用明显优于骨松宝对照组.骨碎补总黄酮能调节细胞因子IL-6、IL-4、TNFα的水平,其中中剂量组IL-6、TNFα较模型组明显降低,骨碎补总黄酮三个剂量组和阳性对照组IL-4含量明显高于模型组.结论:骨碎补总黄酮能明显提高去卵巢大鼠的骨密度,对血清TNFα、IL-6水平有抑制作用,对IL-4分泌有促进作用.     

仙灵强骨口服液对去势老龄大鼠骨质疏松症的影响

目的：观察仙灵强骨口服液对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法：采用12月龄SD雌性大鼠,行双侧卵巢切除术,随机分为强骨口服液高、中、低剂量组(6,3,1.5 g·kg^-1))和阳性药(尼尔雌醇)组、模型组、假手术组。术后45 d开始给药,给药90 d后取出大鼠股骨及第四腰椎骨进行股骨骨形态计量学测定、股骨骨密度测量、股骨三点弯曲实验及椎骨压缩实验,同时测定血清中碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)水平。结果：仙灵强骨口服液可显著增加骨密度、降低血清StrACP水平,明显提高骨最大应力、弹性模量、刚度水平,同时对股骨形态计量学有改善作用。结论：仙灵强骨口服液对去卵巢大鼠的骨质疏松症有治疗作用。     

补脾益肾方对去卵巢骨质疏松症模型大鼠防治作用研究

目的观察补脾益肾方对去卵巢骨质疏松症模型大鼠的影响,探讨其对围绝经期骨质疏松症的防治作用。方法将50只健康大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、中药组、西药组5组,每组10只。去卵巢手术制备骨质疏松症模型。药物治疗12周后,双能X线骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度,ELISA法检测血清ALP、OC、MMP-2、PICP、TGF-β1表达水平。结果与正常组比较,模型组骨密度水平显著下降(P0.01),血清ALP、OC、MMP-2、PICP水平显著升高(P0.01或P0.05),TGF-β1水平显著降低(P0.05);与模型组比较,中药组骨密度水平显著升高(P0.01),血清ALP、OC、MMP-2、PICP水平显著下降(P0.01或P0.05),TGF-β1水平显著升高(P0.05)。结论补脾益肾方对去卵巢骨质疏松症模型大鼠具有防治作用,能有效抑制骨量丢失,促进骨形成。     

左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠IL-1和IL-6活性的影响

目的:探讨左归丸防治骨质疏松症的机理。方法:以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨骨小梁体积百分比(TBV%)、骨小梁吸收表面百分比(TRS%)和骨小梁形成表面百分比(TFS%),采用放射免疫分析法测定外周血清中雌二醇(E_2)含量,分别采用小鼠胸腺细胞检测法和依赖株细胞增殖反应法测定白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)的活性。结果:左归丸能使胫骨TBV%显著增高,使TRS%和TFS%显著降低。大鼠切除卵巢后,E_2含量大幅度降低,而IL-1和IL—6活性显著增高。左归丸对E_2含量无显著性影响,但对IL—1和IL—6活性有明显的抑制作用。结论:左归丸能够抑制IL-1和IL-6的活性是其防治骨质疏松症的机理之一。     

骨碎补对实验性骨性关节炎的治疗作用

用形态学观察骨碎补对160只骨性关节炎模型大鼠的治疗作用。结果表明:骨碎补具有一定的改善软骨细胞的功能、推迟细胞退行性变、降低骨关节病病变率的治疗作用。