EV71感染手足口病患儿外周血检测Treg细胞、TH17细胞、TGF-β、IL-17A的临床意义

目的研究EV71感染手足口病患儿外周血CD4＋CD2＋5Foxp3high调节性T细胞（Treg细胞）、TH17细胞及细胞因子TGF-β、IL-17A,分析其在EV71感染手足口病患儿发病机制中的作用及临床意义。方法收集EV71感染手足口病患儿及健康对照组外周抗凝静脉血,流式细胞仪检测CD4＋CD2＋5 Foxp3highTreg细胞、TH17细胞的表达,ELISA法检测研究对象血清中TGF-β、IL-17A的水平。结果显示EV71感染手足口病患儿CD4＋CD2＋5 Foxp3high Treg细胞百分率和血清中TGF-β水平明显低于健康对照组（P〈0.05）,TH17细胞百分率和血清中IL-17A水平明显高于健康对照组（P〈0.05）。结论 EV71感染手足口病患儿体内存在细胞免疫功能紊乱,病毒感染可能是引起机体免疫功能异常的关键。     

β_2微球蛋白和调节T细胞在非霍奇金淋巴瘤中的应用

目的探讨血清β2微球蛋白（β2-MG）和CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞（regulatoryTcells,Treg）在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的临床意义。方法对67例非霍奇金淋巴瘤患者按骨髓涂片检查结果分为淋巴瘤白血病组,有骨髓侵润组和无骨髓侵润组。40例健康体检者为对照组。用AU2700全自动生化分析仪分别对其血清进行β2-MG进行检测,同时用流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞表达百分率。结果①非霍奇金淋巴瘤患者的血清β2-MG水平明显高于对照组（P〈0.01）,其中淋巴瘤白血病组和有骨髓侵润组β2-MG水平高于无骨髓侵润组（P〈0.01）;淋巴瘤白血病组高于骨髓侵润组（P〈0.01）.3组非霍奇金淋巴瘤患者化疗后β2-MG水平均低于化疗前的水平（P〈0.05）。②非霍奇金淋巴瘤患者、健康对照组外周血CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞占CD4＋淋巴细胞的比例分别为6.73±1.79%、4.15±1.43%。非霍奇金淋巴瘤患者Treg细胞表达高于健康对照组,差异有显著性（P〈0.05）;淋巴瘤白血病组和有骨髓侵润组Treg细胞表达比例明显高于无骨髓侵润组（P〈0.05）,疾病越严重,Treg细胞表达水平越高;非霍奇金淋巴瘤患者化疗前外周血CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞水平升高,化疗后外周血Treg细胞水平降低,结论血清β2微球蛋白和CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞检测对非霍奇金淋巴瘤的诊断,疗效及预后的判断具有重要的临床价值。     

慢性乙型重型肝炎患者外周血调节性T细胞表达

目的通过观察外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）水平,探讨其在慢性乙型重型肝炎患者中的作用。方法流式细胞仪技术检测30例慢性乙型重型肝炎患者（CSHB）、30例慢性乙型肝炎患者（CHB）和15例健康志愿者（正常对照组）PBMCs中Treg的比例。结果慢性乙型重型肝炎患者外周血Treg细胞的平均百分率为（2．45±0．23）％,较慢性乙型肝炎患者的（9．48±0．48）％有极其显著差异（P〈0．01）,较健康对照组（5．65±0．61）％则有显著差异（P〈0．05）。结论Treg在慢性乙型重型肝炎的病情进展及病毒抑制清除等方面起着重要的作用。     

乙型肝炎患者外周血细胞及其与肝功能的相关性

目的研究乙肝患者外周血CD5^＋B细胞百分率的高低与病情发展的关系。方法检测50例乙型肝炎患者外周血CD5^＋B细胞。结果急性乙肝组与正常对照组无显著性差别,其余各疾病组均显著高于对照组。将各疾病组CD5^＋B细胞百分率与肝功能指标进行相关性分析,发现慢性乙型肝炎和慢性重症乙型肝炎患者外周血CD5^＋B细胞百分率与谷丙转氨酶（ALT）和总胆红素（TB）呈正相关,乙肝后肝硬化患者外周血CD5＋B细胞百分率与ALT、谷草转氨酶（AST）,x-谷氨酸基转移酶（γ-GT）,TB和直接胆红素（DB）的升高呈正相关,提示CD5＋B细胞百分率的增高与肝功能的损伤有密切的伴随关系。结论检测CD5^＋B细胞对乙肝的发病呈慢性化发展判断有一定的参考价值。     

肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的检测及意义

目的研究肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）的比例变化,探讨其与肺癌的临床分期、病理类型及组织学分化程度的相关性。方法采用流式细胞术检测78例肺癌患者（肺癌组）和30例健康对照者（健康对照组）外周血CD4^＋CD25^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果肺癌组外周血CD4^＋CD25^＋Treg占CD4’T细胞的比例为（21．07±5．26）％,与健康对照组（10．04±2．75）％比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;Ⅲ、Ⅳ期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg比例分别为（22．46±4．35）％、（24．35±6．20）％,显著高于Ⅰ期＋Ⅱ期肺癌患者（12．89±3．19）％及健康对照组（10．04±2．75）％相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;鳞癌、腺癌、小细胞肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg比例分别为（20．75±4．85）％、（21．52±5．26）％、（19．20±6．41）％,与健康对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）,但不同病理类型的肺癌患者间外周血CD4^＋CD25^＋Treg比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;高分化、中分化、低分化肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg比例分别为（20．36±3．12）％、（21．11±4．67）％、（21．30±5．75）％,显著高于对照组（P〈0．05）,但不同分化程度的各肺癌者间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg水平明显升高,且与肺癌的进展密切相关,但与病理类型、组织学分化程度无关。     

CD4~＋CD25~＋调节性T细胞在肺癌患者中的表达及临床意义

目的探讨肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术分析45例肺癌患者与15例健康对照组外周血CD4＋CD25＋Treg细胞占CD4＋T细胞的比例。结果肺癌患者外周血CD4＋CD25＋Treg细胞占CD4＋T细胞比例为（17.8±6.6）%,表达高于对照组（6.49±0.5）%（P〈0.001）。肺癌患者外周血中Treg细胞数量在不同临床分期和组织学分化程度中的差异有统计学意义（P〈0.01）,但与患者的病理类型无关（P〉0.05）。结论 Treg细胞在肺癌患者中表达明显升高,是肺癌患者免疫功能紊乱的一个证据。     

甲状旁腺激素对维持性血液透析患者调节性T细胞和微炎症的影响

目的观察甲状旁腺激素（PTH）对维持性血液透析患者外周血调节性T细胞（Treg）和微炎症的影响。方法选取27例合并甲状腺旁腺功能亢进的血液透析患者（高PTH组）、18例无甲状腺旁腺功能亢进的血液透析患者（低PTH组）和20名健康人,采用流式细胞术检测各组外周血中CD4＋、CD25＋、CD127-来定义其外周血中Treg细胞表达的百分比,同时通过免疫比浊法和酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组血清C-反应蛋白（CRP）、血清白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）。结果两组血液透析患者的Treg细胞较健康对照组明显减少（P〈0．05）,而两组的CRP,IL-6,TNF—α均显著增高（P〈0．05）;血液透析伴高PTH组的Treg细胞显著低于低PTH组（P〈0．05）,而其CRP,IL-6,TNF—α水平显著高于低PTH组（P〈0．05）。结论高PTH可抑制T细胞分化,减少Treg产生,促使炎症因子增高。积极清除PTH,可能对改善血液透析患者免疫功能有益。     

HLA-B27检测在强直性脊柱炎诊断中的临床价值

目的 探讨HLA-B27抗原检测在强直性脊柱炎（AS）早期诊断中的临床价值。方法使用ELISA法对450例健康体检者（非AS对照组）、462例AS疑似患者（AS疑似组）和80名AS患者（AS组）进行HLA-B27抗原检测。结果非AS对照组、AS疑似组和As组的HLA—B27阳性率分别为3．3％、48．9％和92．5％,AS组、AS疑似组的HLA—B27阳性率明显高于非AS对照组（P〈0．01）,AS组的HLA—B27阳性率明显高于AS疑似组（P〈0．01）。结论HLA．B27抗原与AS疾病相关,检测HLA—B27抗原对疑似AS患者的早期诊断有重要意义。     

原发性肝癌患者手术前后外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞变化的临床意义

目的：探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋regulatory T cell,CD4＋CD25＋Treg）在原发性肝癌患者手术前、后外周血中的变化特性,分析CD4＋CD25＋Treg细胞在肝癌细胞免疫中的作用机制。方法选取本院50例原发性肝癌患者作为实验组,分别采集术前7d、术后14d外周血,同时采集本院50例健康体检人群外周血作为对照组,经过流式细胞仪检测,统计分析各组外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞、CD4＋T细胞和CD8＋T细胞比率。结果（1）术前外周血中CD4＋CD25＋Treg比率显著高于对照组, CD8＋T细胞比率显著低于对照组,两组差异有显著性意义;CD4＋T细胞比率比较,差异无统计学意义。（2）术后外周血中CD4＋CD25＋Treg,CD4＋T细胞,CD8＋T细胞比率与对照组比较,差异无统计学意义。（3）术前与术后外周血中CD4＋CD25＋Treg、CD8＋T细胞比率比较,两组差异有显著性意义;CD4＋T细胞比率比较,差异无统计学意义。结论原发性肝癌患者手术前、后外周血CD4＋CD25＋Treg变化在肿瘤细胞免疫及临床治疗中具有重要意义。     

急性冠状动脉综合征患者Th17和Treg细胞的变化检测

目的观察急性冠状动脉综合征患者Th17细胞和Treg细胞的变化。方法我院2010年8月至2011年8月住院患者中随机选取30例急性冠状动脉综合症患者纳入观察组,健康对照者30例纳入对照组,分别采用流式细胞术检测外周血Th17细胞和Treg细胞百分率。结果观察组患者外周血中Th17细胞百分率高于对照组,其差异具有显著的统计学意义(P<0.05);观察组患者CD4+CD25+Foxp3+Treg和CD4+Foxp3+Treg细胞百分率低于对照组,其差异具有显著的统计学意义(P<0.05)。结论 ACS患者外周血中Th17/Treg失衡,我们推测斑块的不稳定可能与Th17/Treg失衡。     

小儿肺炎外周血C-反应蛋白、降钙素原及细胞免疫指标检测

目的：研究小儿肺炎患者外周血中C-反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、T淋巴细胞亚群及调节性T细胞（Treg细胞）水平变化及各项指标测定在小儿肺炎诊治中的意义.方法：收集我院2012年3月至2013年3月诊断为小儿肺炎的患儿98例,其中细菌性肺炎（BP）40例,支原体肺炎（MP）30例,病毒性肺炎（VP）28例,检测外周血中CRP、PCT、T淋巴细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋）及Treg细胞（CD4＋CD25＋）水平,与同期健康体检的40例儿童比较.结果：肺炎组患儿外周血CRP均较对照组升高;对照组较肺炎各组CD3＋、CD4＋高;对照组较肺炎各组CD8＋低;BP组、MP组较对照组CD8＋升高,BP组、MP组较VP组CD8＋升高.对照组较肺炎各组CD4＋/CD8＋高,且BP组较MP组、VP组下降;对照组较肺炎各组Treg细胞水平低,BP组较MP组、VP组高;对照组较肺炎各组PCT有显著性差异,BP组患儿PCT水平均高于其他各组;对照组与肺炎各组PCT阳性率有显著性差异;BP组阳性率较其他各组升高.结论：CRP、PCT是小儿早期肺炎诊断鉴别的参考依据之一.小儿肺炎的发病机理中免疫损伤起到了一定的作用.     

Th17细胞和Treg细胞在尘肺病中的变化及其意义

目的：检测尘肺病患者外周血中Th17和Treg细胞比例的变化。方法收集2013年1-8月,江西省职业病防治研究院收治的尘肺病患者60例,其中尘肺病Ⅰ期、Ⅱ期组和Ⅲ期患者各20例,另取健康体检者20例作为对照组。用流式细胞仪检测Th17和Treg细胞的表达百分比。结果对照组、Ⅰ期组、Ⅱ期组和Ⅲ期组CD4＋IL17＋Th17细胞的比例分别为（1.31±0.42）％、（5.65±1.33）％、（8.86±2.88）％和（10.56±1.58）％;CD4＋CD25＋Treg细胞的比例分别为（3.57±1.32）％、（1.87±0.76）％、（0.82±0.53）％和（0.67±0.49）％。各组间差异经统计学分析均具有显著性差异。 Th17/Treg比值分别为（0.36±0.13）％、（3.02±0.95）％、（10.8±2.36）％和（15.76±1.23）％,各组间差异均具有统计学意义。相关性分析显示,Th17细胞比例与Treg细胞呈负相关（r＝-0.437,P〈0.05）。结论尘肺病患者中存在Th17细胞的升高和Treg细胞的降低,调控Th17/Treg细胞的失衡,可以成为尘肺病治疗的新思路。     

胸腺肽α1对脓毒症患者T细胞亚群的影响

目的研究胸腺肽α1对脓毒症患者T细胞亚群等免疫功能的影响。方法随机将脓毒症患者40例分为治疗组（n=20）和对照组（n=20）,对照组给予SSC（surviving sepisis campaign,SSC）经典治疗,治疗组则加用胸腺肽俚。治疗,疗程为7d。分别观察两组患者治疗前后APACHE Ⅱ评分、CRP、T细胞亚群CD3^＋、CO4^＋、CD8^＋、CO4^＋／CD8^＋比值、NK细胞百分率、淋巴细胞计数的变化。结果脓毒症治疗组治疗后APACHE Ⅱ评分及CRP下降,CD3^＋、CD4^＋上升,CD8^＋下降,CD4^＋／CD8^＋上升,NK细胞百分率和淋巴细胞计数上升,与治疗前以及对照组治疗后相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论胸腺肽α1可以改善脓毒症患者的免疫功能,调节炎症反应状态,有利于脓毒症的控制。     

强直性脊柱炎患者Th淋巴细胞功能的研究

目的:探讨辅助性T细胞(Th)Th1/Th2比例失衡及Th1/Th2细胞因子网络的异常在强直性脊柱炎(AS)发病机制中的作用。方法:利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定30例AS伴膝关节积液患者、20例正常对照血清及AS患者关节液中Th1/Th2型细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-10;应用三色流式细胞分析法(FCM)检测外周血Th细胞(CD3+CD4+)比例及其胞浆内Th1/Th2细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)和IL-4的表达;AS患者同时检测红细胞沉降率(ESR)及C-反应蛋白(CRP)。结果:(1)AS患者血清TNF-α和IL-10水平均明显高于正常对照组(P<0.01),AS患者关节液TNF-α水平高于血清水平(P<0.01),IL-10水平与血清中水平差异无统计学意义(P>0.05)。(2)AS患者外周血Th、Th2细胞(CD3+CD4+IL-4+)百分率与对照组差异无统计学意义(P>0.05),而Th1细胞(CD3+CD4+IFN-γ+)百分率及Th1/Th2比值高于对照组(P<0.01)。(3)AS患者血清中TNF-α的水平与ESR、CRP呈正相关(P<0.01或P<0.05);而IL-10水平、外周血Th1和Th2细胞百分率、Th1/Th2比值与ESR、CRP均无明显相关性(P>0.05)。结论:AS患者外周血存在Th1/Th2比例失衡,为Th1优势状态。Th1型细胞因子TNF-α在AS患者外周血及关节液中均呈现高水平表达。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在晚期肺癌中的表达及临床意义

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg细胞）在晚期肺癌中的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术分析30例晚期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达水平,与10例健康人比较。结果晚期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量增加（17．9±6．1）％,表达高于正常人（6．81±0．4）％（P〈0．001）。肺癌患者外周血中Treg细胞数量与患者的病理类型无关（P〉0．05）,但与临床分期和组织学分化程度有关（P〈0．01）。结论Treg细胞在肺癌患者中比率明显升高,并与临床进展有关。     

不同分期老年COPD患者外周血中CD4^＋ Foxp3^＋调节性T细胞变化及其与肺功能改变的相关性分析

目的 探讨不同分期老年慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者外周血中CD4^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Treg细胞）变化及其与肺功能改变的相关性。方法 老年COPD患者41例（实验1组）、同期定期随访的稳定期老年COPD患者46例（实验2组）、同期体检的37例健康人（对照组）,分别测定外周血中Treg细胞。结果 实验组和对照组FVC%prep、FEV1%prep、FEV1/FVC%、CD4^＋Foxp3^＋%差异均有统计学意义（P〈0.01）,CD4^＋CD25^＋%差异无统计学意义（P〉0.05）,外周血Treg细胞比例与FEV1%prep和FEV1/FVC%之间有相关性。结论 老年COPD患者调节性T细胞与肺功能改变有相关性。     

儿童慢性特发性血小板减少性紫癜T细胞亚群变化研究

目的：探讨儿童慢性特发性血小板减少性紫癜（idiopathicthrombocytopenicpurpura,ITP）T细胞亚群变化的具体情况及临床意义。方法：采用流式细胞仪分别检测30例儿童慢性ITP患者和15例健康儿童（对照组）的外周血CD4＋/CD8＋比值、天然杀伤细胞（naturalkillercell,NK细胞）计数、调节性T细胞（Treg细胞）计数,比较两组之间的差异。结果：慢性ITP组与对照组比较,CD4＋/CD8＋比值,CD16＋CD56＋NK细胞数,CD4＋CD25＋细胞/CD4＋细胞比值均降低,P均〈0.05。结论：CD4＋、CD8＋T细胞亚群改变,NK细胞减少,Treg细胞减少与儿童慢性ITP的发病有关。     

白细胞介素-27在强直性脊柱炎患者外周血的表达及其对CD4＋T细胞作用机制研究

目的 探讨白细胞介素-27（IL-27）在强直性脊柱炎（AS）患者外周血的表达及其对CD4＋T细胞的增殖分化作用机制.方法 分别收集AS患者、健康体检者（Health controls,HCs）的外周血,磁珠分离CD4＋T细胞.ELISA测定IL-27及其相关细胞因子的表达.IL-27体外作用后,CCK-8测定细胞增殖情况,定量PCR分析T-bet和GATA3基因表达情况.结果 AS患者外周血IL-27显著高于HCs组（P＜0.01）,IL-27作用后,AS组和HCs组CD4＋T细胞增殖能力均增强,AS组CD4＋T细胞增殖能力强于HCs组（t=12.1,P＜0.01）,同时AS组细胞培养液中IFN-γ在IL-27作用后较HCs组均显著增高（P＜0.01）,IL-2及IL-10表达无明显变化.IL-27诱导后AS组CD4＋T淋巴细胞T-bet基因表达显著增加（t=14.3,P＜0.01）,而GATA3差异无统计学意义.结论 IL-27在AS患者外周血表达升高,并可诱导CD4＋T细胞增殖,可能通过上调T-bet的表达诱导CD4＋T细胞向Th1分化,可能在AS免疫炎性反应过程中发挥重要作用.     

外周血T细胞亚群检测在恶性肿瘤中的价值

目的对外周血T细胞亚群检测在恶性肿瘤中的应用价值进行分析。方法恶性肿瘤患者154例作为观察组,同期体检健康者40例作为对照组,利用流式细胞技术分析两组受试者的外周血T细胞亚群。结果观察组CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋均显著低于对照组,CD8＋显著高于对照组（P〈0.05）。进一步分析可知,乳腺癌患者CD3＋、CD4＋水平明显高于其他恶性肿瘤患者（P〈0.05）。结论恶性肿瘤患者有明显的细胞免疫功能紊乱现象,外周血T细胞亚群检测对于恶性肿瘤患者的疾病诊断、病情评估及预后判断等方面均具有积极意义。     

雷帕霉素对TGF-β1诱导的Treg细胞的体外影响

目的体外观察雷帕霉素（Rapa）对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的CD4^＋CD25^＋Treg细胞（i Treg）扩增的有效性及其相关性。方法以抗原提呈细胞（APC）、植物血凝素（PHA,10μg·L^-1）、TGF-β1（7.5 ng·L^-1）联合刺激诱导CD4^＋CD25^-T细胞转化为CD4^＋CD25^＋Treg细胞,培养第5日添加不同浓度Rapa刺激培养3d作为实验组,设阴性对照组（不加Rapa）和空白对照组（RPMI 1640培养基）,FCM检测各组中CD4^＋CD25^＋T细胞比例变化情况;MTT法测定各组诱导细胞的抑制功能。结果①阴性对照组CD4＋CD25＋T细胞比例较空白对照组增高（P〈0.01）,而实验组CD4^＋CD25^＋T细胞比例显著升高,Rapa（100 ng·mL^-1）增殖效应显著（P〈0.01）,CD4^＋CD25^＋T细胞增殖比例达到42.6%;②实验组i Treg细胞能够明显抑制同型CD4^＋CD25^-T细胞的增殖（P〈0.01）且不同浓度Rapa之间存在差异,100 ng.mL^-1Rapa抑制效应最明显（P〈0.01）。结论在体外条件下,Rapa可以促进TGF-β1诱导分化的Treg细胞增殖,且具有免疫抑制功能,这为体外回输Treg细胞治疗疾病开辟了新途径。