益骨胶囊含药血清在共育体系中对大鼠成骨细胞增殖、ALP 活性及IL-11 mRNA表达的影响

目的：观察益骨胶囊含药血清在成骨-破骨细胞共育体系中对SD大鼠成骨细胞(OB)增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性及白细胞介素-11(IL- 11)mRNA表达的影响。方法：(1)取1d龄SD大鼠颅骨分离培养OB，取5 d龄 SD大鼠四肢股骨、胫骨分离培养破骨细胞(OC)，建立细胞上清相通但细胞间不相互混杂的平 面式成骨- 破骨细胞共育体系，实验分为两组(含药血清组和对照组)。 (2) MTT法检测OB增殖，氨基安替吡啉测酚法测定ALP活性，FQ-PCR法测定IL-11 mRNA相对表达量。结果：含药血清组中OB的A值、ALP活性、IL-11/β-actin比值均高于对照组(P<0.05) 。结论：益骨胶囊含药血清在共育体系中可促进OB增殖、增强OB ALP活 性，提高IL-11 mRNA的表达。     

碱性磷酸酶同工酶表达的基因基础

碱性磷酸酶(ALP)广泛分布于细菌和动植物界,在人体以肝、骨、肾、胎盘和小肠的活性最高,肺和嗜中性白细胞也有活性。ALP主要分布在细胞的质膜,在一些疾病时可释入血中,使血清ALP增高。正常组织表达的ALP同工酶ALP是一种糖蛋白。根据酶学和免疫学性质可将正常组织表达的ALP同工酶分为三类:①肝型ALP,包括肝、骨、肾、肺等的ALP.许多酶学性质是相同的,如对热失活敏感,易受L-同型精氨酸(L-HArg)和左     

连翘苷对创伤性骨折大鼠模型骨愈合作用的研究

目的本研究旨在探索连翘苷(forsythin)对大鼠软组织损伤和骨愈合作用的影响。方法利用闭合式股骨干骨折术模拟大鼠创伤性骨折模型,模拟创伤性骨关节炎。SD大鼠随机分为4组:健康对照组、健康加药组、骨折模型组和模型加药组。番红O快绿染色检测大鼠骨组织变化并检测大鼠血清Ca、P含量和碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)活性;Western blot检测血清骨形态发生蛋白(BMP-2)、胶原和增殖标记蛋白表达水平;ELISA检测炎症因子iNOS, TNF-α和IL-6水平。结果连翘苷减轻骨折后骨组织病理损伤;与模型组相比,连翘苷增加骨折后血清Ca、P含量、ALP和BGP活性、血清BMP-2、胶原和增殖标记蛋白表达水平,减少骨折后血清炎症因子iNOS, TNF-α和IL-6水平。结论连翘苷可调节成骨指标和炎症因子,从而改善骨折软组织损伤,促进骨愈合。     

缺氧敏感性不同的大鼠血小板活性的比较研究

HT(Hilltop SD)缺氧敏感大鼠与普通W(Wistar)大鼠,分平原对照组与置模拟5000米高度低压舱10天的慢性缺氧组。慢性缺氧组与对照组肺动脉收缩压的均值(PAP),在HT大鼠分别为51.9±14.2与31.3±3.0mmHg,P<0.001,慢性缺氧组比对照组高65.8%;W大鼠分别为39.7±7.4与28.9±4.7mmHg,P<0.001,慢性缺氧组比对照组高37.4%。对照HT大鼠全血及肺组织5-羟色胺(5-HT)高于对照W大鼠(P<0.05)。慢性缺氧组HT大鼠血小板数增加,与对照组相比,P<0.01;全血及肺5-HT明显减少,与对照组相比,P<0.001及P<0.05;血浆TXB_2增高,与对照组相比,P<0.001;对ADP诱导血小板聚集敏感性降低。慢性缺氧组W大鼠以上指标变化与HT大鼠相似,除血小板聚集外,HT大鼠以上变化比W大鼠更明显。提示对照组两种大鼠血小板功能状态不完全相同,慢性缺氧时,HT大鼠血小板活化程度高于W大鼠,这在HT大鼠肺动脉对缺氧的增压反应敏感中可能起一定作用。     

孕马血清促性腺激素刺激后卵巢储备功能随年龄变化的研究

目的 探讨孕马血清促性腺激素(PMSG)刺激后不同年龄组雌性大鼠血清中抗中肾旁管激素(AMH)的变化规律,探讨PMSG刺激后AMH对预测卵巢储备功能的作用.方法 SD雌性大鼠分为幼年组、成年组和老年组.PMSG注射后54 h,运用ELISA和免疫荧光化学方法,检测血清和卵巢中AMH的表达.结果 血清AMH水平,幼年组(2.92±0.55)ng/mL,成年组(1.90±0.11)ng/mL,老年组(0.80±0.08)ng/mL,成年组与幼年组(P<0.05)、老年组与幼年组(P<0.001)、老年组与成年组(P<0.001)相比,差异具有统计学意义.卵巢中卵泡总数,幼年组57.3±5.5,成年组31.6±31.6,老年组15.1±1.4,成年组与幼年组(P<0.001)、老年组与幼年组(P<0.001)、老年组与成年组(P<0.05)相比,差异具有统计学意义.AMH阳性卵泡的数量,幼年组9.2±2.0,成年组6.3±1.4,老年组4.4±0.8,呈下降趋势.结论 随着大鼠年龄增长,PMSG刺激后,卵巢中分泌AMH的生长卵泡数量减少,血清AMH水平显著降低.PMSG刺激后的AMH水平是一个较好的反映卵巢储备功能的指标.     

I型胶原吡啶交联终肽(ICTP)在骨肿瘤鉴别诊断中的意义

目的检测原发性恶性骨肿瘤、骨转移性肿瘤患者血清中的I型胶原吡啶交联终肽(ICTP)活性,以评价ICTP在骨肿瘤诊断和鉴别诊断中的意义。方法对2004年本院骨肿瘤科收治的40例恶性骨肿瘤、14例骨转移性肿瘤患者,采用酶免疫测定(EIA)方法测定ICTP活性。结果恶性骨肿瘤组的ICTP活性为(16.33±11.82)μg/L,与健康对照组比较有统计学差异(P<0.01)。而骨转移性肿瘤组ICTP活性为(8.97±6.08)μg/L与对照组相比无统计学意义(P>0.05)。两组骨肿瘤组间也有统计学意义(P<0.05)。结论血清ICTP是反映骨肿瘤骨代谢的一个灵敏而简便的检测指标,并对骨肿瘤的诊断及鉴别诊断具有一定的临床意义。     

地塞米松与维甲酸致大鼠骨质疏松动物模型的比较

目的: 了解地塞米松和维甲酸对骨代谢的影响。方法: 选用3月龄健康雌性纯系SD大鼠分别喂食低钙饲料,每周两次肌肉注射地塞米松0.1 mg/100 g体重,连续5周和常规喂养,每天用花生油溶解维甲酸70 mg/kg体重灌胃,连续3周,诱发两种不同类型的大鼠骨质疏松,比较不同组大鼠间血钙、磷、碱性磷酸酶、雌二醇、骨密度、骨灰重、肠钙吸收、骨组织形态多指标的变化。结果: 地塞米松组大鼠的骨组织形态学呈现典型的骨质疏松状态,骨密度、骨灰重、肠钙吸收均显著低于对照组,大鼠体内雌二醇水平亦低于对照组,而血钙、磷、ALP则维持在正常范围,符合骨质疏松的病变特点。维甲酸组大鼠虽然骨骼病变明显,骨灰重、骨密度均显著低于正常大鼠,但血钙、磷、ALP变化明显,与骨质疏松状态下这些指标基本在正常水平或稍低的数据不符。结论: 地塞米松能诱发大鼠的骨质疏松动物模型,维甲酸造成的大鼠骨骼病变非骨质疏松状态而更似骨软化。     

TNFα和SOD在溃疡性结肠炎发病中活性变化的实验探究

目的观察肿瘤坏死因子(TNFα)和超氧化物歧化酶(SOD)在溃疡性结肠炎动物模型血清及结肠粘膜中的活性变化。方法将大鼠随机分成对照组、实验组和实验治疗组,用大鼠TNFαELISA试剂盒和SOD试剂盒测定大鼠血清及肠粘膜中TNFα含量和SOD活力。结果①实验组血清及粘膜中TNFα含量明显高于对照组和实验治疗组(P<0.01);②SOD活力明显低于对照组和实验治疗组(P<0.01)。结论TNFα和氧自由基可通过多种途径介导肠粘膜的损伤。     

CD4+T细胞活化诱导细胞凋亡在原发性胆汁性肝硬化小鼠模型中的作用研究

目的 研究CD4+T细胞活化诱导细胞凋亡(activation induced cell death, AICD)在poly I∶C诱导的原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis, PBC)小鼠模型中的作用.方法 30只C57BL/6雌性小鼠随机分为模型组和对照组,模型组小鼠腹腔注射poly I∶C 5 mg/kg,对照组小鼠注射等体积无菌PBS,16周后通过测定血清抗线粒体抗体(antimitochondrial antibody, AMA)、碱性磷酸酶(alkali phosphatase, ALP)及肝脏HE染色验证模型.磁珠分离小鼠脾脏CD4+ T细胞,分别以Con A和anti-CD3体外诱导细胞凋亡;实时荧光定量PCR测定T细胞中凋亡相关基因Fas、FasL和TRAIL(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand)的表达;Western blot检测CD4+ T细胞中抗凋亡基因Bcl-2的表达.结果 poly I∶C注射16周后模型组小鼠血清AMA均为阳性,同时肝组织汇管区出现不同程度的炎性细胞浸润,而对照组AMA均为阴性,肝组织未出现明显病变.模型组小鼠血清ALP[(110.4±18.3) U/L]显著高于对照组[(52.2±15.4) U/L], P<0.001;模型组小鼠脾CD4+ T细胞AICD显著低于对照组(P<0.001),同时定量PCR结果表明:FasL mRNA水平较对照组有所降低(P<0.05),而两组Fas水平差异无统计学意义(P>0.05),TRAIL水平则显著低于对照组(P<0.001);Western blot结果表明模型鼠的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达较对照组显著增高.结论 TH1细胞的凋亡缺陷可能在PBC小鼠模型的发病机制中有重要作用,该缺陷可能是由于自身免疫机制引起凋亡相关分子Fas体系及TRAIL的表达变化引起,同时通过上调Bcl-2的表达抑制自身反应性T细胞的凋亡.     

去势大鼠5种骨转换生化指标的动态变化

目的： 对去势大鼠骨质疏松动物模型形成过程中5种骨转换指标的变化及其相关性进行研究。方法: 将3月龄SD雌性大鼠分为3组：切除卵巢组(OVX)，假手术组(sham)和对照组(control)，术前和术后分别于1、1.5、2、2.5、3和4月检测血清骨钙素(OC)、碱性磷酸酶(ALP)、 骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和羟脯氨酸(HYP)水平，并作大鼠胫骨病理切片检查。结果: OVX组血清OC、ALP、BALP、TRAP和HYP水平均明显高于sham组，其变化顺序依次为：TRAP/HYP→OC→ALP/BALP；5种指标之间呈显著正相关；术后3月OVX组大鼠胫骨小梁结构有病理改变。结论: 去势大鼠属于高转换型骨质疏松；在模型形成过程中，骨吸收指标的变化早于骨形成指标的改变；骨转换指标是反映绝经后早期骨量丢失的灵敏指标。     

苯妥英钠致大鼠骨质疏松模型的建立及维生素D预防作用的观察

目的：研究苯妥英钠致骨质疏松作用及维生素D的预防作用。方法：将40只SD雄性大鼠随机分为4组(苯妥英钠模型组、D–半乳糖模型组、维生素D预防组、正常对照组),每组10只。其中,用苯妥英钠对苯妥英钠模型组及维生素D预防组大鼠连续灌胃60 d [54 mg/(kg?d)]。60 d后,对苯妥英钠模型组、D–半乳糖模型组、维生素D预防组和正常对照组的相关指标进行检测及比较组间差异。结果：苯妥英钠模型组骨钙[(592.87±120.89)μg]、磷[(173.88±15.98)μg]及血清钙[(2.65±0.09) mmol/L]、磷[(2.13±0.29) mmol/L]、超氧化物歧化酶[(104.40±3.58) NU/mgPro]含量均比正常对照组显著降低(P<0.01),血清碱性磷酸转移酶[(136.00±1.82) U/L]与正常对照组相比有显著升高(P<0.01),骨羟脯氨酸含量[(1128.974±460.77)μg],虽缺乏统计意义但相比于正常对照组仍有所降低,上述变化与D–半乳糖模型组的变化趋势相同,并比后者的变化更加显著。结论：长期大量摄入苯妥英钠可以导致大鼠发生骨质疏松的可能性增加,维生素D可以阻止或减缓这种变化趋势。     

血管活性肠肽抑制实验性类风湿性关节炎的研究

类风湿性关节炎是一种自身抗原未明的慢性自身免疫病,以多关节的慢性炎症及渐进性骨和软骨的破坏为主要特征。胶原诱导的关节炎因其临床表现、病理组织学改变以及免疫学表现等方面与类风湿性关节炎的相似性而成为理想的动物模型。在成功建立了胶原诱导的大鼠关节炎模型(CIA)的基础上采用了血管活性肠肽(VIP)注射,研究其干预关节炎发生的效果。结果显示:使用血管活性肠肽组的大鼠CIA发病率和严重程度明显降低,关节肿胀以及骨和软骨的破坏减轻,大鼠血清中抗胶原抗体水平显著降低,大鼠T淋巴细胞对胶原的增殖反应也显著降低。提示VIP可能通过减轻对胶原的免疫应答而抑制关节炎症状,具有可能的临床应用价值。     

血清PSA、ALP检测和核素骨显像诊断前列腺癌早期骨转移

目的:探讨早期明确前列腺癌骨转移的有效方法。方法:选择45例前列腺增生患者作为对照组,用化学发光免疫分析法检测PSA;酶法检测单脂磷酸水解酶(ALP即AKP);用SPECT对38例前列腺癌患者进行全身核素骨显像的同时,测定血清PSA、ALP。结果:有骨转移的Pca患者的血清PSA和ALP浓度明显高于无骨转移及前列腺增生(BHP)患者;骨显像阳性组和骨显像阴性组分别与前列腺增生组比较,PSA有极显著性意义(P<0. 001);ALP测定阳性组与增生组比较有显著性意义(P<0. 001),阴性组与增生组比较无显著性意义(P>0. 05)。结论:同时测定血清PSA和ALP有助于明确前列腺癌患者核素骨显像异常表现的病变性质。     

益骨胶囊含药血清对共育体系中成骨细胞表达骨保护素mRNA的影响

目的 观察益骨胶囊含药血清在成骨-破骨细胞共育体系中对SD大鼠成骨细胞表达骨保护素(OPG)mRNA的影响.方法 取1d龄SD大鼠颅骨分离培养成骨细胞(OB);取5d龄SD大鼠四肢长骨分离培养破骨细胞(OC).建立上清相通但细胞间不相互混杂的平面式成骨-破骨细胞共育体系,实验分为含药血清组和对照组.将10月龄SD雌性大鼠分为益骨胶囊灌胃组和生理盐水对照组,制备含药血清和对照血清.检测共育体系中成骨细胞OPG mRNA的表达.结果 含药血清组与对照组比较,OPGmRNA表达明显升高(8.2567±0.1118比3.3350±0.9854),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 益骨胶囊含药血清在共育体系中通过刺激OB表达OPG来实现对OC的活性和凋亡的调节.     

甲状腺乳头状癌患者外周血miR-146a、miR-146b表达水平与预后的关系研究

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)患者血清miR-146a、miR-146b的表达水平及其与临床病理特征、预后的关系.方法 采用前瞻性研究方法,选取2018年6月至2020年2月本院收治的PTC患者80例为研究对象,50例同期健康人群作为对照组.荧光定量PCR检测外周血中miR-146a、miR-146b的表达水平,分析PTC患者血清miR-146a、miR-146b水平与临床病理、预后的关系.结果 PTC患者血清miR-146a、miR-146b表达水平(5.18±0.04、2.59±0.13)高于正常人群(1.01±0.01、1.12±0.03)(t=23.091、8.431,P<0.001、<0.001).miR-146a、miR-146b表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移和组织学亚型有显著相关性(P<0.05).miR-146a低表达组患者累积生存率高于miR-146a高表达组(P=0.001);miR-146b低表达组患者累积生存率高于miR-146b高表达组(P<0.001).结论 miR-146a、miR-146b在PTC患者血清中高水平表达,与肿瘤的进展、预后不良有关.     

异体脂肪源干细胞移植对糖皮质激素性骨质疏松大鼠的影响

目的 基于“筋膜学假说”,探索未分化非特异性结缔组织（筋膜）支架构成的支持与储备系统中的主要细胞储备成分——脂肪源干细胞（ADSCs）移植对糖皮质激素性骨质疏松大鼠骨密度及骨生物力学的影响。方法 40只Wistar雌性大鼠随机分为空白对照组、模型组、治疗组和治疗对照组。利用糖皮质激素建立骨质疏松模型后,经尾静脉移植ADSCs 3×106个/只进行治疗。测定血清Ca、P、碱性磷酸酶（ALP）的含量,L3~L5椎体和右侧股骨骨密度以及左侧股骨最大载荷和刚度。结果 糖皮质激素注射12周后,模型组血清Ca和ALP、骨密度、最大载荷和刚度均明显低于空白对照组,而血清P明显升高 （P<0.01）。ADSCs治疗4周后,治疗组血清Ca和ALP、骨密度、最大载荷和刚度均明显升高,而血清P水平下降。 结论 移植异体ADSCs可以有效改善糖皮质激素性骨质疏松大鼠的骨密度和骨生物力学性能,为糖皮质激素性骨质疏松的治疗提供了新的治疗方法,并为“筋膜学假说”提供了部分实验依据     

双下肢骨折大鼠血液粘度及血清酶活性变化

目的:观察骨折对大鼠血液流变学及血清酶学的影响。方法:20只Wistar大鼠,分为对照组、骨折组。观察双下肢骨折后血液流变学指标以及血清AST、ALT、LDH、LDH-1、HBDH、CK、CK-MB、ALP等指标的变化。结果:骨折组大鼠高、中、低切变率下全血粘度及血浆粘度均显著高于对照组,且血清LDH-1、CK-MB、ALP活性显著高于对照组(P<0.01),而血清AST、ALT、LDA、HBDA、CK活性与对照组无统计学差异(P>0.05)。结论:骨折可致大鼠血液流变性异常以及某些血清酶释放增多,从而引起器官功能障碍。     

血清肌酸激酶在支气管哮喘急性发作中的临床意义

目的探讨血清肌酸激酶(CK)活性测定在支气管哮喘(简称哮喘)急性发作中的临床意义。方法测定82例哮喘急性发作患者和30例健康体检者的CK、CK-MB,同步测定哮喘急性发作患者最大呼气流量占正常预计值的百分比(PEF%)。结果①哮喘重度急性发作组患者CK活性与哮喘轻、中度发作组、正常对照组比较差异均具有显著性(P<0.001);②哮喘轻、中度发作组CK活性与对照组比较差异均无显著性(P>0.05);③哮喘急性发作患者CK活性与PEF%间呈显著负相关(r=-0.589,P<0.001);④哮喘重度发作组患者CK-MB活性显著高于对照组(P<0.001)但CK-MB均只占同步测定的CK活性的6%以内,而CK-MB活性与CK活性呈正相关(r=0.745,P<0.001)。结论CK不仅可用于哮喘急性发作患者病情的判断而且可与心肌损伤鉴别。     

急性坏死性胰腺炎模型大鼠肠血流量及血清磷脂酶A2、白介素-1β的变化

观察了急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis, ANP)时肠组织血流量及炎症介质的变化.实验用96只SD大鼠,随机分成对照组和ANP组,以5%牛磺胆酸钠胰腺被膜下均匀注射复制ANP模型.采用放射生物微球技术在制模后0h、2h和12h分别测定肠组织血流量,同时检测血清磷脂酶A2(PLA2)活性及白细胞介素-1β(IL-1β)水平,并观察肠粘膜病理改变.结果显示,ANP组在制模后2h及12h肠组织血流量(0.80±0.07,0.50±0.06)mL/(min*g)较对照组(1.56±0.18,1.61±0.11)mL/(min*g)明显减少(均P＜0.001),血清PLA2活性(94.29±9.96,103.71±14.40)U/L,IL-1β水平(0.78±0.13,0.83±0.20)μg/L较对照组(65.27±10.52,66.63±9.81)U/L,(0.32±0.06,0.33±0.07)μg/L明显升高(均P＜0.001),肠粘膜损伤程度较对照组明显加重(均P＜0.001).提示ANP早期肠组织血流量减少与炎症介质的升高同时发生,两者均是ANP时肠粘膜损伤的重要因素.     

Aβ1-42对大鼠脑组织SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影响

目的 探究Aβ1-42寡聚体对大鼠大脑的氧化应激损伤的影响.方法 经过Morris水迷宫实验,挑选出逃避潜伏期少于60s的60只实验大鼠随机等分为4组,设为正常组、PBS对照组、Aβ1-42纤维组、Aβ1-42寡聚体组.将Aβ1-42纤维或Aβ1-42寡聚体注射于大鼠右侧脑室制成实验动物模型;PBS对照组采用同样的方法给予注射等量的PBS;正常组不作任何处理.使用可见分光光度计检测大鼠脑组织的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性变化及丙二醛(MDA)的含量水平变化情况.借助于光学显微镜观察苏木精-伊红(HE)染色的各组大鼠海马组织的形态学变化.结果 与正常组及PBS组比较,Aβ1-42纤维组和Aβ1-42寡聚体组大鼠皮质MDA含量(分别为7.826±1.696、11.247±1.948)及海马MDA(分别为9.818±1.900、15.090±2.425)含量增加(P<0.05),皮质SOD(分别为29.829±6.340、18.649±6.070)和海马SOD(分别为51.097±8.381、31.634±8.680)活性下降(P<0.05),皮质GSH-Px(分别为133.113±17.506、79.503±19.936)和海马GSH-Px(分别为154.819±23.688、102.800±28.332)活性下降(P<0.05),其中,以Aβ1-42寡聚体组的变化更明显.HE染色可知,Aβ1-42纤维体及Aβ1-42寡聚体可使大鼠大脑海马区的神经元损伤,其中,Aβ1-42寡聚体对神经元的毒性损伤作用更严重.结论 Aβ1-42纤维、Aβ1-42寡聚体都可通过氧化应激损伤引起大鼠脑组织神经元的损伤,以Aβ1-42寡聚体氧化损伤作用更大.