二妙丸和三妙丸中小檗碱的含量测定

本文介绍了二妙丸、三妙丸小檗碱含量测定方法。采用薄层比色法以无水乙醇提取二妙丸、三妙丸中的小檗碱,用正丁醇一冰醋酸一水(7∶1∶2)展开,然后刮取小檗碱斑点进行比色测定,以标准曲线求得小檗碱含量。     

HPLC法测定成药二妙丸、三妙丸、四妙丸及知柏地黄丸中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的含量

建立了反相高效液相法测定成药二妙丸、三妙丸、四妙丸及知柏地黄丸中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱含量的方法。固定相为Nova-PakC184μm, 3.9mm(i.d)×150mmHPLC柱;流动相为乙腈-水(1:1, 每1000mL含磷酸二氢钾3.4g及十二烷基硫酸钠1.7g);检测波长为345nm;小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的加样回收率分别为98.67±2.38%, 98.75±1.67%, 98.38±2.31%。     

HPLC法测定成药二妙丸、三妙丸、四妙丸及知柏地黄丸中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的含量

建立了反相高效液相法测定成药二妙丸、三妙丸、四妙丸及知柏地黄丸中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱含量的方法。固定相为Nova－PakC184μm，3．9mm（i.d）×150mmHPLC柱；流动相为乙腈-水（1：1，每1000mL含磷酸二氢钾3．4g及十二烷基硫酸钠1．7g）；检测波长为345nm；小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的加样回收率分别为98．67±2．38％，98．75±1．67％，98．38±2．31％。     

生苍术和麸炒苍术入药对四妙丸中盐酸小檗碱组织分布的影响

目的:研究以生苍术和麸炒苍术入药对四妙丸中盐酸小檗碱组织分布的影响。方法:将SD大鼠随机分为四妙丸生苍术组和麸炒苍术组,每组随机分为0.5、1、6h三个时间组,空腹24h后灌胃给药并于相应时间点取心、脾、胃、肺、肝、肾、大肠和小肠,运用高效液相色谱仪对各组织样品进行分析,比较两组大鼠组织中盐酸小檗碱的分布差异。结果:以生苍术入药的四妙丸和以麸炒苍术入药的四妙丸中盐酸小檗碱在各组织中的含量虽无统计学差异,但生苍术入药的四妙丸中盐酸小檗碱在多个组织中的含量高于以麸炒苍术入药的四妙丸中盐酸小檗碱的浓度。结论:苍术炮制对盐酸小檗碱的组织分布产生影响,生苍术入药更利于盐酸小檗碱在各组织中的分布。     

二妙丸的质量标准研究

目的:建立二妙丸中有效成分盐酸小檗碱含量测定方法及定性鉴别方法。方法:采用离子对色谱法测定二妙丸中盐酸小檗碱含量。色谱柱:Damonsi(TM)C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相∶乙腈-0.1%磷酸(50∶50)(每100mL加入十二烷基磺酸钠0.1g),检测波长265nm。结果:建立了HPLC测定二妙丸中盐酸小檗碱含量方法。结论:方法简便快速,准确,为该制剂的质量分析建立了可靠的控制方法。分析方法稳定可靠,能作为本丸剂的质控标准。     

二妙丸多指标化学成分质量研究

目的:建立二妙丸(苍术,黄柏)挥发油中β-桉叶醇含量的气相色谱测定法;对二妙丸单煎合并与合煎的挥发油及提取干膏进行多指标化学成分的测定和比较.方法:以丹皮酚为内标物,采用内标法和程序升温的气相色谱条件对二妙丸单煎与合煎的挥发油中的B-桉叶醇含量进行测定和比较;采用高效液相色谱法对二妙丸中的小檗碱、巴马汀、药根碱成分进行含量测定和比较.结果:二妙丸合煎的挥发油中的β-桉叶醇含量比单煎中的含量略高,分别为73.34 mg/g和70.04 mg/g;但从图谱的峰数和保留时间进行比较,结果无明显差别.单煎合并的小檗碱、巴马汀、药根碱的含量明显高于合煎的含量.结论:确立二妙丸挥发油中B-桉叶醇含量测定的方法.并且说明苍术、黄柏配伍,彼此相互影响.     

二妙丸中盐酸小檗碱的溶出度测试

用杯法测定了二妙丸在人工胃液和人工肠液的溶出度。得到T₅₀、Tα及m两组参数,并通过F检验证明该参数间无显著性差异(P>.05),即说明上述两种释放介质对二妙丸中小檗碱的溶出无显著影响。     

二妙胶囊和二妙丸的药代动力学比较

目的:以盐酸小檗碱为主要考察指标进行二妙丸和二妙胶囊的药代动力学比较研究,从药代动力学角度看不同剂型在动物体内的血药浓度变化。方法:灌胃给药,采用HPLC法测定家兔体内盐酸小檗碱的血药浓度,血药浓度-时间数据经DAS2.0药代动力学分析软件处理,分别测得二妙丸和二妙胶囊中的盐酸小檗碱在家兔体内的药代动力学参数。结果:家兔血浆样品中,盐酸小檗碱的线性范围为0.0043～0.427μg/mL,提取回收率高,日内日间精密度试验RSD均小于10%,二妙丸的盐酸小檗碱在家兔体内最大血药浓度为0.082μg/mL,达峰时间为8h;二妙胶囊的盐酸小檗碱在家兔体内最大血药浓度为0.303μg/mL,达峰时间为5h。结论:建立了HPLC法测定黄柏中盐酸小檗碱血药浓度的方法,为二妙胶囊的合理用药提供了药代动力学数据,同时也为中药复方的药代动力学研究提供了可借鉴的方法。     

HPLC法测定三妙丸中盐酸小檗碱的含量

目的建立三妙丸中盐酸小檗碱的含量测定法。方法采用HPLC法，Gemini C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，乙腈-0．05mol／L磷酸二氢钾（10％氢氧化钾溶液调pH5．0）（35：65）为流动相，检测波长246nm，流速1．0mL·min^-1；柱温：25℃。结果盐酸小檗碱分离完全，加样回收率为97．53％，RSD为0．22％。结论本法简便、快速、准确，可用于三妙丸中盐酸小檗碱的含量测定。     

四妙丸HPLC指纹图谱建立

目的 建立四妙丸HPLC指纹图谱.方法 四妙丸50%乙醇提取物的分析采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长280 nm(0~65 min)和330 nm (65~90 min).结果 11批样品指纹图谱中有31个共有峰,指认其中8个峰为绿原酸、黄柏碱、木兰花碱、阿魏酸、药根碱、巴马汀、盐酸小檗碱、苍术素;相似度大于0.994.结论 该方法简便可靠,稳定性好,可用于四妙丸质量评价.     

二妙丸蒸汽灭菌前后体外释放度的研究

本文以盐酸小檗碱为指标,测定了二妙丸高压蒸汽灭菌前后的释放度。结果发现,二妙丸灭菌前后的释放是有差异的,干丸灭菌后释放度显著降低,而湿丸灭菌后释放度稍有升高;二妙丸的崩解度与释放度有相关性。     

用生苍术与用麸炒苍术的四妙丸中盐酸小檗碱大鼠体内药代动力学比较研究

目的以四妙丸中的君药黄柏中的主要有效成分盐酸小檗碱为指标,对分别以生苍术及麸炒苍术入药的四妙丸大鼠体内的药代动力学差异进行比较。方法以吴茱萸碱为内标物,采用高效液相色谱法,建立了盐酸小檗碱大鼠体内的血药浓度测定方法,并对分别以生苍术及麸炒苍术入药的四妙丸灌胃给药后盐酸小檗碱的血药浓度进行测定,采用DASS2.0数据处理。结果以生苍术入药的四妙丸中,盐酸小檗碱在大鼠体内的C_(max)为0.123 mg/L,T_(max)为1.05 h,MRT_(0-24)为8.69 h,AUC_(0-24)为0.778 mg/L·h;以麸炒苍术入药的四妙丸中盐酸小檗碱在大鼠体内的C_(max)为0.096 mg/L,T_(max)为1.03 h,MRT_(0-24)为9.04 h,AUC_(0-24)为0.728 mg/L·h。结论以生苍术或麸炒苍术入药的四妙丸中盐酸小檗碱在大鼠体内的药代动力学参数无显著差别。     

二妙丸与四妙丸的组方及功能比较

二妙丸是燥湿清热的一个经典方。历代医家以二妙丸方为基础方的加减方颇多,最典型是加牛膝、薏苡仁而成“四妙丸”。二妙丸专于清热燥湿,适于一切湿热症;四妙丸偏于利湿除痹,是治疗湿热痿痹证的主要方剂,应用于各种湿热浸淫偏虚疾患。     

三妙丸中牛膝对关节炎大鼠引药作用的机制研究

目的：研究三妙丸中牛膝对关节炎大鼠引药作用的机制。方法：用弗氏完全佐剂和湿热处理法制备大鼠湿热痹症关节炎模型，造模成功的大鼠分为3组：模型组，含牛膝的三妙丸（18 g·kg-1）组，不含牛膝三妙丸（10 g·kg-1）组。HPLC法测定三妙丸中主要成分小檗碱在心脏、关节组织中的分布情况，体积法测定大鼠足关节肿胀度，同时观察组织病理变化；测定血浆血液流变学指标。结果：含牛膝三妙丸组在给药后2，4，6 h和多次给药14 d后关节浓度均高于不含牛膝组，关节／心脏小檗碱浓度比显著大于不含牛膝组。含牛膝的三妙丸明显改善关节炎模型大鼠的关节肿胀和组织病理改变。含牛膝三妙丸组明显改善关节炎大鼠血液流变学指标，与不含牛膝三妙丸组比P<0.01,与模型组相比也有显著性差异（P<0.01）。结论：牛膝能够引导三妙丸中主要有效成分小檗碱的靶组织分布，并与其药效作用相吻合。其促进小檗碱组织分布的作用和其活血作用可能有一定关系。     

三妙丸中牛膝引药作用的机理研究

目的通过药代动力学组织分布研究法,研究牛膝在正常大鼠体内对三妙丸中主要有效成分小檗碱组织分布的影响．以探讨其引药的作用。方法大鼠均分成两组,分别灌胃给予含或不合牛膝的三妙丸水提物,给药后2h,4h,6h和7d处死动物．取血浆和心脏、后肢关节组织的匀浆,用高效液相色谱（HPLC）法测定组织中小檗碱的浓度。结果含牛膝三妙丸组动物给药后关节药物浓度在2h时与去牛膝三妙丸组相近,4h明显高于去牛膝组,6h与去牛膝组相近,多次给药后明显高于去牛膝组。含牛膝组的关节／心脏药物浓度比始终明显大于去牛膝组。结论牛膝有促进三妙丸中有效成分小檗碱向关节组织分布的作用。     

二妙丸与三妙丸中4种生物碱在正常和关节炎模型大鼠体内的药动学与组织分布差异

考察二妙丸与三妙丸中4种生物碱在正常和关节炎模型大鼠体内的药动学与组织分布差异。通过注射弗氏完全佐剂建立模型大鼠,采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS),正离子多反应监测模式检测正常大鼠和模型大鼠分别灌胃二妙丸与三妙丸后血浆和组织中4种生物碱成分,比较4种活性成分的药动学和组织分布差异,探讨牛膝对三妙丸主要成分的影响。建立了同时检测4种生物碱的UPLC-MS/MS方法,该方法专属性、线性关系、准确度、精密度、稳定性等均符合要求。药动学研究发现,与正常大鼠比较,模型大鼠灌胃二妙丸后,黄柏碱、木兰花碱、小檗碱和巴马汀的AUC和C_max明显降低,清除率显著增加,肝、肾和关节中4种生物碱的分布浓度、组织/血浆浓度比明显减少;牛膝可增加模型大鼠体内黄柏碱、小檗碱、巴马汀的AUC,降低清除率,显著增加4种生物碱在肝、肾和踝关节中的分布,但对正常大鼠体内4种生物碱的药动学及组织分布未有明显影响,提示牛膝可能通过增加关节炎状态下三妙丸有效成分的组织分布,发挥引经作用。     

高效液相色谱法测定二妙丸中盐酸小檗碱的含量

目的建立二妙丸中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,DiamonsilODSlC18柱,以乙腈-0．1％磷酸溶液（50：50,每100mL加十二烷基磺酸钠0．1g）为流动相,流速为1．0mL／min,检测波长265nm。结果盐酸小檗碱在0．1386～2．772μg范围内呈良好线性,回归方程为,：2572．354X＋79．851,r=0．9997。平均加样回收率为98．67％,RSD=1．26％（n=6）。结论方法简便、准确,专属性强,测定结果重复性好,为二妙丸中盐酸小檗碱的定量分析提供了科学有效的方法。     

HPLC测定二妙丸中盐酸小檗碱的含量

中成药二妙丸为《中国药典》（2005年版一部）收载的经典方，由苍术和黄柏两味药组成。祖国医学认为，苍术苦温燥湿，黄柏苦寒、清热燥湿，两味合用，具有较强的燥湿清热功效。用于治疗湿热下注，足膝红肿热痛，下肢丹毒，白带，阴囊湿痒等病症。据我们调查，目前国内约有数十家制药企业在生产该品种，但质量标准仅是利用薄层色谱对盐酸小檗碱进行定性定量分析，为进一步提高该产品质量标准，保证临床用药的安全、有效，我们建立了反相高效液相色谱法测定二妙丸中盐酸小檗碱含量的方法，具有操作简便、专属性强、重复性好等特点，现报告如下。     

苍术、黄柏及二妙丸超细微粉的生物药剂学的研究 Ⅱ.超细粉二妙丸的体外溶出度研究

目的探讨超细粉体技术对中药制剂体外溶出度的影响,以及丸剂的粒径对溶出度的影响.方法采用分光光度法,以盐酸小檗碱为指标成分,考察普通粉与超细粉二妙丸及不同粒径的超细粉二妙丸微丸的体外溶出度.结果超细粉二妙丸的T50和Td分别为61.60,19.48,17.84,8.97 min和102.3,33.29,26.98,14.77 min;粒径为2.4 mm的普通粉二妙丸的T50和Td分别为89.61,155.68 min.结论超细粉二妙丸的溶出速率明显快于普通粉,且随着丸剂自身粒径的降低,体外溶出速率加快.     

苍术、黄柏及二妙丸超细微粉的生物药剂学的研究 Ⅱ.超细粉二妙丸的体外溶出度研究

目的 探讨超细粉体技术对中药制剂体外溶出度的影响。以及丸剂的粒径对溶出度的影响。方法 采用分光光度法，以盐酸小檗碱为指标成分。考察普通粉与超细粉二妙丸及不同粒径的超细粉二妙丸微丸的体外溶出度，结果 超细粉二妙丸的T50和Td分别为61.60,19.48,17.84,8.97min和102.3,33.29,26.98,14.77min；粒径为2.4mm的普通粉二妙丸的T50和Td分别为89.61,155.68min。结论 超细粉二妙丸的溶出速率明显快于普通粉，且随着丸剂自身粒径的降低，体外溶出速率加快。