221株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌qacA/qacB基因检测及临床意义

目的 了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)qacA/qacB(qacA/B)消毒剂耐药基因存在状况,并讨论其临床意义.方法 收集221株临床分离的MRSA进行qacA/B基因检测.结果 221株MRSA中qacA/B检出101株(45.7%),其中71株并作qacA基因特异性聚合酶链反应(PCR)检测,检出qacA基因20株(28.2%),而该71株qacA/B基因检出27株(38.0%),提示有7株为qacB基因.结论 MRSA已出现高频度的qacA/B消毒剂耐药基因,用氯己定等消毒剂预防术后医院感染必须重新评估;现行的消毒剂或消毒方法的有效性,应引起我国医院消毒界的广泛重视;消毒剂耐药基因检测技术为细菌耐消毒剂的临床应用研究和分子流行病学研究等提供了具有实际应用价值的技术手段.     

医院与社区获得性感染金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因初步研究

目的比较耐消毒剂基因在本地区医院与社区获得性感染金黄色葡萄球菌(SAU)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的流行状态。方法收集从临床标本中分离出的SAU和MRSA菌株,将其分为医院与社区获得性感染两组,用PCR方法检测耐消毒剂基因qacA/B,并对组间检出率进行比较。结果本地区医院与社区获得性感染SAU耐消毒剂基因的携带率分别为52.2%和18.8%,组间差异有统计学意义(P=0.0151,<0.05);23株医院获得性SAU中,MRSA占73.9%,16株社区获得性感染SAU中,MRSA占43.8%;医院与社区获得性MRSA耐消毒剂基因qacA/B检出率分别为58.8%、0,组间差异有统计学意义(P=0.0099,<0.01)。结论医院获得性感染SAU耐消毒剂基因的携带率高于社区获得性感染SAU,这可能是由于医院环境中消毒剂选择压力和(或)携带耐消毒剂基因的菌株在医院内水平传播速度较快的结果。     

浙江、江西地区MRSA耐mecA、qacA/B基因检测

目的了解浙江、江西地区临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(meticillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)中mecA基因及qacA/B基因存在状况. 方法在2004年1～12月间分别从浙江、江西地区住院患者中分离到42株和31株MRSA,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析技术检测mecA基因及qacA/B基因. 结果 73株MRSA中mecA基因均为阳性(100%),qacA/B基因34株(46.6%)阳性,其中浙江地区qacA/B基因阳性率为52.4%,江西地区为38.7%. 结论浙江、江西地区临床分离的MRSA中mecA基因和qacA/B基因携带率很高或较高.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因检测

目的了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(meticillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)中耐消毒剂基因(qacA)及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因(mecA、TEM)存在状况. 方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测20株MRSA中qacA、mecA和TEM基因. 结果20株MRSA中,qacA、mecA和TEM基因PCR扩增均阳性. 结论临床分离的MRSA中qacA、mecA和TEM基因携带率均很高;在MRSA中发现qacA基因为我国首次报道.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及耐消毒剂基因的研究

目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行细菌耐药性分析及耐药基因和耐消毒剂基因的试验研究。方法对临床分离47株MRSA进行菌株鉴定、药敏试验和β-内酰胺类耐药相关基因(mecA),氨基糖苷类耐药相关基因[aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant(4′,4″)],耐消毒剂基因[qac(A/B)]等主要耐药基因和耐消毒剂基因的检测。结果47株MRSA对抗菌药物氨苄西林/舒巴坦、头孢西丁、红霉素、苯唑西林、青霉素均耐药,其他抗菌药物耐药率分别为克林霉素(87.0%)、庆大霉素(91.3%)、利福平(28.3%)、四环素(76.1%)、复方新诺明(65.2%)、左氧氟沙星(71.7%)、呋喃妥因(0.0)、万古霉素(0.0);47株MRSA共检出mecA基因46株,aac(6′)/aph(2″)基因39株,aph(3′)-Ⅲ基因30株,ant(4′,4″)基因6株,qac(A/B)基因19株。结论MRSA为多重耐药菌,对氨基糖苷类耐药和耐消毒剂分别与携带氨基糖苷类耐药基因和耐消毒剂基因有关,临床医生应重视MRSA的诊断与治疗,加强MRSA的医院感染控制。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及耐消毒剂基因研究

目的 了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性及β-内酰胺类耐药相关基因和耐消毒剂基因存在情况.方法 对临床分离的56株MRSA用K-B纸片扩散法测定对青霉素等16种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链反应(PCR)法检测β-内酰胺类耐药相关基因(mecA)及耐消毒剂基因qac(A/B).结果 56株MRSA对万古霉素、替考拉宁均敏感,对复方新诺明、呋喃妥因、利福平、四环素、左氧氟沙星、克林霉素、阿奇霉素的耐药率分别为17.9%、23.2%、82.1%、87.5%、89.3%、92.9%、96.4%,对红霉素、庆大霉素、阿米卡星、青霉素、氨苄西林/舒巴坦、头孢西丁、氨苄西林均耐药;共检出mecA基因54株(96.4%),qac(A/B)基因31株(55.4%).结论 临床分离的MRSA为多药耐药菌,qac(A/B)基因携带率很高.     

新生儿病房分离金黄色葡萄球菌耐药性及耐消毒剂基因检测

目的了解新生儿病房送检标本中金黄色葡萄球菌的耐药谱及耐消毒剂基因携带情况。方法收集2013年1—12月某院新生儿病房住院新生儿送检标本分离的金黄色葡萄球菌,采用VITEK2 Compact细菌鉴定分析系统进行细菌鉴定及药敏试验,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐消毒剂qacA/B基因。结果新生儿科送检标本中共分离225株金黄色葡萄球菌,主要来源于呼吸道(72.44%)和脐部分泌物(14.33%);耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为8.89%(20株);耐药监测中,MRSA的耐药率普遍高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)。左氧氟沙星、莫西沙星、替加环素、万古霉素、利奈唑胺及呋喃妥因对所有金黄色葡萄球菌均显示出良好的抗菌活性,敏感率均为100%。携带qacA/B基因的金黄色葡萄球菌有21株,阳性率为9.33%,其中MRSA3株(15.00%),MSSA18株(8.78%)。结论新生儿病房分离的MRSA耐药严重,同时携带qacA/B基因,应引起临床重视。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和溶血葡萄球菌耐药基因的检测

目的 对医院临床标本中分离的36株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和24株耐甲氧西林溶血葡萄球菌(MRSH)进行常见耐药基因的检测,探讨MRSH与MRSA临床分离株耐药基因检出率之间的差异.方法 用MicroScan auto SCAN4仪进行细菌鉴定和药敏试验;用聚合酶链反应(PCR)法检测耐消毒剂qacA/B基因、耐氨基糖苷类药物的aac(6')/aph(2")、aph(3')-Ⅲ、ant(4',4")基因、产β-内酰胺酶基因TEM、编码PBP2a的mecA基因、耐红霉素erm、耐四环素tetM、耐万古霉素vanA等基因;用肉汤稀释法对携带了耐消毒剂qacA/B基因的葡萄球菌属进行消毒剂苯扎溴铵最低抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)测定.结果 24株MRSH耐消毒剂qacA/B基因的阳性率为37.5%;氨基糖苷类药物耐药基因aac(6')/aph(2")、aph(3')-Ⅲ和ant(4',4")阳性率分别分别为87.5%、33.3%和29.2%,TEM基因、erm基因和tetM基因的阳性率为95.8%、62.5%和20.8%;36株MRSA耐消毒剂qacA/B基因阳性率为30.6%;氨基糖苷类药物耐药基因aac(6')/aph(2")、aph(3')-Ⅲ和ant(4'、4")阳性率分别为91.7%、72.2%和8.3%;TEM基因、erm基因和tetM阳性率分别为100.0%、94.4%和91.7%;MRSH和MRSA临床株的苯扎溴铵MIC值均为32～128 mg/L,MBC值MRSH为256～512 mg/L,MRSA为512～1024 mg/L,标准菌株ATCC25923的苯扎溴铵MIC值为16 mg/L,MBC值为32 mg/L.结论 MRSA与MRSH临床分离株携带多种耐药基因且检出率非常高.     

皮肤软组织来源MRSA耐消毒剂基因qacA/B检测和抗性分析

目的调查皮肤软组织来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐消毒剂基因(qacA/B)的携带情况,分析携带qacA/B的MRSA对3种消毒剂的抗性。方法随机选取医院获得性MRSA和社区获得性MRSA各32株,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐消毒剂基因qacA/B,对qacA/B阳性株选择最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验进行消毒剂抗性分析。结果皮肤软组织来源的MRSA耐消毒剂基因qacA/B的检出率为18.5%;社区获得性MRSA和医院获得性MRSA耐消毒剂基因的检出率分别为15.6%(5/32)和21.8%(7/32),两者无统计学差异(P0.05);qacA/B阳性组的MIC较qacA/B阴性组高(P0.05);qacA/B阳性组抗性率大于qacA/B阴性组。结论本地区MRSA中qacA/B的检出率较低,qacA/B阳性菌株对消毒剂的抗性增强,临床上应避免使用低浓度消毒剂。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型及同源性研究

目的对下呼吸道标本中分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药机制、同源性及分子生物学分型进行研究,从分子水平了解其耐药特点,为临床用药提供参考依据。方法于2012年7月-2013年4月住院患者送检的下呼吸道标本中分离出金黄色葡萄球菌66株,常规方法进行分离鉴定,根据2013年CLIS规定检测其耐药性;PCR技术检测mecA基因,对其进行SCCmec分子生物学分型及耐消毒剂基因(qacA/B)检测;利用RAPD技术对其进行同源性分析。结果凝胶电泳结果表明,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分子分型全部为ccrAB3型,mecA、qacA/B基因的携带率100.0%,并且同源性分析有5个克隆型。结论临床分离的下呼吸道标本耐甲氧西林金黄色葡萄球菌全部为ccrAB3型,并对普通消毒剂有相当程度的抗性;分离到的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中同源性分型不同菌株耐药率与其基因型之间存在有一定的关系,且这些菌株均为多药耐药株。     

倾向指数配比分析（PSM）：MRSA与MSSA医院获得性肺炎预后比较

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是否增加医院获得性肺炎（HAP）患者的负担。方法选择2013年1月1日—2014年11月31日某院金黄色葡萄球菌肺炎感染者,病例组为MRSA HAP患者,对照组为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）HAP患者,采用倾向指数配比分析（PSM）,比较MRSA与MSSA HAP预后（住院时间、感染至出院时长、病死率、总治疗成本）。结果PSM匹配前病例组APACHE II评分高于对照组,住院时间［40(20,94)d］、感染至出院时长［19(10,46)d］均长于对照组［分别为28(21,53)、17(8,29)d］（均P＜0.05）。匹配后病例组和对照组APACHE II评分比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,资料均衡可比;两组患者住院时间［28(21,52)d vs 28(21,53) d］、感染至出院时长［15(9,25)d vs17(8,29) d］、病死率［10.87% vs 15.22%］、治疗总费用［121 013.5(80 747.21, 176 200) 元 vs 119 911.2(66 994.08,241 184.7)元］比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论APACHE II评分是影响预后的重要因素;均衡此因素后,MRSA和MSSA HAP患者预后无差异,MRSA HAP未增加疾病负担。     

重症监护室耐甲氧西林金黄色葡萄球菌主动筛查检出率分析

目的对某院重症监护室（ICU）住院患者开展快速准确的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）主动筛查，为临床推广MRSA主动筛查和制定更有效的多重耐药菌感染控制措施提供依据。方法将2011年11月1日-2012年4月30日入住该院ICU的患者设为对照组（79例，采用常规细菌培养方法对疑似感染患者进行MRSA检测），2012年6月1日-11月30日入住该院ICU的患者设为干预组（86例，采用快速可靠的MRSA产色培养基对该组患者进行MRSA主动筛查），对比分析两组的MRSA检出率。结果干预组和对照组患者在年龄、疾病分类评分、置管率方面比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；对照组的平均住院时间为（20.77±7.27）d，显著长于干预组的（18.13±6.90）d（t=2.39，P=0.02）。干预组与对照组患者在入ICU时MRSA检出率分别为3.80%（3/79）和1.16%（1/86），出ICU时MRSA检出率分别为5.06%（4/79）和5.81%（5/86），差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论选用MRSA产色培养基开展主动筛查，可以为及时实施接触隔离预防措施提供循证依据，更有利于接触预防措施的落实。     

ICU患者MRSA定植与感染的危险因素研究

目的比较重症监护室(ICU)、呼吸内科监护室(RICU)和神经外科监护室(NSICU)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)定植与感染状况,探讨患者MRSA定植/感染的危险因素。方法采用前瞻性研究方法,连续收集2013年5月1日—7月31日入住某院3个ICU患者的临床资料,采集患者(医护人员)鼻拭子及其周围环境标本进行MRSA检测。结果 197例患者,检出MRSA22株,MRSA定植率为11.17%;ICU、RICU和NSICU定植率分别为4.00%、11.90%和15.87%,差别无统计学意义(χ2=4.04,P=0.133)。患者临床标本MRSA检出率为2.03%(4/197),医护人员MRSA鼻前庭定植率为1.72%(2/116)。MRSA定植患者周围环境中MRSA检出率为22.73%(5/22),高于非定植患者4.00%(7/175)(χ2=8.93,P=0.003)。多因素logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁、侵入性操作、住ICU时间长和近期使用抗菌药物是MRSA定植/感染的独立危险因素。结论临床应主动对入住ICU的患者进行MRSA定植筛查,采取有效措施,防止MRSA在医院环境与患者间的双向传播;同时,尽量避免使用侵入性操作,减少患者住院日和合理使用抗菌药物,减少ICU患者MRSA定植与感染的发生。     

重症监护病房MRSA感染的危险因素

目的了解患者入住重症监护病房(ICU) MRSA感染的危险因素。方法选取2014—2016年某三级综合性医院ICU患者825例,采用病例对照研究,病例组为入住ICU 48 h后MRSA感染者,对照组为入住ICU 48h后无MRSA感染者,进行单因素和多因素logistic分析。结果 825例患者中,64例患者发生了MRSA感染,感染率为7. 76%。MRSA感染以肺部感染居多(占45. 31%),其次为皮肤软组织感染(18. 75%)、手术部位切口感染和血流感染(各占9. 38%)、颅内感染和腹腔感染(各占6. 25%)、胸腔感染(4. 68%)。多因素logistic回归分析结果显示,一个月内接受过手术(OR 95%CI:2. 628～9. 166)、外伤(OR 95%CI:2. 248～9. 280)、气管插管时长 7 d(OR95%CI:1. 651～11. 746)、昏迷(OR 95%CI:1. 813～8. 334)、长期卧床(OR 95%CI:1. 362～10. 127)、再次入住ICU(OR 95%CI:1. 475～7. 915)、肠外营养(OR 95%CI:1. 521～7. 518)、使用两联及以上抗菌药物(OR 95%CI:1. 523～6. 132)、多器官功能衰竭(OR 95%CI:1. 024～3. 948)是ICU患者MRSA感染的独立危险因素(均P 0. 05)。结论预防与控制ICU MRSA的产生与传播,应严格执行接触隔离措施,重点关注气管插管、多器官功能衰竭、昏迷、长期卧床、外伤等高危人群MRSA的防控,在患者达到条件的情况下应尽快转出ICU。     

临床分离金黄色葡萄球菌的耐药特点和MRSA分子分型

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其基因分型。方法收集某院2014年1月—2015年11月检出的非重复金黄色葡萄球菌967株,检测其药敏结果及mecA抗性基因、杀白细胞素(PVL)基因;MRSA菌株经多重PCR进行葡萄球菌盒式染色体mec(SCCmec)分型、多位点序列分型(MLST)、金黄色葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型、金黄色葡萄球菌附属因子调节子(agr)分型。结果 967株金黄色葡萄球菌共检出210株MRSA,MRSA检出率为21.72%;痰标本MRSA检出率高于皮肤软组织标本(68.09%vs 11.83%,P0.05);金黄色葡萄球菌中未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,MRSA对庆大霉素、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、呋喃妥因、利福平的敏感率均低于MSSA,差异均有统计学意义(均P0.05);MRSA对复方磺胺甲口恶唑的敏感率高于MSSA,差异有统计学意义(P0.05)。皮肤软组织分离的MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、利福平的敏感率为86.90%~95.24%,而痰分离的MRSA仅为1.56%~15.63%。967株金黄色葡萄球菌检测出210株携带mecA基因,10株携带PVL基因,210株MRSA中有8株未分型,占3.81%。MLST主要以ST239(177株)为主;SCCmec分型主要以Ⅲ型(177株)为主;spa分型主要以t 030(177株)为主;agr分型主要以Ⅰ型(196株)为主。结论该院MRSA菌株主要流行克隆ST239-MRSA-SCCmecⅢ-t030,耐药形势严峻,应加强医院内耐药菌株的监测。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对不同消毒剂的抗性研究

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）对不同消毒剂的抗性,探讨合理的消毒剂使用方案。方法以头孢西丁纸片扩散法（K—B法）筛选MRSA菌株,检测70％乙醇、0．5％氯己定醇、10％碘伏、0．5％氯已定对MRSA的最小抑菌浓度（MIC）,比较MIC差异,并进行定量的杀菌试验检测。结果氯已定、碘伏、氯已定醇、乙醇的MIC50分别为64．0、64．0、2．4、1．0~g／mL;在30s内,乙醇对MRSA的杀菌率在90％以上,在2min内,乙醇可清除MRSA。结论MRSA对氯已定、碘伏有抗性,对氯已定醇和乙醇敏感。     

消毒湿巾对新生儿病房环境物体表面消毒的效果

目的比较消毒湿巾与含氯消毒剂的消毒效果,为改进医院感染防控措施提供依据。方法按消毒方法分为伽玛卫生湿巾组、洁力佳表面消毒巾组和84消毒剂组,分别对新生儿病房床单位进行清洁消毒,在消毒前及消毒后5、10、30、60 min五个时间点对新生儿病房床单位表面采样,每组每个时间点分别采集标本30份,比较组间细菌菌落数、杀灭率和消毒合格率,同时筛查物体表面耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出情况。结果消毒后5、10、30 min,床单位物体表面三组间细菌菌落数及杀灭率比较,差异无统计学意义(P0.05)。消毒后60 min,细菌菌落数伽玛卫生湿巾组[(2.61±0.41)CFU/cm~2]、洁力佳表面消毒巾组[(2.71±0.42)CFU/cm~2]低于84消毒剂组[(4.08±0.33)CFU/cm~2],差异有统计学意义(P0.05);细菌杀灭率伽玛卫生湿巾组[(72.36±3.90)%]、洁力佳表面消毒巾组[(71.49±4.77)%]优于84消毒剂组[(55.92±3.22)%],差异有统计学意义(P0.05)。床单位物体表面消毒合格率伽玛卫生湿巾组(86.67%)优于84消毒剂组(63.33%),差异有统计学意义(P0.05)。三种消毒方法均能有效清除物体表面MRSA。结论消毒湿巾消毒效果可靠,且能有效杀灭新生儿病房床单位物体表面多重耐药菌,适用于新生儿等高风险环境。     

一种医用消毒超声耦合剂对五种多重耐药菌的杀灭效果

目的观察一种医用消毒超声耦合剂对临床分离的五种常见多重耐药菌的杀灭效果。方法选取一种以三氯羟基二苯醚、丙二醇等为主要有效成分的医用消毒超声耦合剂,于2016年3月—2017年5月对临床分离的五种常见多重耐药菌进行载体定量杀灭试验,观察其对五种常见多重耐药菌的杀灭效果。结果该医用消毒超声耦合剂原液作用1.5、3.0、4.5 min,对多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、多重耐药铜绿假单胞菌(MDR-PA)、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)、产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌(ESBLs-EC)五种常见耐药菌的载体杀灭对数值均3.0。结论该医用消毒超声耦合剂对五种常见多重耐药菌有消毒作用,在超声诊疗中可代替消毒剂使用。