艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力和大脑皮质、海马区c-fos蛋白表达的影响

目的观察艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力的影响与学习记忆相关脑区c-fos蛋白表达的关系。方法健康3月龄昆明雄性小鼠体质量(30±2)g,60只,水迷宫检测后按随机区组设计分为:生理盐水组,造模组,艾灸1、2组,尼莫地平组等5组,每组各12只。造模组,艾灸1,2组,尼莫地平组连续42 d颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;生理盐水组连续42 d颈背部皮下注射等量生理盐水,12 d后艾灸1、2组,分别选取小鼠"足三里、悬钟","关元、百会"行艾柱灸治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日1次,共15次。采用水迷宫检测学习记忆、免疫组化方法观察各组小鼠大脑皮层、海马CA3区c-fos蛋白的表达。结果模型组潜伏期较生理盐水组、艾灸1、2组、尼莫地平组延长(P<0.01或P<0.05),模型组原象比、垮台次数较其他各组缩短、降低(P<0.01或P<0.05),模型组小鼠大脑皮质、海马CA3区c-fos蛋白表达的神经元密度较生理盐水组、艾炷灸组、尼莫地平灌胃治疗组降低(P<0.01)。结论艾炷灸足三里、悬钟,关元、百会穴位处方可能通过提高D-半乳糖衰老小鼠脑组织大脑皮层、海马CA3区c-fos蛋白的表达改善学习记忆能力。     

艾炷灸对衰老小鼠学习记忆力及胰岛素水平的影响

目的:观察艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆及血清、脑组织胰岛素(INS)水平的影响。方法:将75只小鼠随机分为对照组、造模组、艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组,每组15只。艾灸1组艾炷灸足三里穴+悬钟穴,艾灸2组艾炷灸百会穴+关元穴,艾灸3组艾炷灸腕背关节上1mm与膝髌正中上沿上2mm。用Morris水迷宫测试学习记忆力,用酶联免疫法检测血清及脑组织INS水平。结果:治疗前各组小鼠水迷宫各项指标及学习记忆能力比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后,造模组与对照组、艾灸1组、艾灸2组比较,各项指标差异均有统计学意义(P0.01或P0.05);对照组、艾灸1组、艾灸2组与艾灸3组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。造模组血清和脑组织INS水平较对照组、艾灸1组和艾灸2组升高或降低,差异均有统计学意义(P0.01或P0.05);对照组、艾灸1组、艾灸2组与艾灸3组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:艾炷灸足三里穴+悬钟穴、关元穴+百会穴均能显著提高D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力,与降低外周循环胰岛素水平、提高脑组织的胰岛素浓度有关,具有延缓脑衰老作用。     

艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠大脑组织形态和超微结构的影响

目的 观察艾炷灸对脑组织形态和超微结构的影响.方法 将健康3月龄昆明雄性小鼠按随机区组设计分为:造模组、生理组、艾灸1组、艾灸2组、电针组、尼莫地平组6组,每组各12只.另设自然衰老组(16月龄)昆明雄性小鼠12只.造模组、艾灸1,2组、电针组、尼莫地平组,连续42 d颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;生理盐水组连续42 d颈背部皮下注射等量生理盐水,12 d后艾灸1,2组,分别选取小鼠"足三里、悬钟","关元、百会"行艾柱灸治疗,电针组取"足三里、悬钟"治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日1次,共15次.采用光镜观察脑组织形态学变化和神经元密度,电镜下观察脑组织超微结构.结果 ①生理组大脑皮层、海马CA3区细胞结构正常.模型组、自然衰老组可见皮层、海马CA3区变薄,大部分神经元变性,胞核与胞浆界限模糊,核固缩,核仁消失.艾灸1,2组、电针组和尼莫地平组仍有不同程度的神经细胞变性,但变性神经细胞数量显著减少.②各组小鼠脑皮质及海马CA3区神经元密度差异有显著性意义(P<0.01),模型组、自然衰老组与生理组、艾灸1,2组、电针组、尼莫地平组神经元密度比较差异有显著性意义(P<0.01),模型组、自然衰老组神经元细胞密度下降.③大脑皮质超微结构,生理组神经细胞结构清晰,胞浆较宽,细胞器丰富,核仁清楚.模型组和自衰组神经元细胞变性,凋亡细胞器减少.其他各治疗组超微结构损伤较模型组和自衰组减轻.结论 艾炷灸"足三里、悬钟","关元、百会"可减轻D-半乳糖造成的氧化损伤,保护脑组织形态及其神经元细胞超微结构.     

艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠脑组织NO、NOS的影响

目的：探讨艾炷灸抗衰老作用机制。方法：连续42天颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型；观察艾炷灸小鼠脑皮层NO（一氧化氮）含量、NOS（一氧化氮合酶）活力的影响。结果：①D-半乳糖致衰老小鼠和18月龄自然衰老的小鼠其脑组织NO含量和NOS活力都呈增高的趋势。②艾炷灸治疗组与生理盐水对照组小鼠脑组织NO含量和NOS活力水平较模型组和自然衰老组低，并有显著差异。结论：艾炷灸足三里、悬钟可以降低D-半乳糖致衰老小鼠脑组织NO含量和NOS活力，从而抑制了增高的NO产生的细胞毒性，起到延缓衰老的作用。     

艾炷灸足三里、悬钟穴对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的影响

目的:观察艾炷灸足三里、悬钟穴对衰老小鼠模型的学习记忆功能的影响。方法:36只3月龄小鼠随机分为治疗组、模型组、盐水组,将前两组连续注射D-半乳糖6周,治疗组在12天后进行艾炷灸治疗,盐水组注射同剂量生理盐水,另将12只16月龄小鼠作为自然衰老对照组(自衰组)。治疗结束后采用Morris水迷宫检测学习记忆功能。结果:模型组与盐水组在"潜伏期、寻求次数、停留时间、平台象限百分比"4项指标均有显著性差别(P0.05),模型组与自衰组在"寻求次数、停留时间、跨越次数、原平台象比"4项均无明显差异(P0.05),模型组与治疗组比较6项均有显著性差异(P0.05或P0.01),治疗组与盐水组各项指标无显著性差异(P0.05)。结论:艾炷灸足三里、悬钟两穴可以改善D-半乳糖所致衰老小鼠的学习记忆功能。     

艾灸对D-半乳糖致小鼠衰老模型抗衰老作用的研究

目的:探讨艾灸延缓衰老的作用机制。方法:33只3月龄昆明小鼠随机分为模型组、生理盐水对照组、艾灸组,另选16月龄小鼠作为自然衰老组(实验结束为18月龄)。模型组、艾灸组小鼠连续42d颈背部皮下注射D-半乳糖造成衰老模型,生理盐水对照组小鼠连续42d颈背部皮下注射等量生理盐水。注射12d后艾灸组选取"足三里"悬钟"两穴进行米粒大艾柱灸治疗,每穴每次3炷,隔日1次,共15次。用硝酸还原酶法测定小鼠大、小脑皮层一氧化氮(NO)含量,用双波长分光光度法测定小鼠大、小脑皮层一氧化氮合酶(NOS)活力。结果:D-半乳糖致衰老小鼠和18月龄自然衰老小鼠其脑皮层NO含量和NOS活力都呈增高的趋势,艾灸组小鼠脑皮层NO含量和NOS活力水平较模型组和自然衰老组明显降低(P<0.05,0.01)。结论:艾灸"足三里"悬钟"可以降低D-半乳糖致衰老小鼠脑皮层中NO含量和NOS活力,从而抑制了增高的NO产生的细胞毒性,起到延缓衰老的作用。     

艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠大脑组织抗氧化和学习记忆的影响

目的:观察艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠大脑组织抗氧化与学习记忆的影响。方法:3月龄昆明雄性小鼠72只,随机区组分为6组:生理组、模型组、艾炷灸"足三里、悬钟"(简称艾灸1组)、艾炷灸"关元、百会"(简称艾灸2组)、电针组、尼莫地平组,每组12只。模型组及干预治疗组,连续42d颈背部皮下注射D-半乳糖;生理组连续42d颈背部皮下注射等量生理盐水,造模第13d开始干预治疗,1次/隔日,共15次。水迷宫行为测试、脑组织匀浆一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)、总超氧化物歧化酶(TSOD)及铜锌-超氧化物歧化酶(CuZnSOD)的活力检测。结果:①模型组"潜伏期"较生理组、艾灸1、2组、尼莫地平组延长(P<0.01或P<0.05),模型组"原象比"、"跨台次数"较其他各组缩短、降低(P<0.01或P<0.05);②模型组脑组织NO含量、总一氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力较其他5组显著升高(P<0.01),其他5组脑组织NO含量、TNOS、iNOS活力比较无明显差异。模型组脑组织TSOD、CuZnSOD活力较其他5组显著降低,其他5组脑组织TSOD活力无明显差异;电针组、尼莫地平组脑组织CuZnSOD活力低于艾灸2组、艾灸1组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),其余各组间比较无差异。结论:艾炷灸可以通过提高脑组织总SOD、CuZnSOD的活力,保护脑细胞免受NO自由基损害,提高学习记忆,延缓脑组织老化。     

艾灸及电针对D-半乳糖致衰老小鼠大脑组织形态的影响

目的:观察艾灸及电针对D-半乳糖致衰老小鼠大脑组织形态的影响。方法:健康3月龄昆明种雄性小鼠72只,按随机区组设计分为6组:正常对照组、模型对照组、艾灸1组、艾灸2组、电针组、尼莫地平组,每组各12只。除正常对照组外,余组连续42天颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;正常对照组连续42天颈背部皮下注射等量生理盐水。第13天艾灸1组、艾灸2组,分别选取小鼠"足三里、悬钟","关元、百会"行艾灸治疗,电针组取"足三里、悬钟"治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日1次,共15次。另设自然衰老组(16月龄)昆明种雄性小鼠6只。采用光镜下观察脑组织形态学变化和神经元密度,电镜下观察脑组织超微结构。结果:①正常对照组大脑皮层、海马CA3区细胞结构正常。模型对照组、自然衰老组可见皮层、海马CA3区变薄,大部分神经元变性,胞核与胞浆界限模糊,核固缩,核仁消失。艾灸1、2组,电针组和尼莫地平组仍有不同程度的神经细胞变性,但变性神经细胞数量显著减少。②造模后小鼠大脑皮质、海马CA3神经元细胞密度明显下降(P0.01),经艾灸、电针及尼莫地平干预治疗后神经元细胞密度均有显著提高(P0.01)。且艾灸及电针在提高大脑皮质神经元密度方面效果优于尼莫地平(P0.05或P0.01)。结论:艾灸及电针均可减轻D-半乳糖造成的氧化损伤,保护神经元细胞。     

益髓灸对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆及氧化应激水平的影响

目的:观察益髓灸对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆和血清及脑、肾组织的8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHd G)、总抗氧化能力(T-AOC)的影响,比较2组穴位(足三里配悬钟、百会配关元)延缓脑衰老疗效,探讨其作用机制。方法:75只SPF级3月龄体质量为(30±2)g雄性昆明小鼠,水迷宫检测后随机分为5组,每组15只,即生理组、造模组、艾灸1组(足三里+悬钟穴)、艾灸2组(百会+关元穴),艾灸3组(非穴位)。造模组和各艾灸观察组予D-半乳糖按1 000 mg/(kg·d)颈背部皮下注射,同时生理组以同法注射等量的生理盐水,连续56 d。3组艾灸观察组于造模第13 d起开始艾灸,每次每穴3壮,灸单侧(或2穴),共6壮。生理组和造模组不做治疗性干预,但给予与各观察组同时间、程度的捉抓刺激。造模、治疗结束后,再次进行水迷宫测试,将小鼠眼球取血,断头取脑,开腹取肾,制备脑、肾组织匀浆,用酶联免疫法(ELISA)检测血清及脑、肾组织8-OHd G、T-AOC水平。结果:1)水迷宫结果显示:造模、治疗前各组小鼠水迷宫各项指标及学习能力比较,差异无统计学意义(P0.05);造模及治疗后,5组间比较差异有统计学意义(P0.05)。其中两两比较:a.造模及治疗后,造模组与生理组、艾灸1组、艾灸2组比较,"潜伏期、平台象比、停留时间、寻求次数、原平台象限百分比、跨越次数"6项指标比较,差异均有统计学意义(P0.05);b.生理组与艾灸3组比较,差异有统计学意义(P0.05);艾灸3组与艾灸1、2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。2)血清及脑、肾组织ELISA结果示:a.造模组血清和脑、肾组织8-OHd G含量显著升高,与生理组、艾灸1组和艾灸2组3组比较,差异有统计学意义(P0.05);生理组与艾灸3组比较,差异有统计学意义(P0.05),艾灸3组与艾灸1、2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。b.造模组血清和脑、肾组织T-AOC水平显著降低,与生理组、艾灸1组和艾灸2组3组比较,差异有统计学意义(P0.05);生理组与艾灸3组比较,差异有统计学意义(P0.05);艾灸3组与艾灸1、2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:益髓灸防治脑衰老的作用机制可能是通过降低D-半乳糖诱导的8-OHd G表达,抑制细胞的DNA损伤,提高机体总抗氧化能力T-AOC,发挥抗氧化应激损伤的作用。     

艾炷灸命门穴对衰老模型大鼠脑组织中AGEs、RAGE表达影响

目的:观察艾炷灸命门穴对D-半乳糖致衰老大鼠脑组织中AGEs及其受体RAGE表达的影响,探讨艾炷灸命门穴延缓衰老的作用机制。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为空白组10只、模型制备组30只,空白组腹腔注射生理盐水,模型制备组进行腹腔注射D-半乳糖500 mg/kg,每日1次,连续60天,模型制备成功后随机选取20只分为模型对照组、命门穴治疗组,艾炷灸治疗4周。酶联免疫吸附测定法(Elisa)观察各组大鼠脑组织匀浆中AGES、RAGE表达水平,RT-PCR观察RAGE mRNA的表达水平。结果:模型对照组大鼠脑组织中AGES、RAGE及RAGE mRNA表达水平比空白组明显增加(P<0.01);命门穴治疗组脑组织中AGES、RAGE及RAGE mRNA表达水平明显低于模型对照组(P<0.01)。结论:艾炷灸命门穴可以延缓衰老,其机制可能是AGEs的水平下调减少了对蛋白的直接修饰及抑制AGEs与特异性配体RAGE结合而引发一系列的生物学效应而达到延缓衰老的目的。     

艾灸对亚急性衰老小鼠—氧化氮的影响

目的 :通过测定亚急性衰老小鼠血清NO浓度、红细胞中SOD活力和血浆MDA的含量 ,进一步探讨NO与衰老的关系以及艾灸的延缓衰老作用。方法 :以D 半乳糖造成的亚急性衰老小鼠为实验对象 ,艾灸“大椎”、“命门”、“足三里”穴 ,治疗结束后测定NO浓度、SOD活力和MDA含量。结果 :模型组NO浓度与空白组比较明显下降 (P <0 0 5) ;各治疗组与模型组相比 ,NO浓度、SOD活力上升 ,MDA含量下降 ,具有显著性意义 (P <0 0 1 )。结论 :NO与衰老之间有一定的相关性 ,衰老时血清NO浓度降低 ;艾灸具有延缓衰老的作用     

艾灸对D-半乳糖致小鼠衰老模型海马突触蛋白的影响

本实验将空白对照组和D-半乳糖造模组及造模同时又艾灸其“百会”、“大推”穴的小鼠的海马粗制突触体的总蛋白进行SDS-聚丙烯酸胶凝胶平板电泳,老马斯亮兰染色,薄层扫描分析,观察艾灸对D-半乳糖所致小鼠海马的突触蛋白的影响,以探讨艾灸抗衰老作用可能的中枢机制。 1材料与方法1．1材料健康3月龄的ICR雄性小鼠30只,体重309士Zg,由本校实验动物中心提供。丙烯酸胺（Acr）、甲叉双丙烯酸胺（Bis）、十二烷基磺酸钠（SDS）等均为FLUKA公司生产,低分子量标准蛋白为上海丽珠东风生物技术有限公司生产,D一半乳糖为上海试剂二厂生…     

Effects of moxibustion and Chinese herbs on contents of mitochondrial DNA, serum IL-2 and IL-6 in the aging model rat

OBJECTIVE: To probe into the mechanisms of moxibustion and Chinese herbs in delaying aging. METHODS: Sixty SD rats were randomly divided into a young control group, an aging group, a moxibustion group, a Chinese herb group and a moxibustion plus Chinese herb group. In the latter 4 groups, aging rat model was established by hypodermic injection of D-galactose. In the course of modeling, the 3 treatment group were treated by mild-warm moxibustion at "Zusanli (ST 36)", "Shenshu (BL 23)" and "Guanyuan (CV 4)" with reinforcing method, stomach perfusion of decoction of Liuwei Dihuang plus Danggui (Angelica) and Danshen (Salvia Miltiorrhiza Bge), and the moxibustion plus the Chinese herbs, respectively. After treatment for 40 days, liver mitochondrial DNA, serum IL-2 and IL-6 contents were detected. RESULTS: (1) The mitochondrial DNA content of liver cells and serum IL-6 level significantly increased (P < 0.05, P < 0.01) and serum IL-2 level significantly decreased (P < 0.05) in the aging model group as compared with those in the young control group. (2) The mitochondrial DNA content of liver cells and serum IL-6 level significantly decreased (P < 0.05, P < 0.01) and serum IL-2 level significantly increased (P < 0.05) in all the treatment group as compared with those in the aging model group. CONCLUSION: Moxibustion and Chinese herbs function delaying aging though decreasing mitochondrial DNA content of liver cells and serum IL-6 level and increasing serum IL-2 level.     

近十年艾灸治疗腹泻的临床应用规律分析＊

目的 探讨近十年临床研究文献中艾灸治疗腹泻的临床应用规律。方法 收集近十年国内外数据库中艾灸治疗腹泻的临床研究文献，运用Excel 2013、SPSS 25.0及Apriori算法对艾灸治疗腹泻的病种、治疗方法及穴位组方进行数据分析。结果 共纳入300篇文献进行统计分析，结果显示艾灸以治疗慢性腹泻为主；隔药灸和温和灸较为常用；艾灸与中药结合治疗较为多见。所采用的艾灸穴位处方共涉及65个穴位，频次超过10次的穴位有天枢、神阙、关元、足三里、中脘、大肠俞、气海、上巨虚、脾俞、肾俞、命门、胃俞、三阴交、下巨虚和阴陵泉，其中天枢、神阙、关元、足三里四穴频率超过100次。从分布来看，以任脉和腹部的穴位居多。聚类分析发现核心穴位有天枢、上巨虚-肾俞-大肠俞-三阴交、中脘-脾俞-神阙-关元、足三里-胃俞-命门、气海-下巨虚-阴陵泉。穴位关联性分析发现天枢-关元为最常用穴对。结论 艾灸治疗腹泻以慢性腹泻为主，治疗方法多采用温和灸、隔物灸，穴位以天枢、神阙、关元、足三里的使用频率最高，以天枢-关元合用较为多见。     

逆灸对不同运动强度小鼠心肌细胞的保护作用

目的:探讨逆灸对不同运动强度小鼠心肌细胞凋亡损伤的影响。方法:将60只昆明小鼠随机分为空白对照组、空白逆灸组、中等运动对照组、中等运动逆灸组、力竭运动对照组、力竭运动逆灸组,每组10只。采用不同运动强度对小鼠进行训练。各逆灸组取"足三里""关元"穴进行艾灸治疗,每穴每日灸5壮,每日1次,每周休息1d,共治疗3周。采用TUNEL法检测各组心肌细胞凋亡率,电镜观察各组心肌亚细胞结构破坏程度。结果:中等运动对照组与空白对照组相比,心肌细胞凋亡率升高(P0.05);中等运动逆灸组与中等运动对照组相比心肌细胞凋亡率下降(P0.05);力竭运动对照组与中等运动对照组相比,心肌细胞凋亡率升高(P0.05);力竭运动逆灸组与力竭运动对照组相比,心肌细胞凋亡率明显下降(P0.05)。电镜观察显示,中等运动逆灸组比中等运动对照组心肌细胞亚细胞结构破坏程度轻,力竭运动逆灸组比力竭运动对照组心肌细胞亚细胞结构破坏程度轻。结论:不同运动强度的运动训练均可引起心肌细胞发生凋亡损伤,且伴有心肌组织损伤,随着运动强度加大,心肌细胞发生凋亡更加明显;艾灸可减轻高强度运动对小鼠心肌细胞造成的损伤,减少细胞的凋亡。     

针灸对衰老模型小鼠皮肤中MDA、GSH-Px和Hyp影响的实验研究

目的:观察针灸对衰老模型小鼠皮肤组织形态的影响.方法:长期颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠亚急性衰老模型,随机分为针刺组、艾灸组、模型组和空白组,检测皮肤组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase,SH-Px)活力、羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量.结果:针灸足三里穴能够使衰老模型小鼠皮肤组织中的MDA含量减少,GSH-Px活力增强,Hyp含量增多.结论:针灸足三里穴对小鼠皮肤衰老具有拮抗作用.