SELEX法筛选炭疽芽孢杆菌适配子的研究

目的：利用SELEX（system evolution of ligands by exponential enrichment)体外筛选,找能与炭疽芽孢杆菌芽孢特异结合的寡核苷酸适配子（aptamer),方法：体外合成长度为78个核苷酸的随机DNA库,通过SELEX技术,以炭疽牙直菌疫苗株A．16R的芽孢为靶标进行15轮的筛选,利用生物素－亲和素显色系统判断寡核苷酸与牙孢的结合活性,结果：随着筛选轮数的增加,PCR扩增电泳条带渐单纯,寡核苷酸与芽孢结合后显色,D值提高9倍以上,D值随适配子结合量的增加而递增,结论：已初步筛选到与炭疽芽孢具有亲和力的适配子。     

金纳米棒制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联

目的金纳米棒的制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联。方法利用种子调制生长法制备了金纳米棒,采用化学桥联方法对金纳米棒进行m-SH-PEG修饰及与靶向定位乳腺癌细胞的寡核苷酸适配子的耦联。结果成功制备了金纳米棒,以CTAB包裹的金纳米棒表面光滑、尺寸均一、分散性和稳定性良好;Zeta电位检测表明m-SH-PEG已成功修饰金纳米棒,琼脂糖电泳证实寡核苷酸适配子与金纳米棒成功耦联。结论成功地进行了金纳米棒的制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联。     

新疆1例汉族家系β地中海贫轿IVS—II—654（C→T）的基因分析

应用聚合酶链反庆结合等位基因特异的寡核苷酸斑点杂交技术（ＰＣＲ／ＡＳＯ０，对新疆首例β地中海贫血（β地贫）家系进行基因分析，从１２名家系成员中检出７例β地贫基因突变（ＩＶＳ－Ⅱ－６５４，Ｃ→Ｔ）的杂合子。结合家系调查、临床症状及血液学检查结果，证实先证才的致病基因来源于父方。     

人乳头瘤病毒分型长链寡核苷酸芯片的制备

目的 制备用于人乳头瘤病毒（HPV）初步检测和分型的长链寡核苷酸基因芯片。方法 对4型HPV（6,11,16,18）全基因组序列进行分析,设计特异性高、熔解温度（Tm）和GC含量相近的HPV型特异性长链寡核苷酸探针,点样制备成寡核苷酸基因芯片,利用限制性显示技术对HPV样品进行荧光标记,并将标记好的样品与芯片杂交,以了解寡核苷酸基因芯片在HPV病毒检测和分型中的作用。结果 荧光标记的HPV样品与多个型特异性HPV探针杂交有明显的荧光信号,可以根据杂交结果进行初步的分型检测。结论 采用设计合理的60mer寡核苷酸基因芯片可以从基因水平实现对HPV的检测和分型。     

载人航天60问（11）

49.宇宙空间电离辐射严重吗？ 电离辐射是指能够通过直接或间接过程使作用物质产生电离的辐射。例如各种带电离子（质子、电子、α粒子等）能够直接使作用物质发生电离,而中性粒子（如中子、X射线和γ射线）可间接地使作用物质发生电离，这些粒子辐射都称为电离辐射。     

病理类型特异的卵巢癌组织适配子的鉴定

目的鉴定经组织切片消减SELEX筛选获得的4条候选适配子对不同类型卵巢癌组织的识别特性。方法公司合成、荧光素修饰候选适配子,利用免疫荧光实验对筛选获得的适配子候选序列进行鉴定。结果免疫荧光实验证明,适配子OC-10-19和OC-10-36能够特异识别卵巢浆液性乳头状囊腺癌,且OC-10-36还能够对早期的不典型增生进行识别,另2条适配子OC-10-10和OC-10-37仅识别个别的卵巢浆液性囊腺癌。结论成功筛选获得识别不同类型卵巢癌组织的特异适配子,为适配子用于不同病理类型标志物的鉴定、临床辅助诊断等提供了理论基础。     

炭疽芽孢杆菌芽孢适配子的结构与亲和性分析

为了对炭疽芽孢杆菌疫苗株A．16R芽孢的适配子进行亲和性分析,体外构建了78个碱基的随机DNA库,以炭疽芽孢杆菌疫苗株A．16R芽孢为靶标,用SELEX技术进行了15轮的筛,针室的适配子库进行克隆,测序,用Macaw2.05和DNAsisv2.5软件对每一适配子的保守序列和二级结构进行分析,并用生物素－链酶亲和素－辣根酶系统检测,根据OD值的高低判定亲和力的大小,对每一适配子进行亲和力测定。结果表明,适配子的亲和力高低不一,OD值最高为1．2,最低为0．25,二级结构分析结果显示,茎环和茎等二级结构可是适配子与芽孢结合的基础;其一级结构提示有AGGGG,CCCCG,GGCTT、ACACT等保守序,上述分类与OD值的高低分布基本吻合。     

反义MAPK寡核苷酸对精氨酸加压素诱导下心肌成纤维细胞一氧化氮合成增加的抑制作用

目的：探讨反义丝裂素活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase）寡核苷酸对精氨酸加压素（AVP）诱导下心肌成纤维细胞（CFs）一氧化氮（NO）合成增加的抑制作用。方法：分离培养SD仔鼠CFs，采用分光光度法和硝酸还原酶法测定CFs一氧化氮合酶（NOS）活性和NO含量。结果：AVP显著提高CFs NOS活性和NO含量；反义MAPK寡核苷酸剂量依赖性地抑制AVP诱导下CFs NOS活性增高和NO含量增加，其中0．2μmol／L和0．3μmol／L反义MAPK寡核苷酸可将AVP诱导下CFs NOS活性和NO含量抑制到与对照组近似水平。结论：MAPK参与了AVP诱导下CFs NOS活性增高和NO含量增加，MAPK激酶有可能成为阻断或逆转心肌纤维化新的作用靶点。     

高压氧对皮肤移植和皮瓣转移术后的影响

目的：探讨高压氧（ＨＢＯ）治疗对皮肤移植及皮瓣转移术后成活的影响。刀法：对３６例皮肤移植和皮瓣转移术后患者加用ＨＢＯ治疗，并以常规治疗者３３例作为对照；同时测定１０例患者高压氧治疗前后血浆中丙二醛（ＭＤＡ）、红细胞超氧化物歧化酶（ＲＢＣ－ＳＯＤ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）及“中分子”物质（第一军医大学未发表资料）含量。结果：ＨＢＯ治疗组皮肤及皮瓣成活率明显提高（Ｐ＜０．０１）；治疗前后血浆中的ＭＤＡ，ＲＢＣ－ＳＯＤ，ＧＳＨ变化不显著（Ｐ＞０．０５）；而治疗后“中分子”物质考量下降，从４０２０±８００Ｕ／Ｌ下降到２３９０±７９０Ｕ／Ｌ。结论：血浆中“中分子”物质与病情密切相关；植皮和皮瓣转移术后早期进行ＨＢＯ治疗可以提高成活率。     

反义核酸抑制放疗诱导的肝癌细胞VEGF高表达

目的：探讨放疗过程中放疗患者血清血管内皮生长因子（VEGF）升高的机理，以及VEGF反义硫代寡核苷酸（Antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODNs）对肝癌细胞VEGF表达分泌的抑制作用。方法。动态观察肿瘤患者放疗期间血清VEGF变化，体外培养肿瘤细胞，观察放疗对肿瘤细胞VEGF表达分泌的诱导作用及反义寡核苷酸的抑制效应。结果：肿瘤患者血清VEGF浓度在放疗期开始后逐渐升高，1－2周达到峰值后开始下降，到第6周时基本恢复到正常，肝癌细胞受X射线照射后VEGF的分泌量较对照组明显升高，VEGF反核组癌细胞VEGF蛋白表达水平较单纯照射组显著下降（P＜0．01）。结论：放射可诱导肿瘤细胞中VEGF的表达分泌。放疗患者放疗过程中血清VEGF浓度升高可能是由于癌细胞受照射后VEGF表达，分泌增加所致，VEGF反义寡核苷酸对放疗诱导的VEGF高表达有较好的抑制作用。     

β地中海贫血IVS-Ⅱ-654(C→T)的基因鉴定

目的：总结新疆１６例β地中海贫血ＩＶＳⅡ６５４（Ｃ→Ｔ）的基因分析结果。方法：应用聚合酶链式反应和寡核苷酸探针杂交。结果：对新疆１６例β地中海贫血先证者进行基因分析，鉴定为ＩＶＳⅡ６５４（Ｃ→Ｔ）基因突变，均为杂合子，其中汉族１１例，回族４例，维吾尔族１例。回族中这种突变类型属首次报道。结论：本文结果对了解这一突变类型在我国的分布特点提供了有意义的资料     

033 携带俄歇电子发射器的DNA水平放射性药物在抗基因放射性疗法中的进展

目的：抗基因放射性疗法是利用携带俄歇电发射器（如１２５I）的三螺旋形成寡核苷酸（TFO）以序列特异方式靶向基因序列，造成基因特定位点双链断裂，将靶基因“剔除”的方法。本研究拟比较未修饰的TFO及经６－氨基吡唑犤３，４－d犦嘧啶－４（３－H）－酮－（８－氮－７－去氮鸟嘌呤）（PPG）修饰、单核苷酸定位多肽（NLS）修饰的TFO与多药耐药基因（MDR１基因）中的靶序列结合效率，并察１２５I－TFO在细胞内导致基因组DNA中靶位点双链断裂的能力。方法：用多聚酶链反应（PCR）方法扩增人类KB－V１肿瘤细胞系的MDR１基因片…     

辐射诱导lncRNA LOC102606465靶基因的筛选及生物信息学分析

目的 筛选电离辐射诱导的长链非编码RNA LOC102606465靶基因，探索其潜在生物学功能。方法 基因芯片检测LOC102606465下游差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs），qRT-PCR对部分DEGs进行验证。对DEGs进行GO和KEGG功能富集分析，构建PPI蛋白互作网络，以筛选显著模块及关键枢纽基因。结果 siRNA-447和siRNA-541的LOC102606465表达量显著低于siRNA-NC，差异具有统计学意义（t=29.095、13.751，P<0.01）。siRNA-447，siRNA-541共同变化的DEGs有374个（112个上调，262个下调）。qRT-PCR验证发现DEGs表达变化趋势与基因芯片结果一致。GO富集分析发现，下调DEGs显著富集于"氧化还原酶活性作用集群"（分子功能），"基底层" （细胞组分），"铵离子代谢过程" （生物过程）；上调DEGs显著富集于"蛋白磷酸酶抑制剂活性"（分子功能），"SNARE复合体" （细胞组分），"纤维蛋白溶解负调节" （生物过程）。KEGG分析发现，DEGs显著富集在外源物质细胞色素P450代谢通路，背腹轴形成信号通路，溶酶体信号通路，甘油酯代谢通路和P53信号通路。基于STRING数据库构建蛋白互作网络（包括194个节点与268个边缘），筛选出1个显著功能模块和5个关键枢纽基因ACTRT3、CDKN1A、DPYD、TMP4、PRKACB。结论 LOC102606465可能是调节电离辐射敏感性潜在的生物标志物，其表达下调在细胞响应辐射过程中发挥重要作用，并有望成为调节辐射敏感性的重要靶标。     

总参北京第一干休所门诊部 保健服务工作掠影

总参北京第一干休所门诊部针对老干部的“两高”（高龄、高发病率）特点，积极抢先责任制保健工作模式，逐步完善三级责任制医疗保健机制，不断强化“内强素质，外树形象”的工作理念，认真落实“三性三化（科学性、整体性、艺术性、理性化、人性化、个性化）”的服务原则，把全心全意为老干部服务作为保健工作的出发点和落脚点，老干部满意率逐年提高。     

红枣保健新功用

近年来科学家研究发现，红枣含蛋白质、糖类、多种氨基酸、胡萝卜素、维生素B２、维生素C、钙、磷、铁等营养物质，具有一些新的防病保健功能。抗过敏国内曾有人用大红枣治疗过敏性紫癜，每天吃３次，每次吃１０枚，一般３天见效。后来日本科学家发现大红枣中含有大量叫作“环磷酸腺苷”（简称cAMP）的物质，这种物质具有抗过敏作用。据测定，红枣中cAMP的含量最高，干红枣中的含量又较新鲜大枣高４～５倍。抗癌红枣富含三萜类化合物（如山楂酸）和二磷酸腺苷。三萜类化合物大都具有抑制癌细胞的功能，其中尤以山楂酸的作用最强，超过了…     

春季花粉期哮喘患者外周血嗜酸细胞阳离子蛋白水平及临床改变

近年资料表明支气管哮喘的重要原因是气道非特异性炎症，其组织病理学特点为嗜酸性粒细胞（EOS）增加，EOS产生的主要检基蛋白（MBP）、嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP）是造成粘膜下水肿、上皮细胞损伤和非特异性气道高反应性的主要毒性物质（‘－”。本文在春季花粉前期和花粉期测定一厂哮喘患者和正常人外周血中EcP水平及同期肺功能变化，现报告如下。对象与方法一、过敏性哮喘患者24人，男11人，女13入，年龄ZO～71岁（平均47．5土15．3岁），其中历人为春季花粉过敏，9人为秋季发作或对油漆等其他物质过敏。病程l～40年（平均18．3士1…     

余甘子喉片提高高原人体体能的试验研究

目的探讨余甘子喉片对提高高原人体体能的作用。方法在3700 m和5100 m高原分别选择40名已习服高原半年以上的男性青年,随机分为余甘子组（n=20,每日3.0 g,连续服药15 d）和安慰剂对照组（n=20,服用15 d）。按照军标GJB1337-92测定服药前、后身体做功能力（PWC170）,最大耗氧量（VO2max）和台阶指数等体能指标和血氧饱和度（SaO2）、血液乳酸（BLA）浓度、血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的变化。结果与服药前相比,在3700 m高原余甘子组服药后VO2max增加8.03%（P〈0.01）,台阶指数增加13.94%（P〈0.01）,运动后BLA减少19.9%（P〈0.05）,血清SOD活性增加7.90%,MDA减少36.07%（P〈0.05）;在5100 m高原余甘子组运动后SaO2增加4.63%（P〈0.05）,VO2max增加8.08%（P〈0.05）,台阶指数增加11.12%（P〈0.05）,运动后BLA减少16.9%（P〈0.05）;对照组无明显变化。结论余甘子具有抗疲劳、提高高原人体体能的作用。     

高原氧自由基代谢的研究进展

近年来对高原缺氧机制的分子生物学水平研究较为多的是氧自由基，其过氧化和抗氧化过程所涉及的物质和多种血氧代谢酶-腺苷酸（adenosine monophosphate，AMP）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione perioxidase，GSH—PX）、丙二醛（malonaldehyde，MDA）、过氧化氢酶（Catalase，CAT）、过氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）在高原医学的各项研究活动中具有很重要的意义。本文综述氧自由基学说和高原缺氧机制之间的关系，尝试从细胞凋亡学说加以解释，同时综述了高原习服和适应的“线粒体适应”学说（Mitochondrial adaptation）。     

微小肝细胞癌（≤1 cm）的Gd-EOB-DTPA增强MRI表现

目的：探讨直径≤1 cm微小肝细胞癌（mHCC）在钆塞酸二钠（Gd-EOB-DTPA）增强MRI的表现。方法：回顾性分析经病理证实45例mHCC的临床和影像资料，采用多个独立样本列表的χ2检验比较不同序列对mHCC的检出率。结果：45个病灶中，25个（55.6%）表现为典型的“快进快出”模式，11个（24.4%）无动脉期高强化（APHE）,20个（44.4%）无门脉期廓清（WO），仅1个（2.2%）肝胆期（HBP）呈高信号。HBP低信号对mHCC的检出率最高（97.8%）,HBP与T1WI、T2WI、APHE+WO任一序列比较，其检出率差异具有统计学意义（Bonferroni校正，P<0.005）。DWI联合“APHE+WO”的病灶检出率为82.2%,HBP联合“APHE+WO”检出率为97.8%,HBP联合DWI的检出率为100%。HBP联合DWI的检出率优于DWI联合“APHE+WO”(P=0.010),HBP联合“APHE+WO”的检出率优于DWI联合“APHE+WO”(P=0.035)。结论：Gd-EOB-DTPA增强MRI肝胆期对mHCC的检出率非常高，肝胆期低信号联合...     

未来西南战区前线指挥部高级首长医疗保健的思考

作者积三次西南战区实战医疗保健经验，结合我军应对信息化条件下常规战的战略、战术思想，提出未来该战区前指高级首长医疗保健思路，总体思路是：（1）必须确立前指首长医疗保健高于一切理念；（2）架构相对独立的战区前指专职医疗保健组；（3）医保组人员和装备必须“少而精”和“高、精、尖”；（4）必须实施对首长个性化医保预案；（5）确保战区前指快速直达后送通道畅通。