乙型肝炎病毒外膜大蛋白对HBeAg阴性和低水平HBV-DNA乙型肝炎患者的检测意义

目的探讨HBV感染者血清中乙型肝炎病毒外膜大蛋白(BHV-LP)与HBV-DNA、HBeAg、PreS1-Ag之间的关系及在判断病毒复制中的临床应用价值。方法对235例HBV感染及80例例健康对照血清采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法检测HBV-LP、HBeAg、PreS1-Ag,采用实时荧光定量PCR方法检测HBV-DNA。结果在235例HBV患者血清中,HBV-LP与HBV-DNA、PreS1-Ag、HBeAg关联显著(均P0.05),HBV-LP阳性率85.11%,较HBV-DNA、PreS1-Ag、HBeAg敏感,差异有统计学意义(均P0.01);HBeAg阴性组中,HBV-LP阳性率为75.20%,较HBV-DNA、PreS1-Ag敏感,差异有统计学意义(均P0.01);HBV-LP水平与HBV-DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关(r=0.9638,P0.05);HBV-DNA阴性组中HBV-LP阳性率为71.43%,较PreS1-Ag、HBeAg敏感,差异有统计学意义(均P0.01)。结论HBV-LP能够反映HBV的复制情况,是反映HBeAg阴性和低水平HBV-DNA乙型肝炎患者体内病毒复制、疾病进程、疗效与预后判断的新的敏感指标。     

乙肝病毒携带者外周血单个核细胞培养上清液HBV-DNA定量检测意义

目的　探讨慢性无症状乙肝病毒携带者外周血单个核细胞 (PBMC)与HBV -DNA定量的临床关系及意义。方法　采用慢性乙肝病毒HBeAg阳性携带者PBMC体外刺激诱导培养 ,荧光定量PCR(FQ -PCR)法测定上清液HBV -DNA ,ELISA法检测白细胞介素 10、12 (IL -10、12 )与γ 干扰素 (γ IFN)。同期检测肝功能 ,血清HBV -DNA定性试验。结果　PBMC培养后于上清液中以FQ -PCR法检出HBV -DNA。 >5 0 0 0考贝 /ml组中 ,IL -12及γ IFN均明显高于正常对照组。重症肝炎PBMC上清液FQ -PCR测定HBV -DNA阳性率明显高于同期血清PCR定性试验阳性率。PBMC上清液FQ -PCR测定HBV -DNA阳性率与血清HBeAg转换的关系同血清HBV -DNA定性试验阳性率与其关系相仿。与肝功能ALT及TBiL程度无明显相关。结论　HBeAg携带者PBMC培养液HBV -DNA高复制状态时IL -12及γ IFN分泌增强。重症肝炎PBMC上清液HBV -DNAFQ -PCR测定阳性率高于同期血清PCR定性实验     

恩替卡韦治疗慢乙肝患者血清及PBMC中HBVDNA变化的相关性研究

目的研究恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者期间血清及PBMC内HBVDNA变化的相关性。方法 73例慢乙肝患者,随机分为治疗组(38例)和对照组(35例),治疗组应用恩替卡韦0.5㎎/天>48周,分别于治疗后的0、4、12、24、48周检测血清及PBMC中HBVDNA。结果治疗后的4、12、24、48周治疗组患者血清HBVDNA阴转率分别为31.57%、81.58%、94.74%、97.37%,PBMC内HBVDNA阴转率分别为10.52%、42.11%、57.89%、76.32%,治疗后的12、24、48周血清和PBMC内HBVDNA阴转率治疗组与对照组相比较P<0.005,两组比较差异有显著性意义。结论恩替卡韦对慢乙肝患者血清及PBMC中HBVDNA均有明显的抑制作用,但PBMC中HBVDNA的阴转率低于血清HBVDNA的阴转率。     

乙型肝炎患者血清和唾液中HBV-DNA的水平

目的探讨乙型肝炎(乙肝)患者唾液中HBV-DNA水平,为乙型肝炎病毒(HBV)经唾液传播提供临床依据。方法采用实时荧光定量PCR法检测乙肝患者血清和唾液中HBV-DNA含量。结果 99例乙肝患者血清和唾液中HBV-DNA的阳性率分别为90例(90.9%)、65例(65.7%)。结论乙肝患者唾液中HBV-DNA的阳性率与血清HBV-DNA的阳性率之间差异有统计学意义(P0.01),乙肝患者唾液中HBV-DNA含量与血清HBV-DNA含量呈显著正相关(r=0.82)。     

HBV携带产妇血清与乳汁HBV-DNA变量相关性探讨

目的分析HBV携带产妇血清与乳汁HBV-DNA变量相关性,为安全哺乳提供科学依据。方法 ELISA法检测HBV携带产妇血清HBV-M,荧光定量PCR检测血清与乳汁HBV-DNA,统计学方法分析两变量相关性。结果以乳汁HBV-DNA小于500拷贝/ml为阴性,其中A组(HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性)乳汁阴性率为11.7%(15/128),B组(HBsAg、HBcAb阳性或HBsAg、HBeAg阳性)乳汁阴性率72.3%(11/15),C组(HBsAg、HBAbe、HBcAb阳性)乳汁阴性率94.9%(185/195),三组阴性率比较差异有统计学意义(P0.05)。248例HBV携带产妇同时检测血清和乳汁HBV-DNA,各组分组情况同上,A组血清HBV-DNA阳性率95.4%(83/87),乳汁HBV-DNA阳性率80.7%(71/87),两者阳性率比较,差异有统计学意义(P0.05);B组血清HBV-DNA阳性率为46.2%(6/13),乳汁HBV-DNA阳性率30.8%(4/13),差异无统计学意义(P0.05);C组血清与乳汁HBV-DNA阳性率分别为31.8%(37/148)和4.1%(6/148),差异有统计学意义(P0.05),每组两变量统计学分析正相关且相关程度高。结论不同感染模式的HBV携带产妇,血清与乳汁HBV-DNA病毒载量不同,HBV携带产妇哺乳前应该检测血清和母乳中的HBV-DNA,以指导母乳安全喂养。     

外周血单个核细胞中TTV-DNA检测及意义

目的：探讨外周血单个细胞（PBMC）中输血传播病毒（TTV）的检测意义。方法：采用聚合酶链反应（PCR）方法检测49例血液透析患者血清及PBMC中TTV－DNA。结果：血液透析患者TTV感染率18．4％（9／49）。PBMC中TTV－DNA检出率22．4％（11／49），PBMC中TTV－DNA检出率在血清TTV－DNA阳性者（66．7％），高于血清TTV－DNA阴性者（12．5％）（P＜0．05）。结论：PBMC中TTV－DNA主要在血清阳性患者中检出，PBMC可能是TTV的一个贮存场所。     

HBeAg阴性的慢性乙肝患者病毒复制情况分析

目的 分析探讨e抗原阴性的慢性乙型肝炎病毒(HBV)患者体内病毒复制情况及其临床意义.方法 乙肝五项检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA),挑选出e抗原阴性的780例HbsAg阳性标本分为两组:A组,HbsAg HbeAb HbcAb阳性组(1,4,5阳性即小三阳模式组);B组,HbsAg HbcAb阳性组(1.5阳性组).两组分别进行前sl抗原(ELISA法)和HBV-DNA含量检测[利用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR )]法进行,以HBVDNA拷贝数大于103copy/ml为阳性).结果 (1)在小三阳模式组中,pre-SlAg总阳性率为39.57 %,HBV-DNA总阳性率为43.40,二者差异无统计学意义(P>0.05); (2)在1,5阳性模式组,pre-SlAg总阳性率为27.42%,HBV-DNA总阳性率为31.29 %,两者差异无统计学意义;(3)两个模式组的pre-SlAg阳性率相比,差异有统计学意义(P< 0.05),而HBV-DNA阳性率相比无统计学意义(P>0.05),结论 (1)e抗原阴性时,小三阳模式组与1.5阳性组相比,pre-SlAg的阳性率差异有统计学意义,HBV-DNA的阳性率差异无统计学意义;同一模式组下的pre-Sl Ag与HBV-DNA阳性率比较接近,pre-SlAg也可以反映HBV-DNA复制情况;(2)e抗原阴性时,并不一定体内无病毒复制,必须联合检测pre-SlAg等指标,才能在乙肝病毒复制方面发挥重要作用.     

乙型肝炎病毒大蛋白在慢性乙型肝炎患者中检测的临床价值探讨

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白(HBV-LP)反映HBV复制的可靠性及其检测的临床价值和意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测304份慢性乙型肝炎患者血清标本的HBV-LP和乙型肝炎两对半结果,并应用实时荧光定量PCR方法平行检测HBV-DNA结果。结果 304例慢性乙型肝炎患者标本中,HBV-DNA的阳性率67.76%,HBV-LP的阳性率75.66%,两者差异无统计学意义;其中186例HBeAg阴性患者HBV-LP阳性率65.59%,高于HBV-DNA的阳性率(50.54%),差异有统计学意义(P<0.01);186例HBeAg阴性患者中,HBV-DNA和HBV-LP检出一致率为76.34%;血清中HBV-LP(OD值)与HBV-DNA拷贝数之间具有良好的相关性,相关系数(r)=0.853。结论 HBV-LP能反映出乙型肝炎病毒的复制情况;在HBeAg阴性乙型肝炎患者中,HBV-LP较HBV-DNA更能敏感反映HBV的感染复制状态;在无条件开展HBV-DNA检测的一些基层医院,HBV-LP可以作为反映乙型肝炎病毒的复制情况的一个很好的血清学指标。     

唾液乙型肝炎病毒检测在预防乙型肝炎传播中的意义

目的 探讨乙型肝炎(简称乙肝)患者唾液中乙肝病毒(HBV)含量在乙肝传播中的意义.方法 采用荧光定量聚合酶链反应检测200例乙肝患者和20例健康体检者的血清、唾液中HBVDNA含量.按血清乙肝病毒含量高低分为4组,即对照A组、阴性B组、低病毒C组[1×103～1×105拷贝/ml(copies/ml)]、高病毒D组(＞1×105copies/ml).分析唾液与血清病毒含量之间的关系.结果 200例乙肝患者血清中检出HBV DNA 180例,阳性率为90.O%,而唾液中检出HBV DNA145例,阳性率为72.5%,两者比较差异没有统计学意义(X2=1.35,P＞0.05).低病毒C组血清与唾液检出病毒(100.0%vB 38.5%)两者比较差异具有统计学意义(X2=14.11,P＜0.01).高病毒D组血清与唾液检出病毒(100.%It8 83.8%)两者比较差异没有统计学意义(X2=1.05,P＞0.05).血清高病毒D组病毒平均含量为(6.63±1.55)log copies/ml(拷贝/ml的常用对数),唾液中病毒平均含量为(5.21±1.85)log copies/ml,唾液较血清病毒含量平均低一个数量级.20例健康体检者血清和唾液中未检出HBV DNA.结论 乙肝患者血清中含有较高的HBV DNA病毒时,其唾液中也存在具有感染性的HBV DNA病毒,可能成为传染源之一.精确检测唾液中HBV DNA水平可评价病毒在体内复制程度,进而判断患者的传染力度.     

HBV-DNA与乙型肝炎血清学标志物的相关性研究

目的探讨乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）与乙肝病毒血清标志物（HBV-M）之间的相关性。方法将临床筛查的600例HBsAg阳性血清标本用ELISA法检测HBV-M,同时用荧光定量PCR法检测HBV-DNA,按不同的HBV-M模式分组进行分析。结果 HBsAg和HBeAg同时阳性的标本,检测HBV-DNA阳性率为100%,明显高于HBeAg阴性模式的阳性率,亦高于HBsAg阳性的其它模式。差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 HBV-DNA检测在各种模式的HBV-M阳性血清中检出率差异有统计学意义,HBeAg阳性者HBV-DNA检出阳性率最高（100%）,检测乙肝患者HBV-M的同时检测HBV-DNA,对于早期诊断、判断患者传染性程度、疗效观察和预后判断具有重要的临床意义。     

血清HBV前S1抗原在乙型肝炎诊断及判断预后中的作用

目的了解乙型肝炎前S1抗原(HBVpreS1-Ag)与乙型肝炎病毒(HBV)复制的关系,及诊断乙型肝炎的价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法对276例携带乙型肝炎不同病毒标志物的慢性乙型肝炎患者进行HBVpreS1-Ag,HBV-M测定并与HBVDNA做对比分析,同时测定患者的生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT),门冬氨酸氨基转移酶(AST),分析前S1抗原与AST、ALT之间的关系。结果HBV大三阳组与前S1抗原和HBVDNA符合率分别为70.8%,77.1%,P>0.05,患者血清HBVpreS1-Ag、HBeAg和HBVDNA检出率高度符合。HBV小三阳组与前S1抗原和HBVDNA符合率分别为29.5%和26.2%,说明部分HBeAg阴性患者仍有病毒复制。276例患者中preS1-Ag阳性组与preS1-Ag阴性组比较,ALT、AST升高率均有显著性差异。结论前S1抗原能够敏感的反映乙型肝炎的复制情况,尤其可以反映HBeAg阴性的乙型肝炎患者是否有病毒复制。     

乙肝五项定性与HBV-DNA结果相关探讨

目的：探讨ELISA检测乙肝病毒血清标志物与荧光定量PCR检测HBV-DNA结果的相关性。方法：采用ELISA方法检测285例患者乙肝病毒血清标志物（HBV-M）,同时用荧光定量PCR检测其HBV-DNA含量。结果：139例HBsAg （＋）、HBeAg（＋）、抗-HBc（＋）患者中有124例患者阳性（血清HBV-DNA含量≥103copy/ml为阳性）,阳性率为89.2%;92例HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、抗-HBc（＋）患者中有43例阳性,阳性率为46.7%;27例HBsAg（＋）、抗-HBc（＋）患者中有10例性,阳性率为37%;10例HBsAg（＋）、HBeAg（＋）患者中有9例阳性,阳性率为90%;11例HBsAg（＋）、HBeAg（±）、抗-HBc（＋）患者中有9例阳性,阳性率81.8%,6例单独HBsAg（＋）患者中有0例阳性,阳性率为0。结论：所有分组中HBeAg（＋）组病毒复制水平最高,其与HBV-DNA含量密切相关;抗-HBe（＋）、抗-HBc（＋）患者乙肝病毒复制并非完全停止,只是其复制水平明显降低,荧光定量PCR检测HBV-DNA含量可表达HBV感染和病毒复制水平。     

荧光定量聚合酶链反应在检测乙肝孕妇患者血清HBV-DNA及母婴传播中的临床应用

目的 探讨乙型肝炎感染孕妇血清HBV-DNA含量和乙肝标志物与胎儿宫内感染的关系，同时针对高危人群采取适当措施，以降低宫内感染的发生率。方法 用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法，检测了59例乙肝感染孕妇血清以及其胎儿股静脉血的HBV-DNA的含量。结果 乙肝孕妇血清HBeAg阳性组HBV-DNA含量明显高于抗-Hbe和抗HBc阳性组，而后两组中部分病例HBV-DNA水平仍很高。胎儿发生宫内感染与其母亲血清HBV-DNA含量有关，随着孕妇血清中HBV-DNA含量的增高，胎儿发生宫内感染的危险性也呈增高的趋势。结论 定量PCR检测血清HBV-DNA水平对了解乙肝孕妇患者病毒复制和孕妇传染性的强弱与母婴传播的关系具有一定指导作用，采取适当措施，可以降低宫内感染的发生率。     

乙型肝炎病毒基因分型与HBV-DNA水平及血清标志物关系的探讨

目的 探讨HBV基因型与HBV-DNA水平及血清标志物的相关性,分析不同基因型的临床表现.方法 对532例HBV-DNA阳性感染者分别检测HBV病毒基因型、HBV-DNA、乙型肝炎血清标志物及肝功能.结果 532例慢性HBV感染者中HBV基因型以C型为主60.2％,其次为B型31.6％,B、C混合型6.0％,未分型2.3％例;C基因型HBV-DNA水平和HBeAg阳性率分别为6.41±1.15和91.3％,明显高于B型5.88±1.30和83.3％,P＜0.01 ;C基因型患者的ALT、AST及TBIL均高于B型,但差异无统计学意义,C基因型ALB 28.68±4.32显著低于B基因型30.55±5.84,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 该地区HBV基因型以C型为主,B型次之,C基因型HBV-DNA水平显著高于B基因型,C基因型HBeAg阳性率较B基因型高,C基因型对肝脏损害较B基因型重,并与HBV载量及HBeAg系统具有相关性.     

血清中前S1抗原与HBV-DNA、HBeAg检测结果及临床意义的分析

目的对比分析前S1抗原、HBV—DNA和HBeAg在乙型肝炎感染期主要临床意义。方法用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测前S1抗原和乙肝血清标志物“五项”，用荧光定量聚合酶反应（PCR）检测HBV—DNA，对619例乙肝病毒标志物进行检测，检测结果进行统计分析。结果619例中HBV-DNA阳性率78．4％[485／619]，前S1抗原的阳性率为69．34％[429／619]，其中HBeAg阳性／HBeAg阴性[HBeAb阳性]又分为两组，结果：前S1抗原阳性率在EBeAg阳性模式组中明显高于HBeAg阴性／抗HBeAb阳性模式组，前S1抗原与HBV—DNA和HBeAg检测有明显相关性和互补性。结论前S1抗原的检测可以较好的反映HBV存在和复制的情况，前S1抗原作为辅助或补充指标联合HBV血清标志物与HBV—DNA同步动态监测，为乙型肝炎的诊断、治疗和预后判断提供依据，具有重要临床价值。     

慢性肝病患者血清HBV-DNA定量检测及临床应用

目的：探讨乙肝病毒（HBV）DNA含量与慢性肝病临床病程和乙肝标志物的关系及其在治疗疗效观察中的应用价值。方法：采用TagMan荧光标记探针技术检测113例各型慢性肝病患者血清HBV－DNA含量。结果：以慢性乙肝轻型HBV－DNA含量最高，随肝损害加重，HBV－DNA含量逐渐下降，血清HBV，DNA含量在HBeAg阳性组明显高于HBeAg阴性组，而与ALT，AST及肝硬化不同Child分级无相关性，治疗前HBV－DNA含量低者疗效好，且不同疗效HBV－DNA含量变化不同。结论：定量PCR检测血清HBV－DNA含量对了解慢性乙肝患者病毒复制情况和临床病程的关系及治疗评价有一定价值。     

儿童乙型肝炎血清HBVcccDNA及病毒基因型研究

目的 了解甘肃省儿童血清乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)及病毒基因型情况.方法 随机选择HBV-DNA阳性124例乙肝患儿(男性84例,女性40例),其中HBV携带者65例、慢性乙肝59例(轻度31例、中度18例、重度10例),对以上患儿进行基因分型、肝功、HBV-DNA载量和血清HBV cccDNA检测.结果 中、重度慢性乙肝患儿HBV cccDNA阳性率高于携带者和轻度组(F=25.429,P＜0.01);HBeAg阳性患儿HBV cccDNA检出率高于HBeAg阴性患儿(F=28.386,P＜0.01);HBV cccDNA阳性组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素均高于阴性组(t值分别为13.241、11.347、15.013,均P＜0.01);124例肝炎患儿中,以C、B基因型为主,C基因型为优势,B/C混合型占一定比例,还有一些其他基因型;C基因型患儿中HBV cccDNA阳性的比例高于B基因型患儿(F=23.216,P＜0.01);而B基因型患儿中HBVcccDNA阴性的比例高于C基因型患儿(F=26.364,P＜0.01).结论 病情越重外周血HBVcccDNA检出率越高,HBV cccDNA和基因型的检测可以较好地反映HBV复制程度和临床严重程度,对诊治乙肝具有一定的指导意义.     

前S1抗原和HBV-DNA检测结果的相关性分析

目的:探讨前S1抗原(PreS1)与HBV-DNA的相关性。方法:用酶联免疫法对450例慢性乙肝患者血清和95例健康人血清进行PreS1检测。用荧光定量PCR法检测HBV-DNA。结果:450例慢性乙肝患者血清中PreS1和HBV-DNA的阳性率分别为63.3%和74.4%。285例PreS1阳性标本中HBV-DNA的阳性数为270例,335例HBV-DNA阳性标本中PreS1阳性数为260例。结论:PreS1与HBV-DNA相关性较好,是乙型肝炎早期诊断和疗效评估的可靠指标。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测唾液HBV-DNA含量

目的:采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法准确地定量检测血清、唾液中乙型肝炎病毒(HBV)的数量和免疫指标,进而全面评估唾液乙肝DNA在乙型肝炎的预防、诊断及治疗方面的意义。方法:采用FQ-PCR法检测200例乙型肝炎患者血清、唾液中HBVDNA的含量。结果:(1)经FQ-PCR检测,200份标本中血清HBVDNA含量>103copies/ml的有180例(90%),相应的唾液中HBVDNA含量>103copies/ml的有145例(72.5%),同时病毒含量>105copies/ml标本中血清168例(84.0%),唾液98例(49.0%),血清HBVDNA与唾液HBVDNA水平之间存在显著相关(r=0.79,P<0.001)。(2)在不同的血清免疫指标组合中乙肝病毒含量也不相同,在HBeAg( )组与HBeAg(-)组中,血清与唾液的病毒含量与阳性率均存在HBeAg( )组明显高于HBeAg(-)组,在HBeAg( )组中血清、唾液HBVDNA平均水平分别为7.13、5.01 logcopies/ml。血清、唾液病毒含量在两组不同免疫组合中差别均有统计学意义(P<0.01)。结论:(1)乙型肝炎患者除了血清外,唾液中也存在具有感染性的高病毒载量HBVDNA,可能成为传染源之一。(2)唾液中定量检测HBVDNA与血液中HBVDNA含量存在明显相关性,在一定程度上也能反映HBVDNA在体内复制情况。