日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原的分析

采用免疫沉淀技术和ＥＩＴＢ技术分析了日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）。结果：能被ＳＩＥＡ免疫血清识别的ＳＩＥＡ带主要于３０．８ＫＵ到４９．６ＫＵ之间，其主要反应带为４９．６ＫＵ，３９．７ＫＵ和３３．７ＫＵ。推测４９．６ＫＵ和３３．７ＫＵ这两怕 诱导宿主产生抗卵或熟过程中可能起着重要作用。     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导抗卵免疫的初步研究

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）及成熟虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，发现ＳＩＥＡ诱导小鼠产生显著的抗生殖及抗卵胚发育的免疫力，与对照组比较，ＳＩＥＡ免疫鼠在攻击感染后４６天，肝，肠组织内总虫卵数明显下降，成熟虫卵数和粪卵数分别降低了５９．９８％，６６．８６％和６６．９７％，粪卵下降程度与肝，肠组织中成熟虫卵的减少相一致，ＳＥＡ免疫后未呈现上述效应。     

未成熟日本血吸虫卵的组分蛋白及其免疫学特性的研究

应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对日本血吸虫４周、５周和６周－ＳＥＡ进行分析，分别出现２１、１４和２０条组分蛋白带，三者间既有共同组分又存在差异，显著出不同的分子基础。     

日本血吸虫卵可溶性抗原与病人和病兔血清的免疫印斑反应

日本血吸虫可溶虫卵抗原（ＳＥＡ）与血吸虫病人和兔血清的免疫印斑反应结果表明：ＳＥＡ中有七咱不同分子量的蛋白为主要血清学反应成分，其中≤２６ＫＤ、７ＫＤ及９６ＫＤ组分蛋白在血吸虫病检查中具有高度的敏感性和特异性，尤其是抗７ＫＤ和９６ＫＤ抗体在治疗兔的血清中消失较早。     

虫卵可溶性抗原对日本血吸虫卵肉芽肿形成的影响

用日本吸虫卵可溶性抗原(SEA)皮下注入正常小鼠。末次注射第23天从尾静脉注入新鲜日本血吸虫卵。注射虫卵后第18天观察小鼠肺内虫卵肉芽肿反应的增长比。结果用SEA 0.1微克,0.5微克及1.0微克/克体重的三个实验组肺组织内虫卵肉芽肿反应明显减弱。提示对正常小鼠用0.1～1微克/克体重的SEA为诱发免疫调节的适宜剂量。为用SEA诱发宿主对虫卵肉芽肿应答的免疫耐受性研究提供选择依据。     

日本血吸虫成虫和虫卵可溶性抗原及其组分抗原的研究

目的:探讨日本血吸虫雄虫、雌虫、虫卵的可溶性抗原雄虫(AWA-m、雌虫AWA-f、虫卵SEA)及其组分抗原的特性.方法:用DE22纤维素层析柱对日本血吸虫AWA-m,AWA-f,SEA抗原进行纯化,得到相应组分抗原.分别以SDS-PAGE和Western blot对组分抗原进行全面分析,并与相应未经纯化的可溶性抗原作比较.结果:经DE22纤维素层析处理的AWA-m,AWA-f,SEA,均能获得含多种蛋白的组分抗原.SDS-PAGE结果表明,AWA-m见10条主带和9条次带,其中Mr 37 000,28 000,25 000为特异性条带,出现8条免疫反应阳性带;而AWA-m组分抗原为9条蛋白带和6条免疫反应阳性带.AWA-f见15条蛋白带,其中Mr 26 500为特异性条带,组分抗原为8条蛋白带.AWA-f粗抗原及其组分抗原均见9条反应带.SEA见8条主带和10条次带,13条为免疫反应阳性条带;SEA组分抗原见11条带,其中9条为免疫反应阳性带.结论:AWA-m,AWA-f,SEA经DE22纤维素层析纯化获得组分抗原,方法简单、可靠.该组分抗原含有粗抗原的主要免疫反应成分,去除了多种与日本血吸虫病免疫反应无关的蛋白.     

日本血吸虫可溶性虫卵抗原38kDa分子Dipstick快速诊断模式的初步建立

目的 建立简便的血吸虫病Dipstick快速诊断法。方法 以纯化的日本血吸虫虫卵可溶性抗原（SEA）38kDa分子为诊断抗原,以胶体金标记的鼠抗人IgG为二抗,建立Dipstick快速诊断体系;检测日本血吸虫病血清,急性期37例,慢性期30例,正常人52例,肝吸虫病人血清30例。结果 所测得的阳性率分别为94.6%,86.7%,1.9%,0%。结论 以SEA38kDa纯化分子建立的血吸虫病Dipstick快速诊断法具有较好的敏感性和特异性,且简便快捷,有较好现场应用前景。     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导抗卵免疫的初步研究

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）及成熟虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，发现ＳＩＥＡ诱导小鼠产生显著的抗生殖及抗卵胚发育的免疫力；与对照组比较，ＳＩＥＡ免疫鼠在攻击感染后４６天，肝、肠组织内总虫卵数明显下降，成熟虫卵数和粪卵数分别降低了５９．９８％，６６．８６％和６６．９７％；粪卵下降程度与肝、肠组织中成熟虫卵的减少相一致，ＳＥＡ免疫后未呈现上述效应。     

未成熟日本血吸虫卵的组分蛋白及其免疫学特性的研究

应用SDS－PAGE对日本血吸虫4周、5周和6周－SEA进行分析,分别出现21、14和20条组分蛋白带,三者间既有共同组分又存在差异,显示出不同的分子基础。于攻击感染后0～8周作动态观察,ELIB结果表明,4周－SEA及其免疫鼠血清的免疫学特性与5周－SEA和6周－SEA存在一定差异,其中被4周－SEA免疫鼠血清识别的72．4～68．5ku蛋白宽带至攻击感染后6～8周消失,与该抗原免疫鼠肝内虫卵数减少、虫卵发育延缓及肉芽肿缩小（在6周前）及后来的恢复（8周）基本一致。     

单克隆双抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫卵抗原

用双抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫卵主要血清学抗原。为了在所用的单克隆抗体H6、C12、H7及B2中获得包被抗体与复盖抗体(酶联抗体)的最适组对,我们进行了20组配对试验。实验结果表明,H7单抗最适于作包被抗体而H6单抗最适于作复盖单抗。有兴趣的是最佳的配对组是H7-EH6和混合单抗-EHG组而不是混合单抗-E混合单抗组。上述两个最佳组对在10次试验的OD均值均较任何一组高,有非常显著的意义(P<0.01)。我们还观察到,同一单抗既作包被抗体又作复盖抗体的效果常不理想。     

日本血吸虫成虫在体外培养中产卵和虫卵发育成熟的影响因素研究

在无血清８４１培养基中分别添加胸腺嘧啶核苷（１６×１０－５ｍｏｌ／Ｌ）、鸟氨酸（１０ｍｇ／Ｌ）、强的松龙（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）和胰蛋白胨（１０ｇ／Ｌ），可促进日本血吸虫产卵。经１５ｄ的观察证实在８４１培养基中添加上述成份组成的８９１培养基比８４１培养基产卵量高、畸卵率低和产卵高峰持续时间长。成虫最初２４ｈ内产出的虫卵体外培养至第１５ｄ，ＲＰＭＩ１６４０培养基、无血清８４１培养基、８４１培养基和８９１培养基上成熟期虫卵的百分比依次为１１６±４７，１８７±５６，２８４±８３和３０１±７８。     

PCR扩增日本血吸虫大陆株黏蛋白样蛋白(SjMLP)部分基因

目的 体外扩增日本血吸虫中国大陆株黏蛋白样蛋白(SjMLP)的部分基因序列。方法 利用PCGENE软件查找SjMLP的抗原决定簇；特定寡核苷酸引物的设计与合成；TROZOL抽提日本血吸虫成虫总RNA，RT—PCR扩增目的基因并进行DNA度列分析。结果 RT—PCR特异性扩增出SjMLP编码区部分基因序列，大小为756bp，测序结果显示与曼氏血吸虫MLP高度同源。结论 扩增到了SjMLP抗原编码区基因的部分序列，与Sm MLP高度同源。     

绞股蓝总皂甙减轻小鼠血吸虫性肝纤维化的实验观察

本实验采用绞股蓝总皂甙（ＧＰｓ）治疗小鼠血吸虫病，观察其对血吸虫性肝纤维化的影响。结果表明：ＧＰｓ治疗组肝虫卵肉芽肿反应增长比和肝纤维化程度均明显小于感染对照组（Ｐ＜０．０５）。提示ＧＰｓ具有减轻血吸虫性肝纤维化的作用。也提示自由基在血吸虫虫卵肉芽肿形成和发展中起了重要作用     

经脾脏注射血吸虫虫卵实验方法的探讨

报告应用经脾脏注射虫卵法建立Ｃ５７ＢＬ／６小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型，并与自然感染模型作比较。结果表明，脾脏注射组小鼠肝虫卵肉芽肿发生率为１００％，其肉芽肿的形态、细胞组成、转化发展过程均与自然感区染模型相似。本实验提示经脾脏注射虫卵是一种较好的、建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型的方法。     

日本血吸虫卵壳蛋白编码基因的扩增和克隆

目的　克隆日本血吸虫卵壳蛋白基因 ,以研究其在诊断和作为候选疫苗分子的作用。方法　设计合成引物 ,以日本血吸虫雌性成虫cDNA第一链为模板 ,用PCR法扩增日本血吸虫卵壳蛋白 (SchistosomajaponicumeggshellproteinSjEP)基因编码序列 ,并克隆入pGEM T质粒载体。结果　PCR法扩增出大小为 62 4bp的单一条带 ,将其克隆入载体获重组质粒 pGEM T SjEP ,经双酶切和以质粒为模板进行PCR扩增 ,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段。结论　日本血吸虫卵壳蛋白的编码基因重组质粒的成功构建 ,为进一步研究提供了条件。     

日本血吸虫肝门型童虫在体外培养中的生长、发育和产卵

本文报导在不同培养基中日本血吸虫肝门型童虫的生理活动、生长、生殖器官的发育和产卵。结果表明:在培养35d 内,不同培养基中童虫雌雄合抱率均有随培养时间延长而升高的趋势;M-841培养基、M-841+影细胞培养基中童虫生长速度快于841培养基,但三种培养基中睾丸、卵巢的生长速度差异无显著性(P>0.05)。培养35 d 时,在以上三种培养基中童虫卵黄腺均可发育成熟。最早于培养10d 时,在 M-841+影细胞培养基中查见体外产出的虫卵。提示 M-841影细胞培养基比较适合于肝门型童虫的体外培养。     

日本血吸虫尾蚴标本制作流程的改进

目的：探索日本血吸虫尾蚴标本制作流程的改进.方法：启用灿烂甲酚兰、伊红染色,改革制作流程,省略了传统制作中的固定、分色、脱水、透明等步骤.结果：制成的日本血吸虫尾蚴标本,结构清晰美观,虫体弯曲自然,无卷曲、重叠.结论：改进后的方法效果好,提高了标本的制作质量,而且操作简单易行,值得在有关教学与科研单位推广.