分泌抗人恶性疟的单克隆抗体的杂交瘤细胞系

当前疟疾疫苗研究的突破点是如何获得足够纯化的保护性抗原,用具有保护性的单克隆抗体以亲和层析法提取相应的保护性抗原是获得高纯度保护性抗原的有效办法。因此,有些疟疾免疫的研究者已把淋巴细胞杂交瘤技术引用于疟疾疫苗的研究中。 Perrin、高敏新曾获得抗人恶性疟的单克隆抗体,在体外对原虫生长的抑制率分别在90％和60％以上,表明用保护性单克隆抗体获取人     

分泌抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

以医用尿激酶免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Fo和Ns-1骨髓瘤细胞进行3次融合,筛选到6株分泌抗尿激酶单克隆抗体的杂立瘤细胞系,分别为IUB_5、IUD_2、3UA_2、3UD_12、3UG_2和3UH_7细胞株,对其中IUB和IUD_2两个细胞株进行克隆化培养、冷冻、储存、复苏传代和染色体分析等处理,结果显示IUB_5和IUD_2确系BALB/C鼠脾细胞与FO骨髓瘤细胞融合后获得的单个细胞的克隆。根据免疫双扩散法和ELISA方法鉴定,它属IgG_1和IgG_(2(?));其培养上清液的ELISA效价为10~(-2)～10~(-3),注入BALB/C×C_(57)第一代杂交鼠腹腔诱生的腹水抗体效价达10~(-6)～10~(-7)。经高纯度的低分子量尿激酶检测后,确定是抗高分子量尿激酶的单克隆抗体。     

分泌抗HBsAg单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

纯化的HBsAg免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0—Ag14用PEG进行融合。杂交瘤出现后以PHA和ID法检测其上清,阳性孔的细胞两次克隆化,筛选出两个产生抗—HBs的杂交瘤细胞系—XM—B_5、XM—C_5。染色体99～106条,均包含有SP2/0的两条标记染色体。该两个细胞系所分泌的抗体皆为小鼠IgG_1。经传代(还用体外激发法)或冷冻复苏后的,都仍保持其分泌抗体的能力。XM—B5所分泌的抗—HBs抗体,经纯化后已建立了RPHA和ELISA法,并已由省防疫站应用于临床检测。     

分泌抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

尿激酶(Urokinas;UK)能促进血栓的溶解,是临床上治疗脑血栓及肺栓塞的有效药物。商品UK由人尿中提取,还可由基因工程技术制备。从这两种途径所得到的UK,含杂质较多,必须经过有效的提纯才能达到临床应用的理想纯度。单克隆抗体(Mc Ab)由于其专一性强,特异性高,是纯化药物的理想手段。本工作的目的是制备抗UK的McAb,以用于粗制品UK的纯化。 用BALB/C小鼠,以市售的UK(上海     

分泌抗破伤风类毒素人单克隆抗体的人鼠杂交瘤细胞系的建立

作者采用小鼠骨髓瘤细胞系与破伤风类毒素免疫的人外周血淋巴细胞进行融合，对影响人一鼠杂交瘤细胞制备人单抗成功的因素进行了探讨。按免疫时间(天)及体外刺激与否分为四组、其中以PWM TT体外刺激PBL(比体外不刺激)的细胞融合率高，且易建成稳定分泌抗体的细胞系。经5次克隆化后获得5株抗TT的人单抗杂交瘤细胞系。经双扩确定IgG2株，IgM3株。冻存10个月后复苏，传代及适当的克隆化后仍为阳性。上清液中人IgM的分泌量为0．42～1．15μg/ml。经染色体鉴定确为人-鼠杂种细胞。     

分泌抗破伤风类毒素人单克隆抗体的人鼠杂交瘤细胞系的建立

作者采用小鼠骨髓瘤细胞系与破伤风类毒素免疫的人外周血淋巴细胞进行融合,对影响人-鼠杂交瘤细胞制备人单抗成功的因素进行了探讨。按免疫时间(天)及体外刺激与否分为四组、其中以 PWM+TT 体外刺激 PBL(比体外不刺激)的细胞融合率高,且易建成稳定分泌抗体的细胞系。经5次克隆化后获得5株抗 TT 的人单抗杂交瘤细胞系。经双扩确定 IgG2株,IgM3株。冻存10个月后复苏,传代及适当的克隆化后仍为阳性。上清液中人 IgM 的分泌量为0.42～1.15μg/ml。经染色体鉴定确为人-鼠杂种细胞。     

抗人A型红细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞建株

SRBC-B_3单克隆杂交细胞株是用小鼠骨髓瘤细胞 SP2/0与经过 A 型红细胞免疫BALB/C 小鼠脾脏中的 B 淋巴细胞融合而成的细胞株。该株能分泌抗 A 抗体,与 A 型红细胞发生凝集,有高度专一性与特异性。无额外抗体,对 ABO 血型鉴定有一定可靠性。     

分泌抗马来丝虫成虫单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

应用杂交瘤枝术,以小鼠骨髓瘤 SP~z/O 与用马来丝虫成虫免疫成功的BALB/C 小鼠脾细胞融合后,成功地建立了一株名 XM—H_7的杂交瘤细胞。间接免疫荧光试验检测其上清中特异性抗体的存在,用有限稀释法2次克隆化。XM—H_7的核型,染色体为85—104条,40%为92条。细胞生长良好,至今持续培养6个月以上仍不失其分泌特异抗体的效应。     

分泌抗SPA单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定

以 SPA 作基础免疫 BALB/C 小鼠后,融合前三天直接脾内免疫,取脾细胞与 SP_2/O 瘤细胞常规融合,融合率100%;以快速 ELISA 法检测抗体,阳性率60%。5次有限稀释法克隆化后获得7株杂交瘤细胞,作中和抑制试验,证实为 SPA 特异性抗体。经鉴定属 IgG2a 及 IgG2b 亚类。电镜观察细胞融合,发现其细胞内含逆转录病毒。杂交瘤细胞液氮保存与体外连续传代一年,仍保持原有各种特性。     

分泌抗人白血病细胞分化抗原单克隆抗体的杂交瘤试建通过鉴定

苏州医学院微生物学教研室张澜生教授负责的江苏省科委资助课题“分泌抗人白血病细胞分化抗原单克隆抗体的杂交瘤试建”于1989年12月12日通过省卫生厅组织的鉴定。以白血病细胞系S_(7811)细胞为免疫源,成功地获得了3株有效、稳定分泌抗人白血病细胞单抗的杂交瘤     

分泌抗H_(615)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

用抗正常615纯系小鼠肝细胞抗体处理的H615瘤细胞免疫Balb/c小鼠、取其脾细胞与小鼠骨髓细胞融合、以间接免疫荧光法和细胞ELISA二种方法检测、建立两株分泌抗H615单克隆抗体的杂交瘤细胞系。两杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体与正常615小鼠的肝、脾、肺、肾、心肌、横纹肌、胸腺的组织细胞和小鼠肿瘤细胞及人肝癌细胞无交叉反应,证明两种单克隆抗体具有一定的特异性。对两种单克隆抗体进行亚类检定均属IgG_1。     

分泌抗HLA Class Ⅰ单态性单克隆抗体杂交瘤细胞的建株和鉴定

本文报道了应用杂交瘤技术制备抗 HLA-I 类抗原单态性单克隆抗体,命名为CJH-F6,经流式细胞间接免疫荧光分析,放射免疫沉淀 SDS-PAGE 测定,微量淋巴细胞毒实验和血小板吸收试验均证明为抗 HLA-I 类抗原单态性单克隆抗体,Ig 类别为 IgM,文内讨论了此单抗的应用。     

分泌抗人IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

应用人ＩｇＧ免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾脏与ＳＰ２／０小鼠骨髓瘤细胞在ＰＥＧ作用下融合，经３次克隆化后获得五株抗人ＩｇＧ单克隆抗体的杂交瘤细胞，用被动血凝法和ＥＬＩＳＡ检测培养上清滴度为２￣４，用琼脂双扩散法证明此单克隆抗体只与人ＩｇＧ发生反应，产生透明沉淀线。经ＩｇＧ亚类血清鉴定，其单克隆抗体均属ＩｇＧ－Ｇ１亚类抗体。五株杂交瘤细胞在液氮保存数月，经反复复苏培养，不改变其分泌抗体的性能。     

分泌抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用人甲胎蛋白(AFP)免疫BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗人AFP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株(G2和G10)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液和小鼠腹水的特异性抗体效价,分别为2～4×10~(-3)和10~(-6)～10~(-7)。两株杂交瘤细胞染色体的众数为104～108条。经体外连续传代及冻存半年复苏后,仍具有分泌抗体能力,说明其性能稳定。两株所分泌的抗体,均属IgGl型。     

分泌抗人CRP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

<正> C反应蛋白(CRP)是一种急性相蛋白质,正常情况下在血清中仅微量存在,而在急性感染、组织损伤、心肌梗塞、移植排斥反应、肿瘤播散等急性期可呈千倍升高,测定血清中的CRP含量及动态变化,对于疾病的诊断、鉴别诊断、预告估计和指导治疗均有重要意义。 1984年我们用经亲和层折提纯的人CRP免疫Bald/c小鼠,经3次免疫后取其脾     

分泌抗人精子单克隆抗体杂交瘤细胞的建立

用人精子免疫BALB/C小鼠,用杂交瘤技术制备出9株抗人精子单克隆抗体。经酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光实验证明,9株抗人精子单克隆抗体均能与人精子产生特异性免疫反应。连续传代及液氮中保存的杂交瘤细胞分泌抗人精子单克隆抗体的滴度持续稳定。     

分泌抗人C_4单克隆抗体的淋巴细胞杂交瘤

1975年Kohler和Milstein报告的淋巴细胞杂交瘤技术,为制备抗各种抗原决定簇的单克隆抗体提供了精确的手段。1983年我们运用杂交瘤技术,用提纯的人补体第4成分(C_4)免疫BALB/c小鼠,取其脾脏淋巴细胞与小鼠SP2/0—Ag14骨髓瘤细胞融合,获得了分泌抗人C_4单克隆抗体的淋巴细胞杂交瘤。     

分泌抗B型肉毒毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

我国由肉毒毒素引起的食物中毒以A、B型最常见。但用常规法制备的抗血清在两型间常有交叉反应,不适于分型鉴定之用。即使应用亲和层析交叉吸收纯化,仍难以获得B型特异性抗体。为获得高效价的型特异性抗体,本研究以B型肉毒类毒素免疫纯系BALB/c小鼠,注射3次后,血清抗体琼脂双     

分泌抗H_(615)单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立

用抗615纯系小鼠的正常肝细胞抗体处理的H_(615)瘤细胞免疫BALB/c系小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,以间接免疫荧光法和细胞ELISA两种方法检测,建立两株分泌抗H_(615)单克隆抗体的杂交瘤细胞系8A58和12C_6。两杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体与正常615系小鼠的肝、脾、肺、肾、脑、心肌、横纹肌、胸腺组织细胞以及小鼠肿瘤细胞、人肝细胞性肝癌细胞均无交叉反应。证明两种单克隆抗体具有一定的特异性。两种单克隆抗体均属IgG_1。