成纤维细胞特异蛋白-1在肺癌中的表达及其临床生物学意义

目的研究成纤维细胞特异蛋白-1（S100A4）在人肺癌中的表达及其临床生物学意义，探讨其在肺癌侵袭和转移中的作用。方法采用S-P免疫组化法检测50例肺癌及6例正常肺组织中S100A4的表达水平。结果S100A4在肺癌中表达显著高于正常肺组织；非小细胞肺癌中表达明显高于小细胞肺癌（P〈0．05）；腺癌中表达明显高于鳞癌（P〈0．05）。S100A4表达与非小细胞肺癌临床病理特征关系密切，在有淋巴结转移组与无转移组中两者均差异有统计学意义（P〈0．05）。在肺癌不同临床TNM分期中。S100A4阳性表达随临床分期的升高而明显增加，各期间均差异有统计学意义（P〈0．05）。S100A4阳性率随肺癌细胞分化程度的降低也有升高趋势。但差异无统计学意义。S100A4表达与肿瘤大小有密切的正相关关系，随肿瘤体积的增大。S100A4的阳性率升高（P〈0．05）。结论S100A4与肺癌的侵袭和转移有密切的关系，可以作为评估肺癌病人预后的重要指标。     

碱性成纤维细胞生长因子及其受体在胃癌及癌前病变中的表达及其意义

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）及成纤维细胞生长因子受体-2（fibroblast growth factor receptor-2,FGFR-2）在胃癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化SP法检测100例胃癌及癌旁组织,bFGF和FGFR-2的表达及两者之间的关系。结果胃癌中bFGF和FGFR-2表达明显高于癌旁组织及正常组织（P〈0．01）,胃癌组织中bFGF、FGFR-2表达的水平与临床病理分期有关,中晚期胃癌bF-GF及FGFR-2阳性率明显高于早期胃癌（P〈0．05）,胃癌组织中bFGF与FGFR-2表达呈正相关,随bFGF表达的增高FGFR-2表达亦增高（P〈0．05）。结论bFGF和FGFR-2在胃癌组织中表达明显增高可能与肿瘤的发生发展有关。     

Tiam1在肺癌及正常肺组织中的表达规律及其临床意义

目的 通过分析肺癌病人病灶组织中T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1（Tiaml）的蛋白表达水平分析其在肺癌转移.发生以及发展过程中的作用.方法 我院对204例肺癌患者的病灶组织,40例正常正常肺组织以及40例胎儿的肺组织采用点阵的对T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1蛋白表达水平进行了强度定量分析,分别比较了T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1在肺癌组织、转移组织、正常肺组织和胎儿肺组织中的表达变化情况.结果 肺癌患者病灶组织中T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1的阳性单位PU值为13.5±5.42,正常人上皮细胞和胎儿肺组织上皮细胞的阳性单位PU值分别为5.67±1.56和5.89±1.45,肺癌组织中表达量显著性高于正常肺癌组织和胎儿肺组织（P＜0.01）;存在淋巴结转移组和无淋巴结转移组的T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1的PU值分别为15.23±4.34和12.53±4.23,两组比较具有显著性统计学意义（P＜0.05）;按照不同TNM分期,Ⅲ-Ⅳ期和Ⅰ-Ⅱ期的患者T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1的PU值分别为14.71±4.14和10.95±5.34（P＜0.05）;同时结果显示肺癌组织中的T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1的表达水平与患者的年龄,肿瘤大小、肿瘤组织类型以及肿瘤分化程度没有相关性.结论 肿瘤患者肺癌病灶组织中T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1的表达水平显著高于正常肺组织以及胎儿肺组织,T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1的表达水平与肺癌的发生、发展以及转移有着密切的关系.     

金属硫蛋白在肺癌细胞系中的表达及其临床意义

目的探讨肺鳞癌、腺癌中金属硫蛋白在肺癌细胞系中的表达。方法运用SP免疫组化方法检测检测肺癌细胞系的表达定位。结果 MT在肺癌细胞系A549、BE1表达,均为胞浆表达。在HBE为胞核表达。结论 MT在非小细胞肺癌转移起促进作用。     

二氧化硅对人肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞IL-1β表达意义

目的探讨二氧化硅(SiO2)刺激矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)条件培养上清对人胚肺成纤维细胞(FB)白细胞介素(IL)-1β表达的影响。方法用酶联免疫吸附法检测离体经或不经SiO2刺激的矽肺患者AM在3、6、12、18、24、36 h上清中IL-1β的表达,取IL-1β表达高峰点的AM上清作为条件培养上清。采用免疫细胞化学法检测AM条件培养上清刺激FB于不同时间点(3、6、12、18、24、36、48 h)其细胞内IL-1β的表达。结果经SiO2刺激的矽肺患者AM上清中IL-1β的表达量明显升高(P<0.01),12 h达高峰;活化的矽肺患者12 h AM条件上清可以促进FB表达IL-1β增高(P<0.05);18 h表达最高,以后逐渐下降。结论在本实验条件下,经离体细胞培养,提示SiO2可通过上调AM和FB中IL-1β的表达,参与矽肺纤维化的形成过程。     

在小鼠肺纤维化成纤维细胞表型转化过程中NF-κB的表达及其意义

目的探讨平阳霉素(BLM)致小鼠肺纤维化病理过程中,核因子-κB(NF-κB)在成纤维细胞(FB)向肌成纤维细胞(MF)转化过程中的表达及其意义。方法将12只C57BL/6雌性小鼠随机分成2组,模型组气管内注射平阳霉素A2,对照组注射生理盐水;两组小鼠分别于气管内注射后第1及第3天随机取3只处死,用组织块贴壁法原代培养肺组织成纤维细胞,将第4代培养细胞分别进行P65及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫细胞化学染色,p65原位杂交染色,行图像分析,以平均光密度(MOD值)表示p65及α-SMA蛋白表达量及p65mRNA表达量。结果模型组、对照组p65免疫细胞化学染色的MOD值分别为(0.1055±0.0443)和(0.0521±0.0121);原位杂交染色的MOD值分别为(0.1659±0.0532)和(0.0753±0.0196);模型组、对照组α-SMA免疫细胞化学染色的MOD值分别为(0.1314±0.0247)和(0.0660±0.0026);模型组P65蛋白和α-SMA蛋白及p65mRNA表达量均较对照组增强(P0.05);模型组P65蛋白及p65mRNA均与α-SMA蛋白表达呈正相关(r分别为0.764和0.626,P0.05)。结论在平阳霉素诱导的肺间质纤维化病理过程中,存在着成纤维细胞向肌成纤维的表型转化,这一转化可能对肺间质纤维化的形成具有重要作用;NF-κB活化可能在成纤维细胞向肌成纤维细胞转化中起关键的调节作用,并因此在肺间质纤维化中发挥重要的作用。     

细胞外信号调节蛋白激酶1/2信号通路对SiO2活化的肺成纤维细胞转化生长因子-β1表达的影响

目的 探讨细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号通路对矽尘诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中转化生长因子(TGF-β1)表达的影响及调控作用.方法 收集矽肺患者支气管肺泡灌洗液中的肺泡巨噬细胞(AM),在体外将AM分别用不含SiO2的DMEM培养液和含SiO2(50 μg/ml)的DMEM 培养液培养作用18 h后,将收集的AM条件培养上清液与HELF共同孵育.通过采用免疫细胞化学法检测应用ERK1/2抑制剂PD98059干预后SiO2活化的矽肺患者AM上清介导的HELF中TGF-β1表达的改变.结果 SiO2处理组HELF中TGF-β1的表达量(0.3227±0.0238)明显高于空白对照组(0.1637±0.0196)及AM对照组(0.2406±0.0225),而PD98059干预组TGF-β1的表达量(0.2711±0.0229)明显低于SiO2处理组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PD98059对由SiO2刺激的矽肺患者AM条件培养上清介导的HELF中TGF-β1的表达有一定抑制作用,ERK信号途径在一定程度上可能介导SiO2刺激的HELF细胞因子表达.

Abstract：

Objective To investigate the effect and regulation of extracellual signal-regulated kinase (ERK1/2)signaling pathway on the expression of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) in human embryonic lung fibroblasts induced by SiO2. Methods Human alveolar macrophages were collected from a silicotic patient by bronchoalveolar lavage and in the presence or absence of SiO2 (50 ug/ml) exposition for 18h, and then the conditioned supernatants were used to incubate HELF. The expressions of TGF-β1 of the HELF acted with the conditioned AM supernatant fluid were detected with the immunocytochemistry method after treatment with PD98059 of inhibitor of ERK. Results The expression of TGF-β1 in HELF of the SiO2 treatment group(OD value is 0.322 7±0.023 8)exceed blank group (OD value is 0.163 7±0.019 6) and AM control group(OD value is 0.240 6±0.022 5) by the immunocytochemistry method. But the expression of TGF-β1 had reduction in some extent in the PD98059 intervention group (OD value is 0.271 l±0.022 9). The values were statistically different (P＜0.05). Conclusion ERK inhibitor PD98059 have inhibition effect on the expression of transforming growth factor-pi and expression of cytokine of human embryonic lung fibroblasts stimulated by SiO2, The study indicate that the proliferation and collagen prodction of HELF activated by SiO2 are mediated by ERK/MAPK signal pathway in some extent. PD98059 may antagonizes silica-induced lung fibrosis by inhibiting the expression of transforming growth factor-β1.     

活化蛋白-1和细胞周期蛋白在石英诱导的细胞周期改变中的作用

目的 探讨在石英刺激的人胚肺成纤维细胞(HELF)中AP-1/细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)通路在细胞周期改变中的作用.方法 建立稳定转染空载体PXJ的HELF系(HELF-PXJ)及空载体PXJ与反义cyclin D1质粒或反义细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4)质粒分别共转染的HELF系(简称anti-D1和anti-K4),将HELF-PXJ、anti-D1和anti-K4细胞分为对照组和石英刺激组(共6组),各对照组不加任何处理,石英刺激组用200 μg/ml石英处理细胞24h.检测AP-1对石英诱导的cyclin D1、CDK和E2F-4表达改变的影响.AP-1的化学抑制剂姜黄素(curcumin) 20μmol/L预处理细胞1h后,200 μg/ml石英刺激24 h,将HELF分为4组,分别为HELF对照组、HELF+石英组、HELF+curcumin对照组、HELF+curcumin+石英组.用免疫印迹(Western blot)法和免疫荧光法检测cyclin D1、CDK4和E2F-1/4蛋白表达;运用反义RNA技术证明通路的上下游关系;用流式细胞术检测细胞周期变化.结果 200 μg/ml石英处理HELF细胞,cyclin D1和CDK4蛋白表达升高,E2F-4蛋白表达明显降低,而E2F-1蛋白的表达没有明显改变.HELF-PXJ+石英组G1期细胞所占比例下降,S期细胞所占比例升高,与HELF-PXJ对照组的差异有统计学意义(P＜0.05).抑制cyclin D1或CDK4表达后,与对照组比较,anti-D1+石英组和anti-K4+石英组G1期细胞和S期细胞百分比无明显变化.抑制AP-1活性,与HELF+石英组比较,HELF+curcumin+石英组cyclin D1和CDK表达均减低,E2F-4表达增多.结论200μg/ml石英可诱导cyclin D1和CDK4蛋白表达增高,E2F-4蛋白表达减少,并通过AP-1/cyclin D1通路诱导细胞周期改变.     

Caveolin-1在乳腺癌中的表达及其临床意义

摘要:目的　探讨基因蛋白Caveolin-1在乳腺癌组织侵袭以及转移中的作用。方法　采用流式细胞免疫法定量检测Caveolin-1在60例乳腺良性组织和70例乳腺癌组织中的表达。结果　Caveolin-1在乳腺癌组织中的表达明显低于乳腺良性组织（P＜0.05）,且随着乳腺癌临床分期的递增及淋巴转移的出现Caveolin-1的表达水平逐渐降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　Caveolin-1的低表达促进了乳腺癌的侵袭和转移,在乳腺癌的发生、发展中起到了抑制作用,提示Caveolin-1可作为乳腺癌诊断和判断预后的指标。     

bFGF在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的检测碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在非小细胞肺癌组织中的表达情况,并分析其与非小细胞肺癌的病理分化程度、手术-病理分期、淋巴结转移的相关性,探讨bFGF在非小细胞肺癌的发生、浸润及转移过程中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测原发性非小细胞肺癌石蜡包埋组织80例、正常肺组织40例中bFGF蛋白的表达水平。结果非小细胞肺癌组bFGF阳性率均高于正常肺组织组(P=0.000)。非小细胞肺癌组TNM分期中Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期bFGF的阳性率比较,差异有统计学意义(P=0.000);低分化癌的bFGF的阳性率与高、中分化癌相比,差异有统计学意义(P=0.013);淋巴结转移组bFGF的表达与无淋巴结转移组相比,差异有统计学意义(P=0.000)。结论 bFGF可能参与了非小细胞肺癌的发生和演进的过程;bFGF蛋白检测可能成为判断非小细胞肺癌发生发展和评价预后的有效参考指标之一,对于非小细胞肺癌的早期预测可能具有重要的临床意义。     

结肠癌患者血清MCP-1含量的检测及其意义

目的:研究结肠癌患者外周血中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平的变化,探讨其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定98例结肠癌患者(37例未发生肝转移\61例发生肝转移)和40例正常人(对照组)血清MCP-1的水平,并进行比较。结果:发生肝转移结肠癌患者血清MCP-1水平为(158.7±267.4)pg/ml,未发生肝转移结肠癌患者血清MCP-1水平为(78.3±116.1)pg/ml,正常对照组血清MCP-1水平为(57.1±48.8)pg/ml。临床相关性发现血清MCP-1水平与肝转移、临床分期相关。结论:MCP-1在结肠癌肝转移中起重要作用,监测血清MCP-1水平可反映结肠癌的进展程度,具有重要的临床价值。     

MTA1基因在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的 MTA1基因是近年来发现的与肿瘤转移浸润有关的基因,该文探讨该基因在宫颈癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应方法检测53例新鲜宫颈标本组织中MTA1 mRNA的表达水平,进行定量分析并与临床病理资料比较.结果 正常宫颈MTA1 mRNA表达量为0.456±0.430、宫颈上皮内瘤变0.716±0.146,宫颈癌1.217±0.416.晚期及有淋巴结转移的宫颈癌MTA1 mRNA表达量增加,差异有显著意义(χ2=7.9562,P=0.0187;t =-2.89,P=0.0409),与肿瘤分化程度无关(χ2=1.0358,P=0.5958 ).结论 MTA1基因表达与宫颈癌临床分期及转移有关,可能预示宫颈癌的浸润转移的分子指标.     

KiSS-1 mRNA和MMP-9 mRNA在肺癌中的表达及意义

目的探讨KiSS-1 mRNA和MMP-9 mRNA在肺癌组织中的表达，及其在肺癌侵袭及转移中的作用和临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（1it—PCR）技术检测56例肺癌组织及10例正常肺组织KiSS-1 mRNA和MMP-9 mRNA表达，分析其与各种临床参数的关系。结果肺癌组织KiSS-1 mRNA和MMP-9 mRNA阳性率分别为30．4％和62．5％，正常肺组织分别为100．0％和10．0％（P〈0．01）。肺癌组织中KiSS-1 mRNA表达与临床分期、淋巴结转移、远处转移有关，MMP-9 mRNA表达也与肺癌的淋巴结转移和远处转移有关。而KiSS-1 mRNA阳性的肺癌组织MMP-9 mRNA阳性率为35．3％，而KiSS-1 mRNA阴性肺癌组织中MMP-9 mRNA的阳性率为74．4％，KiSS-1 mRNA和MMP-9 mRNA的表达呈负相关（r=-0．371，P〈0．01）。结论KiSS-1失表达与肺癌的侵袭和转移密切相关，KiSS-1可能通过抑制MMP-9合成而抑制肺癌的侵袭转移。     

肺鳞癌中高迁移率族蛋白A1的表达及意义

目的 探讨高迁移率族蛋白A1 (HMGA1)在肺鳞癌中的表达情况,以明确HMGA1表达与肺鳞癌发生的关系及临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测76例肺鳞癌组织(肺鳞癌组)和30例肺良性病变组织(对照组)标本中HMGA1的表达情况,并分析其表达与肺鳞癌临床病理参数的相关性.结果 HMGA1在肺鳞癌组和对照组的表达阳性率分别为68.4％(52/76)、16.7％(5/30),两组比较差异有统计学意义(P＜ 0.01);HMGA1表达与肺鳞癌的淋巴结转移、分化程度显著相关(P＜0.05).结论 肺鳞癌的发生、发展可能与HMGA1的表达上调密切相关,HMGA1有望成为肺鳞癌诊治中的一个新的标志物;临床中检测HMGA1对判断肺鳞癌可能具有一定的参考价值.     

可溶性细胞间粘附分子-1在乳腺癌患者血清中表达的临床意义

目的 检测乳腺癌患者血清可溶性细胞间粘附分子-1（soluble intercellular adhesion molecule-1 ,sICAM-1）表达水平,探讨血清sICAM-1与乳腺癌临床病理学指标的关系及其临床意义。方法 用酶免疫吸附方法(enzyme-linked immunosorbentassay, ELISA)对61例乳腺浸润癌患者和23例乳腺良性肿瘤患者外周血中sICAM-1的水平进行定量测定,并收集患者临床资料进行统计学分析。结果 ①乳腺浸润癌组患者血清sICAM-1表达水平（1389.46+648.91ng/ml）显著高于乳腺良性肿瘤组（879.72+378.62 ng/ml）(t=4.448,P<0.001)。伴淋巴结转移组sICAM-1显著高于无淋巴结转移组(P<0.001),Ⅲ-Ⅳ 期乳腺浸润癌患者血清sICAM-1水平显著高于Ⅰ-Ⅱ 期患者（P<0.05）。②ROC曲线分析血清sICAM-1水平1186.87ng/ml是区分乳腺浸润性癌和乳腺良性肿瘤的最佳临界值;sICAM-1水平1257.38ng/ml是判断乳腺浸润性癌是否发生转移的最佳临界值。③血清sICAM-1表达水平与病理分级,年龄,肿瘤大小,乳腺癌免疫组化指标ER,PR,Ki67及HER-2均无相关性（P>0.05）。结论 血清sICAM-1可作为乳腺癌的血清学观察指标,对判断肿瘤发展程度、转移状态及复发状况有较好的临床意义。     

caveolin-1在宫颈癌中的表达及临床生物学意义

目的:探讨caveolin-1(窖蛋白-1)在正常宫颈组织和宫颈鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化方法(SP法)分别检测10例正常宫颈组织及78例宫颈鳞癌组织caveolin-1的表达情况。结果:caveolin-1阳性染色呈棕黄色颗粒,主要分布于细胞浆中,在正常宫颈组织的阳性表达率高且多为中、强表达,而在宫颈鳞癌组织中阳性表达率低且多为弱表达。在正常宫颈组织、宫颈鳞癌组织的阳性表达率分别为100.0%和56.4%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);caveolin-1与宫颈癌的分化程度、淋巴结转移及分期均密切相关(P<0.05,P<0.05,P<0.05),而与患者的年龄无关(P>0.05)。结论:caveolin-1表达的降低或缺失与宫颈鳞癌的发生和发展过程密切相关,对宫颈鳞癌患者行caveolin-1蛋白的检测有可能作为临床判断宫颈鳞癌进展和预后的生物学指标。     

卵巢癌组织中凋亡相关蛋白8的检测及其临床意义

目的 检测卵巢癌组织中凋亡相关蛋白8(THAP-8)的表达,探讨其相关的临床意义.方法 选择卵巢癌患者86例,分别取卵巢癌组织和癌旁组织,采用荧光定量聚合酶链反应法检测THAP-8基因的表达量,免疫组织化学法检测THAP-8蛋白的表达量.结果 在卵巢癌组织和癌旁组织中THAP-8基因表达量分别为0.304±0.104和0.615±0.152,THAP-8蛋白表达量分别为30.16±12.34和67.34±22.37,卵巢癌组织均显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.01).中、低分化卵巢癌组织中THAP-8基因和蛋白表达量显著低于高分化卵巢癌组织(0.216±0.085比0.457±0.124、24.22±9.21比46.24±17.52),有淋巴结转移卵巢癌组织中显著低于无淋巴结转移卵巢癌组织(0.247±0.087比0.476±0.133、23.44±8.57比49.60±18.35),临床分期Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌组织中显著低于临床分期Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌组织(0.232±0.114比0.424±0.125、25.64±8.12比44.78±16.84),差异均有统计学意义(P＜0.01或＜0.05).结论 THAP-8的失活参与了卵巢癌的发生、发展,可以作为卵巢癌患者肿瘤分级和预后评估的一个指标.     

Mirk/Dyrk1b在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义

目的:探讨Mirk/Dryk1b(Minibrain-related kinase/Dual specificity tyrosine-phosphorylation-regulated kinase1B)在卵巢组织中的表达及其临床意义。方法:利用免疫组化检测Mirk/Dyrk1b在30例上皮性卵巢癌、20例上皮性卵巢囊腺瘤、10例正常卵巢组织中的表达。结果:Dyrk1b在上皮性卵巢癌中的表达明显高于上皮性卵巢囊腺瘤及正常卵巢组织(P<0.05),而其在正常的卵巢组织中几乎不表达;Dyrk1b的阳性率与卵巢癌的组织学分化程度有明显的相关性(P<0.01),与卵巢癌的临床分期、有无淋巴转移等无明显相关性(P>0.05)。结论:Dyrk1b在上皮性卵巢癌中高表达,提示其可能参与了肿瘤的发生和发展,并有望成为临床早期诊断的肿瘤标志物和新的卵巢癌治疗的靶基因。