COX-2、VEGF及TGFβ1在急性白血病的表达及其临床意义

目的:检测不同类型急性白血病(AL)患者在不同阶段的COX-2、VEGF、TGFβ1等指标的表达变化情况,分析各检测指标在AL的诊断、治疗及预后判断中的临床意义.方法:选择90例AL患者为研究对象,以该院体检中心健康体检者40例为正常对照,采用ELISA方法检测血清COX-2、VEGF及TGFβ1水平,并对AL患者进行治疗前、后两个不同阶段的动态检测.结果:(1)初诊时,AL组的血清COX-2及VEGF的表达量较正常对照组明显升高,而TGFβ1表达量较正常对照组明显降低(P＜0.001).(2)治疗前AML组血清VEGF、COX-2及TGFβ1水平与ALL组患者比较,无显著差异.(3)CR(完全缓解)时,与治疗前比较VEGF与COX-2水平明显下降,TGFβ1显著升高(P＜0.001).(4)治疗前血清VEGF及COX-2表达水平与骨髓原始加幼稚细胞数呈正相关,而TGFβ1表达水平与之呈负相关,VEGF、COX-2的水平均与TGFβ1呈负相关.结论:COX-2及VEGF在AL患者血清中含量显著增加,完全缓解后其水平显著下降,而血清TGFβ1明显减低,完全缓解后其水平明显升高,提示血管生成可能在AL的发生、发展中具有一定作用.因此,动态监测AL患者血清COX-2、VEGF及TGFβ1水平,可作为AL病情评估进展的重要参考指标.     

bFGF、TGFβ1在人皮肤病理性瘢痕不同时期的表达及意义

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）、转化生长因子β1（transforming growth fac-torβ1,TGFβ1）在病理性瘢痕不同时期中的表达情况,并探讨它们在瘢痕形成中的作用。方法：收集病理性瘢痕患者43例,应用免疫组化SP法检测其瘢痕组织及正常皮肤中bFGF、TGFβ1的表达并进行统计学分析。结果：瘢痕形成晚期的组织bFGF表达水平明显高于瘢痕形成早期,在增殖期瘢痕、成熟期瘢痕的表达显著低于正常皮肤组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。但在不同发生时期的瘢痕中,TGFβ1表达水平差异不明显（P〉0.05）,而在病理性瘢痕的表达明显高于正常皮肤组织（P〈0.05）。结论：bFGF可能是抑制瘢痕形成的重要因子;TGFβ1可能是瘢痕维持其形态和结构的主要内源性生长因子。     

转染NDRG1基因对宫颈癌细胞COX-2、VEGF表达及增殖的影响

目的： 通过研究人类N-myc下游调节基因1(N-myc downstream regulated gene 1,NDRG1)对人宫颈癌SiHa细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达及细胞增殖的影响,深入探讨NDRG1抑制宫颈癌侵袭转移的作用机制。方法： 经脂质体介导将含有NDRG1真核表达质粒转染人宫颈癌SiHa细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆及RT-PCR、蛋白质印迹鉴定;蛋白质印迹法检测阳性克隆细胞COX-2及VEGF表达的改变;噻唑盐（MTT）比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果： 成功建立高表达NDRG1的阳性SiHa细胞克隆（N-12）,并证实其COX-2和VEGF蛋白表达及细胞增殖活性均显著降低。结论： NDRG1可能通过下调宫颈癌细胞COX-2、VEGF的表达及抑制细胞增殖而起到抑制宫颈癌进展的作用。     

血管内皮生长因子与转化生长因子的协同作用诱导兔骨髓间充质干细胞分化

目的 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的协同作用对兔骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响及其可能机制.方法 将细胞分为4组:对照组、腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)-VEGF组、AAV-TGF-β1组和VEGF+ TGF-β1组.穿刺法抽取兔骨髓液,分离培养原代BMSCs,分别构建AAV-VEGF和AAV-TGF-β1腺病毒载体转染BMSCs,Western blot检测各组细胞中VEGF、TGF-β1的蛋白表达.流式细胞术检测细胞凋亡情况,CCK8法检测细胞增殖能力,Western blot检测髓核细胞标志SOX-9、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达,以及P38MAPK信号通路相关蛋白P38、MAPKAPK2和HSP27的表达.加入P38MAPK的特异阻滞剂SB203580预处理BMSCs,检测VEGF和TGF-β1对BMSCs增殖、凋亡、分化及相关蛋白表达的影响.结果 VEGF和TGF-β1可通过调节P38MAPK信号通路抑制BMSCs凋亡,促进BMSCs增殖,并向类髓核细胞分化,且在其协同作用下效果显著.抑制P38MAPK信号通路可反转VEGF和TGF-β1对BMSCs增殖分化能力的促进作用.结论 VEGF和TGF-β1的协同作用能增强BMSCs增殖和分化的能力,提高胶原蛋白和蛋白聚糖等细胞外基质的表达,从而促进退变椎间盘的修复和再生.     

hsa-miR-23a-3p靶向TGFβ2对急性淋巴细胞白血病CEM/C1细胞增殖、凋亡、侵袭及细胞骨架重组的影响

目的:探究hsa-miR-23a-3p靶向转化生长因子β2(TGFβ2)对急性淋巴细胞白血病细胞株CEM/C1增殖、凋亡、侵袭及细胞骨架重组的影响.方法:将CEM/C1细胞随机分为4组:Control组、mimic组、pcDNA-TGFβ2组和mimic+TGFβ2组,采用Li-pofectamine 2000分别转染mimic对照、miR-23a-3p mimic、TGFβ2过表达质粒及共转染miR-23a-3p mimic+TGFβ2过表达质粒.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-23a-3p、TGFβ2表达;荧光素酶报告实验验证miR-23a-3p与TGFβ2的靶向关系;克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭;微管形成实验检测细胞微管形成的结节数;Western blotting法检测 Ki67、Survivin、Caspase-3、Bax、Bcl-2、VEGF 蛋白表达.结果:与 Control 组相比,mimic 组miR-23a-3p表达、细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达量和Bax/Bcl-2比值升高,TGFβ2mRNA表达、克隆形成率、微管形成结节数及Ki67、Survivin、VEGF蛋白表达量降低,侵袭细胞数减少(均P＜0.05),pcDNA-TGFβ2组与mimic组各指标变化相反(均P＜0.05);与pcDNA-TGFβ2组比较,mimic+TGFβ2组克隆形成率、微管形成结节数和Ki67、Survivin、VEGF蛋白表达量降低,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达量及Bax/Bcl-2比值升高,侵袭细胞数减少(均P＜0.05).荧光素酶报告实验证实miR-23a-3p和TGFβ2存在靶向关系.结论:hsa-miR-23a-3p通过靶向下调TGFβ2表达抑制人白血病细胞增殖、侵袭、细胞骨架重组,促进细胞凋亡.     

佛波酯对促进人绒毛膜癌AJR细胞侵入机制的研究

目的：探讨佛波酯（PMA）是否通过改变细胞因子的生成而影响滋养细胞的侵袭性。方法：用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测人绒毛膜癌JAR细胞与侵袭力调节有关的多种细胞因子基因表达的变化。结果：JAR细胞表达肝细胞生长因子（HGF）、胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF－Ⅱ）、转化生长因子β（TGF-β）、白细胞介素1β（IL－1β）和血管内皮生长因子（VEGF），且VEGF的表达以VEGF121和VEGF165为主，而不表达IGF－I。100nmol/L PMA处理细胞24h可显著上调IL－1β、HGF、IGFⅡ mRNA的表达，同时抑制TGF－β2、TGF－β3 mRNA的表达，而对TGF－β1、VEGF mRNA的表达未见有明显变化。结论：HGF、IL－1β、IGF－Ⅱ对滋养细胞的侵入起促进作用，而TGF－β2、TGF－β3具有抑制效应。说明丝裂原PMA可能通过调节这几种细胞因子的自分泌机制，从而增强JAR细胞的侵袭能力。     

祛瘀消斑胶囊和辛伐他汀对动脉粥样硬化生长因子和MMP1 mRNA表达的影响

目的：观察祛淤消斑胶囊和辛伐他汀对动脉粥样硬化生长因子和基质金属蛋白酶1(collagen I matrix metalloproteinase 1，MMP1)及其组织抑制物1(tissue inhibitor 1，TIMP1)表达的影响。方法：对实验性动脉粥样硬化兔，分别给予辛伐他汀和中药祛淤消斑胶囊治疗12周，应用免疫组化和逆转录 多聚酶链反应观察动脉粥样硬化碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF β1）、胶原I、MMP 1及TIMP 1的表达。结果：2种药物均可显著降低兔血脂，辛伐他汀效果更强；2种药物均可显著消退动脉粥样硬化；药物治疗组bFGF、TGF β1、胶原I、MMP 1的mRNA表达水平均下降，其中辛伐他汀组的bFGF表达差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：2种药物均有消退动脉粥样硬化的作用, 药物通过减少生长因子和MMP 1的表达，相对减少MMP 1／TIMP1表达比例，起到稳定斑块的作用。     

人参三七组方对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子分泌及其受体2表达的影响

目的：探讨益气活血中药人参三七组方对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体2（vascular endothelialgrowth factor receptor-2,VEGFR-2）表达的影响。方法：体外培养HUVEC,分为高剂量人参三七组方（0.4 mg/mL）组、中剂量人参三七组方（0.2 mg/mL）组、低剂量人参三七组方（0.1 mg/mL）组,另设碱性成纤维细胞生长因子（bovine basic fibroblast growth factor,bFGF,320 U/mL）阳性对照组和只加培养液的空白对照组。酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中的VEGF含量,免疫细胞化学法检测VEGFR-2阳性细胞数及其光密度值,蛋白印迹法检测VEGFR-2蛋白的表达。结果：与空白对照组比较,高剂量人参三七组方组和bFGF组细胞上清液中VEGF含量增加（P〈0.05）,VEGFR-2阳性细胞数及光密度值增加,细胞中VEGFR-2蛋白表达增强。结论：促进HUVEC分泌VEGF和表达VEGFR-2可能是人参三七组方促血管生成的基础。     

健脾解毒方通过抑制环氧化酶2下调幽门螺杆菌诱导的人胃癌细胞血管内皮生长因子表达

目的：探讨健脾解毒方对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）感染胃癌细胞诱导的血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的调控作用及可能的机制。方法：采用Hp标准株NCTC11637与人胃癌MKN45细胞共培养的方法感染MKN45细胞,实验中共分7组：对照组、Hp感染组、NS398抑制组、空白血清组和5%、10%、20%健脾解毒方药物血清组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测Hp感染对人胃癌MKN45细胞VEGF和环氧化酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）mRNA表达的影响及健脾解毒方血清对Hp感染诱导的人胃癌MKN45细胞VEGF和COX-2mRNA表达的影响;采用COX-2特异性抑制剂NS398（50μmol/L）抑制COX-2的表达后,检测Hp感染后人胃癌MKN45细胞VEGF mRNA表达的变化。结果：与对照组比较,Hp感染MKN45细胞6h后,Hp感染组COX-2mRNA的表达明显上调（P〈0.01）;感染12h后,VEGF mRNA表达亦明显上调（P〈0.01）;而采用COX-2特异性抑制剂NS398抑制COX-2表达后,Hp感染组VEGF mRNA的表达相比抑制前明显下调（P〈0.01）。与Hp感染组比较,5%、10%和20%健脾解毒方药物血清均可下调Hp诱导的人胃癌MKN45细胞VEGF和COX-2mRNA的表达,并呈一定的剂量依赖效应。结论：Hp感染可诱导人胃癌细胞VEGF和COX-2表达,健脾解毒方通过下调COX-2表达进而下调VEGF的表达,这可能是其防治胃癌的重要作用机制之一。     

环氧化酶-2和血管内皮生长因子在急性白血病中的表达及意义

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在急性白血病细胞中的表达及其意义.方法 将58例入选患者按免疫分型分为:急性白血病组(AL)、急性髓细胞性白血病组(AML)、急性淋巴细胞性白血病组(ALL)和缓解组,选取25例患者作为对照组,应用免疫组化法检测COX-2和VEGF在急性白血病细胞中的表达.结果 (1)在急性白血病细胞中COX-2、VEGF的表达与对照组及缓解组差异有统计学意义(P<0.05).缓解组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);(2)COX-2和VEGF在急性白血病细胞中的表达呈正相关(r=0.726,P<0.05).结论 COX-2、VEGF在急性白血病细胞中均为高表达,COX-2与VEGF的表达可能有协同作用,共同促进肿瘤血管生成,在白血病的发生、发展过程中可能发挥重要作用.     

急性髓细胞白血病患者环氧化酶-2与骨桥蛋白表达的意义及相关性研究

目的：探讨环氧化酶-2 （COX-2）与骨桥蛋白（OPN）在急性髓细胞白血病患者中的表达及二者的相关性.方法：采用免疫酶联法（ELISA）检测34例初发未治急性髓细胞白血病患者不同时期的78份标本,以及20例健康对照组外周血中COX-2及OPN的表达情况.结果：在急性髓细胞白血病（AML）初发未治组、未缓解组、复发组患者外周血中COX-2及OPN的表达水平高于正常对照组和完全缓解组（P＜0.05）;正常对照组与完全缓解组患者表达无统计学差异（P＞0.05）;COX-2及OPN在未治组、未完全缓解组及复发组患者外周血中的表达情况,每二者之间表达无统计学意义（P＞0.05）;COX-2及OPN在AML患者中的表达正相关（P＜0.05）.结论：COX-2及OPN的高表达可能与AML的发生发展相关.因此检测COX-2及OPN的表达水平对AML患者的早期诊断、监测疗效、预测复发和评价预后具有一定意义.     

TGF-β/Smads信号转导通路与脑胶质瘤的研究进展

转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)是一种多功能多肽类细胞因子,构成一组调节细胞生长和分化的蛋白质家族,是正常或疾病状态下组织平衡发展和维持的基础[1],它能够有效抑制大部分类型细胞的增殖,如上皮细胞、内皮细胞、造血细胞和淋巴细胞等[2],是一种强效的增殖抑制剂,并被认为是一种肿瘤抑制因子。最近发现,肿瘤患者血清和组织中的TGF-β表达随着肿瘤的恶性程度明显升高,提示TGF     

肝硬化患者血浆表皮生长因子和转化生长因子β1的表达

肝硬化常表现为胆小管增生和肝脏纤维化，多种细胞因子参与了此过程，其中表皮生长因子（epi-dermal growth factor,EGF）与转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGFβ1）和肝细胞的生长、再生及肝脏胶原纤维合成密切相关。本文通过检测肝硬化患者血浆EGF及TGFβ1的表达水平，以探讨其临床意义。     

血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子在喉癌细胞Hep-2中的表达

目的研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)在喉癌细胞Hep-2中的表达,及其与喉癌细胞生长、浸润及转移的关系。方法培养Hep-2和正常永生化表皮细胞HaCaT,提取总细胞RNA,应用逆转录聚合酶链反应检测VEGF mRNA和bFGF mRNA在Hep-2和HaCaT细胞中的表达。结果VEGF mRNA在Hep-2细胞中高表达,平均相对积分吸光度值为(0.839±0.063);VEGF mRNA在HaCaT细胞中低表达,平均相对积分吸光度值为(0.305±0.066),差异有极显著性意义(t=14.94,P<0.01)。bFGF mRNA在Hep-2细胞中高表达,平均相对积分吸光度值为(0.792±0.058);bFGF mRNA在HaCaT细胞中低表达,平均相对积分吸光度值为(0.296±0.049),差异有极显著性意义(t=17.54,P<0.01)。结论VEGF及bFGF与喉癌细胞的生长、浸润及转移有密切关系。     

塞来昔布对急性白血病原代细胞增殖及血管新生的影响

目的探讨塞来昔布对急性白血病原代细胞增殖的影响。方法采用MTT法检测塞来昔布对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用,采用免疫组化法检测塞来昔布作用急性白血病原代细胞后血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子-β(TGF-β)的表达情况。结果塞来昔布能显著抑制急性白血病原代细胞的增殖,免疫组化结果可见实验组VEGF、bFGF的阳性率较对照组均显著降低;但TGF-β阳性率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论塞来昔布能有效抑制急性白血病原代细胞分泌VEGF、bFGF,抑制白血病原代细胞的生长和增殖,其机制可能与抑制白血病血管新生有关。     

紫外线照射对血管内皮细胞的损伤效应

目的探究不同剂量紫外线照射对人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）的细胞形态、细胞凋亡率、活性氧（reactive oxygen species,ROS）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和碱性成纤维生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）的影响。方法实验分正常组和3个不同剂量辐照组,辐照组分别采用10J·m^-2、20J·m^-2、40J·m^-2紫外线照射血管内皮细胞,通过流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测各组细胞凋亡率,荧光试剂盒检测ROS的水平和酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定VEGF和bFGF的含量。结果与正常组相比,细胞经不同剂量紫外照射24 h后,细胞凋亡率随着照射剂量的增加而升高;ROS、VEGF、bFGF的含量随着照射剂量的增加而升高。结论紫外照射对血管内皮细胞有一定程度的损伤效应,可能与诱导细胞凋亡,释放ROS和激活VEGF和bFGF有关。     

环氧合酶-2与胃癌新生血管形成的关系

目的：观察环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在正常胃黏膜组织、癌旁组织和胃癌组织中的表达,探讨COX-2与胃癌发生发展过程中新生血管形成的关系。方法：采用SP免疫组化方法检测42例正常组织、66例癌旁组织和66例胃癌组织中COX-2和VEGF的表达,以CD34标记血管内皮,测定微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：正常胃黏膜组织→癌旁组织→胃癌组织中,COX-2、VEGF的表达和MVD呈逐渐上升趋势,差异具有统计学意义（P〈0．01）,三者的表达具有一致性。MVD值与COX-2的表达呈正相关。结论：COX-2在胃癌发生发展过程中促进新生血管的生成。     

急性髓细胞白血病患者血清VEGF测定及其临床意义

目的观察急性髓细胞白血病(AML)患者血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平及临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)对36例初治、18例复发AML患者,及20例正常献血员血清VEGF表达水平进行检测。结果36例初治、18例复发AML患者血清VEGF水平分别为(779.0±214.51)ng/L,(792.15±169.72)ng/L,二者相近(P>0.05),正常对照组(128.25±30.47)ng/L(P<0.01)。初治组经诱导化疗后达到完全缓解(CR)的患者血清VEGF水平为(532.24±25.72)ng/L与治疗前比较有明显降低(P<0.01),但仍高于正常对照组(P<0.01)。结论血管内皮生长因子在刺激AML细胞增殖、迁移中发挥重要作用,观察AML患者血清VEGF水平对预测AML的复发具有临床意义。     

胰岛素样细胞生长因子-1、碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子α对人表皮干细胞增殖的影响

目的 表皮干细胞是组织工程化皮肤的"种子细胞".文中研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、胰岛素样细胞生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)和转化生长因子α(transforming growth factor α,TGFα)对人表皮干细胞增殖的影响.方法 采用两步酶消化法和Ⅳ型胶原差速贴壁相结合的方法获得人原代表皮干细胞,将表皮干细胞分为A组(K-SFM)、B组(K-SFM+bFGF)、C组(K-SFM+IGF-1)及D组(K-SFM+TGFα)进行培养.比较不同组之间表皮干细胞的克隆形成率、生长增殖、生长曲线和细胞周期等指标.结果 B组、C组及D组培养的表皮干细胞在细胞增殖、细胞克隆率方面检测结果均明显高于A组(P<0.05);流式细胞仪检测B组、C组与A组及D组处于G0/G1细胞比例比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 IGF-1、bFGF及TGF-α均对表皮干细胞的增殖有促进作用,IGF-1及bFGF对表皮干细胞表型的维持有较好的作用.     

血管内皮生长因子对胃黏膜损伤保护及中医药研究进展

新生血管生成需要细胞细胞、细胞基质的相互作用,并有多种因子参与调节.参与调节血管生成的因子分为促血管生成因子和抗血管生成因子两类.其中促血管生成因子主要包括bFGF、 PDGF、TNFα、TGFβ、IFGβ、EGF、HGF等.血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF) 又称为血管渗透因子(vascular permeability factor,VPF)是1989年Leung等[1] 从牛垂体滤泡星状细胞的体外培养液中首先纯化出来并命名的.VEGF能通过其受体特异性作用于血管内皮细胞,促进其增殖,形成新生血管,增加血管通透性.现已证实,VEGF是唯一对血管形成具有特异性的重要生长因子,是目前己知最强的血管生成促进因子,且对血管内皮细胞有特殊的专一性[2] .