细胞移植临床应用研究进展

细胞移植治疗损伤心肌的技术即细胞心肌成形术在国内外已进行了近20年的研究，近几年国内外的学者逐步将这项技术的研究从动物实验转向临床，本文主要对细胞移植的临床应用研究进展作一综述。     

细胞移植修复坏死心肌的研究进展

在成熟个体中 ,心肌细胞属于最终分化的细胞 ,一旦损伤只能由瘢痕组织代替。目前对心肌坏死的常规治疗方法包括药物、介入性治疗和手术治疗 (冠状动脉旁路移植术 )等。他们能改善心肌缺血和心力衰竭 (心衰 )的症状 ,使闭塞的血管再通 ,却不能替代不可复生的坏死心肌 ,残留心肌只能靠肥厚使心室重构进而发展为难治性心衰。而心脏移植虽能取代受损的心脏 ,但供体难以选择 ,费用高 ,临床很难推广。近年来新兴的细胞工程技术实现了体外细胞的培养 ,并通过移植技术试图使移入的细胞在受损的心肌组织中生存增殖 ,替代坏死心肌 ,改善心室重构和心脏…     

细胞移植与再生心肌的研究进展

心肌梗死后,因心肌细胞增殖能力极低,坏死心肌由瘢痕组织替代,最终导致心力衰竭。细胞移植治疗,是采用人体内具有高度复制和高度分化能力的细胞群体,经过体外增殖及特殊处理后,通过某种方式,使其到达梗死心肌的瘢痕部位,在适宜的条件下,再生出新的心肌及血管,改善心脏功能。     

组织工程学心肌移植研究进展

缺血性心脏病导致的心力衰竭是一个全球性的卫生问题。对于这些终末期缺血性心脏病患而言,心肌细胞大量死亡是导致其心脏功能恶化的首要原因。由于心肌细胞属于终末分化细胞,一旦死亡很难自行再生,所以如何增加心肌梗死区域的心肌细胞数目是近年来心血管研究领域关注的热点。随着体外细胞培养技术的成熟以及组织工程概念的提出,再生医学为治疗终末期缺血性心脏病提供了新的思路。     

超声心动图检测存活心肌的应用及研究进展

存活心肌的检测是近年来影像医学研究的热点，缺血区心肌存活性的判别对冠心病的治疗决策、疗效评价和预后估测均有着非常重要的临床意义，本文就超声心动图检测存活心肌的应用和研究进展作一综述。     

CARTO电压标测识别猪急性心肌梗死模型中存活心肌的研究

目的 研究应用CARTO电压标测的方法识别猪急性心肌梗死模型中存活心肌的准确性和实用性.方法 用普通家猪13头,麻醉气管插管后行冠状动脉造影术,置入经皮腔内冠状动脉成形术球囊至冠状动脉左前降支远端,堵闭血流60～90 min,建立家猪心肌梗死模型.采用CARTO电压标测系统构建左心室,通过电压标测识别存活心肌.处死试验动物取出心脏,将心肌组织切成薄片后采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法识别存活心肌.CARTO电压标测识别存活心肌的标准为0.5～1.5 mV为存活心肌,TTC染色存活心肌呈淡红色.将CARTO电压标测的结果与TTC染色结果进行对比.结果 所有猪均完成冠状动脉左前降支远端的封堵,2头分别在堵闭45和65 min时因心室颤动死亡.存活11头猪成功地建立急性心肌梗死模型.将猪的左心室分为16个节段,11头共176个节段,分别通过CARTO电压标测与TTC染色法对各节段心肌进行识别并评价两种方法的一致性,两者的一致性较好(Kappa=0.816,P＜0.001).以TTC染色检测出的存活心肌为标准,CARTO电压标测检测存活心肌的敏感度为71.8%,特异度为96.5%;准确度为90.9%.结论 运用经皮腔内冠状动脉成形术球囊封堵冠状动脉可成功建立猪急性心肌梗死模型.通过CARTO电压标测系统能够识别出模型中的存活心肌,为检测存活心肌提供了一个新的方法.     

心脏和肾脏短暂缺血对心肌保护作用的比较研究

目的　明确心脏和肾脏短暂缺血预处理对心肌缺血 再灌注 (MIR)所致心肌坏死和细胞凋亡的影响。方法　在家兔MIR模型上 ,36只动物随机分为单纯MIR组、心肌短暂缺血预处理 (MIP)组和肾脏短暂缺血预处理 (RIP)组。实验过程中 ,记录血流动力学、心外膜电图 ;应用三苯硝基四氮唑红测定心肌梗死范围 ;采用末端标记和流式细胞方法检测心肌细胞凋亡等。结果　 (1)血流动力学和心外膜电图 :三组动物的血流动力学指标在MIR过程中逐渐下降 ;心外膜电图ST段在缺血期明显抬高 ,再灌注过程中恢复正常。 (2 )心肌梗死范围 :MIR组的心肌梗死范围 (坏死区占缺血区的重量百分比 )为 (5 3 83± 2 0 4 ) % ,MIP组和RIP组的心肌梗死范围分别为 (2 9 6 7± 2 16 ) %和 (33 0 0±3 4 6 ) %。与MIR组相比 ,MIP组和RIP组的心肌梗死范围明显减小 (P <0 0 1)。 (3)心肌细胞凋亡 :末端标记显示 ,MIR组、MIP组和RIP组中缺血区的心肌细胞凋亡率分别为 (10 98± 0 92 ) %、(5 93±0 81%和 (5 5 8± 0 5 0 ) % ,MIP组和RIP组缺血区中的细胞凋亡率较MIR组明显降低 (P <0 0 1)。结论　MIP和RIP均能减少MIR所致的心肌梗死范围和细胞凋亡 ,MIP和RIP对心脏的保护效应无明显差别。     

体外扩增的骨髓基质细胞在缺血心肌内的存活及对心肌重塑影响

目的观察体外扩增骨髓基质细胞(MSCs)在缺血心肌内存活以及对缺血心肌重塑的影响.方法兔下肢骨获取MSCs,体外扩增传代,收获第二代细胞行,4,6二氨基-2-苯茚二酮(DAPI)标记.结扎前降支制作心肌梗死动物模型,3d后2×106DAPI标记MSCs直接注射到实验组缺血坏死区心肌(n=8),对照组心肌注射相同体积培养基(n=6).细胞植入前、植入后1周、4周心脏超声检查,4周时收获心肌标本,计算缺血范围与梗死面积.荧光显微镜观察植入的DAPI标记MSCs在缺血区存活情况,Masson's染色对比实验组与对照组缺血坏死区瘢痕化程度.结果荧光显微镜检发现植入的MSCs在缺血区存活增殖并融合于缺血区心肌;心脏超声显示细胞移植组心室容积变化显著小于对照组(△EDV 0.27±0.11ml vs 0.46±0.14ml P＜0.05;△EDV 0.17±0.13mlvs 0.32±0.11 ml P＜0.05);细胞移植组局部室壁运动情况明显优于对照组;4周后,细胞移植组平均缺血范围与梗死区面积与对照组比较明显减小(14.70±0.04%vs19.6±0.09%P＜0.05;4.43±1.0%vs13.72±0.92%P＜0.05);细胞移植组缺血坏死区纤维化程度较轻.结论体外扩增的MSCs可在缺血坏死区存活并融合于植入区心肌,植入细胞显著减轻缺血坏死区心肌重塑.     

细胞凋亡与扩张型心肌病的心肌损伤

细胞生命过程中存在着两种不同的细胞死亡现象。一种是坏死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ），是指细胞受到严重而突然的损伤后发生的死亡。另一种是细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ），又称为细胞程序死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｄｅａｔｈ，ＰＣＤ），是由局部环境生理性或病理...     

缺血心肌再生的研究进展

一般认为，成熟心肌细胞属于终未分化细胞，已丧失再生能力。一旦受到缺血和乏氧的影响而导致不可逆的损伤时，心肌组织无法通过残余心肌细胞的增生或间质细胞分化修复，造成心肌细胞数量减少，并只能以纤维组织的增生来替代，从而导致心室重构和／或心功能衰竭。     

细胞性心肌成形术的研究进展

细胞性心肌成形术是治疗心肌异常性疾病的新方法。本文分别从移植细胞的种类、成活、分化、与宿主细胞的联系、对宿主心脏结构功能的影响及其移植区新生血管的作用等方面综述了细胞性心肌成形术的基础及临床研究进展 ,并介绍了目前存在的问题     

不同类型的细胞移植治疗心力衰竭的简评

心肌细胞是终末分化细胞。心肌损伤后,细胞凋亡、瘢痕替代、心肌重构,最终发展成心力衰竭,使传统内科治疗陷入被动无奈的境地。1990年以来探索着不同类型的细胞作心肌移植,以求改善心功能,其中包括了胚胎心肌细胞、骨骼肌卫星细胞、胚胎干细胞及骨髓干细胞等作心肌的细胞移植,有如在黑暗摸索中看到一缕曙光,掀起一股研究的热潮,甚至被勇敢的应用于临床。但就现状来说,急于推向临床还存在不少问题,在实际应用中还应理智地客观对待。为此本文对几种不同来源的细胞在心肌细胞移植中存在的问题略作评述。     

细胞移植治疗心力衰竭的研究进展

难治性心力衰竭是各种心脏疾病的终末阶段表现，心脏移植曾经被认为是唯一的治疗方法。近年来随着细胞移植研究的深入，为解决这一难题提供了新的方向。本文时目前细胞移植治疗的研究概况及可能发展方向进行了综述。     

细胞移植修复心肌损伤的研究进展

目前 ,充血性心力衰竭 (ＣＨＦ)发生率和死亡率逐渐增加 ,因而有必要寻找治疗方法加以阻止和转复。增加心肌梗死 (ＭＩ)后生存能力和心室功能的一个比较有前途的实验方法是细胞移植 ,移植胎儿细胞可能增加梗死部位功能心肌细胞的数量 ,可作为生长因子的潜在源泉 ,能够进行以心肌为基础的基因转移。本文综述近年来细胞疗法修复损伤心脏的进展。1　胎儿心肌细胞移植1994年Ｓｏｏｎｐａａ等〔1〕 报道胎儿心肌细胞能够移植并融合入鼠的正常心脏中 ,后来他们又报道〔2〕了移植后长达 10周的时间内 ,在肌营养障碍鼠和犬的心脏中有稳定的胎儿心肌…     

人骨髓间充质干细胞体外心肌样细胞诱导分化中细胞周期与凋亡的分析

目的探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向心肌样细胞分化过程中分化与凋亡的情况,为hMSCs临床移植治疗提供数据。方法采用体外纯化、扩增后的第4代hMSCs,分3组在体外分别经0μmol/L、2.5　μmol/L、5.0μmol/L 5-杂氮胞苷(5-Aza)诱导24 h后继续培养8周,相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪检测各组细胞周期及凋亡指数,应用RT-PCR技术分析肌球蛋白重链(β-MHC)、肌钙蛋白T(cTNT)、凋亡相关基因(Bcl-2、Bax)的mRNA在分化过程中的动态表达。结果hMSCs诱导后凋亡指数随诱导后培养时间增加,低浓度诱导组低于标准浓度诱导组,组间差异有统计学意义(P<0.05),G_0/G_1期细胞比例诱导后较对照组显著减少(P<0.05);β-MHC和CTNT在诱导后表达开始增强,在第6周时均达到高峰,第8周时表达开始衰减,Bcl-2、Bax基因表达呈时间依赖性变化。结论hMSCs在体外经纯化、扩增和诱导后可表现心肌样细胞的生物学特性,但诱导过程中hMSCs发生细胞凋亡,采用2.5μmol/L 5-Aza低浓度诱导可减少细胞凋亡发生。     

坏死心肌修复的细胞和分子生物学研究进展

在细胞周期调控下,人类心肌细胞仅在胚胎期和出生后早期增生,出生后数月即停止分裂。由于心肌细胞坏死不可逆转,心肌梗死后,早期再灌注治疗虽然能挽救濒死心肌细胞,但已经死亡的心肌细胞将由瘢痕组织代替,由此造成的心力衰竭和心律失常是许多患者死亡的主要原因。近年来,随着细胞和分子生物学技术的发展,坏死心肌修复的研究取得了令人瞩目的成绩。移植外源或自体肌细胞从而代替坏死心肌细胞行使功能,转入外源基因表达重组蛋白从而刺激坏死心肌局部血管增生,这些均为坏死心肌修复开辟了新的途径。     

缺血预处理对移植肝缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的 探讨细胞凋亡在移植肝缺血再灌注损伤中的作用及缺血预处理对其影响。方法 通过对移植肝进行 因预处理,用全自动生化分析仪检测肝功能、比色法测定移植肝组织的ＭＤＡ、用流式细胞仪结合原位标记技术检测细胞调７亡。结果 移植肝再灌注后血中ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＬＤＨ和肝组织中ＭＤＡ均明显升亮,肝细胞调亡明显增加,经缺血预处理后,血中ＡＳＴ,ＡＬＴ,ＬＤＨ和肝组织中ＭＤＡ均降低,肝细胞调亡亦明显减少,结论 缺血     

心肌营养素1对心肌细胞缺氧复氧损伤的作用及信号机制的研究

目的探讨心肌营养素1(CT-1)对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及信号通路所起的作用。方法用改良的方法培养出生1～3天的SD乳鼠心肌细胞,分为对照组、缺氧复氧组、阻断剂组、营养素组和助溶剂组。后4组进行缺氧3 h,加不同药物处理后,复氧3 h,MTS法测定心肌细胞的存活率,四氯四乙基苯丙咪唑基羰化青碘化物检测心肌细胞线粒体膜电位,二氯荧光黄双乙酸盐检测细胞内活性氧(ROS),用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率。采用RT-PCR法检测心肌细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达,Western blot检测磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)蛋白水平。结果与对照组比较,缺氧复氧组心肌细胞凋亡率及ROS明显增加,而心肌细胞存活率明显降低,线粒体膜电位下降,eNOS mRNA表达明显下调(P0.05);与缺氧复氧组比较,营养素组心肌细胞存活率明显升高,心肌细胞凋亡率及细胞内ROS明显减少,线粒体膜电位水平更高,磷酸化PI3K蛋白水平增加,eNOS mRNA表达上调。与营养素组比较,阻断剂组抑制上述指标表达。结论 CT-1能减轻缺氧复氧引起的心肌细胞损伤,其作用部分依赖PI3K/蛋白激酶B/eNOS信号通路的激活。     

骨髓基质细胞移植对心肌纤维化的干预

目的:评价骨髓基质细胞移植对心肌梗死后心肌间质纤维化的影响。方法:30只日本大耳白兔,随机分为细胞移植组、药物治疗组、对照组,体外骨髓穿刺提取、分离、培养骨髓基质细胞,心肌梗死模型制作成功2周后沿梗死周边区域注射细胞悬液100μl(细胞移植组)或DMEM培养基100μl(对照组)或给予安体舒通20mg,bid,服用1个月(药物治疗组)。各组实验前、后4周经心脏超声检查,氯胺T氧化法测定血浆、组织羟脯胺酸含量,TTC染色评价梗死面积。结果:细胞移植组血浆、组织羟脯胺酸含量[(22.79±1.69)mg/L、(1.59±0.89)μg/mg]均低于对照组[(40.16±2.31)mg/L、(3.59±0.19)μg/mg]、药物治疗组[(34.24±1.98)mg/L、(2.67±0.81)μg/mg],均P<0.05。实验后4周时,细胞移植组心功能有所提高[LVEF(56.91±2.04)%],与对照组[(32.49±1.29)%]、药物治疗组[(53.22±2.13)%]比较,均P<0.05;梗死面积[(22.82±3.12)%]有所下降,与对照组[(29.73±2.11)%]、药物治疗组[(28.61±1.24)%]比较,均P<0.05。结论:细胞移植后可抑制心肌胶原合成、抑制心肌局部间质纤维化,是细胞移植心功能改善机制之一。     

诱导分化促进DNA损伤的肺癌细胞凋亡

本试验的目的是探讨诱导分化剂和ＤＮＡ损伤性化疗药对肺腺癌细胞凋亡的影响。材料与方法（１）材料：人肺腺癌细胞Ａ５４９购自武汉大学典型培养物保藏中心,常规培养传代。诱导分化剂全反式维甲酸（ＲＡ）和ＤＮＡ荧光染料ｈｏｅｃｈｅｓｔ３３２５８购自美国Ｓｉｇｍａ...