转录因子Klf2和Nrf2/Bach1调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶在气道上皮细胞中的作用

目的通过研究锌指Krüppel样转录因子2（Klf2）及红系衍生核因子相关因子2（Nrf2）/BTB-CNC异体同源体1（Bach1）在经香烟烟雾提取物（CSE）刺激的大鼠气道上皮细胞中的表达,了解其感受氧化应激对靶基因γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）的调控作用。方法采用酶消化法提取大鼠原代气管-支气管上皮细胞,并用10%CSE干预细胞6 h,收集细胞,双酶法检测γ-GCS活性;通过免疫细胞化学法观察Nrf2/Bach1的核转位;采用Western blot和RT-PCR技术研究细胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表达。结果大鼠气管-支气管上皮细胞经CSE诱导后其γ-GCS活性明显增高。免疫细胞化学结果显示Nrf2经CSE刺激后出现由核外向核内的转位,Bach1经CSE刺激后出现由核内向核外的转位。Western blot结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白水平较对照组显著升高（P〈0.05）;RT-PCR结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS mRNA水平较对照组显著升高（P〈0.05）。直线相关分析表明γ-GCS蛋白表达与Klf2、Nrf2、Bach1呈正相关（P〈0.05）。结论 CSE可能通过转录因子Klf2、Nrf2、Bach1调节γ-GCS的表达。     

泄浊解毒、活血通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏MMP-9／TIMP-1表达的调节作用

目的泄浊解毒、活血通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏MMP-9／TIMP-1影响的实验研究。方法予高糖高脂饲料喂养,并一次性予大鼠腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）（35mg／kg）,建立糖尿病模型。将成模大鼠随机分成中药组、厄贝沙坦组、中药＋厄贝沙坦组、模型组,并设立正常对照组,治疗16周。用免疫组化法检测MMP-9、TIMP-1在肾脏的表达。结果泄浊解毒、活血通络中药可抑制糖尿病大鼠肾组织TIMP-1的表达、上调。肾组织MMP-9的表达,促进细胞外基质的降解而拮抗糖尿病肾病肾小球硬化,减轻肾脏慢性损伤,延缓糖尿病肾病（diabetic nephropath）进一步发展。结论泄浊解毒、活血通络中药可能通过影响糖尿病大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1的表达而起到保护糖尿病大鼠肾脏的作用。     

厄贝沙坦对慢性高原病大鼠肺组织损伤的改善作用

目的：研究厄贝沙坦对慢性高原病大鼠肺组织损伤的改善作用。方法测定平原对照组（CG）、模型组（MG）、阳性对照组（NE）、厄贝沙坦低剂量组（I.L）、厄贝沙坦中剂量组（I.M）及厄贝沙坦高剂量组（I.H）的肺动脉压、血清学指标（NO、ET-1）、肺组织匀浆中MDA含量、SOD与GSH-Px活性以及观察肺组织病理切片的改变。结果厄贝沙坦可使高原模型组大鼠肺组织匀浆中MDA含量下降并使SOD与GSH-Px活性有所提高;以及使高原模型组大鼠血清中NO含量升高及ET-1含量下降。各组中以厄贝沙坦高剂量效果较优。结论厄贝沙坦可改善大鼠处于慢性低压缺氧下导致的肺组织损伤。     

参芪补肺方对慢性阻塞性肺疾病稳定期大鼠Nrf2和γ-GCS表达的影响

目的探讨参芪补肺方对大鼠肺组织红系衍生核因子相关因子-2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(gamma-glutamylcysteines-ynthetase,γ-GCS)的mRNA及蛋白表达水平的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、富露施组,每组各10只。除空白组外,其余3组均采用香烟烟雾熏制和经鼻给予脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)制作慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠模型,且给予相应干预,连续灌胃30 d。于第38天对大鼠进行麻醉并提取肺组织,通过RT-PCR法检测Nrf2和γ-GCS的mRNA表达水平,通过免疫组化法、Western blot法检测Nrf2和γ-GCS蛋白表达水平。结果中药组、富露施组大鼠Nrf2、γ-GCS的mRNA和蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05);中药组大鼠Nrf2、γ-GCS的mRNA和蛋白表达与富露施组组间比较差异无统计学意义(P0.05),疗效相当。结论参芪补肺方能够通过降低Nrf2、γ-GCS的mRNA及蛋白的表达,减轻COPD大鼠的氧化应激反应。     

PGC-1α与Nrf2协同调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶对大鼠COPD的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（PGC-1α）和红系衍生的核因子相关因子2（Nrf2）对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）表达的调控及其在COPD中的作用和意义。方法24只大鼠随机分为COPD组和对照组。COPD组用每日熏香烟和两次气管内滴入脂多糖（LPS）的方法制作COPD模型。观察大鼠的肺组织病理学改变,检测肺功能指标;应用免疫组化、Westernblot、原位杂交和逆转录-聚合酶链反应检测肺组织中PGC-1α、Nrf2和γ-GCS的蛋白及mRNA表达情况。结果COPD组的肺功能指标（FEV0.3、FEV0.3／FVC、PEF）和光镜下COPD组肺组织病理变化符合COPD的特征性改变。PGC-1α、Nrf2mRNA在两组大鼠肺组织中均有表达,且与γ-GCSmRNA的表达部位基本一致;PGC-1α、γ-GCS蛋白及mRNA表达在COPD组均显著高于对照组（P均〈0．05）;Nrf2蛋白表达在COPD组较对照组显著增高（P〈0．01）,而Nrf2mRNA在两组表达无明显差异（P〈0．05）。相关性分析显示PGC-1α蛋白与Nrf2蛋白及mRNA表达均呈正相关（r值分别为0．775和0．515,P均〈0．01）,PGC-1α、Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白（r值分别为0．531和0．575,P均〈0．01）及mRNA表达（r值分别为0．616和0．634,P〈均0．01）均呈正相关。结论PGC-1α可能作为Nrf2的辅激活因子,通过辅助激活Nrf2,上调γ-GCS的基因表达;PGC-1α和Nrf2可能通过一个共同通路协同上调γ-GCS的基因表达,从而改善COPD的氧化／抗氧化失衡。     

左卡尼汀对肾脏缺血再灌注损伤中Nrf2和γ-GCS表达影响

目的研究左卡尼汀对大鼠肾脏缺血再灌注损伤中核因子相关因子2(Nrf2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组及治疗组。缺血再灌注组及治疗组建立肾脏缺血再灌注损伤模型,治疗组在缺血再灌注损伤模型建立前后尾静脉注射左卡尼汀2mL。假手术组不行缺血再灌注处理。再灌注6h后处死大鼠,取血检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及胱抑素C(Cys C)的水平,并测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。应用RT-PCR及Western-blot方法检测肾组织中Nrf2和γ-GCS的表达水平。结果治疗组Cr、BUN、Cys C及MDA水平显著低于缺血再灌注组,SOD活性显著高于缺血再灌注组(F=8.58～57.42,q=4.06～11.26,P<0.05);与假手术组相比,缺血再灌注组肾组织中Nrf2、γ-GCSmRNA及蛋白表达水平显著升高,而治疗组肾组织中上述指标较缺血再灌注组显著增高(F=143.53～241.64,q=3.76～13.51,P<0.05)。结论左卡尼汀可减轻肾脏缺血再灌注损伤,其机制可能为通过激活Nrf2-ARE通路进而诱导γ-GCS的表达而实现的。     

人参皂苷通过Nrf2/ARE信号通路干预波动性高糖致内皮细胞损伤的作用机制研究

目的 观察人参皂苷通过调控Nrf2/ARE信号通路,对波动性高糖所致内皮细胞损伤的影响,探讨人参皂苷起保护作用的部分机制。 方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为对照组、波动性高糖模型组及人参皂苷低中高剂量治疗组。Western blot检测NF-E2相关因子2(Nrf2)的核转位及下游抗氧化蛋白血红素加氧酶-1(HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和醌氧化还原酶(NQO1)的表达;RT-PCR检测下游抗氧化蛋白HO-1、γ-GCS和NQO1的mRNA表达。瞬时转染Nrf2siRNA质粒, Western blot检测Nrf2总蛋白和核蛋白表达,及下游HO-1、γ-GCS和NQO1蛋白的表达。 结果 人参皂苷治疗后,HUVECs中的Nrf2核蛋白及下游抗氧化蛋白HO-1、γ-GCS和NQO1的表达均明显增强。瞬时转染Nrf2siRNA质粒后,人参皂苷的治疗作用消失。 结论 人参皂苷通过促进Nrf2核转位,调控Nrf2/ARE信号通路发挥其抗波动性高糖所致内皮细胞损伤的氧化应激损伤作用。     

人参皂苷对波动性高血糖大鼠肾脏Nrf2/ARE信号通路的影响

[目的]探讨人参皂苷对波动性高血糖大鼠肾脏氧化应激及转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)/应答元件(ARE)信号通路的影响。[方法]实验以32只雄性SD大鼠为研究对象,分为正常对照组(NC组,n=8只)和波动性高糖模型组(n=24只),高脂饲料喂养模型组2周后,链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg腹腔注射诱导建立糖尿病大鼠模型,错时注射葡萄糖和胰岛素,建立血糖波动组模型,2周后,将波动性高糖模型组随机分为3组,分别为波动性高血糖组(FHG组,n=8),人参皂苷低剂量组(LG组,n=8),人参皂苷高剂量组(HG组,n=8)。予人参皂苷低高剂量[14、56mg/(kg·d)]干预相对应的模型组8周后,切取肾脏组织,用蛋白免疫切迹方法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测血红素加氧酶-1(HO-1)、Nrf2、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)蛋白及m RNA表达。[结果]与NC组相比,FHG组Nrf2的蛋白及m RNA的表达明显增加(P0.05),而HO-1、γ-GCS的表达明显降低(P0.05);但人参皂苷治疗后,LG组及HG组HO-1、γ-GCS、和Nrf2蛋白及m RNA表达明显增高(P0.05)。[结论]人参皂苷能够进一步促进波动性高糖状态下Nrf2下游HO-1、γ-GCS蛋白及m RNA表达,增加抗氧化蛋白的含量,提高机体的抗氧化应激能力,对波动性高糖所致的肾脏损伤有一定的保护作用。     

人参皂苷对波动性高糖所致内皮细胞损伤的作用及机制研究

目的观察人参皂苷对波动性高糖所致内皮细胞损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为对照组、波动性高糖模型组及人参皂苷低中高浓度组(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL)。Western blot检测NF-E2相关因子2(Nrf2)的核转位及下游抗氧化蛋白血红素加氧酶-1(HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和醌氧化还原酶(NQO1)的表达;RT-PCR检测下游抗氧化蛋白HO-1、γ-GCS和NQO1的m RNA表达;Western blot检测瞬时转染Nrf2 si RNA质粒后Nrf2总蛋白和核蛋白及下游HO-1、γ-GCS和NQO1蛋白的表达。结果人参皂苷治疗后,HUVECs中的Nrf2核蛋白及下游抗氧化蛋白HO-1、γ-GCS和NQO1表达均明显增强(P0.05)。瞬时转染Nrf2 siRNA质粒后,人参皂苷的治疗作用消失。结论人参皂苷通过促进Nrf2核转位,调控Nrf2/ARE信号通路发挥其抗波动性高糖所致内皮细胞损伤的氧化应激损伤作用。     

厄贝沙坦对高糖诱导胰岛NIT-1细胞Caspase-3 mRNA表达及凋亡的影响

目的：观察厄贝沙坦对高糖诱导胰岛 NIT-1细胞Caspase-3 mRNA 表达及凋亡的影响。方法将对数生长期胰岛NIT-1细胞分为空白对照组（A组）,高糖组（25 mmol／L）（B组）,高糖加厄贝沙坦（0．1 mmol／L）组（C组）,厄贝沙坦（0．1 mmol／L）培养24 h后加高糖培养组（D组）,各组细胞分别培养48 h。通过Hochest 33342荧光染色观察各组细胞形态,反转录聚合酶链反应（ RT-PCR）技术检测各组细胞Caspase-3 mRNA的表达。结果 Hochset 33342荧光染色结果：A组细胞呈均匀弥漫性蓝光着色,B组细胞呈不均匀强蓝光着色,可见细胞核浓缩和细胞碎片,C组和D组大部分细胞着色与A组细胞一致,少数呈不均匀强荧光蓝色减少。 RT-PCR结果：B组Caspase-3 mRNA表达量高于A、C、D组（P＜0．05）,A、C 、D组间比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论高糖可诱导胰岛 NIT-1细胞凋亡;厄贝沙坦可降低Caspase-3 mRNA表达量,减少细胞凋亡,在体外,对高糖诱导胰岛NIT-1细胞可能具有一定的保护作用。     

miR-455-3p在糖尿病肾脏疾病大鼠肾小球硬化过程中的作用及厄贝沙坦的干预研究

目的：研究miR-455-3p在糖尿病肾脏疾病（Diabetic kidney disease, DKD）大鼠肾小球硬化过程中的作用,以及厄贝沙坦的干预对miR-455-3p及肾小球硬化过程的影响。方法：取雄性SD大鼠24只,随机取6只作为正常组（Control组）,余大鼠采用高脂高糖饲料喂养及链脲佐菌素（STZ）腹腔注射制备DKD模型,造模成功后随机分为模型组（STZ组）、过表达miR-455-3p组（STZ+miR-455-3p组）、厄贝沙坦干预组（STZ+厄贝沙坦组）。其中,STZ+miR-455-3p组在STZ注射后第二周和第五周以20mg/kg的剂量腹腔注射miR-455-3p 激动剂（miR-455-3p agomir）,STZ+厄贝沙坦组予50mg/kg的厄贝沙坦悬浊液灌胃,其他组予等剂量生理盐水灌胃,12周后记录大鼠24h尿量、24h尿白蛋白水平,采用qRT-PCR法检测各组大鼠血清及肾组织中miR-455-3p的表达水平,PAS染色法观察大鼠肾组织病理改变,Western blot方法检测肾组织中胶原蛋白I（Collagen I）和增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen ,PCNA）蛋白表达水平。结果：（1）STZ+miR-455-3p及STZ+厄贝沙坦组大鼠24h尿量、24h尿白蛋白水平较之STZ组明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;（2）STZ+miR-455-3p及STZ+厄贝沙坦组大鼠血清及肾组织中miR-455-3p表达水平较之STZ组明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;（3）STZ+miR-455-3p及STZ+厄贝沙坦组大鼠肾组织中Collagen I、PCNA表达水平较STZ组明显减少。结论：miR-455-3p参与DKD进程,可能是DKD治疗的新靶点,而厄贝沙坦能够通过调控miR-455-3p延缓DKD肾小球硬化进程。     

蒿鳖养阴软坚方通过Nrf2/γ-GCS信号转导通路抑制酒精性肝纤维化作用及其机制

目的:研究不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方对肝纤维化大鼠肝组织中Nrf2/γ-GCS信号转导通路的影响,探讨不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方对大鼠肝纤维化的治疗作用。方法:健康Wistar 大鼠随机分为8组:正常组、模型对照组、先水后醇60%提取方案组(0.09 mg.kg^-1.d^-1)、先水后醇95%提取方案中、高剂量组(2.59 g.kg^-1.d^-1、8.2 g.kg^-1.d^-1)、水提醇沉中、高剂量组(2.59 g.kg^-1.d^-1、8.2 g.kg^-1.d^-1)及复方鳖甲软肝片组(0.09 mg.kg^-1.d^-1),每组10只大鼠。酒精性肝纤维化大鼠模型制备成功后,各组按相应药物剂量分别开始治疗,正常组和模型组给予同体积蒸馏水,每日1 次,造模10周后处死大鼠,留取标本。酸水解法测定肝组织中胶原蛋白含量; Western blotting 检测肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白的表达;光镜观察肝组织免疫组化染色结果。结果:(1) 肝组织中羟脯氨酸含量:与正常组比较,模型组大鼠肝组织胶原蛋白含量增高 (P<0.01);与模型组比较,先水后醇60%提取方案组、先水后醇中、高剂量组以及复方鳖甲软肝片组大鼠肝组织胶原含量均降低 (P<0.05)。(2) 肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白的表达:与正常组比较,模型组大鼠肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白表达增高 (P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白表达增高 (P<0.01)。(3) 肝组织免疫组化染色结果: 模型组的Nrf2和γ-GCS蛋白主要在细胞浆中表达,各用药组Nrf2和γ-GCS蛋白均多数在细胞浆和细胞核中表达,汇管区附近也有所表达,但表达量不及胞浆和胞核。结论:提取工艺优化后的蒿鳖养阴软坚方可能通过上调肝组织Nrf2/γ-GCS信号转导通路,增加Nrf2蛋白和γ-GCS蛋白的表达,降低大鼠肝组织肝纤维化程度从而发挥抗肝纤维化的作用。     

缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肾脏转录因子Nrf2表达的影响

目的:研究缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肾脏转录因子红细胞系-2相关因子2(Nrf2)表达的影响,探讨Nrf2在缺血-再灌注中的作用及其意义。方法:SD大鼠30只分三组:假手术C组、缺血-再灌注(I-R)组、缺血后处理(IPO)组。于再灌注2h处死大鼠,取血检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及胱抑素C(Cys C)的水平,并测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。应用RT-PCR及Western-blot方法定量分析Nrf2,血红素氧合酶1(H0-1),y-谷氨酞半肤氨酸合成酶(-GCS)蛋白在肾组织中的表达。结果:IPO组肾组织Cr,BUN,Cys C及MDA水平显著低于缺血再灌注组,SOD活性显著高于缺血再灌注组,Nrf2,H0-1,γ-GCS蛋白在肾组织中的表达明显增多。结论:缺血后处理可能通过提高Nrf2在肾组织中的表达增多避免加重肾缺血再灌注损伤。     

厄贝沙坦联合瑞舒伐他汀影响冠心病大鼠心肌及主动脉干s分泌型磷脂酶表达的实验研究

目的观察厄贝沙坦联合瑞舒伐他汀对冠心病大鼠心肌及主动脉干s分泌型磷脂酶A2-V（sPLA2-V）的影响。方法将50只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组、瑞舒伐他汀组及厄贝沙坦联合瑞舒伐他汀组（联合用药组）。采用喂饲高脂饲料和腹腔注射脑垂体后叶素方法制备冠心病大鼠模型。免疫组化及Western blot测定各组大鼠心肌及主动脉干sPLA2-Ⅴ的表达。结果模型组大鼠心肌及主动脉干sPLA2-Ⅴ的表达显著高于其他各组（P〈0.05）,联合用药组sPLA2-Ⅴ的表达均显著低于厄贝沙坦组及瑞舒伐他汀组（P〈0.05）。结论厄贝沙坦联合瑞舒伐他汀可能通过抑制心肌及主动脉干sPLA2-Ⅴ的表达起到抗动脉粥样硬化治疗冠心病作用,可作为心血管疾病高危人群的一级预防。     

褐藻素通过调控Nrf2/Keap1通路缓解糖尿病大鼠心肌肥大

目的 探索褐藻素（FX）对糖尿病心肌病的保护效应和作用机制。方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,进行分组：糖尿病组（DM）、褐藻素干预糖尿病组（DM+FX）和二甲双胍干预糖尿病组（DM+Met）,另取正常大鼠给予正常喂养作为正常组（Con）。造模成功后连续12周每日灌胃给药,褐藻素组每日给予200 mg/kg褐藻素灌胃,二甲双胍组每日给予230 mg/kg灌胃,糖尿病组同步灌胃生理盐水。HE染色观察各组大鼠心脏细胞肥大情况;Western blot法检测大鼠心脏中纤维化蛋白TGF-β1和FN蛋白表达水平。H9C2细胞分为3组：正常糖组（NG,5.5 mmol/L葡萄糖）、高糖组（HG,45 mmol/L葡萄糖）和褐藻素干预高糖组（HG+1 μmol/L FX）。FITC标记的鬼笔环肽检测大鼠心肌细胞H9C2表面积变化;qRT-PCR法测定各组细胞肥大因子ANP、BNP和β-MHC基因表达变化;Western blot法检测各组大鼠心脏组织和H9C2细胞中Nrf2、Keap1、HO-1、SOD1蛋白表达水平;DCFH-DA探针检测细胞内活性氧水平变化。结果 褐藻素改善糖尿病大鼠心肌纤维化和心肌细胞肥大,同时上调心脏组织中Nrf2和HO-1蛋白表达,抑制Keap1蛋白表达（P<0.05）。褐藻素可抑制高糖诱导H9C2心肌细胞表面积增加,降低ANP、BNP和β-MHC的mRNA表达水平（P<0.05）。褐藻素可促进高糖诱导的H9C2细胞中Nrf2入核,上调下游靶蛋白SOD1和HO-1蛋白表达（P<0.05）来增强细胞抗氧化能力,降低细胞内活性氧的水平。结论 褐藻素具有良好的抗糖尿病心肌纤维化和心肌细胞肥大作用,同时上调Nrf2信号通路并促进下游抗氧化蛋白SOD1和HO-1的表达,降低活性氧水平。     

补肾化痰祛瘀法对血管性痴呆大鼠认知功能的保护作用

目的研究补肾化痰祛瘀方对血管性痴呆（VaD）大鼠认知功能的改善作用。方法在缺糖缺氧培养条件下,观察补肾化痰祛瘀方血清对体外培养的海马神经元的保护作用。用双侧颈总动脉永久性结扎法（2VO）制备VaD大鼠模型,造模前予灌胃治疗,Morris水迷宫测试治疗后VaD大鼠认知功能的改善情况,TUNEL染色测定各组大鼠海马脑组织内细胞凋亡的变化。免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果在缺糖缺氧培养条件下,体外培养海马神经元出现大量的细胞凋亡,而预先加入补肾化痰祛瘀方的血清进行处理后,细胞凋亡率明显下降。补。肾化痰祛瘀方灌胃治疗的VaD大鼠,与未予治疗的VaD大鼠组相比,治疗组大鼠找到平台的潜伏期缩短（P〈0．01）,穿越平台次数增多（P〈0．01）;与痴呆组相比,补肾化痰祛瘀方治疗组大鼠脑组织海马区凋亡细胞数明显减少,抗凋亡基因Bcl-2蛋白表达显著增加,凋亡基因Bax蛋白表达降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论补肾化痰祛瘀方对大鼠体外培养和脑组织内海马神经元具有神经保护作用,补肾化痰祛瘀方治疗可以明显改善VaD大鼠的认知功能。     

健脾消积法对非酒精性脂肪性肝病模型大鼠的抗氧化作用

【目的】探讨健脾消积法对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠的抗氧化机制。【方法】将46只大鼠随机分为正常组(N=10)、模型组(N=8)、阳性对照组(N=9)、中药低剂量组(N=9)、中药高剂量组(N=10)等5组。给予大鼠喂饲高脂饲料诱导NAFLD大鼠模型。自造模第1天起,正常组、模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,阳性对照组给予复方蛋氨酸胆碱溶液(剂量为0.38 g·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,中药低、高剂量组给予加减丹溪枳术丸溶液(剂量分别为18、36 g·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,共给药10周。采用常规油红O法观察肝组织形态学改变,采用实时荧光定量PCR检测肝组织核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-glutamylcysteine synthethase,γ-GCS)mRNA表达,采用硫代巴比妥酸法检测肝组织丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)含量。【结果】与模型组比较,中药高剂量组大鼠肝脏脂肪变性减轻,Nrf2 mRNA、γ-GCS mRNA表达水平及SOD含量显著升高,MDA含量显著降低(均P0.05或P0.01)。【结论】健脾消积法可有效干预NAFLD大鼠,其机制可能与增强Nrf2、γ-GCS表达,减轻氧化应激有关。     

化浊方对肾小球硬化大鼠肾组织细胞因子TGF-β1表达的影响

目的:观察化浊方对肾小球硬化(GS)大鼠模型肾组织TGF-β1表达的影响,探讨其延缓GS的作用机制。方法:72只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组及模型组、化浊方高、中、低剂量组及厄贝沙坦组。采用尾静脉注射阿霉素、单侧肾脏切除建立肾小球硬化模型,予灌胃治疗8周后处死各组大鼠,检测治疗前后24 h尿蛋白定量、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN),HE染色后光镜下观察肾小球病理改变及肾小球硬化指数(GSI),免疫组化(IHC)检测肾组织TGF-β1的表达。结果:治疗8周后,各治疗组24小时尿蛋白定量、SCr、BUN的水平均低于模型组,肾脏病理显示大鼠肾小球硬化较模型组改善,以化浊方高剂量组明显。高剂量组大鼠肾脏TGF-β1表达明显低于模型组、中低剂量组及厄贝沙坦组。结论:化浊方可能通过抑制大鼠肾脏TGF-β1的表达,改善肾脏病理形态,延缓肾小球硬化。     

贝那普利与厄贝沙坦对心衰大鼠血管内皮功能影响的比较

目的：探讨贝那普利和厄贝沙坦联用对心衰大鼠血管内皮功能的影响。方法：SD大鼠45只，采用缩窄大鼠腹主动脉造成压力负荷性心力衰竭的大鼠模型。分为5组：假手术组、模型组、贝那普利组（10mg／kg·d）、厄贝沙坦组（50mg／kg·d）及联合用药组（Ben5mg／kg·d＋Irb25mg／kg·d），连续给药8周。检测血清超氧化物歧化酶（SOD）活性，丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、血浆AngⅡ和ET的含量。结果：模型组NO和SOD显著降低（P〈0．01）．MDA、ET和AngⅡ显著升高（P〈0．01），治疗后各组NO和SOD显著升高（P〈0．01），MDA和ET显著降低（P〈0．01），其中联合用药组MDA低于贝那普利组（P〈0．05），SOD高于厄贝沙坦组（P〈0．05）；治疗后，贝那普利组AngⅡ水平明显降低（P〈0．01），而厄贝沙坦组明显升高（P〈0．01），联合用药组明显低于模型组和单用组（P〈0．01）。结论：联合应用贝那普利和厄贝沙坦对改善心衰大鼠血管内皮功能具有协同作用。     

汉防己甲素对卵蛋白诱导大鼠哮喘模型的抗氧化保护作用

目的探讨汉防己甲素（Tet）对卵蛋白（OVA）诱导大鼠哮喘（asthma）模型的治疗效果及抗氧化机制。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组和Tet治疗组,每组10只。后两组1次/2d雾化吸入1mg/mlOVA溶液30min,共8周,构建哮喘模型;Tet治疗组予100mg/kgTet灌胃处理（另两组予等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃）,1次/d,共8周;苏木精-伊红（HE）染色观察大鼠肺组织形态改变;ELISA法检测肺组织半胱氨酰白三烯1（CysLT1）和半胱氨酸白三烯受体1（CysLTR1）含量;分光光度法检测肺组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）及谷胱甘肽（GSH）含量;qRT-PCR法检测肺组织核因子-E2相关因子（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）、转化生长因子β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）mRNA表达水平;免疫荧光染色法检测肺组织平滑肌肌动蛋白α（α-SMA）和Nrf2蛋白表达情况。结果与对照组相比,模型组大鼠肺组织气道壁增厚,并且气管周围可见炎性细胞聚集,γ-GCS活性、GSSG、CysLT1和CysLTR1含量均明显增加,Nrf2、HO-1、TGF-β1、MMP-9mRNA的表达水平均明显增加,α-SMA和Nrf2蛋白表达荧光强度明显增强,GSH含量、GSH/GSSG比值及TIMP-1mRNA表达水平均明显降低（均P＜0.01）。而与模型组比较,Tet治疗组的肺组织气道壁厚度减轻,炎性细胞浸润减少,γ-GCS活性、GSSG、CysLT1和CysLTR1含量等均明显降低,TGF-β1、MMP-9mRNA表达水平明显降低,α-SMA荧光强度有所减弱,GSH含量、GSH/GSSG比值与Nrf2、HO-1、TIMP-1mRNA表达水平均明显增加（均P＜0.01）,同时Nrf2荧光强度进一步增强。结论Tet对哮喘大鼠肺组织有保护作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1途径,抑制氧化应激有关。