肾上腺髓质素对自发性高血压大鼠心脏重构的影响

目的对比研究肾上腺髓质素(ADM)对自发性高血压大鼠(SHR)心脏重构和血压的影响。方法 4周龄32只雄性SHR随机分为SHR组和SHR-T组,同周龄16只雄性WKY大鼠作为正常对照,每组4、8、16、24周龄各4只。SHR-T组皮下注射ADM(每周5d,1.0nmol.(kg.d)-1),SHR组皮下注射等量生理盐水,WKY组不作处理。每周测量1次尾动脉收缩压(SBP)。4、8、16、24周龄时间点提取心脏,切片HE染色,显微测微尺观测心脏结构变化。结果 8周龄开始,SHR组和SHR-T组大鼠血压显著高于WKY组(P<0.01),ADM治疗至24周龄时,SHR-T组血压明显低于SHR组(P<0.05)。组织学显示24周龄SHR-T组大鼠高血压所致的心肌细胞肥大和排列紧密现象较SHR组有一定程度的改善。8周龄始,SHR逐渐出现左心室肥厚。ADM治疗至24周龄时,SHR-T组动脉血压、心脏/体重比值、相对左心室壁厚度低于SHR组(P<0.05)。结论 ADM有效降低了SHR血压并在一定程度上抑制了高血压时心脏重构。     

肾上腺髓质素对自发性高血压大鼠肾脏微小动脉的影响

目的探讨肾上腺髓质素（Adrenomedullin, ADM）对自发性高血压大鼠（SHR）肾脏微小动脉的影响及与磷酸化细胞外调
节蛋白激酶1/2（ERK1/2）的关系。方法4周龄雄性SHR随机分为ADM治疗组（ADM组）和高血压对照组（SHR组）,以WKY
大鼠作为空白对照,ADM组皮下注射ADM（1.0 nmol/kg·d,每周5 d）。采用组织学、组织化学、免疫组织化学和Western blot技
术,对比观察平均动脉收缩压、肾微小动脉组织学变化和磷酸化ERK1/2表达。结果从8周龄开始,SHR和ADM组血压开始升
高,16和24周龄平均动脉收缩压明显高于WKY组,ADM治疗组24周龄时平均动脉收缩压明显低于非治疗SHR组;在16和24
周龄,SHR组和ADM组大鼠肾脏微小动脉中膜/内径比值明显大于WKY组（P<0.05）;ADM组大鼠肾脏微小动脉中膜/内径比
值的增幅略低于SHR组,其中外径小于40 μm动脉中膜/内径比值在24 周龄时明显小于SHR组（P<0.05）。免疫组织化学和
Western blot显示16和24周龄SHR和ADM组大鼠肾脏组织磷酸化ERK1/2表达显著高于WKY组（P<0.05）,24周龄时ADM组
肾脏磷酸化ERK1/2表达显著低于SHR组（P<0.05）。结论较长时间使用ADM,在一定程度上能够减轻自发性高血压大鼠血
压升高程度,可能通过抑制ERK1/2的磷酸化减轻肾微小动脉的重构。
     

高血压大鼠血浆肾上腺髓质素和肾上腺升压素的变化

观察高血压大鼠血浆肾上腺髓质素和肾上腺升压素的变化及其与内皮素的关系。方法；在Ｗｉｓｔａｒ大鼠上用一氧化氮合酶抑制剂Ｌ－ＮＡＭＥ复制大鼠高血压模型，用放射免疫分析法测定血浆Ａｄｍ，Ａｄｔ和ＥＴ。结果；血浆Ａｄｍ明显升高「（７．６±１．２）ｐｍｏｌ／Ｌ比对照组」「（３．４±０．７）ｐｍｏｌ／Ｌ，Ｐ〈０．０１」，与高血压和心肌肥大程度正相关「ｒ值分别为０．７６和０．４８」，反之，血冰Ａｄｔ降低「（１．     

降压通络方对高血压肾损害大鼠肾上腺髓质素表达的影响

目的观察降压通络方对高血压病肾损害大鼠肾脏肾上腺髓质素(ADM)表达的影响,探讨其对高血压肾损伤大鼠肾脏的保护作用。方法采用16周龄自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,将其随机分为模型组、缬沙坦组、降压通络方组、并设正常血压大鼠(WKY)为空白对照。降压通络方组、缬沙坦组分别给予降压通络方14.2 g/(kg·d)和缬沙坦10 mg/(kg·d)灌胃治疗,模型组及正常对照组给予等量的生理盐水。观察各组大鼠在给药前、给药2周、4周、8周后血压的变化,测定大鼠24 h尿蛋白定量,同时观察肾功能及肾脏病理组织学改变,检测大鼠肾脏中ADM的蛋白含量,并与大鼠的血压进行相关性分析。结果模型组及各治疗组大鼠血压、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)较正常对照组明显升高,降压通络方组、缬沙坦组均明显低于模型组(P0.01),但2个治疗组之间比较无显著性差异;模型及各治疗组大鼠肾脏ADM蛋白含量较正常对照组明显降低(P0.01),与模型组比较,降压通络方及缬沙坦组大鼠肾脏ADM蛋白含量明显升高(P0.01),并与大鼠的血压呈明显负相关(γ=-0.740,P0.001),但2个治疗组之间比较无明显差异。HE染色显示降压通络方能显著改善肾小动脉及肾小球硬化,促进肾组织结构的恢复。结论降压通络方通过上调高血压肾损害大鼠肾脏ADM的表达,扩张肾脏局部小血管,改善肾脏缺血,在保护肾脏功能方面起到重要作用。     

肾上腺髓质素和肾上腺髓质素原N端20肽对大鼠离体灌流心脏功能的影响

目的 :研究肾上腺髓质素原 (proadrenomedullin ,proADM)的不同肽段 ,肾上腺髓质素 (adrenomedullin ,ADM )和肾上腺髓质素原N端 2 0肽 (proadrenomedullinN terminal 2 0 peptide ,PAMP)的心脏效应及可能机制。方法 :Langendorff装置灌流离体大鼠心脏 ,通过心室内的乳胶水囊经换能器连于PowerLab多导生理记录仪 ,观察不同浓度的ADM和PAMP对左心室内压 (leftventricularpressure ,LVP)、左室内压变化速率 (leftventricularpressure(dp/dtmax)、冠状动脉 (冠脉 )流量 (coronaryfluid ,CF)和心率 (heartrate,HR)的影响 ,并检测灌流后心肌组织cAMP含量。结果 :ADM (1 0 -1 1 ～ 1 0 -8mol·L-1 )灌流呈浓度依赖地降低心脏LVP和±dp/dtmax ;PAMP也以浓度依赖的方式降低上述心功能的指标 ,且较相同浓度的ADM作用强。PAMP与ADM依次以不同浓度梯度联合应用 ,较各药单用对上述心功能指标的影响表现为低浓度 (1 0 -1 1 ～ 1 0 -1 0 mol·L-1 )时增强 ,而高浓度 (1 0 -9～ 1 0 -8mol·L-1 )削弱其心功能抑制效应。ADM和PAMP单独或联合应用时 ,冠脉流量均高于对照组水平。灌流液含有NO合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)抑制剂L NAME(Nω nitro L argininemethylester)时 ,ADM、PAMP或ADM联合PAMP灌流 ,其对LVP、±dp     

肾上腺髓质素对自发性高血压大鼠心脏重构的影响及与ERK1/2活化关系研究

目的:对比研究肾上腺髓质素(Adrenomedullin ADM)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat SHR)心脏重构的影响及与ERK1/2活化的关系。方法:4周龄雄性SHR随机分为SHR组和SHR-T组,同周龄WKY大鼠作为正常对照。SHR-T组皮下注射ADM(每周5天,1.0nmol/(kg.d)),SHR组皮下注射等体积生理盐水,WKY组不作处理。在第4、8、16和24周龄时间点分别处死动物(每组4只),提取心脏做H.E染色和P-ERK1/2免疫组化染色。结果:SHR组和SHR-T组从8周龄开始血压显著升高,明显高于WKY组(P<0.01),ADM治疗至24周龄时,血压明显低于SHR组;随着大鼠周龄增加,SHR组和SHR-T组大鼠心脏/体重比值逐渐增大。16周龄后,SHR组和SHR-T组的心脏/体重比值大于WKY组(P<0.05),24周龄SHR-T组大鼠的心脏/体重比值小于SHR组(P<0.05);随着大鼠周龄增加,SHR和SHR-T组大鼠相对左心室壁厚度呈增加趋势,24周龄SHR组大鼠相对左心室壁厚度大于同周龄WKY组(P<0.05)。SHR-T组大鼠相对左心室壁厚度在16周龄后增幅放缓,24周龄时小于SHR组(P<0.05);随着大鼠周龄的增加p-ERK1/2在大鼠心肌中的阳性表达逐渐增加,24周龄SHR组大鼠心脏p-ERK1/2的表达率显著高于WKY组(P<0.01),24周龄SHR-T组大鼠心脏p-ERK1/2的表达率显著低于SHR组(P<0.05)。结论:ADM可一定程度减缓自发性高血压大鼠血压的升高和心脏重构,p-ERK1/2的表达量的降低可能参与了ADM发挥其保护作用。     

影响大鼠主动脉肾上腺髓质素和肾上腺升压素释放的因素

用放射免疫法测定离体大鼠主动脉孵育或灌流介质中肾上腺髓质系（ＡＭ）和肾上腺升压素（ＡＴ）,发现：①～１００ｎｍｏｌ／Ｌ ＡＩＩ和ＥＴ－１呈剂量依赖性增加ＡＭ的释放率;１和１０ｎｍｏｌ／Ｌ ＡＩＩ和ＥＴ－１对ＡＴ的释放无明显的影响,１００ｎｍｏｌ／Ｌ ＡＩＩ和ＥＴ－１则增加ＡＴ释放率;这六组的ＡＭ／ＡＴ比值均增大;②１０ｎｍｏｌ／Ｌ肾上腺素增加ＡＭ和ＡＴ的释放率,１０ｎｍｏｌ／Ｌ ＣＧＲＰ则降低两者     

肾上腺髓质素对大鼠肝星状细胞凋亡的影响

目的 初步探讨在肝纤维化形成过程中肾上腺髓质素(ADM)对肝星状细胞(HSC)凋亡的作用及其意义,以期为临床治疗和(或)预防肝纤维化提供理论依据.方法 采用不同浓度ADM对体外培养的HSC进行干预,应用流式细胞术对HSC的凋亡进行检测.结果 ADM 10-8 mol/L组、10-7 mol/L组、10-6 mol/L组HSC凋亡率分别为(8.81±0.27)%、(7.99±0.36)%、(5.61±0.33)%,对照组为(10.82±0.38)%,ADM不同浓度组HSC凋亡率均低于对照组,差异有显著性(F=121.87,q=5.61～8.81,P＜0.05).结论 活化的大鼠HSC存在凋亡,ADM可降低活化大鼠HSC的凋亡率,且呈剂量依赖性.这为更加全面地研究HSC的凋亡提供了进一步的理论依据.     

瘦素对体外培养大鼠胰岛细胞的分泌功能的影响

目的:探讨瘦素对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响。方法:250-350 g的SD大鼠,分离并纯化其胰岛细胞。将胰岛细胞放于营养液中在培养箱中培养2 h,然后换营养液再培养1 h。以10个胰岛为一个单位,放于一个培养孔中。将22个培养孔分成实验组和对照组,实验组中加入11种不同浓度(4-24 mmol/L)的葡萄糖溶液、瘦素(10 mmol/L),对照组中加入11种不同浓度     

高血压大鼠血浆肾上腺髓质素和肾上腺升压素的变化

目的：观察高血压大鼠血浆肾上腺髓质素（ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｉｎ，Ａｄｍ）和肾上腺升压素（ａｄｒｅｎｏｔｅｎｓｉｎ，Ａｄｔ）的变化及其与内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）的关系。方法：在Ｗｉｓｔａｒ大鼠上用一氧化氮合酶抑制剂ＬＮＡＭＥ复制大鼠高血压模型，用放射免疫分析法测定血浆Ａｄｍ、Ａｄｔ和ＥＴ。结果：血浆Ａｄｍ明显升高［（７６±１．２）ｐｍｏｌ／Ｌ比对照组［（３．４±０．７）ｐｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１］，与高血压和心肌肥大程度正相关［ｒ值分别为０．７６（Ｐ＜０．０１）和０．４８（Ｐ＜０．０５）］，反之，血浆Ａｄｔ降低［（１０．０±２．０）ｐｍｏｌ／Ｌ比对照组（１２．７±１．７）ｐｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。血浆Ａｄｍ和Ａｄｔ与血浆ＥＴ分别呈正和负相关。ＥＴＡ受体颉颃剂ＪＫＣ３０１治疗不仅可使高血压大鼠血压明显下降，并且可以逆转Ａｄｍ和Ａｄｔ的上述变化。结论：Ａｄｍ、Ａｄｔ和ＥＴ间相互作用参与高血压动物的发病过程。     

环孢素A对正常及自发性糖尿病仓鼠胰岛细胞分泌功能的短期影响

目的　探讨环孢素 A( Cs A )对胰岛α、β细胞的作用 ,为临床合理用药提供理论依据。方法　采用改良Kanatsuna及 knudsen柱细胞表面灌注系统 ,动态观察低浓度 ( 2 5～ 10 0 ng/ml) Cs A对正常及自发性糖尿病 ( DM)中国短尾黑线仓鼠离体胰岛α、β细胞分泌功能的短期影响。结果　 DM仓鼠胰岛β细胞无论在静态时或 16.7mm ol/L D-葡萄糖 ( G)刺激下胰岛素 ( Ins)的分泌量均较正常仓鼠明显降低 ( P<0 .0 5 ) ,而静态胰高糖素 ( Glc)分泌量则较正常仓鼠明显增高 ( P<0 .0 5 )。将小剂量 ( 2 5～ 10 0 ng/ml) Cs A加入胰岛细胞中培养 2 4h后 ,培养液 Ins和Glc含量与对照组 (未加 Cs A)相比无统计学差异 ( P>0 .0 5 ) ,但 Cs A处理 2 4h后的正常仓鼠胰岛β细胞对 16.7mm ol/L D-葡萄糖刺激的反应减弱。结论　 DM仓鼠发病可能与胰岛细胞分泌功能异常有关。小剂量 ( 2 5～ 10 0 ng/ml) Cs A对正常及 DM仓鼠离体胰岛α、β细胞分泌功能无明显直接影响。胰岛细胞与 Cs A作用 2 4h后β细胞储备功能降低。 Cs A在体外对 Ins释放的影响 ,除剂量因素外 ,还与作用时间有关     

人类巨细胞病毒感染与胰岛功能的临床研究

目的探讨人类巨细胞病毒（HCMV）感染与胰岛功能的关系，以明确HMCV作为糖尿病致病因素的可能性。方法利用ELISA技术检测血清HCMV-IgG、IgM，免疫组化技术检外周血单个核细胞中HCMV pp65的表达水平，同时测定空腹血糖及C肽水平，对HCMV感染状况及血糖和C肽水平进行分析。结果空腹血糖增高组HCMV pp65阳性率明显高于正常对照组，HCMV-IgG、IgM及PBMC HCMV DNA在两组中阳性率无显著性差异，但空腹血糖增高组HCMV-IgG的相对含量明显高于正常对照组，且HCMV-IgG的相对含量与空腹血糖及C肽水平存在明显的相关关系。结论HCMV感染与糖尿病的发病密切相关，HCVM感染可能是糖尿病的始发因素。     

云南小耳猪胰岛细胞的分离和纯化方法

目的探索云南小耳猪胰岛细胞分离和纯化的有效方法.方法采用胶原酶胰导管注射负荷技术,静止消化与物理消化相结合消化分离小耳猪胰腺;不连续密度梯度比重离心纯化,胰岛素释放试验检测胰岛细胞功能.结果胰岛收获量为（4580±257）IEQ/g胰腺,纯化后为（3660±449）IEQ/g胰腺,纯度为80%左右,胰岛素释放反应良好.结论采用本方法消化分离小耳猪胰岛,腱岛细胞产量、纯度较高,功能良好,为进一步成人胰岛细胞的分离纯化提供了实验依据.     

胰岛素促泌剂及其对胰岛β细胞功能的影响

胰岛素促泌剂是目前治疗2型糖尿病的一类主要口服降糖药,是非肥胖及部分肥胖2型糖尿病的一线治疗药物。近年来研究发现,2型糖尿病患者胰岛β细胞凋亡明显增加,二者之间的关系及2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的机制逐渐成为人们关注的热点。由于它的治疗作用与胰岛β细胞的功能状态密切相关,本文就各种胰岛素促泌剂对胰岛β细胞功能的影响予以综述,为2型糖尿病的合理用药提供新思路。     

重症急性胰腺炎胰腺内分泌功能的实验研究

目的:观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺内分泌功能的变化。方法:雄性Wistar大鼠48只,随机分为假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组),每组24只。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型。术后(3、6、12)h分批剖杀大鼠,每个时间点8只。肉眼观察胰腺形态学变化,取胰头部胰腺组织行病理学检查并评分。生化法检测血清淀粉酶(AMY),放射免疫分析法测定血清胰岛素(INS)、C-肽(CP)和胰高血糖素(GG)的变化。结果:SAP大鼠造模成功后,随时间延长胰腺外分泌部损伤逐渐加重,并在12h达高峰,但内分泌部胰岛仅在12h出现形态学变化;SAP组3,6和12h组大鼠血清INS和CP水平与SO组相比升高,差异有统计学意义(P<0.05)。SAP组6和12h大鼠血清胰高血糖素与SO组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:5%牛磺胆酸钠制备的SAP模型中,出现了胰腺内分泌部的损伤,表现为其分泌激素水平的紊乱。     

软脂酸对胰岛细胞凋亡作用的观察

目的通过观察软脂酸对体外培养的原代胰岛细胞的凋亡作用，探讨游离脂肪酸在糖尿病发病中的作用。方法体外培养Wistar大鼠胰岛细胞，用不同浓度软脂酸(分别为0，0．125，0．25，0．5mmol／L)共同孵育48h，用Tunel法计算胰岛细胞凋亡率。AO／EB染色观察细胞形态变化。结果0．125，0．25，0．5mmol／L的软脂酸均有抑制高糖刺激下胰岛细胞的胰岛素分泌，促进胰岛细胞凋亡的作用。结论软脂酸可抑制胰岛细胞的分泌功能，促进胰岛细胞凋亡，其凋亡程度与软脂酸的浓度有关。     

不同腹内脂肪/皮下脂肪比值的糖耐量正常人群胰岛素敏感性与胰岛β细胞分泌功能的研究

目的 通过检测糖耐量正常人群的血糖、血脂、血清胰岛素水平,探讨不同腹内/皮下脂肪比值的糖耐量正常人群的胰岛素敏感性以及胰岛β细胞分泌功能.方法 104名糖耐量正常人群,根据中位数按腹内脂肪情况分两组,其中VA/SA＜0.4组53例(男20例,女33例),VA/SA≥0.4组51例(男23例,女28例),所有受试者分别测量体质指数(BMI)、腰围(WHC),行75 g葡萄糖OGTT试验,采用葡萄糖氧化酶法测血糖,放免法测血清胰岛素.血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)均采用Beckman公司的试剂,在Beckman全自动生化分析仪上进行测试.采用SIEMENS SOMATOM Sensation 16CT机定量测定腹部内脏脂肪和腹部皮下脂肪面积,计算VA/SA值以及葡萄糖曲线下面积(AUCglu)、胰岛素曲线下面积(AUCins),计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、总体胰岛素敏感指数(WBISI)、定量胰岛素敏感性检测指数(QUCKI)指数来评估胰岛素敏感性,稳态模型β细胞功能(HOMA-β)、胰岛素分泌指数(△I/△G)来评估胰岛β细胞分泌功能.结果 (1)VA/SA≥0.4组TG、HDL-C、LDL-C、VLDL-C、apoA、apoB较VA/SA＜0.4组差异有统计学意义(P＜0.01),而两组间TC差异无统计学意义(P＞0.05);(2)VA/SA≥0.4组HOMA-IR、WBISI、QUCKI、AUCglu、AUCins与VA/SA＜0.4组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);而HOMA-β、△I/△G两组间差异无统计学意义(P＞0.05);(3)WBISI、AUCins、AUCglu与VA/SA的相关性(r值分别为-0.460、0.460和0.446)相似,强于HOMA-IR、QUCKI指数与VA/SA的相关性(r值分别为0.315和-0.319),而HOMA-β、ΔI/ΔG与VA/SA无相关性(P＞0.05).结论 腹型肥胖患者中胰岛素敏感性下降先于胰岛β细胞功能衰竭.     

丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病患者B细胞功能的影响

目的:观察纯中药制剂丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病患者B细胞功能的影响,探讨中医药在治疗2型糖尿病及延缓其进程中的作用。方法:62例2型糖尿病患者随机分成两组,治疗组32例服用丹蛭降糖胶囊,对照组30例服用马来酸罗格列酮,疗程为2个月,以胰岛素敏感指数及Ho-ma模型公式评估各组B细胞功能。结果:两组中医证候积分及B细胞功能均有改善,且治疗组明显优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:丹蛭降糖胶囊具有降低血糖,改善高胰岛素血症,提高2型糖尿病患者胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗的作用。     

VEGF对大鼠胰岛瘤细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌功能的影响

目的 探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）对大鼠胰岛瘤细胞（INS-1）增殖、凋亡、胰岛素分泌以及相关基因表达的影响。方法 用不同浓度（0、40、80、160 ng/mL)VEGF对大鼠INS-1细胞进行处理,采用CCK-8试剂盒检测INS-1细胞增殖,用Annexin Ⅴ及碘化丙啶(PI)双染试剂检测细胞凋亡;INS-1细胞经VEGF处理后做标准葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验, ELISA法检测胰岛素,实时定量PCR技术检测胰岛分泌过程中相关基因表达,Western blot检测VEGF对Insulin蛋白表达的影响。结果 不同浓度VEGF对INS-1细胞作用24 h、48 h、72 h,其细胞活性均无明显变化（P>0.05）。但当VEGF浓度为80 ng/mL和160 ng/mL时对细胞凋亡具有抑制作用(PSur)、内向整流性钾离子通道基因 (inwardly rectifying potassium channel 6.2, Kir6.2)的表达随VEGF浓度增高呈下降趋势,葡萄糖激酶基因（glucokinase,GCK）的表达先降低后升高,葡萄糖转运蛋白基因2（glucose transporter 2,Glut2）表达呈先升高后降低趋势,Insulin蛋白的表达量随VEGF浓度增高呈逐渐下降趋势。结论 VEGF在高糖状态下对细胞凋亡和胰岛素分泌有抑制作用,为探索VEGF在糖代谢中的作用提供了新的线索。     

烟酰胺对高糖介导胰岛细胞bax及bcl-2表达的影响

目的 探讨烟酰胺对高糖环境下胰岛细胞bax及bel-2蛋白表达的影响。方法 体外培养大鼠胰岛细胞，应用免疫组化方法检测培养液中葡萄糖终浓度为22．2mmol／L及加入烟酰胺后胰岛细胞bax及bcl-2蛋白表达。结果 培养液中葡萄糖终浓度为22．2mmol／L时，胰岛细胞bax表达阳性，bcl-2表达较对照组降低。加入烟酰胺后bax表达降低，bcl-2表达增强。结论 烟酰胺能够上调bcl-2表达，下调bax表达，在高糖介导的胰岛细胞损伤中起一定作用。