鞘内注射巴氯酚对神经病理性痛大鼠的镇痛作用及其对脊髓GABA转运体-1的影响

目的研究鞘内注射GABAB受体激动剂巴氯酚(ba-clofen,Bac)对神经病理性痛大鼠的镇痛作用及其对脊髓GABA转运体-1的影响。方法建立坐骨神经结扎致神经病理性痛大鼠模型。在行为学实验部分,将32只大鼠随机分为NS组、Bac1组、Bac2组、Bac3组(n=8),分别鞘内注射生理盐水、0.1、0.3、1.0μg巴氯酚10μl,并分别于给药前、给药后0.5、1、2、4、8、12、24 h测定大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawl threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdrawl latency,TWL)以及运动功能。在第2部分,将大鼠分为NS组与Bac组,鞘内分别给予0.3μg巴氯酚或生理盐水,分别于给药前、给药后1、4、8 h取大鼠脊髓腰段,免疫组织化学检测脊髓节段GAT-1免疫阳性神经元(n=6);分别于给药前、给药后30 min、1、2、4、8、12和24 h取大鼠脊髓腰段,用Western blot方法测定脊髓节段GAT-1蛋白含量(n=4)。结果鞘内注射巴氯酚后0.5～2 h,Bac1组、Bac2组与Bac3组大鼠MWT和TWL均较NS组明显升高(P<0.01,P<0.05),鞘内给药后4 h,Bac2与Bac3组大鼠MWT和TWL仍较NS组明显升高(P<0.01,P<0.05),给药后8 h,Bac3组MWT与TWL仍高于NS组(P<0.05)。与NS组和给药前比较,鞘内注射0.3μg巴氯酚后0.5～4h,大鼠脊髓节段的GAT-1蛋白含量均明显降低(P<0.01,P<0.05),大鼠脊髓背角浅层GAT-1免疫阳性染色灰度值亦明显降低(P<0.01,P<0.05),至给药后8 h,GAT-1的表达逐渐增多,与NS组和给药前相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论鞘内注射GABAB受体激动剂巴氯酚可减轻坐骨神经结扎致神经病理性痛大鼠的痛觉过敏,其镇痛作用可能与抑制脊髓水平GAT-1的表达有关。     

国产齐考诺肽注射液对大鼠镇痛效果的影响

目的:研究国产齐考诺肽注射液对大鼠腰5脊神经病理性疼痛的抑制作用。方法:将大鼠随机分为模型组,国产齐考诺肽低、中、高剂量(每只30、100、300ng)组,进口齐考诺肽低、中、高剂量(每只30、100、300ng)组,每组8只。用神经结扎加切断术建立腰5脊神经病理性疼痛模型,术后第7天鞘内注射相应药物,检测给药后1、2、4、8h的50%机械性撤足阈值(50%PWT),计算最大效应百分比(MPE)。结果:与模型组比较,国产和进口齐考诺肽低、中、高剂量组大鼠给药后各时间点的50%PWT、MPE均明显增加(P<0.01),且呈明显量效关系;与同剂量的进口齐考诺肽组比较,国产齐考诺肽中、高剂量组大鼠给药后1、2、4h的50%PWT、MPE差异无统计学意义(P>0.05)。结论:国产和进口齐考诺肽注射液对大鼠腰5脊神经病理性疼痛均具有较好的抑制作用。     

鞘内注射米诺四环素对慢性坐骨神经结扎大鼠机械痛敏和热痛敏的影响

目的观察鞘内注射小胶质细胞抑制剂米诺四环素对慢性坐骨神经结扎大鼠机械痛敏和热痛敏的影响。方法所有大鼠术前8d鞘内置管,用机械缩足反射阈值和热缩足潜伏期来分别评价大鼠机械痛敏和热痛敏。前给药组:生理盐水10μl或米诺四环素50μg,于坐骨神经结扎前1d开始持续到术后1d(每天2次)鞘内注射,机械缩足反射阈值和热缩足潜伏期分别于术前2d,术后1,3,5,7,14d测定;后给药组:坐骨神经结扎后7d,鞘内注射1次生理盐水10μl或米诺四环素50μg,其对机械缩足反射阈值和热缩足潜伏期的影响分别于给药后0.5、1、2、4、8h测定。结果CCI大鼠从术后1d形成稳定的热痛敏和机械痛敏,前鞘内注射米诺四环素明显增加CCI大鼠MWT和TWL(P<0.05,P<0.01),相反,后鞘内注射米诺四环素对CCI大鼠MWT和TWL无明显影响。结论前鞘内注射米诺四环素明显抑制CCI大鼠机械痛敏和热痛敏,提示小胶质细胞的活化参与慢性坐骨神经结扎引发神经病理痛的形成。     

碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺对切口痛大鼠痛行为的影响

目的观察鞘内注射碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺(ACT)对大鼠切口痛行为的影响。方法所有大鼠术前6天鞘内置管,随机分为5组:假手术组、假手术+ACT组、切口痛组、切口痛+ACT低剂量(2.25μg)组、切口痛+ACT高剂量(22.5μg)组,每组16只。按照Brennan法建立切口痛模型。ACT和生理盐水均在术后d 1鞘内给予。分别于术前d1(基础值)、术后d 1(给药前,给药后30、75、120、165、240min)测定大鼠的热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足反射阈值(MWT),并予比较。结果切口痛术后d 1(给药前)与基础值相比TWL、MWT均明显降低(P<0.05);鞘内给予高剂量ACT,与给药前相比,给药后30、75、120 min TWL升高(P<0.05),但不影响大鼠的MWT;与切口痛组相比,切口痛+ACT高剂量组在给药后30、75、120 min TWL明显增高(P<0.05)。结论鞘内给予碳酸酐酶抑制剂ACT部分缓解了切口痛大鼠的热痛觉过敏,但是对机械痛觉过敏没有影响,提示碳酸酐酶可能参与了切口痛的热痛敏过程。     

比阿培南对丙戊酸钠在大鼠红细胞内、外分布的影响研究

目的:研究比阿培南对丙戊酸钠在大鼠红细胞内、外分布的影响。方法:取大鼠随机分为对照组(丙戊酸钠50mg·kg-1)和实验组(比阿培南15mg·kg-1+丙戊酸钠50mg·kg-1),每组6只,禁食12h,麻醉固定后分别在股静脉和动脉行套管插入术,经股静脉给予相应药物,给药前注射肝素,采用荧光偏振免疫分析法考察给药后180min内各组大鼠血浆和全血中丙戊酸钠的浓度,并用非房室模型法估算药动学参数。结果:与对照组比较,实验组大鼠全血中丙戊酸钠浓度无明显变化,血浆中浓度有所降低,由此推算试验组大鼠红细胞内的丙戊酸钠浓度有所增加。实验组与对照组血浆中丙戊酸钠的AUC0～3h分别为(134.89±18.88)、(189.35±34.76)μg.h.mL-1,t1/2分别为(0.95±0.04)、(1.13±0.16)h,2组间AUC0～3h和t1/2均存在显著性差异(P<0.05)。结论:比阿培南能够明显增加丙戊酸钠在大鼠红细胞内的分布,同时降低大鼠血浆中丙戊酸钠的浓度。     

脂氧素A4缓解非压迫性腰椎间盘突出症模型大鼠根性神经痛的作用机制

目的 探讨脂氧素A4缓解非压迫性腰椎间盘突出症模型大鼠根性神经痛的作用机制。方法 雄性SD大鼠48只随机均分为四组。S组仅暴露相应手术操作部位,术后连续3 d鞘内注射生理盐水10μL/d。M、A和B组建立非压迫性腰椎间盘突出症模型后,分别连续3 d鞘内注射生理盐水10μL/d、含脂氧素A4 10 ng/d和脂氧素A4 100 ng/d的生理盐水10μL/d。比较四组术前1 d和术后7 d的大鼠右侧后肢50%缩足反射阈值(PWT)。RT-PCR法和Western blot法分别检测术后第7天四组大鼠右侧L₄～L₆段脊髓背角组织炎症因子mRNA表达和NF-κB/p65蛋白表达。结果 与S组比较,M、A、B组术后各时间点50%PWT均降低(P<0.05)。与M组比较,A组和B组术后各时间点50%PWT升高,且B组升高更明显(P<0.05)。与S组比较,M、A、B组TNF-α、IL-1β mRNA表达和NF-κB/p65蛋白表达升高,而转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA表达降低(P<0.05)。与M组比较,A组和B组TNF-...     

苦参碱对神经病理性疼痛小鼠疼痛行为的干预

目的研究苦参碱对坐骨神经缩窄性损伤(CCI)诱导的神经病理性疼痛的镇痛作用。方法建立慢性坐骨神经缩窄性损伤神经病理性疼痛模型,用Von Frey纤维丝、辐射热测痛仪、冷板法、运动协调和自主活动实验的方法测定苦参碱对7.5,15和30 mg·kg的CCI小鼠的机械缩足反射阈值(MWT)、热缩足反射潜伏期(TWL)、抬足次数、在棒时间和自主活动次数的影响。结果 CCI小鼠从术后7d开始到本实验观察的14d表现出明显的机械性痛觉超敏、热痛觉过敏及冷痛觉超敏。与CCI组相比,ip给予苦参碱30 mg·kg-1可提高小鼠损伤侧后足的机械缩足反射阈值(P<0.05);ip给予苦参碱30,15和7.5 mg·kg-1呈剂量依赖性延长小鼠损伤侧后足的热缩足反射潜伏期(P<0.05);ip给予苦参碱30,15和7.5 mg·kg-1呈剂量依赖性地减少小鼠损伤侧后足的冷缩足反射次数(P<0.05);ip给予苦参碱30,15和7.5 mg·kg-1对自主活动次数(P>0.05)和在棒时间(P>0.05)没有明显影响。结论苦参碱对CCI诱发的神经病理性疼痛有良好的镇痛作用。     

鞘内注射甘珀酸对腰5脊神经切断大鼠痛觉高敏的影响

目的观察鞘内注射甘珀酸(CBX)对腰5脊神经切断(SNT)大鼠机械痛阈及脊髓背角星形胶质细胞标志物(GFAP)和TNF-α、IL-1β表达的影响。方法 36只成年♂SD大鼠,随机分成3组(n=12),假手术组(Sham组)、SNT+NS组(NS组)、SNT+CBX(CBX组)。Sham组仅暴露腰5脊神经,不切断,NS组和CBX组切断腰5脊神经。术后10d,Sham组和NS组鞘内注射生理盐水10μl,CBX组鞘内注射甘珀酸5μg(10μl),分别于术前1 d,术后1、3、5、7、10 d及给药后1、2、4、6 h随机取6只大鼠测损伤侧机械痛阈(MWT),并采用免疫组化技术观察给药后2 h后损伤侧脊髓背角中GFAP表达的变化,ELISA测定损伤侧脊髓背角TNF-α和IL-1β的水平。结果 3组大鼠术前1 d,MWT差异均无显著性(P>0.05);Sham组术后各时间点与术前相比损伤侧MWT差异无显著性(P>0.05);与Sham组相比,NS组和CBX组术后1、3、5、7、10 d痛阈明显下降(P<0.05);NS组术后10 d给药后1、2、4、6 h,MWT与给药前无差异(P>0.05),但给药后2 h损伤侧脊髓背角GFAP的表达和TNF-α、IL-1β的水平较Sham组明显增高(P<0.05);CBX组给药后1、2、4 h损伤侧MWT较给药前明显提高(P<0.05),6 h无差异(P>0.05),给药后2 h损伤侧脊髓背角GFAP的表达和TNF-α、IL-1β的水平较NS组明显降低(P<0.05)。结论单次鞘内注射5μg CBX可改善脊神经切断大鼠损伤侧机械痛敏行为,该效应可能与其抑制损伤侧脊髓背角星形胶质细胞的活化,减少TNF-α、IL-1β的释放有关。     

对氯苯氧异丁酸甲氧基苯丙烯酸酯的小鼠急性毒性和大鼠长期毒性

目的评价对氯苯氧异丁酸甲氧基苯丙烯酸酯(AZ)的安全性。方法 小鼠分别ig给予AZ3000～1001mg.kg-1或ip给予AZ1600～983mg.kg-1,观察14d,测定小鼠的半数致死量(LD50)。大鼠ig给予AZ500,291.7和166.7mg.kg-1(为临床拟用剂量的60倍、35倍和20倍),连续13周,停药2周后,观察大鼠一般状况、体质量增长、血液学、血液生化学和病理组织学等指标的变化。结果小鼠ig及ip给AZ的LD50分别为2053和1254mg.kg-1。大鼠给药13周后,AZ500mg.kg-1组血清转氨酶、尿素氮和肝系数升高(P<0.05),AZ291.7mg.kg-1组血清天冬氨酸转氨酶(AST)和肝系数升高(P<0.05),其他各组各指标与溶媒对照组相比均无显著性差异。病理组织学检查显示,AZ500mg.kg-1有1例肝组织炎细胞浸润,其余组大鼠未见与药物毒性相关的明显病变。停药2周后各异常指标均恢复正常。结论 AZ在规定剂量下使用应有较好的安全性。     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾组织Toll样受体信号通路调节的研究

目的探讨白芍总苷(TGP)对糖尿病大鼠肾组织Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)信号通路的影响。方法建立链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分正常组、糖尿病模型组、TGP给药组(50、100、200 mg·kg-1·d-1灌胃)。8周后应用免疫组化,Western blot及实时定量PCR方法检验大鼠肾组织中TLR2/4信号通路相关蛋白的表达。结果 TGP给药组(50、100、200 mg·kg-1·d-1)大鼠尿蛋白排泄率(AER)水平明显低于糖尿病模型组(P<0.05)。免疫组化显示TGP给药组(50、100、200 mg·kg-1·d-1)肾小管-间质TLR2蛋白表达明显低于糖尿病模型组(P<0.01),肾组织TLR4、ED-1也明显低于糖尿病模型组(P<0.05,P<0.01)。Western blot显示糖尿病肾组织TLR信号通路蛋白TLR2、TLR4、MyD88、p-IRAK1、p-IRF3与NF-κB p65表达明显高于正常组(P<0.01);TGP给药(50、100、200mg·kg-1·d-1)肾组织TLR信号通路相关蛋白表达明显低于糖尿病组(P<0.05,P<0.01)。实时定量PCR显示TGP给药(50、100、200 mg·kg-1·d-1)肾组织TLR2、TLR4、MyD88 mRNA明显低于糖尿病组(P<0.05,P<0.01)。结论TGP可减轻糖尿病大鼠早期肾脏损害,其机制可能与抑制糖尿病大鼠肾组织中TLR信号通路有关。     

卡马西平联合吗啡对慢性坐骨神经缩窄损伤模型大鼠的镇痛作用研究

目的:研究卡马西平联合吗啡对慢性坐骨神经缩窄损伤(CCI)模型大鼠的镇痛作用。方法:取大鼠行手术建立CCI模型,建模成功后随机分为模型组、卡马西平组(5mg·kg-1)、吗啡组(3mg·kg-1)和联用组(卡马西平5mg·kg-1+吗啡3mg·kg-1),每组16只,术后第8天分别注射相应药物,连续5d,同时设立假手术组进行比较,观察各组大鼠术后和给药过程中有无感染、自残等现象,检测给药前和给药第1、3、5天以及停药2d后机械缩足反射阈值(PWMT)和热辐射缩足反射潜伏期(PWL)变化。结果:所有大鼠术后和给药期间均无感染和自残等现象;与假手术组比较,模型组大鼠给药前和给药后各时间点的PWMT、PWL均明显减弱或缩短(P<0.01);与吗啡组比较,联用组大鼠给药后各时间点的PWMT、PWL均明显增强或延长(P<0.05或P<0.01);与给药前比较,联用组大鼠给药后各时间点的PWMT、PWL均明显增强或延长(P<0.01),卡马西平组和吗啡组大鼠停药2d后的PWMT、PWL均无明显变化。结论:卡马西平联合吗啡能明显减弱CCI模型大鼠的机械痛和热痛反应,延长吗啡作用时间,改善吗啡耐受。     

新型芳烷酮哌嗪类衍生物YX0611-1对坐骨神经慢性压迫损伤大鼠的镇痛作用

目的研究化合物YX0611-1对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用。方法建立CCI模型,采用Electronic von Frey法和热辐射法分别测定大鼠机械刺激缩足反射痛阈值(MWT)和热刺激缩足反射潜伏期(TWL)。结果 YX0611-1160 mg.kg-1组和80 mg.kg-1组单次给药均能明显提高大鼠的机械刺激阈值,延长大鼠热刺激潜伏期;YX0611-1 160mg.kg-1组多次给药能明显提高大鼠机械刺激阈值,延长大鼠热刺激潜伏期;YX0611-1 80 mg.kg-1组多次给药能明显提高大鼠的热刺激潜伏期。结论化合物YX0611-1对神经病理性疼痛大鼠有镇痛作用。     

不同剂量左氧氟沙星在大鼠胆汁药物浓度分布情况探讨

目的在大鼠模型上,研究不同剂量左氧氟沙星在大鼠胆汁药物浓度分布的情况,并初步探讨左氧氟沙星用于胆道感染的剂量问题。方法选择32只Wistar大鼠分为20,40,50,100 mg.kg-14个剂量组。在给药后30 min,1,2,3,4,5,6,8,10,12 h分别收集血标本和胆汁标本,经HPLC方法检测药物含量,并计算相关药代动力学参数。结果通过比较各组不同时点的血药浓度发现,各时点血药浓度差异均有显著性(P<0.05);而比较各剂量组胆汁药物浓度后发现,20和40 mg.kg-1剂量组各时点均无差异;1～5 h,50和100 mg.kg-1剂量组胆汁药物浓度显著高于其它剂量组;6～8 h,50和40 mg.kg-1剂量组相比差异无显著性,但10～12 h,两剂量组差异具有显著性;10～12 h,50和100 mg.kg-1剂量组相比浓度相差较大,但差异无显著性(P=0.053)。结论由动物模型结果推测,400 mg.d-1剂量用于治疗胆道感染可以满足临床需要,但500 mg.d-1剂量可能更合适临床用药。     

KATP通道对缺血性心肌电平衡的维护作用及机制

目的:利用异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌缺血性损伤模型和心肌细胞损伤模型,并对其进行药物干预,探讨心肌ATP敏感性钾通道(KATP通道)维持缺血性心肌电平衡的作用与机制。方法:在动物实验中,将雄性SD大鼠,随机分为5组,正常对照组大鼠皮下注射0.9%氯化钠溶液,其余各组大鼠均皮下注射等量1g·L-1ISO(qd),连续9d,其间,在第7~9d,除了正常对照组和模型组外,其他3组大鼠还分别灌胃给予1.75g·L-1普萘洛尔(PRO)2m L·kg-1·d-1、5g·L-1曲美他嗪(VAS)2m L·kg-1·d-1或腹腔注射给予5g·L-1二苯基碘(DPI)1m L·kg-1·d-1。在造模期间不同时间点,对各组大鼠进行心电图检查,并制备心肌标本,检测其中KATP通道亚基KIR6.2蛋白表达水平。在细胞实验中,将H9C2心肌细胞分成对照组(不给药)、ISO组、ISO+PRO组、ISO+DPI组和ISO+VAS组,后3组细胞均在1μmol·L-1ISO加入前30min,分别给予2μmol·L-1PRO、10μmol·L-1DPI和10μmol·L-1VAS,且在加入ISO后,与ISO组细胞一样,再孵育1和24h,采用实时荧光定量PCR法测定各组细胞中KATP通道亚基KIR6.2和SUR2A基因表达水平。结果:大鼠实验显示,与正常对照组相比,模型组大鼠在造模的第3、7d,心电图参数QTc明显缩短,心率加快(P<0.05),且心肌中KIR6.2蛋白表达明显增多(P<0.01),而造模9d后,其QTc明显延长(P<0.01),心率减慢(P<0.05),心肌中KIR6.2蛋白表达显著降低(P<0.01);ISO+PRO、ISO+DPI和ISO+VAS各组大鼠在持续3d分别接受3种药物治疗后,其QTc较模型组明显缩短,心率升高,均趋于恢复正常水平。细胞实验显示,与对照组相比,ISO组H9C2细胞经ISO孵育1h后,KIR6.2和SUR2A的m RNA表达显著上调(P<0.05),而在ISO孵育24h后,KIR6.2和SUR2A的m RNA表达显著下调(P<0.01);与ISO组相比,各给药组细胞经ISO孵育1h后,KIR6.2和SUR2A的m RNA表达均有不同程度下调,而在ISO孵育24h后,KIR6.2和SUR2A的m RNA表达均显著上调(P<0.05或P<0.01)。结论:KATP通道对维护缺血性心肌电平衡起重要作用。持续性激动β受体、氧化应激或能量供应不足等体内多条途径都会影响KATP通道的表达和功能,而保护KATP通道功能,对于维持心电平衡,抑制心律失常基质形成,意义重大。     

CGRP、K_(ATP)通道和脊神经在鞘内注射吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血后损伤中的作用

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)、ATP敏感性钾离子通道(KATP通道)和脊神经在鞘内注射吗啡预处理对在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的保护作用。方法♂SD大鼠60只,建立鞘内置管和心肌缺血/再灌注损伤模型,随机分为10组,每组6只:对照组(CON,生理盐水)、二甲亚砜组(DMSO,GLI的溶剂)、CGRP8-37组(CGRP受体阻滞剂,3nmol.kg-1)、格列苯脲组(GLI,KATP通道阻滞剂,0.3 mg.kg-1)、利多卡因组(LID,1%盐酸利多卡因10μl)、鞘内注射吗啡预处理组(MPC,3×1μg.kg-1)、CGRP8-37+MPC组、GLI+MPC组、LID+MPC组、GLI+LID组。观察指标包括:平均动脉压(MAP)、心率(HR),计算平均动脉压和心率乘积(RPP);心肌缺血危险区(AAR)、梗死区(IS)的体积、心肌梗死面积以IS/AAR表示。结果与CON组比较,MPC组、LID组、LID+MPC组和GLI+LID组的IS和IS/AAR均明显下降(P<0.05,P<0.01);与MPC组比较,CGRP8-37+MPC组、GLI+MPC组和LID+MPC组的IS和IS/AAR均明显增加(P<0.01)。结论外周CGRP的释放、KATP通道和脊神经可能参与了鞘内注射吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血后损伤的作用。     

头孢替安钠与呋塞米合用对大鼠肾功能的影响

目的:评价头孢替安钠与呋塞米合用的安全性,为临床用药提供参考。方法:设空白组、头孢替安钠500 mg·kg-1·d-1组、头孢替安钠500 mg·kg-1·d-1+呋塞米15 mg·kg-1·d-1组,给药12d后检测大鼠肾脏结构,以及血清尿酸、肌酐、尿素氮,大鼠尿α1微球蛋白,β2微球蛋白等水平。结果:头孢替安钠500 mg·kg-1·d-1给药后对大鼠的肾脏结构,血清尿酸、肌酐、尿素氮,大鼠尿α1微球蛋白、β2微球蛋白无明显影响,头孢替安钠500 mg·kg-1·d-1+呋塞米15 mg·kg-1·d-1给药后引起大鼠尿β2微球蛋白显著上升(P<0.05),血清尿酸显著下降(P<0.05)。结论:短期使用头孢替安钠对大鼠的肾功能及肾脏结构无明显影响,而头孢替安钠+呋塞米对大鼠尿β2微球蛋白及血清尿酸有一定影响。     

p38丝裂原活化蛋白激酶选择性抑制剂对难治性癫痫模型大鼠神经细胞的保护作用及其机制研究

目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)选择性抑制剂SB202190对难治性癫痫模型大鼠神经细胞的保护作用及其机制。方法:取大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(卡马西平5 mg.kg-1)和SB202190低、中、高剂量组(7.5、15、30mg.kg-1),每组10只,除空白对照组外,其余各组腹腔注射海仁酸(KA)10 mg.kg-1建立难治性癫痫模型,阳性对照组和SB202190各剂量组建模前30 min腹腔注射相应药物。建模给药后按Racine分级标准对各组大鼠进行行为学评价,观察建模给药后1 h内各组大鼠的脑电图(EEG)变化,采用免疫组化法和蛋白免疫印迹法检测建模给药后3 h各组大鼠脑组织中p38MAPK蛋白的表达。结果:空白对照组无癫痫发作,EEG无明显节律性;模型组癫痫大发作,发作程度为5级,EEG出现癫痫样放电,与空白对照组比较,模型组p38MAPK阳性细胞数明显增加,其表达明显增强(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组和SB202190 3个剂量组发作程度、EEG癫痫样放电、p38MAPK阳性细胞数及其蛋白表达均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:SB202190对KA诱导的难治性癫痫模型大鼠神经细胞具有保护作用,可能与其抑制p38MAPK蛋白的表达有关。     

氯胺酮单次注射对创伤后应激障碍模型动物场景恐惧行为的影响及机制

目的在大、小鼠创伤后应激障碍(PTSD)模型上评价氯胺酮单次预防给药对大、小鼠场景恐惧表达的影响,并基于脑源性神经营养因子(BDNF)表达调节研究其作用机制。方法建立小鼠条件性恐惧和大鼠时间依赖性敏化(TDS)2种PTSD动物模型,在条件性恐惧训练前不同时间点进行不同剂量的单次给药,采用僵住行为测试评价氯胺酮在2个模型上对场景恐惧的影响。在小鼠条件性恐惧模型中,训练前0.5 h单次预防性给予氯胺酮10 mg·kg-1,分别于造模训练后24 h和第14天取脑,采用Western印迹法检测大脑皮质BDNF的表达。结果行为学测试结果表明,在小鼠条件性恐惧模型上,氯胺酮10 mg·kg-1分别在训练前第7天、24 h和0.5 h单次预防给药,训练后24 h场景恐惧测试中各组小鼠僵住时间百分率无明显差异;而训练前0.5 h单次预防性ip氯胺酮10 mg·kg-1,在训练后第14天显著降低小鼠僵住时间百分率(P<0.05);在大鼠TDS模型上,条件性恐惧训练前0.5 h单次ip氯胺酮10 mg·kg-1可显著降低TDS大鼠僵住次数百分率(P<0.05)。Western印迹结果显示,在训练后24 h和第14天,与正常对照组相比,模型组小鼠大脑皮质BDNF表达均显著降低(P<0.05);训练前0.5 h给予氯胺酮10 mg·kg-1组,在训练后24 h和第14天小鼠皮质BDNF的表达较模型组均显著升高(P<0.05)。结论氯胺酮单次预防性给药可减少小鼠场景恐惧的表达,该作用与给药剂量有关,且具有延迟起效的特点,但延迟起效作用与恐惧记忆形成后大脑皮质BDNF表达改变在时间上不具有一致性;氯胺酮单次给药可降低TDS增敏的大鼠场景恐惧的表达,此作用与给药时间点密切相关。     

Tacrolimus对糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞Toll样受体2与4表达的影响

目的探讨Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2和TLR4在糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞的表达水平及tacrolimus对其的调节作用。方法将40只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、tacrolimus(0.5、1.0 mg.kg-1)给药组,通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,4周后测大鼠血糖、相对肾质量、尿白蛋白排泄率(UAER),应用免疫组化单染及双染方法检测肾组织ED-1+细胞、NF-κB-p-p65+细胞及ED-1+TLR2+细胞、ED-1+TLR4+细胞的表达。结果 ta-crolimus 1.0 mg.kg-1给药组大鼠相对肾质量明显低于模型组(P<0.05),tacrolimus(0.5、1.0 mg.kg-1)给药组大鼠UAER较模型组明显减少(P<0.05或P<0.01)。免疫组化显示:模型组大鼠肾组织ED-1+、ED-1+TLR2+、ED-1+TLR4+及NF-κB-p-p65+细胞数明显高于对照组(P<0.01),tacrolimus 0.5与1.0 mg.kg-1给药组ED-1+细胞数与模型组比较无差异,而ED-1+TLR2+、ED-1+TLR4+及NF-κB-p-p65+细胞数则明显低于模型组(P<0.05)。结论糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞TLR2和TLR4的过度表达与巨噬细胞的活化及由此引发的炎症反应有关,tacrolimus可通过直接或间接作用下调肾脏巨噬细胞TLR2与TLR4表达,从而抑制与TLR-NF-κB信号转导及调控途径有关的炎症反应。     

双歧杆菌对应激模型大鼠肠道通透性的影响

目的:研究双歧杆菌对应激模型大鼠肠道通透性的影响及其与蒙脱石散联用的协同作用。方法:取SD大鼠50只随机均分为正常对照组、模型对照组、双歧杆菌干预组(2×108cfu)、蒙脱石散干预组(0.6 g.kg-1)及其联合干预组(双歧杆菌2×108cfu+蒙脱石散0.6 g.kg-1),每日灌胃给药1次,连续给药7 d,后4组每日给药后以避水压力模型(WAS)方法建立大鼠应激模型。第8天各组分别灌胃给予探针药物甘露醇80 mg、三氯蔗糖60 mg,检测各组大鼠给药后5、24 h尿液中甘露醇、三氯蔗糖的量及其比值,以评价肠道通透性。实验结束处死大鼠,检测各组大鼠血清中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)和促肾上腺皮质激素(ACTH)的含量。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠24 h尿液中甘露醇的量及血清中CRF、ACTH含量均明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,双歧杆菌干预组和联合干预组ACTH含量均明显降低(P<0.05),其余指标均有降低,但没有统计学意义。结论:双歧杆菌对应激模型大鼠的肠道通透性有影响,其与蒙脱石散联用对应激所致的肠道屏障功能紊乱无协同作用。