缺血预处理对大鼠移植胰缺血再灌注损伤的保护作用和机制

目的：探讨缺血预处理（IPC）对大鼠移植胰缺血再灌注（I／R）损伤的影响，并分析其中可能的机制。方法：糖尿病大鼠随机分为缺血再灌注组（I／R组，／n=6）和缺血预处理组（IPC组，n=18），IPC组又根据不同方法分为3个亚组：IPC3、IPC2和IPC3（n均=6）组，检测各组再灌注前及再灌注后血糖；再灌注后2h血清中TNF-α和NO的含量、胰腺组织中SOD、MPO和MDA含量。结果：①再灌注后IPC组相对于I／R组血糖低；②再灌注后IPC组较I／R组血清中TNF-α含量高、NO含量低；③再灌注后IPC组较I／R组胰腺组织中SOD含量高，MDA和MPO含量低。结论：①IPC对大鼠移植胰的VR损伤具有保护作用，机制可能是提高SOD的活性、增加内源性NO的合成、减少TNF-α的生成和减轻PMNs的粘附与聚集；②缺血5min再灌注5min2次是最佳的移植胰IPC诱导办法。     

移植胰腺冷缺血后细胞凋亡与Bcl-2Bax表达的研究

目的：探讨胰腺移植后供胰冷缺血损伤后细胞凋亡与Bcl-2、Bax表达的关系。方法：建立小型猪胰腺移植冷缺血再灌注模型，根据供胰冷缺血时间（CIT）分为：CIT 0h组、CIT 3h组、CIT 6h组、CIT 9h组。切除受体猪胰腺制作成糖尿病模型，胰腺移植完成30min后观察胰腺病理变化及TUNEL法检测胰腺细胞凋亡、免疫组织化学法进行Bcl-2、Bax测定。结果：CIT 3h、CIT 6h、CIT 9h组供胰细胞凋亡指数（AI）明显高于冷缺血时间0h组，随着冷缺血时间的延长Bcl-2表达及Bcl-2／Bax比率逐渐下降，Bax表达则逐渐增强。结论：冷缺血时间越长，胰腺细胞凋亡程度越重，细胞凋亡不仅与Bcl-2、Bax自身表达水平有关，也与Bcl-2／Bax比率失衡有关。     

IGF-1后处理与缺血后处理对缺血再灌注心肌保护作用的对比研究

目的 比较胰岛素样生长因子-1后处理(IGF-1-POST)与缺血后处理(I-POST)对缺血再灌注心肌的保护作用,探讨两者抑制缺血再灌注心肌凋亡的可能机制.方法 采用垫扎球囊法建立模型,将48只SD大鼠随机均分成4组(n=12):假手术组、I/R组、I-POST组、IGF-1-POST组.除假手术组外其余各组均缺血4...     

缺血后处理对大鼠肠缺血再灌注保护作用及机制

 目的 观察肠缺血后处理(I-post C)对缺血再灌注(IR)损伤的保护作用,探讨I-postC在肠IR损伤中的作用机制.方法 雄性SD大鼠72只,随机分为假手术组(S组),缺血再灌注组(IR组)和缺血后处理组(I-postC组),每组再分为再灌注10 min、45 min及90 min三亚组,测定血浆及肠组织二氨氧化酶(DAO)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)浓度、髓过氧化酶(MPO)含量、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)mRNA表达量,以及血浆一氧化氮(NO)浓度 (以NO2-/ NO3-代表).结果 (1)与IR组比较,I-postC组肠组织DAO在45 min和90min显著升高(P<0.05),血浆DAO在45 min和90 min显著减低(P<0.05);(2)与IR组比较,I-postC组在10、45和90 min降低肠组织MDA与MPO含量(P<0.05),在45 min与90 min显著升高肠组织SOD活性(P<0.05);(3)I-postC组血浆NO含量及iNOS mRNA表达在45 min和90 min均明显高于IR组(P<0.05).结论 肠IR损伤与iNOS过高表达及NO大量产生有关.I-postC对肠IR损伤的拮抗作用可能与I-postC诱导早期产生低水平NO,发挥其信号保护效应相关.     

肢体缺血预处理对肺缺血再灌注兔细胞因子和肺细胞凋亡的影响

研究肢体缺血预处理对肺缺血再灌注兔细胞因子和肺细胞凋亡的影响。方法：18只日本大耳白兔随机分为假手术组（S组）、肺缺血再灌注组（I／R组）、肢体缺血预处理组（L组）,每组6只。分别测定肺缺血前后各时间段兔血清及实验结束时兔左肺组织中TNF-a、IL-6、IL-10的含量和细胞凋亡指数（AI）,观察肺组织病理学变化和肺损伤定量评价（IQA）。结果：与I／R组比较,L组肺缺血再灌注后各时间段血清和肺组织TNF-仅、IL-6浓度明显降低（P〈0．05或P〈0．01）,IL-10浓度明显升高（P〈0．01）。L组光镜下肺组织病理学改变较I／R组明显减轻,且IQA及AI明显低于I／R组（P〈0．01）。结论：肢体缺血预处理能有效的减少肺缺血再灌注后血清和肺组织中促炎细胞因子浓度,增加抗炎细胞因子浓度,从而减少肺组织细胞凋亡的发生。     

库普弗细胞功能状态对肠缺血再灌注肝、脾、胸腺细胞凋亡的影响

封闭和不封闭ＢＡＬＢ／ｃ小鼠库普弗细胞４８ｈ后,夹闭肠系膜上动脉１ｈ后松夹,复制肠缺血再灌注模型。运用原位细胞ＤＮＡ末端标记和流式细胞术检测缺血前、缺血６０ｍｉｎ、再灌注３０、６０ｍｉｎ肝、脾、胸腺细胞的凋亡情况。     

骨髓单个核细胞移植对心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡及bcl - 2表达的调节

 目的观察骨髓单个核细胞(BM-MNCs)移植对心肌梗死(MI)后恢复期心肌细胞凋亡及心功能的影响,并探讨其可能机制.方法通过结扎左冠状动脉前降支制成MI模型.2周后第2次开胸在心外膜下梗死区及周边区多点注射BM-MNCs混悬液200μl(5×106个细胞).经超声心动图测定左室射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)等指标.采用DNA缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测bcl-2蛋白在心肌细胞中表达水平.结果术后4周,移植组EF、FS值均高于对照组(P＜0.05);8周时EF、FS值升高达22.4%、28.1%(P＜0.05).TUNEL结果显示心肌细胞凋亡指数在移植组明显低于对照组(4周:0.0946±0.0170 vs 0.1730±0.0180,P＜0.05;8周:0.0916±0.0140 vs 0.1820±0.0150,P＜0.05).免疫组化结果表明,移植组bcl-2蛋白表达高于对照组(4周:12.66±3.37vs 5.68±2.53,P＜0.05;8周:13.080±3.087 vs 5.02±1.91,P＜0.05).结论骨髓单个核细胞移植可抑制MI后心肌细胞凋亡的发生,从而保护心功能,其机制可能与对bcl-2表达的调节有关.     

缺血预处理对兔心肌细胞凋亡的影响

 目的 探讨缺血预处理及缺血再灌注对兔缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响.方法 制备兔缺血预处理(ischemic preconditioning,IP)、缺血再灌注损伤(I/R)模型,采用末端脱氧核苷酶转换酶介导的生物素平移缺口末端标记技术(transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况.结果 RI组细胞凋亡率(43.37±4.82)%,IP组虽然也有一定的心肌细胞凋亡率(24.53±2.95)%,但较I/R组明显降低(P<0.01).IP组心肌梗死范围较I/R组明显减小.结论 心肌缺血再灌注损伤可诱发或加重心肌细胞凋亡,IP能明显减少缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的发生率,能明显减少心肌梗死范围,减轻缺血再灌注损伤;IP能减少心肌梗死范围、减轻缺血再灌注损伤的机制可能与其能明显减少心肌细胞凋亡有关.     

供体凋亡脾细胞输注诱导大鼠胰岛移植免疫耐受的研究

目的 探讨供体凋亡细胞输注诱导大鼠胰岛移植免疫耐受的可行性.方法 应用链脲佐菌素(STZ)制备SD大鼠糖尿病模型,以直线加速器照射诱导供体Wistar大鼠脾细胞凋亡.将糖尿病SD大鼠分为4组,分别经阴茎背静脉输注Hanks液、供体正常脾细胞、供体凋亡脾细胞、供体坏死脾细胞,7天后于肾包囊进行同种异体胰岛移植,测定血糖变化,观测胰岛移植物存活时间,并通过混合淋巴细胞反应(MLR)观察移植耐受的状态.结果 预输注供体凋亡脾细胞能显著延长同种异体胰岛移植物存活时间(中位存活时间达31天),并使受体鼠对供体鼠的MLR明显减弱.结论 供体凋亡细胞输注能够诱导同种异体大鼠胰岛移植免疫耐受.     

胃饲己酮可可碱预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损害时细胞凋亡的影响

目的探讨胃饲己酮可可碱预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损害时细胞凋亡的影响及其对肝功能的保护作用。方法 48只健康成年雄性SD大鼠随机分为生理盐水对照组（n=24）和己酮可可碱预处理组（n=24）,两组分别给予生理盐水或己酮可可碱溶液灌胃5d。建立肝脏缺血再灌注模型,分别于缺血30min及再灌注后1、6、24h各时相点取材,检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）,并用TUNEL染色及图像分析法检测肝细胞凋亡率的变化。结果与生理盐水对照组比较,己酮可可碱预处理组ALT、MDA、肝细胞凋亡率在上述多个时相点显著降低（P〈0.05）,而SOD活性则显著升高（P〈0.05）。结论肝脏缺血再灌注前给予己酮可可碱预处理,可以显著降低肝细胞凋亡率,减少MDA含量同时激活SOD,并能有效地保护肝脏功能。     

缺血后适应对急性心肌梗死急症介入治疗患者心肌灌注及预后的影响

目的：探讨缺血后适应(IPOC)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)急症经皮冠状动脉介入治疗(PCI)患者心肌灌注和预后的影响。方法203例接受急症PCI治疗的STEMI患者随机分为IPOC组(n=103)和对照组(n=100),IPOC组在再灌注开始1 min内行IPOC处理,对照组在再灌注后最初6 min内不作干预。观察两组患者心肌肌钙蛋白I(cTnI)峰值、肌酸激酶同工酶(CK-MB)峰值、左室射血分数(LVEF)、室壁运动评分指数(WMSI)、校正的TIMI计帧(CTFC)及住院期间主要心血管不良事件(MACE)有无差异。结果两组患者在年龄、性别、危险因素、梗死相关血管、缺血时间等方面差异均无统计学意义(P>0.05);IPOC组CTFC明显快于对照组[(25.3±7.9)帧对(29.4±8.4)帧(P<0.05)];IPOC组CK-MB峰值、cTnI峰值明显低于对照组[(157.3±83.6) U/L对(201.5±77.3) U/L,(2.5±1.3) ng/ml对(3.1±1.0) ng/ml)(P<0.05)];两组患者入院时LVEF、WMSI均无统计学差异,术后3个月IPOC组LVEF、WMSI均明显优于对照组[(57.4±8.7)%对(53.6±9.3)%,1.19±0.4对1.27±0.3(P<0.05)]。 IPOC组术后3个月MACE发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论 IPOC能够改善STEMI急症PCI治疗患者冠状动脉血流,减轻心肌细胞缺血-再灌注损伤,改善心功能及预后。     

抑肽酶对离体模拟肺移植兔供体肺功能及细胞凋亡的影响

目的 探讨低钾右旋糖酐液(LPD)中加入抑肽酶对供体肺功能的保护作用及供体肺细胞凋亡的影响.方法 24只健康纯种新西兰大白兔随机分为两组,A组用LPD液(70ml/kg)经肺动脉灌注供体肺,B组用含150kU/ml抑肽酶的LPD液(70ml/kg)灌注供体肺,4℃保存16h,应用肺移植动物模型模拟肺移植过程1h.循环灌注期间每隔10min记录肺动脉压(PaP)、气道峰压(PawP),并检测供体肺血气标本(PaO2、PaCO2),计算肺泡-动脉血氧差(A-aDO2)、肺顺应性(CL).光镜、电镜观察各组供体肺移植前后的组织变化;TUNEL-Fluorescein及PI双染色法定量观察各组供体肺移植前后细胞凋亡变化,分析细胞凋亡与供体肺功能的关系.结果 再灌注早期(前20min)两组供体肺氧合能力无差异,再灌注30min后各时段,A组PaO2低于B组(54.42～118.87mmHg vs 112.33～183.73mmHg,P＜0.01);B组供体肺在整个灌注过程中能保持良好的氧合能力(PaO2≥112.33mmHg).再灌注末期,A组PaCO2及含水量均明显高于B组(50.96mmHg vs 41.42mmHg,P＜0.01;88.90% vs 82.48%,P＜0.001),B组供体肺的PaP、PawP、CL则明显优于A组.光镜及电镜观察见A组供体肺细胞结构破坏,间质水肿,而B组则基本保持正常结构.两组供体肺移植后均出现明显的细胞凋亡,且A组凋亡指数明显高于B组(24.67% vs 15.50%,P＜0.01).供体肺凋亡指数与PaO2、CL呈负相关(r＝-0.895,r＝-0.683,P＜0.001).结论 LPD液中加入抑肽酶可提高移植术后供体肺功能,抑制移植后早期供体肺细胞的凋亡;细胞凋亡可能是供体肺移植术后早期肺功能减低的原因之一.     

川芎嗪对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

 目的 观察川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TMP)对缺血心肌细胞凋亡以及病理组织学改变的作用.方法 采用大鼠心肌缺血再灌注(Myocardial ischemic reperfusion,MIR)损伤模型,用缺口末端标记技术(TDT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测MIR过程中不同时间点缺血心肌细胞凋亡的动态变化及川芎嗪对其影响,并采用电镜观察其病理组织学改变进行对照研究.结果 (1)非缺血心肌无TUNEL阳性细胞出现,MIR 60 min大鼠缺血心肌中可见TUNEL阳性细胞,120 min时TUNEL阳性细胞数目最多.(2)与单纯MIR大鼠相比,川芎嗪干预MIR大鼠缺血心肌细胞中TUNEL阳性细胞数明显减少,心肌缺血再灌注60 min时分别为(36.30±8.76)个,张和(24.70±7.15)个/张(P<0.05),120 min时分别为(48.43±23.87)个/张和(10.04±8.11)个,张(P<0.01).(3)电镜结果显示MIR 60 min时,心肌缺血性改变最明显,川芎嗪干预大鼠再灌注组心肌缺血损伤有一定减轻.结论 心肌缺血再灌注可诱导心肌细胞发生凋亡,且随再灌注时间的延长,心肌细胞凋亡数目逐渐增多.川芎嗪干预可使缺血心肌细胞凋亡减少,病理组织学改变亦有减轻.     

智能化血管跟踪MRA在胰肾联合移植中的应用

目的：探讨智能化血管跟踪MRA在胰肾联合移植(SPKT)中的应用。方法：搜集我院SPKT病例5例，采用GE1.5TMR扫描机，先行常规扫描，再行MRCP和MRU检查。在此基础上行Smart Prep MRA成像。所有智能化血管跟踪MRA的源影像均采用IVI软件包进行分析处理。结果：5例SPKT的智能化血管跟踪MRA的腹主动脉远端、髂内外动脉、主要移植动脉及其1～2级分支均清晰显示，其中3例患者血管异常被DSA证实。1例胰腺急性排斥反应者显示胰腺分支血管闭塞，另1例显示脾动脉的动脉瘤形成及血管连接处和胰十二指肠下动脉的近端狭窄。第3例为急性肾脏排斥反应伴肾梗死者显示肾动脉的近端及远端血管闭塞。结论：智能化血管跟踪MRA能显著提高动脉的信噪比，减少流动伪影，进而提高MRA的图像质量。     

缺血后处理对全脑缺血损伤后神经元结构可塑性及记忆的影响

目的 观察缺血后处理(Ischemic postconditioning)对全脑缺血损伤后神经元结构可塑性及记忆的影响,从形态学的角度对缺血后处理的保护作用机制进行探讨.方法 SD成年雄性大鼠36只,随机数字表法分为为假手术组、全脑缺血15 min组、全脑缺血+后处理组,每组12只,处理方式为缺血/再灌注各15 s,循环3次.每组6只以Morris水迷宫观察学习记忆,重复性方差分析处理数据,另外6只以高尔基(golgi)银染观察神经元形态与树突棘密度变化,使用方差分析进行统计分析.结果 缺血后处理组逃避潜伏期较全脑缺血组明显缩短(第3天P=0.014,第4天P=0.040第5天P=0.001),缺血后处理组树突棘密度较全脑缺血组明显增多(F=562.820,P＜0.01) 结论缺血后处理对脑缺血所致的记忆损伤有明显的保护作用,其机制可能与减少树突棘的损伤有关.     

氧化苦参碱诱导慢性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的实验研究

 目的 观察慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)大鼠胰腺细胞凋亡的病理学改变,探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)对CP的治疗作用.方法 Wistar雄性大鼠40只,随机分为:阴性对照组(n=10)、模型组(n=10)、苦参组(n=10)和激素组(n=10).模型组、苦参组、激素组采用Matsumura等[1]方法制备CP模型,阴性对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水;模型组与激素组于模型制备后分别给予OM和地塞米松治疗.于相应时相点处死大鼠,取血取组织.酶学方法测定血清淀粉酶、透射电镜对胰腺细胞进行形态学观察、TUNEL技术检测细胞凋亡指数.结果 模型组、激素组大鼠胰腺细胞出现明显的线粒体嵴不清、染色质浓缩、细胞核裂解等细胞凋亡特征,出现新月形小体;苦参组、激素组凋亡率(22.6%±4.9%,24.5%±6.1%)显著高于阴性对照组/模型组(1.2%±0.3%,13.4%±7.8%),P<0.05.结论 OM具有明显的诱导胰腺细胞凋亡的作用,明显改善胰腺炎病变程度.