华支睾吸虫尿素抗原的应用价值

<正> 为提高华支睾吸虫材料的利用价值,我们将提取水溶性抗原(CsA)后的沉渣进行尿素溶性抗原(CsUA)浸提,并平行比较了免疫学价值。 一、抗原制备 CsA:按常规方法。微量凯氏法测蛋白为2.83mg/ml;CsUA:取提CsA后的沉渣,按1:50(w/v)加8mol尿素溶液,超声粉碎、冷浸、离心,上清即CsUA,透折,Lowry法测蛋白为1.66mg/ml。 二、试验方法 ELISA:按常规方法。包被抗原蛋白量,CsA28mg/ml,CsUA6mg/ml。血清稀释度1:200。HRP-羊抗人IgG为1:20000、1:40000。以阴性血清XOD+3SD≥0.24(CsA)和0.26(CsUA)为阳性。皮试与粪检:两种抗原氮量相等,按常规方法皮试,丘疹≥1.1cm为阳性。以醛醚法双管粪检华支睾吸虫卵。抗原     

华支睾吸虫代谢抗原用于免疫诊断的试验研究

有人报道用华支睾吸虫成虫代谢抗原检测兔体内抗体取得了较满意的结果。本文应用了无血清1640培养液内活虫培养的代谢产物作为抗原与华支睾吸虫全虫抗原进行比较,评价代谢抗原在检测华支睾吸虫抗体中的价值。一、材料与方法(一)抗原制备1.代谢抗原:自人工感染华支睾吸虫囊蚴的猫肝脏中无菌取出华支睾吸虫成虫,用含双抗的无菌生理盐水漂洗后,分别装于100ml 含有1640培养液的三角烧     

华支睾吸虫的器官特异性抗原

随着群众依从性的下降,进行华支睾吸虫病的病原学诊断—粪便检查日益困难。为控制华支睾吸虫病的流行,进行人群筛查十分必要,且血清学诊断正快速地取代病原学检查。该研究的目的在于通过对华支睾吸虫的一些器官的蛋白进行分析,以获得特异性的抗原蛋白。从自然感染华支睾吸虫的淡水鱼获取的囊尾蚴,经口感染兔,8周后解剖获取成虫。解剖并收集华支睾吸虫的睾丸、储精囊、卵黄腺、子宫以及肠道液体。整个虫体或分离的器官分别搅匀并离心,上清液作为粗抗原或单一器官抗原。将100条活的华支睾吸虫在PBS中饲养并收集排泄-分泌抗原。分别对获取的…     

抗华支睾吸虫代谢抗原单克隆抗体的制备及鉴定研究

目的建立分泌抗华支睾吸虫代谢抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株。方法用华支睾吸虫成虫代谢抗原免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2／0融合，筛选分泌高滴度单克隆抗体的杂交瘤细胞株，测定单抗免疫球蛋白亚类和单抗效价，检测单抗与日本血吸虫全虫可溶性抗原、卫氏并殖吸虫成虫抗原和猪囊尾蚴抗原的交叉反应。结果获得3株分泌高滴度抗华支睾吸虫代谢抗原的杂交瘤细胞株，其分泌的抗体与日本血吸虫、卫氏并殖吸虫和猪囊尾蚴抗原均不发生交叉反应，3株单抗均属IgG。结论制备的抗华支睾吸虫代谢抗原的杂交瘤细胞株能分泌高滴度和高特异性的单抗，为制备免疫诊断试剂盒奠定了基础。     

华支睾吸虫成虫代谢抗原的化学及免疫学特性的研究

本文报道华支睾吸虫成虫代谢抗原(MA)的化学、免疫化学及免疫学性质。MA 中含有蛋白质和糖类。SDS—PAGE 显示 MA 的分子量为22—128KD。MA 与成虫盐水浸液抗原(ASE)和全虫抗原有相同的抗原成分,MA 与全虫抗原的血清学敏感性有显著性差异,与 ASE 无显著性差异。用 MA 免疫家兔能诱导动物产生对攻击感染的抵抗力。     

华支睾吸虫的组织化学研究

用组织化学方法观察华支睾吸虫成虫各种物质的分布和定位。结果其糖原、蛋白质、脂肪、核酸ACP、酚酶的分布与文献记载基本一致,但ACP的分布较为局限,活性低下。虫体的SDH,MDH、MAO、G-6-P、G-ATP等五种酶系首次记载,前三者的分布以皮层、皮下,睾丸、卵巢与吸盘为主,SDH和MDH的活性较MAO强,G-6-P与糖原的分布颇为一致,主要在虫体的实质组织和皮下肌层,在皮层与皮下肌层的Ca-ATP活性较强。     

对流免疫电泳检测粪内华支睾吸虫抗原诊断华支睾吸虫病的试验研究

华支睾吸虫卵甚小,粪检时极易漏检。十二指肠及胆汁引流等方法,虽可提高检查效果,然操作不便,难于推广。血清学方法虽可提高检出率,但不易区分既往感染和现症病人。因此,我们初步探讨了对流免疫电泳法检测华支睾吸虫病人粪便内抗原的诊断价值。一、抗华支睾吸虫兔免疫球蛋白制备:     

华支睾吸虫成虫抗原和排泄分泌产物对T细胞的作用研究

目的观察华支睾吸虫成虫抗原(Crude antigen,CA)、排泄/分泌产物(excretory-secretory products,ESPs)对T细胞的作用。方法体外分离小鼠骨髓细胞诱导分化为未成熟骨髓树突状细胞(immature DC,iDC);磁珠分选仪分选小鼠脾脏细胞的初始CD4+T细胞;流式细胞术检测DC、CD4+T细胞的纯度;抗原刺激DC细胞,实验分为PBS阴性对照组,LPS阳性对照组,CA和ESPs刺激组;负载抗原后的DC细胞与分选的CD4+T细胞共培养72h;Real time-PCR检测T-bet、GATA3mRNA的相对表达量;ELISA检测细胞培养上清中IFN-γ、IL-4细胞因子的表达量。结果与PBS组相比,ESPs刺激组Tbet、GATA3mRNA表达水平升高(P0.05),而CA刺激组T-bet、GATA3 mRNA表达水平差异不显著;与PBS组相比,ESPs刺激组细胞因子IFN-γ、IL-4的含量均升高(P0.05),CA刺激组仅IFN-γ的分泌增高(P0.05),IL-4无明显变化。结论 CA可能诱导宿主产生Th1型免疫应答,ESPs可能诱导宿主产生Th1型、Th2型免疫应答。     

Acute cholecystitis caused by Clonorchis sinensis

We are reporting a case of a 43-year-old Chinese male from Hong Kong, who came to see a doctor complaining of acute onset of severe upper abdominal pain. A diagnosis of acute cholecystitis was made and an emergency cholecystectomy was carried out. On opening the common bile duct, lancet-shaped worms were seen emerging from it. About 45 adult worms were collected and sent to the Department of Parasitology University of Malaya for identification. The worms were identified as Clonorchis sinensis. After the operation the patient was treated with praziquantel and he had an uneventful recovery.     

华支睾吸虫cDNA文库的构建

目的　构建华支睾吸虫cDNA文库。方法　采集华支睾吸虫阳性鱼 ,分离囊蚴 ,感染实验动物兔 ,解剖兔收集华支睾吸虫成虫虫体。应用“一步法”提取华支睾吸虫总RNA ;经过mRNA纯化、cDNA合成 ,以PcDNA3(Amp +)质粒为载体构建文库。挑取 2 0个克隆进行扩增 ,选择 9个克隆进行DNA序列测定。序列结果与GenBank中相关基因进行比对。结果　获得含有 9 7× 10 5个重组子库容量的华支睾吸虫cDNA文库。其中PC6号克隆基因序列与华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶序列具有 93%的同源性。结论　已构建成华支睾吸虫cDNA文库。     

重组抗原应用于SPG-ELISA检测华支睾吸虫循环抗体的效果评价

目的评价重组抗原用于SPG-ELISA诊断华支睾吸虫感染的价值。方法分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶（Cs-CysB）与华支睾吸虫成虫可溶性抗原（CAA）,以SPG-ELISA检测华支睾吸虫病患者血清特异性IgG,比较两种抗原包被SPG-ELISA方法的敏感性与特异性。结果检测50份华支睾吸虫感染者血清,重组Cs-CysB与CAA包被的SPG-ELISA阳性率均为94.00%,健康人血清50例均为阴性;检测日本血吸虫病血清20份、并殖吸虫病血清20份、囊虫病血清10份,交叉反应率分别为5.00%、10.00%、20.00%和5.00%、0、20.00%。结论以重组Cs-CysB为包被抗原用SPG-ELISA检测血清华支睾吸虫抗体具有较高的敏感性及特异性,检测效果与CAA包被的SPG-ELISA相当。     

B超诊断华支睾吸虫感染

华支睾吸虫病为我国南方沿海及东北、西南各省区较常见的寄生虫病 ,东南亚各国也有流行区 [1 ] 。关于 B超诊断本病的报道较少 ,我们用 B超诊断华支睾吸虫感染 178例报告如下。病例为我院 1993年 1月至 1999年 1月的门诊或住院患者 ,男 15 7例 ,女 2 1例 ,年龄 13～ 82岁 ,平均 38.2岁。除 4例女性患者外 ,其余均有吃生鱼、虾等不洁食物史。先经 B超检查而后检查华支睾吸虫卵者 137例 (其中粪便检查 12 7例 ,胆汁引流检查 10例 ) ;先作华支睾吸虫卵检查 (不论阳性阴性 )而后作B超检查者 41例 (其中粪便检查 39例 ,胆汁引流检查 2例 )。B超…     

Counterimmunoelectrophoresis test on human Clonorchis sinensis infection

A counterimmunoelectrophoresis test was used to detect antibodies against the adult worm antigen of Clonorchis sinensis in sera from 70 clonorchiasis patients, 20 uninfected healthy persons and 7 patients infected with other helminths. A constant voltage of 10 V/cm and a running time of 30 minutes was chosen in carrying out detection. Antibody titers of 1, 1:2 and 1:4 were obtained from 35, 21 and 14 clonorchiasis patients, respectively. Significant correlation was observed between worm burden in patients and antibody titer, the higher the antibody titer in patients, the more eggs per gram feces in their stool. Although cross reaction was observed with toxocariasis and angiostrongyliasis in this study, high (100%) sensitivity made it possible to screen the subjects in endemic areas to shorten the survey period.