透析-色谱联用技术研究黄连生物碱与牛血清白蛋白的结合作用

目的:研究黄连中与牛血清白蛋白(BSA)有结合作用的潜在活性成分。方法:采用平衡透析与高效液相色谱联用技术筛选黄连中与BSA有结合作用的成分;考察BSA浓度、缓冲液pH值对黄连生物碱与BSA结合作用的影响;比较黄连中各生物碱单体与BSA单独作用和黄连总生物碱与BSA作用的区别。结果:黄连中共有7个化学成分与BSA结合作用明显,通过对照品对照,其中6个成分被分别鉴定为非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马亭及盐酸小檗碱;各生物碱单独结合作用强于它们在黄连中混合存在的结合作用,各生物碱在与BSA结合过程中存在竞争作用。结论:蛋白结合-平衡透析-高效液相色谱法联用可有效、快速地预测黄连中多种成分在体内的吸收情况,筛选其潜在活性成分,且能体现中药整体作用的特点,为其药效物质基础的进一步研究提供依据。     

基于含量测定和化学计量分析的消渴灵片质量标准研究

目的:建立13个厂家111批消渴灵片中黄连的6个生物碱、丹皮酚等多指标性成分含量测定方法,并结合主成分分析及聚类分析等化学计量学方法对其进行质量评价研究.方法:采用HPLC-UV法建立6个黄连生物碱类成分(非洲防己碱、表小檗碱、盐酸药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱)、丹皮酚的含量测定方法及通过Chempatt...     

草连生物碱成分的研究

目的研究草连的生物碱成分。方法采用硅胶柱色谱法,进行单体化合物的分离纯化,通过波谱学方法鉴定其结构。结果分离并鉴定出7个原小檗碱型生物碱,分别为小檗碱、药根碱、巴马汀、非洲防己碱、黄连碱、甲基黄连碱和groen-landicine。结论7种生物碱均首次从草连中分得。草连所含生物碱的种类与黄连属其他植物中的生物碱种类不完全相同,生物碱种类可作为黄连属植物分类及生药鉴定的依据之一。     

一测多评法测定黄连须中的5种生物碱

目的 采用一测多评法同时测定黄连须中5种生物碱(盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱和盐酸巴马汀)的含量.方法 以盐酸小檗碱为内参物,采用HPLC法测定其与盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀的相对校正因子,利用该相对校正因子计算其他4种生物碱的含量;同时利用外标法测定5种生物碱的含量,比较两种测定方法的差异,验证一测多评法的可行性和准确性.结果 在线性范围内,盐酸小檗碱与盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀的相对校正因子分别为1.128、1.008、1.070、1.025,在不同实验条件下,相对校正因子的重复性良好,5种生物碱成分含量的计算值与实测值间无显著性差异.结论 一测多评法同时测定黄连须中5种生物碱的含量是可行的、准确的.     

小叶锦鸡儿种子中的生物碱及其细胞毒活性

目的鉴定小叶锦鸡儿种子中的生物碱类成分,研究其抗癌活性。方法采用色谱和光谱法对小叶锦鸡儿种子中所含有的总生物碱进行分离并作结构鉴定;对小叶锦鸡儿种子的总生物碱及分离得到的5个生物碱单体分别进行细胞毒活性筛选。结果从总生物碱中共分离得到了5个原小檗碱型生物碱,分别为去氢白莲叶碱、黄连碱、表小檗碱、脱氢卡维丁以及刻叶紫堇明碱,它们对Saos-2,A375,Hela细胞株均表现出明显的细胞毒活性。结论5个生物碱单体均为首次从锦鸡儿属植物中分离得到,提示小叶锦鸡儿种子提取物具有抗肿瘤的药用价值。     

黄连生物碱成分的 HPLC-DAD-MS 分析

目的：优化测定黄连中生物碱成分的高效液相色谱法条件,并用 LC - MS 鉴定黄连中主要生物碱类成分。方法：使用 Zorbax SB C18色谱柱,流动相 A 为乙腈,流动相 B 为水溶液（含20 mmol／ L 乙酸铵和0.5%乙酸）,梯度洗脱,检测波长345 nm。联用电喷雾-离子阱质谱检测器鉴定主要色谱峰的成分。结果：建立了测定黄连中黄连碱、巴马汀和小檗碱三个成分含量 HPLC 方法,黄连碱、巴马汀和小檗碱的线性范围分别为0.0420~0.840μg、0.0448~0.896μg 和0.0502~1.004μg;LC - MS 鉴定了黄连中7个色谱峰。结论：该方法简便、准确、可靠,能用于控制黄连药材及饮片的质量,同时该方法使用溶解性好、易挥发的乙酸铵代替十二烷基硫酸钠（SDS）做离子对试剂,适用于 LC - MS 分析。     

交泰丸中4种生物碱与人血浆蛋白结合率的测定

目的：研究交泰丸中表小檗碱,盐酸黄连碱,盐酸巴马汀,盐酸小檗碱与人血浆蛋白的结合率。方法：采用平衡透析法测定交泰丸中4种生物碱与人血浆蛋白的结合率,用高效液相色谱（HPLC）法测定透析内、外液中4种成分的质量浓度,计算血浆蛋白结合率。结果：表小檗碱,盐酸黄连碱,盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的线性关系、精密度、提取回收率和稳定性均符合方法学要求;交泰丸低、中、高（0.5,1,1.5 mg·mL^-1）浓度中,表小檗碱与人血浆蛋白结合率分别为40.28%±3.02%,42.41%±2.61%,33.76%±2.19%,盐酸黄连碱与人血浆蛋白结合率分别为46.60%±3.47%,58.49%±6.47%,47.00%±1.3%,盐酸巴马汀与人血浆蛋白结合率分别为40.17%±3.26%,33.71%±3.74%,24.05%±1.81%,盐酸小檗碱与人血浆蛋白的结合率分别为29.41%±4.99%,25.35%±1.37%,18.07%±1.61%。结论：交泰丸中表小檗碱,盐酸巴马汀和盐酸小檗碱属于低等结合型成分,盐酸黄连碱属于中等结合型成分。     

不同辅料炮制对黄连生物碱类成分的影响

目的探讨不同辅料炮制对黄连生物碱类成分的影响。方法取不同辅料炮制黄连粉末制备成供试品溶液。在色谱条件下进样分析,计算各样品中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀及盐酸药根碱的含量。结果生黄连总量19.48%、姜黄连总量22.79%、酒黄连总量23.46%、醋黄连总量23.17%、萸黄连总量21.68%、胆汁黄连总量19.72%。结论炮制对黄连化学成分有一定影响,不同辅料炮制黄连中生物碱含量变化不大。     

RP-HPLC测定不同品种黄连中的黄连碱和表小檗碱

目的 测定不同黄连药材中黄连碱、表小檗碱的含量。方法 采用反相高效液相色谱法。结果 不同品种的黄连中黄连碱的含量均在l％以上；所有的黄连均含有黄连碱、表小檗碱、小檗碱、巴马汀、药根碱的五个峰，它们之间的含量比例为1．5：1：6：1．5：0．8。结论 所用方法可作为黄连药材的定量测定方法。     

高效液相色谱法测定黄连药材中小檗碱型生物碱的含量

目的:分离并测定黄连药材中小檗碱型生物碱的含量。方法:采用ODS柱(15 mm×6.0 mm),以乙腈-50 mmol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(磷酸调 pH=3.0)(50:50),内含 25 mmol·L~(-1)SDS为流动相,345nm检测。结果:在以上条件下,药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马亭和小檗碱5种生物碱可以完全分离,测定了8种不同黄连药材中4种生物碱的含量。结论:本法可用于黄连药材的研究,也可用于黄连等含小檗碱中药材及制剂的常规检验。     

黄连总生物碱对糖尿病大鼠降血糖作用研究

目的：探讨黄连总生物碱对糖尿病大鼠的降血糖作用。方法：采用链脲佐菌素50 mg/kg诱导SD大鼠形成糖尿病模型,筛选糖尿病大鼠空腹血糖的禁食时间,考察黄连总生物碱给药68d对糖尿病大鼠血糖、糖化血清蛋白、肌酐、尿素氮的影响,并测定其肝、胃、肾脏器指数,评价黄连总生物碱对糖尿病大鼠的降血糖作用。结果：（1）选择白天禁食6 h为糖尿病大鼠的禁食时间。（2）与模型组比较,黄连总生物碱高剂量组（含黄连总生物碱578.7 mg/kg）可明显降低糖尿病大鼠空腹6 h血糖及糖化血清蛋白（P〈0.05）;黄连总生物碱低剂量组（含黄连总生物碱192.9 mg/kg）可显著降低谷胱甘肽-过氧化物酶（P〈0.01）。黄连总生物碱对糖尿病大鼠肌酐、超氧化物歧化酶、总胆固醇、甘油三酯及脏器指数总体上影响不明显（P〉0.05）。结论：黄连总生物碱对糖尿病大鼠有降血糖的作用。     

黄连化学成分的分离与鉴定

目的：对中药黄连（Coptis chinensis Franch．）的化学成分进行分离与鉴定。方法：利用各种色谱手段对黄连中的化学成分进行分离,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果：从黄连中分离得到3个化合物。结论：化合物分别是berberine（1）,coptisin（2）,palmafine（3）。     

不同栽培条件黄连的质量分析与评价

目的建立黄连药材HPLC指纹图谱分析方法及含量测定方法，比较分析不同栽培条件、不同产地和不同炮制方法制备的黄连药材的质量。方法采用HPLC-UV方法建立了黄连药材指纹图谱，应用HPLC-MS联用技术指认了主要色谱峰；并对黄连药材中的小檗碱、巴马汀和药根碱进行含量测定。结果指认了黄连药材指纹图谱中7个主要的色谱峰，含量测定结果表明不同的栽培条件中，遮荫条件、生长年限对黄连中小檗碱、巴马汀和药根碱的含量影响较大，而种植密度的影响不是很明显；现代生态技术栽培的黄连中这3种生物碱的含量均高于对照药材或与之基本相当。不同产地的黄连中这3种生物碱的含量差别较大。应用不同炮制方法制备的黄连中这3种生物碱的含量差别不明显。结论现代生态栽培技术替代传统人工搭棚方式栽培黄连是可行的，同时为科学炮制黄连提供依据。     

黄连中生物碱有效部位纯化工艺研究

目的：用大孔吸附树脂对黄连总生物碱有效部位进行纯化工艺研究。方法：以总生物碱吸附量、含量和解吸率为考察指标,采用高效液相色谱法检测黄连中总生物碱的含量。结果：HPD722型大孔吸附树脂对黄连总生物碱有良好吸附分离性能,适宜的工艺条件为：黄连药材上样液质量浓度为100mg·ml^-1（相当于原生药）,上样体积为3BV湿树脂体积,洗脱方法为先以5BV湿树脂体积蒸馏水除去杂质,再以7BV湿树脂体积50％乙醇洗脱,收集50％乙醇洗脱部分。结论：该法简单可行,适合工业生产。     

滴鼻灵质量标准研究

目的:建立滴鼻灵的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对方中黄连进行定性鉴别;采用反相高效液相色谱法测定该制剂中盐酸麻黄碱的含量。结果:TLC中斑点清晰、分离度好。盐酸麻黄碱的进样量在0.088～3.520μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.996 0);平均回收率为100.82%,RSD=1.19%(n=6)。结论:所建标准可用于滴鼻灵的质量控制。     

两种工艺对舒胃颗粒中黄连生物碱含量的影响

目的:比较黄连与其余药材混煎及分煎合并两种工艺对舒胃颗粒中黄连生物碱含量的影响。方法:以黄连生物碱提取量为考察指标,采用紫外分光光度法测定黄连生物碱含量,对两种水提取方法进行比较。结果:按黄连药材投量计,混煎、分煎合并和黄连单煎所得3个样品中生物碱含量以盐酸小檗碱计,分别为3.88%,6.47%,8.37%。结论:分煎合并工艺中黄连生物碱损失量明显少于混煎工艺。     

基于生物碱类成分优选黄连药材的加工方法

目的：探索黄连药材在产地加工过程中不同的干燥方法对其生物碱类成分的影响,以优化和建立适宜的干燥加工方法。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法同时测定不同加工方法的黄连药材样品中7种生物碱类成分的含量,并采用主成分分析（PCA）对其进行综合评价。结果：不同加工方法对黄连中生物碱类成分的含量有一定影响,自然干燥综合质量较好。结论：建议黄连在加工时采用低温、不断翻动干燥的方法,为优选黄连适宜的产地加工方法提供了基础研究资料。     

四妙颗粒的质量标准

目的：建立四妙颗粒的质量标准。方法：用TLC法对四妙颗粒中苍术、黄柏、黄连进行鉴别;用HPLC法对制剂中的盐酸小檗碱进行含量测定。结果：定性鉴别分离度较好,专属性强;盐酸小檗碱的含量测定线性范围为0．15～0．90μg（r=0．9994,n=6）,平均回收率为99．65％（RSD=3．04％,n=6）。结论：所建立方法准确可靠,灵敏度高,专属性强,能有效控制四妙颗粒的质量。