Gi蛋白βγ亚单位在氨甲酰胆碱所致CCL137细胞磷脂酰A_2激活中的作用

为研究氨甲酰胆碱（ＣＣｈ）所致ＣＣＬ１３７细胞中毒蕈碱型乙酰胆碱受体（ｍＡＣｈＲ）失敏时磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）激活的机理，应用百日咳杆菌毒素（ＰＴＸ），抗－βγ血清和纯化的Ｇｉβγ，分别观察了它们对ＰＬＡ２活性的影响．当在培养液中加入ＰＴＸ或抗－βγ血清时，可见ＣＣｈ不再能引起ＣＣＬ１３７细胞中ｍＡＣｈＲ失敏和ＰＬＡ２激活．反之，加入Ｇｉβγ或ＧＴＰ－γ－Ｓ则使ＰＬＡ２激活，且呈剂量依赖关系，前者尤为明显．结果表明，Ｇｉβγ在ＣＣｈ所致ＣＣＬ１３７细胞的ＰＬＡ２激活中起重要作用．     

Giβγ亚基介导的磷脂酶A2激活在激动剂所致CCL137 细胞毒蕈碱性乙酰胆碱受体失敏中的作用

卡巴胆碱(CCh)所致CCL137细胞中磷脂酶A₂(PLA₂)激活和毒蕈碱性乙酰胆碱受体(mAChR)结合能力降低，均呈浓度和时间依赖关系，且PLA₂激活早于mAChR对配基结合量的降低，所需浓度亦小于后者.可使Gi蛋白失活的百日咳杆菌毒素能阻抑CCh所引起的变化，表明Gi蛋白在其中起着某种作用.应用各种抗Giα，抗Giβγ或抗β血清，测知CCh可使Giα明显减少，而游离的βγ和β亚基的量不变. 足够量的抗G蛋白β亚基血清可完全阻抑CCh所致PLA₂活性和mAChR结合能力的变化.结果提示，Gi蛋白βγ亚基激活的PLA₂在CCh所致CCL137细胞mAChR失敏中起关键作用.     

G蛋白在大鼠心血管对去甲肾上腺素脱敏反应中的作用

为了研究鸟嘌呤核苷酸结合蛋白（Ｇ蛋白）在慢性输入去甲肾上腺素（ＮＥ）所致大鼠心脏和主动脉对ＮＥ脱敏反应中的作用，采用大鼠皮下植入微量泵持续输入ＮＥ（０．１ｍｇ·ｋｇ－１·ｈ－１）模型，Ｇ蛋白α亚基及其ｍＲＮＡ水平用相应的抗体和ｃＤＮＡ探针按Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法测定．结果显示：输注６ｄＮＥ的大鼠主动脉中Ｇｓα，Ｇｉα和Ｇｏα均显著下降，但其ｍＲＮＡ无显著改变；心房及心室中Ｇｉα显著升高，Ｇｓα，Ｇｏα维持不变，而Ｇｉ２αｍＲＮＡ升高，心房中ＧｓαｍＲＮＡ下降．输入ＮＥ３ｄ的大鼠心房及心室Ｇｉα，Ｇｏα无改变，Ｇｓα４５和４２ｋＤ带显著下降，但５２ｋＤ带升高；心室中ＧｏαｍＲＮＡ的３．８和３．４ｋｂ带显著升高，而心房中５．４ｋｂ带升高，心室Ｇｉ３αｍＲＮＡ下降．上述结果表明输入ＮＥ可引起Ｇ蛋白的动态变化，提示Ｇ蛋白在ＮＥ慢性刺激引起的心血管反应性降低中可能起一定的作用，其早期以Ｇｓ下降为主，６ｄ时则以Ｇｉ升高为主     

替硝唑药物动力学研究

本文建立了反相ＨＰＬＣ测定替硝唑血药浓度的方法，以０．８ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌＯ４溶液沉淀蛋白后直接进样，方法简便，平均绝对回收率９５．１％，日间和日内ＲＳＤ％均小于４％，兔静注替硝唑３０ｍｇ／ｋｇ后，体内过程符合二室开放模型，药动学参数分别为α０．７９１６ｈ＾－１，β０．０６２８ｈ＾－１，Ｔ１／２α０．８７６ｈ，Ｔ１／２β１１．０４ｈ，ＡＵＣ２７２．３μｇ．ｈ／ｍｌ，Ｖｃ０．５６Ｌ／ｋｇ，ＣＬ０．１     

低浓度N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍对HeLa细胞DNA聚合酶及拓扑异构酶Ⅱα mRNA表达水平的影响

利用定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，研究了低浓度甲基硝基亚硝基胍（ＭＮＮＧ）对ＨｅＬａ细胞ＤＮＡ聚合酶（Ｐｏｌα，β，δ，ε）及拓扑异构酶Ⅱα（ＴｏｐⅡα）ｍＲＮＡ表达水平的影响．发现经０．２μｍｏｌ·Ｌ－１ＭＮＮＧ处理２．５ｈ后，ＨｅＬａ细胞ＰｏｌβｍＲＮＡ水平在６－２４ｈ内升高约１倍，而Ｐｏｌα，δ，ε及ＴｏｐＩαｍＲＮＡ水平则无明显改变．提示ＰｏｌβｍＲＮＡ水平改变可能参与ＭＮＮＧ诱发细胞遗传不稳定的发生．     

胰岛素样生长因子及其受体在大肠癌发生中的作用

胰岛素样生长因子（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒｓ，ＩＧＦｓ）包括ＩＧＦ—Ⅰ和ＩＧＦ—Ⅱ。它们均由 Ａ、Ｂ、Ｃ三部分构成，Ａ、Ｂ两部分和胰岛素的α、β链相似，其中有４５％的序列同源。ＩＧＦ是通过与细胞表面的ＩＧＦ受体起作用的。ＩＧＦ受体有两型：Ⅰ型和Ⅱ型。ＩＲ为糖蛋白，由α２、β２四个亚基组成。α亚基含有一个细胞外配体结合部，包括跨膜与膜内两部分的β亚基有一个酪氨酸激酶区，能被配体结合而激活，通过第二信使系统起生物学效应。ＩＲ对ＩＧＦ－Ⅰ的亲和力较ＩＧＦ—Ⅱ大，ⅡＲ只能和ＩＧ…     

蛇毒神经生长因子在大鼠体内的药物代谢动力学与周围神经分布

用［１２５Ｉ］标记结合高效液相色谱法和酸沉法研究大鼠体内蛇毒神经生长因子（ｖＮＧＦ）药物代谢动力学．［１２５Ｉ］ｖＮＧＦ体外有刺激神经突起生长活性．药后血清存在游离和结合［１２５Ｉ］ｖＮＧＦ及［１２５Ｉ］降解物．１２ｍｇ·ｋｇ－１ｉｖ后ｔ１／２α为０．１３ｈ，ｔ１／２β为３．８ｈ；１２和４８ｍｇ·ｋｇ－１ｉｍ后ｔ１／２β为７．１和４．１ｈ，ＡＵＣ与剂量呈正比，ＣＬＳ相近，生物利用度为０．６２．体外［１２５Ｉ］ｖＮＧＦ与血清最大结合率２４．６％±０．４％，平衡解离常数３．２±０．３ｎｍｏｌ·Ｌ－１．ｉｍ后颈上神经节，注药侧和对侧坐骨神经放射性明显高于血清，注药侧最高，不被１００倍非标ｖＮＧＦ抑制．主要经尿排泄，２ｄ排出约８６％．     

石杉碱类似物在体外对胆碱酯酶的抑制作用

用比色法测试表明，１４个半合成类似物的抗ＡＣｈＥ作用均弱于Ｈｕｐ－Ａ，左旋二氢及四氢类似物的抗ＢｕＣｈＥ作作用稍强于Ｈｕｐ－Ａ，前者属混合型抑制剂，Ｋｉ值为０．１２ｕｍｏｌ．Ｌ＾－１。后者属竞争型抑制剂，Ｋｉｗｆｈｇｏ ０．５６ｕｍｌｌ．Ｌ＾－１。二者不同于异氟，与ＡＣｈＥ为可逆性结合。     

白芍总甙对大鼠腹腔巨噬细胞产生前列腺素E_2的作用及部分机制研究

白芍总甙（ＴＧＰ，０．０１～１００ｍｇ·Ｌ－１）对亚适浓度Ａ２３１８７（０．１μｍｏｌ·Ｌ－１）激活的大鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭΦ）产生的前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）呈现低浓度促进和高浓度抑制的双向调节作用。而ＴＧＰ对最适浓度Ａ２３１８７（１μｍｏｌ·Ｌ－１）激活的ＰＭΦ产生的ＰＧＥ２呈浓度依赖性的抑制作用，其ＩＣ５０为１６．７ｍｇ·Ｌ－１。在整体模型上，ＴＧＰ（５０ｍｇ·ｋｇ－１×１０ｄ）能使佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠ＰＭΦ产生过高的ＰＧＥ２恢复正常水平。采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光法测定ＴＧＰ对Ａ２３１８７（１μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导正常大鼠ＰＭΦ胞内游离钙离子浓度［Ｃａ２＋］ｉ，发现ＴＧＰ（≤１０ｍｇ·Ｌ－１）对ＰＭΦ［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响，而ＴＧＰ在（１０～１００ｍｇ·Ｌ－１）时，对ＰＭΦ［Ｃａ２＋］ｉ有一定抑制作用。提示高浓度ＴＧＰ对ＰＧＥ２的负向调节作用可能与抑制细胞内钙有关。     

L—焦谷氨酸对抗从氨酸钠诱发的大鼠皮层神经元损伤

目的：在大鼠皮层神经元研究Ｌ－吡咯烷酮羧酸（Ｌ－ＰＧＡ）对谷氨酸钠（Ｇｌｕ）诱发神经毒性的拮抗作用。方法：原代培养的皮层神经元取自１６ｄ龄的胎鼠,与Ｇｌｕ作用３０分钟,２４后测定神经元的存活及增益昌质中亚硝酸盐的浓度;以Ｆｕｒａ ２－ＡＭｏ ｘｌｅｑｍｗ 〖Ｃａ＾２＋〗;荧光探针,,ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子测定系统测定〖Ｃａ＾２＋〗ｉ。结果：Ｌ－ＰＧＡ１０－８０βｍｏｌ．Ｌ＾－１浓度依赖地抑制Ｇ     

IQ_(23)对豚鼠心室肌细胞钙通道和CHO H_(10)细胞异源表达的钙通道α_1亚单位的作用

应用膜片钳全细胞记录技术,观察了具有正性肌力作用的苄基异喹啉衍化物ＩＱ２３,即１－〔对甲氧苄基－２－（Ｎ－苄基,Ｎ－甲基）〕－６,７－二甲氧基异喹啉盐酸盐,对豚鼠心室肌分离细胞的Ｃａ２＋通道,以及ＣＨＯＨ１０细胞表达的Ｃａ２＋通道α１亚单位的作用．结果显示,当豚鼠心室肌细胞从保持电位（Ｖｈ）－５０ｍＶ除极至测试电位（Ｖｔ）０ｍＶ时,ＩＱ２３３,１０μｍｏｌ·Ｌ－１分别使Ｃａ２＋电流（ＩＣａ）由对照的（０．４７±０．２３）ｎＡ增至（０．５７±０．２３）和（０．７９±０．３１）ｎＡ（Ｐ＜０．０５）．在ＣＨＯＨ１０细胞Ｖｔ为２０ｍＶ时,ＩＱ２３１０μｍｏｌ·Ｌ－１电压依赖性的增强Ｂａ２＋电流（ＩＢａ）,ＩＢａ从（０．４５±０．１０）ｎＡ增至（０．６７±０．２０）ｎＡ（Ｖｈ＝－８０ｍＶ）,或从（０．４３±０．０８）ｎＡ增至（０．６０±０．１４）ｎＡ（Ｖｈ＝－４０ｍＶ）．ＩＱ２３１０和３０μｍｏｌ·Ｌ－１还分别使电流－电压曲线的峰值和失活曲线的半失活电位向负膜电位方向移动．实验结果表明,ＩＱ２３通过作用于通道的α１亚单位,对心肌Ｌ型Ｃａ２＋通道产生电压依赖性激动作用,此作用为其正性肌力效应提供了部分解释．     

肾移植前后检测β2－MG与THP及ALB的临床意义

采用放射免疫方法测定４４例尿毒症患者肾移植前后血清β２－微球蛋白（β２－ＭＧ）Ｔａｍｍ－Ｈｏｒｓｆａｌ蛋白（ＴＨＰ）及尿β２－ＭＧ、ＴＨＰ和白蛋白（ＡＬＢ）水平。结果表明，尿毒症患者血清、尿β２－ＭＧ及尿ＡＬＢ明显高于正常（Ｐ＜０．０１），血清、尿ＴＨＰ明显低于正常值（Ｐ＜０．０１）。术后肾功能正常组血清、尿β２－ＭＧ、尿ＡＬＢ均显著降低，血清、ＴＨＰ均显著升高（Ｐ＜０．０１），但仍未达正常。术后排斥组血清、尿β２－ＭＧ及尿ＡＬＢ显著升高，尿ＴＨＰ显著降低（Ｐ＜０．０５）。而环孢素（ＣｓＡ）急性肾中毒组仅尿β２－ＭＧ显著升高。提示动态观察血清、尿β２－ＭＧ、ＴＨＰ及尿ＡＬＢ变化，对于监测肾移植术后肾小球和肾小管的功能变化，早期诊断急性排斥反应、ＣｓＡ急性肾中毒有一定的临床价值     

布美他尼对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响

目的研究布美他尼对Ｃａ２＋、组胺、乙酰胆碱、前列腺素引起豚鼠离体气管平滑肌收缩的影响。方法建立不同浓度Ｂｕｍｅｔ（１０－６、１０－５、１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１）孵育时Ｃａ２＋和组胺量效曲线，观察Ｂｕｍｅｔ对Ａｃｈ和ＰＧＦ２α引起气管条收缩的抑制作用。结果Ｂｕｍｅｔ可压低Ｃａ２＋和Ｈｉｓ量效曲线，减活指数分别为３．０８±０．４８和５．６１±０．１３。对Ａｃｈ１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１和ＰＧＦ２α５×１０－３ｍｏｌ·Ｌ－１引起的气管平滑肌收缩的ＩＣ５０分别为（５．０９×１０－６±０．１６×１０－６）ｍｏｌ·Ｌ－１和（５．１３×１０－６±０．１７×１０－６）ｍｏｌ·Ｌ－１。结论Ｂｕｍｅｔ可抑制Ｃａ２＋、组胺、乙酰胆碱、前列腺素Ｆ２α引起的豚鼠离体气管平滑肌收缩     

钾通道开放剂降低血管平滑肌细胞内游离钙浓度

研究ＰＣＯ－Ｐｉｎ，Ｎｉｃ，Ｌｅｍ及ＲＰ对ＶＭＳＣ内［Ｃａ＾２＋］ｉ的改变及其可能机制。ＶＳＭＣ加入Ｆｕｒａ－２ＡＭ２．５μｍｏｌ．Ｌ＾－１３７℃下孵育５０ｍｉｎ，［Ｃａ＾２＋］ｉ用荧光分光光度计检测。４种ＰＣＯ能较弱地抑制Ｋ＾＋３０ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１诱导的［Ｃａ＾２＋］ｉ增加，但明显抑制ＡＴＰ０．１ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１诱导的［Ｃａ＾２＋］ｉ峰相及持续相增加，且呈剂量依赖性。格列苯脲完全阻断Ｐｉｎ，     

非胰岛素依赖型糖尿病早期肾病变

观察５年内发病的ＮＩＤＤＭ病人４８例，检测尿微白蛋白（ＭＡＵ）、白蛋白排泄率（ＡＥＲ）、血清β２－ｍＧ，Ｃｃｒ，２４小时尿蛋白等，ＡＥＲ阳性率明显高于血清β２－ｍＧ，Ｃｃｒ，２４小时尿蛋白的阳性检出（Ｐ＜０．０１）。ＡＥＲ与血清β２－ｍＧ及Ｃｅｒ呈显著相关（Ｐ＜０．０１）。ＡＥＲ是诊断糖尿病早期肾素的可靠依据。于ＮＩＤＤＭ肾病变诸多影响因素中高血压是至关重要的，高血压与肾病相互影响，故抗高血压治疗     

粉防己碱的抗炎作用与磷脂酶A2的关系

为探讨Ｔｅｔ的抗炎作用及机制，在大鼠胸膜腔内注射Ｃａｒ复制胸膜炎。注射后２－４８ｈ，Ｎｅｕ－和ＡＣＣ－ＰＬＡ２活性明显增强，胸膜渗出液量，蛋白质渗出量和白细胞游出数随之增加。Ｔｅｔ剂量依赖性地抑制上述各指标的变化，且Ｔｅｔ引起的ＰＬＡ２活性的降低与炎症指标的减少密切相关。提示Ｔｅｔ有良好抗炎作用，其机制可能涉及抑制ＰＬＡ２激活和释放。     

烟碱受体在非洲爪蟾卵母细胞的表达及特征

分别给非洲爪蟾卵母细胞微量注射电线电器官烟碱型胆碱受体（Ｎ＿２－ＣｈＲ）和大鼠脑烟碱型胆碱受体（Ｎ＿１－ＣｈＲ）的ｍＲＮＡ，表达出相应的Ｎ－ＣｈＲ。采用全细胞和部分细胞灌流法测定不同浓度氨甲酰胆碱引起的Ｎ＿２－ＣｈＲ产生的膜电流，以最小反应模型方程拟合两法所得量反应曲线非常接近。Ｋ＿１值分别为０．５２８和０．４９１ｍｍｏｌ·Ｌ￣（－１）；Φ￣（－１）值分别为３．８６１和３．８９１。采用全细胞灌流法测得不同浓度氨甲酰胆碱引起的表达Ｎ＿１－ＣｈＲ产生的膜电流，拟合所得的量反应曲线较之相应的Ｎ２－ＣｈＲ曲线明显左移。Ｋ＿１和Φ￣（－１）值分别为０．１４０ｍｍｏｌ·Ｌ￣（－１）和３．１２５。     

细胞外钙离子对培养大鼠交感神经元烟碱受体失敏的影响

以培养的新生大鼠颈上交感节神经元为标本，使用膜片钳全细胞记录技术，观察了细胞外Ｃａ２＋对烟碱受体失敏的影响．发现向神经元喷射１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＡＣｈ，可即刻诱发迅速上升的内向电流（ＡＣｈ电流）．随着胞外Ｃａ２＋浓度的上升，ＡＣｈ电流衰减明显加快（Ｐ＜０．０１）．而ＡＣｈ诱发电流的幅度和上升速率则随胞外Ｃａ２＋浓度的上升而显著增加（Ｐ＜０．０１）．当胞外Ｃａ２＋为０，２和６ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，ＡＣｈ电流衰减的时间常数分别为８．０±４．３ｓ（ｎ＝９），４．２±０．９ｓ（ｎ＝８）和２．６±０．７ｓ（ｎ＝８）．诱发电流的幅度（ｎＡ）分别为２．０±０．９（ｎ＝９），３．３±１．０（ｎ＝８）和５．１±１．６（ｎ＝８）．其上升速率（ｐＡ／ｍｓ）分别为２．６±０．８和９．３±１．６（ｎ＝８）．以上结果说明，胞外Ｃａ２＋浓度的增加，可加速ＡＣｈ电流的衰减，即加速烟碱受体的失敏，同时提高ＡＣｈ电流幅度，加快烟碱受体离子孔道的开放速率．提示交感神经元烟碱受体上可能存在着不同的Ｃａ２＋结合位点．通过对这些不同位点的作用，Ｃａ２＋可以从两方面影响烟碱受体的功能，进而调制胆碱能神经元的突触传递效率．     

甲磺酸左氧氟沙星的药代动力学研究

用微生物法测定了ＭＳＡＬＶＬＸ在狗体内的药代动力学过程符合二室模型。４、８和１６ｍｇ／ｋｇ口服给药的Ｃｍａｘ分别为１．７３、２．８９和８．２８ｍｇ／Ｌ,ＡＵＣ值分别为１５．４３、３１．９５和７０．２ｍｇｈ／Ｌ,ＭＲＴ分别为６．９６、７．５８和６６２８ｈ。大鼠口服２０ｍｇ／ｋｇ的Ｃｍａｘ为２．８６ｍｇ／Ｌ,ｔ１／２β为２．２ｈ,ＡＵＣ为７．４ｍｇｈ／Ｌ,ＭＲＴ为３ｈ。大鼠口服后７２ｈ的尿中排泄率为４２％,而７２ｈ胆汁排泄率为３８．２％。     

急性低压缺氧复合梭曼中毒对大鼠肺微血管损伤作用

应用伊文思蓝标记白蛋白法，微量滴定法和紫外法观察了急性低压缺氧复合梭曼中毒肺组织伊文思蓝含量，磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活力以及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＰＬＡ２活力，血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性和蛋白含量的变化。结果表明，低压缺氧（模拟海拔４０００ｍ）６ｈ后，给大鼠梭曼７２μｇ·ｋｇ－１ｓｃ，继续减压可引起肺组织伊文思蓝含量增加，ＢＡＬＦ中ＡＣＥ活性和蛋白含量升高，同时伴有肺组织和ＢＡＬＦ中ＰＬＡ２活性明显升高，提示急性低压缺氧复合梭曼中毒导致的肺损伤可表现为肺微血管通透性（ＰＭＶＰ）增高，微血管内皮细胞损伤和ＰＬＡ２的作用是引起ＰＭＶＰ增高的主要原因。