细菌鞭毛染色意义

细菌鞭毛染色是鉴定细菌十分重要的技术。通过鞭毛染色 ,可以观察鞭毛形态、数量和鞭毛在菌体分布的位置 ,鞭毛在菌体分布位置是作为鉴定细菌的重要特征之一 ,根据这种特征可将细菌分为 :单端极鞭毛菌、单端丛鞭毛菌、周鞭毛菌、多侧鞭毛菌。195 8年 ,Ｒｈｏｄｅｓ[1 ] 就已论述每株细菌菌体上的鞭毛数是不恒定的 ,同一株菌可以观察到甚至 5种以上不同鞭毛数的菌体 ,例如大肠埃希氏菌在鞭毛涂片染色后 ,可以发现菌体鞭毛数量 1- 10根 ,由于菌体细胞的鞭毛数量的多样化 ,可以看到多种鞭毛分布的菌体 ,这种现象可能是与鞭毛基因表达有关 ,另外…     

关于细菌鞭毛染色法的点滴体会

鞭毛是细菌的特殊构造之一。具有鞭毛的细菌按鞭毛的数量及其排列可分为单毛菌,丛毛菌及周毛菌。鞭毛是细菌的运动器官,具有鞭毛的细菌,在液体培养基中能运动,可用悬滴法或压滴法观察其动力,用染色际本观察细菌的鞭毛时,因鞭毛纤细普通染色标本不易看到鞭毛,必须通过鞭毛染色法才能显示出来,又因鞭毛非常娇嫩,很易从菌体脱落,因此我们在制作鞭毛染色标本时,往往因处理不当,而导致鞭毛染色的失败。为了提高鞭毛染色的成功率,我们进行     

鞭毛染色的制作体会

鞭毛为细菌的一种特殊结构,是细菌的运动器官,在教学中常通过鞭毛染色让学生认识鞭毛的形态、数量及其存在的部位,用于鉴定和鉴别细菌。鞭毛染色步骤较为严格,传统方法诱导鞭毛时间太长,鞭毛易脱落,染色结果不够理想,初学者不易掌握。我们在前人的基础上,经过反复实践,摸索出一     

亚马逊利什曼原虫无鞭毛体的体外培养及其抗原性分析

目的建立亚马逊利什曼原虫无鞭毛体体外培养方法，并用间接免疫荧光法分析其抗原特异性。方法小鼠皮损组织处获得的无鞭毛体（Al）、由前鞭毛体转化束的无鞭毛体（Ap）、J774．G8巨噬细胞来源的无鞭毛体（Aj）置于改良后的Schneider’s Drosophila培养基，pH4．6、33℃条件下培养，取培养物光镜下观察并用间接免疫荧光法分析。结果三种不同来源无鞭毛体体外培养物光镜检查形态相似，均与纯培养获得的无鞭毛体一样。与无鞭毛体特异性蛋白P-8和P-4特异性单克隆抗体进行间接免疫荧光分析显示，三种不同来源的无鞭毛体均出现阳性，且浓度与部位相似。而前鞭毛体与抗P-8单克隆抗体（mAb）染色呈弱阳性反应，与抗P-4单克隆抗体呈阴性反应。相反，GP-46／M-2McAb与前鞭毛体染色呈强阳性反应，与无鞭毛体仅呈弱阳性反应。结论在33℃条件下，用改良的Schneider’s Drosophila培养基进行无鞭毛体体外培养获得成功。用阶段特异性单克隆抗体，进行间接免疫荧光分析法可鉴定亚马进利什曼原虫的无鞭毛体。     

细菌鞭毛银染法的改进

目的通过改进发明一种新的细菌鞭毛银染色方法。方法本方法通过载玻片的准备、菌种活化、染液制备,菌液制备孵育、制片、染色等环节步骤完成。结果改进后的牛肉膏蛋白胨培养基新配方,营养更丰富,硬度更适宜,镜检结果,鞭毛多,粗壮、着色更容易且均匀。菌液改为恒温水槽孵育,能让菌体鞭毛更活跃,鞭毛更舒展。涂片菌膜清晰便于少量A液覆盖操作,B液染色升温时容易掌握火源高度。结论这种鞭毛染色方法操作简单,易学易掌握,鞭毛着色率高,还有延长A、B液的有效使用时间。此鞭毛染色值得推广使用。     

伤寒杆菌鞭毛标本片制备体会

伤寒杆菌鞭毛标本片制备体会郑然冉，王永祥微生物学教研室（０５００１７）关键词伤寒杆菌；鞭毛染色观察细菌鞭毛形态是医学微生物学实验内容之一，鞭毛染色标本片的制备，往往因鞭毛生长不良及涂片操作技术问题，而不尽人意。本文将细菌培养温度及涂片方法加以改进，取...     

细菌鞭毛标本制作方法的改进

目的：建立稳定、实用、效果良好的细菌鞭毛标本制作及染色方法。方法：本实验将多次幅菌复苏好的变形杆菌鞭毛充分舒展和菌体自由扩散后制做鞭毛标本。结果：所制标本鞭毛丰富、伸展自然、清晰易找。结论：该方法效果理想,实用性强,简单易行,对基层教学单位尤为实用。     

细菌鞭毛染色条件的探讨

细菌的鞭毛染色,效果与染色条件密切相关。微生物学实验教学中,不管是制作鞭毛的示教片,或学生鞭毛染色的操作,都必须掌握好鞭毛染色的条件,才能取得较好的效果。笔者在工作实践中,经多次试验,摸索出染好细菌鞭毛的一些条件和注意事项,报道于下。     

介绍一种细菌鞭毛快速染色方法

介绍一种细菌鞭毛快速染色方法王忠寿（附二医院检验科）细菌鞭毛的显示，对细菌鉴定具有十分重要的意义。我们在工作实践中，摸索出一种细菌鞭毛快速染色方法，所染标本清晰、方法简单、易于掌握，特介绍如下：１鞭毛染色液配制１．１甲液石碳酸鞣酸饱和硫酸铝钾１．２乙...     

克氏锥虫的超微结构

从感染克氏锥虫的小鼠切取病变心肌组织,同时取培养的锥虫作电镜观察。结果显示:无鞭毛体圆或椭圆形。鞭毛袋内藏鞭毛。无鞭毛体的鞭毛较短,大都藏于袋内。在鞭毛横切面上,周围有9对微管,中央有2根微管。质膜下有排列整齐的膜下微管,约143根。动基体腊肠状,内腔中含有呈“8”字形紧密排列的DNA纤丝。高尔基复合体呈囊状。在小鼠心肌纤维中,常可见簇状排列的无鞭毛体。锥鞭毛体的动基体在核后方,动基体的DNA由平行而疏松排列的纤丝组成。动基体DNA纤丝在无鞭毛体及锥鞭毛体内形态显著不同。阐明这种形态变化的本质,对揭示动基体功能将起重要作用。     

嗜肺军团菌flaA部分基因的克隆及其原核表达

目的克隆表达嗜肺军团菌的鞭毛亚单位蛋白flaA部分基因,并纯化重组蛋白。方法以嗜肺军团菌I型DNA为模板,聚合酶链反应（PCR）扩增鞭毛亚单位蛋白flaA部分基因,并将其定向克隆至原核表达载体pET32a（＋）,构建原核表达重组质粒pET-flaA。经PCR和限制性核酸内切酶鉴定及测序分析后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳分析,用亲和层析法纯化其表达蛋白。结果扩增出嗜肺军团菌606bp的flaA部分基因,构建的重组质粒pET-flaA表达并纯化出42 kDa融合蛋白质。结论成功构建嗜肺军团菌flaA部分基因的原核表达载体,在原核系统中得到了高效表达。     

人五鞭毛滴虫超微结构的进一步观察

透射电镜观察人五鞭毛滴虫前部有一椭圆形的细胞核，其背侧可见一条肋及由副基体和两根副基纤维组成的副基器。核的前方有由鞭毛周管、Ｃ形盾和６个毛基体组成的毛基体复合体。由毛基体分别发出４根前鞭毛，１根独立前鞭毛和１根后鞭毛。轴柱位于核的腹侧，分头、干和尾三部分。轴头起自盾－轴连合，开始是匙形，围绕于核的腹侧，延伸至核后端时，卷曲成筒状为轴干，最后以轴尾伸出体外。波动膜乃虫体细胞膜和细胞质向虫体背侧延伸形成的一条波浪形膜结构，向后直达虫体末端。该膜的细胞质内有一电子密度增大的板层结构。后鞭毛伴行于波动膜左侧，至虫体末端离开波动膜，游离于体外。     

幽门弯曲菌和空肠弯曲菌的电子显微镜对比观察

作者对幽门弯曲菌(Cp)和空肠弯曲菌(Cj)进行负染和钌红染色后作电镜对比观察。结果发现Cp的形态类似于Cj,但结构存在明显差异。Cp菌体一端有1～5根有鞘鞭毛,末端有终球;Cj菌体两端各有一根无鞘鞭毛,末端未见终球。Cp菌体比Cj长,菌体的两端较Cj圆。在用钌红染色的超薄切片中,Cp菌体表面附着一层厚而密集的细丝状物质,而Cj表面仅有稀少的钢丝状物质附着。     

幽门弯曲菌和空肠弯曲菌的电子显微镜对比观察

Specimens were made by preparing the ultrathin sections after negative staining and ruthenium red staining. The specimens were observed under electron microscope. Results revealed that the shapes of Campylobacter pyloridis (Cp) and C. jejuni (Cj) were similar, but distinctive differences in their structures were observed. Cp had one to five sheathed flagella at one end with bulbous tips. Cj had only one unsheathed flagellum on each end without a bulbous tip. The cell body of Cp was longer than that of Cj. A layer of thick and dense delicate filament-like substance was attached to the surface of the cell body of Cp in the ultrathin sections with ruthenium red staining, in the case of Cj only a little of such a substance could be noted.     

人及哺乳动物甲状腺滤胞上皮超微结构的研究

用透射电子显微镜、扫描电子显微镜,冷冻蚀刻等方法,研究了人及哺乳动物甲状腺上皮的超微结构。人材料四例,大鼠、小鼠,家兔材料各10只,观察结果如下:上皮多为立方形、细胞间有圆孔并有细胞连接。扫描电镜结果,外表面有圆形小孔、内表面有微绒毛,中心鞭毛。冷冻蚀刻观察,可见核表面有大量核孔,细胞质中粗面内质网、线粒体、高尔基复合体、溶酶体。细胞间可见紧密连接,缝隙连接。     

附睾蛋白RhoA参与人精子顶体反应

目的:研究RhoA在男性生殖系统中的表达和功能.方法:采用RT-PCR来检测RhoA的mRNA表达,Western blot和免疫组化用来检测RhoA蛋白在人睾丸,附睾及成熟精子中的表达.免疫荧光用来观察这个蛋白在人精子上的定位.豌豆凝集素(PSA)染色用来确定精子顶体反应率.结果:只能在附睾中检测到RhoA的mRNA,而RhoA蛋白不仅在附睾上皮中表达,在人精子上也有表达.它位于人精子的顶体和尾部,并且随着顶体反应转移到精子的赤道部及顶体后区.同时特异的RhoA抗体能够显著地抑制精子发生顶体反应(P<0.01).结论:结果表明RhoA可能是在附睾成熟过程中带到人精子质膜表面,从而使精子获得发生顶体反应的能力.     

骨桥蛋白在雄性小鼠生殖系统中的表达及意义

目的:检测骨桥蛋白(OPN)在小鼠睾丸、附睾、精子中的表达,探讨其意义。方法:用免疫组织化学方法检测OPN在正常小鼠睾丸及附睾中的表达情况,免疫细胞荧光法检测OPN在小鼠精子中的表达情况,分析OPN与雄性小鼠生殖能力的关系。结果:OPN在小鼠睾丸、附睾组织及精子上均具有特征性表达。在睾丸中,OPN表达于Sertoli细胞、Leydig细胞以及各级生精细胞,尤其是精原细胞、精子细胞和精子的胞质中;附睾内,OPN的表达主要见于各段上皮主细胞胞质中,部分基细胞、亮细胞中也可见到免疫阳性反应。并且附睾头部的免疫阳性染色相对较弱;免疫荧光染色则将OPN定位于附睾尾精子的顶体帽区及鞭毛。结论:小鼠睾丸、附睾及精子中均存在OPN的特异性表达,OPN可能参与精子的发生及成熟过程,并与精子的活力和受精能力密切相关。