糖尿病大鼠胃Cajal间质细胞超微结构的改变

糖尿病并发上消化道动力异常十分常见，但其发病机制尚未完全阐明。Cajal间质细胞广泛分布于胃肠道，有着重要的生理功能，目前认为Cajal间质细胞是胃肠道运动的起搏细胞，它不仅能产生节律性慢波电活动，还能调节神经递质的传递。本实验中，我们用大鼠建立糖尿病动物模型，记录其胃电活动，观察糖尿病病变大鼠胃Cajal间质细胞的超微结构改变，探讨糖尿病胃电节律紊乱原因。     

慢性束缚水浸应激对大鼠胃窦Cajal间质细胞超微结构的损伤

目的:研究不同时程慢性束缚水浸应激对大鼠胃窦Cajal间质细胞(ICC)超微结构的损伤,量化分析细胞内不同超微结构的损伤程度.方法:48只雄性SD大鼠随机分为6组,即实验3d、7 d、28 d组和对照3 d、7 d、28 d组,每组8只.实验组每日给予束缚水浸1 h,对照组自由摄食饮水;禁食12 h后分别于第4、8、29天晨脱颈处死,每组中的3只大鼠被各取胃窦组织2块放入3%戊二醛中固定并送电镜室镜检.将损伤的严重程度分成0-3级并以此标准计分并计算.结果:不同应激时间组大鼠胃窦ICC的核周间隙、基膜、内质网的损伤严重程度无明显差别.缝隙连接和线粒体的损伤积分有明显差异,胞质溶解、粗面内质网减少、核异常程度积分有极显著性差异:量化分析显示:随着应激时间的延长,超微结构受损呈现逐渐加重的趋势,主要表现在缝隙连接、线粒体、胞质和粗面内质网等方面.结论:慢性应激可以导致大鼠胃窦ICC超微结构的损伤,不同细胞超微结构的损伤随应激的延长有所差别;量化分析可以显示不同细胞器受损伤的程度.     

胃电节律失常大鼠胃窦肌间神经丛胆碱能神经的改变

目的：探讨大鼠胃窦肌间神经丛胆碱能神经，氮能神经含量变化与胃电节律失常的关系。方法：63例大鼠随机分为正常对照组，胃电节律失常模型组和白芍组。饲养4周后记录并分析胃电信号，测定胃窦肌间神经丛胆碱能神经含量。结果：模型组胃电节律失常明显增加，胃窦肌间神经丛胆碱能神经含量减少；经白芍治疗后，胃电节律失常明显减少，胃窦肌间神经丛胆碱能神经含量恢复正常。结论：胃窦肌间神经丛的胆碱能神经与胃电节律关系密切，当胆碱能神经减少时，胃电节律失常明显增加。     

不同时程慢性束缚水浸应激对大鼠胃窦Cajal间质细胞超微结构的影响

目的:研究不同时程慢性束缚水浸应激大鼠胃窦Cajal间质细胞(ICC)的超微结构改变.方法:♂ SD大鼠48只随机分为6组、即实验3、7、28 d组和对照3、7、28 d组,每组8只.实验组每日束缚水浸1 h,对照组自由摄食饮水;于实验第4、8、29天晨禁食12 h后脱颈处死.取胃窦组织2块放入3%戊二醛中固定并电镜下观察ICC超微结构.结果:所有对照组ICC的超微结构均无异常改变,试验3、7、28 d各组ICC的超微结构与同期对照组比较均有明显的损害,主要表现为ICC的缝隙连接减少、细胞器减少等,以肌内ICC(ICC-MY)和肌间ICC(ICC-IM)为主:随着应激时间的延长,ICC的超微结构受损逐渐加重.结论:慢性束缚水浸应激可以损伤大鼠胃窦ICC的超微结构.     

肝硬化大鼠胃窦Cajal间质细胞的变化

目的观察肝硬化大鼠胃窦Cajal间质细胞的变化,探讨肝硬化胃肠动力障碍的相关机制.方法20只Wister大鼠随机分为肝硬化模型组和对照组,采用四氯化碳溶剂大腿根部皮下注射法制作肝硬化模型,免疫组化染色观察胃窦C-kit阳性Cajal间质细胞的变化,并用透射电镜观察胃窦Cajal间质细胞的超微结构改变.结果与对照组比较,肝硬化组大鼠胃窦C-kit阳性Cajal间质细胞明显减少(P＜0.01),透射电镜观察显示Cajal间质细胞与其他细胞间连接减少,线粒体肿胀、细胞器减少,胞浆内空泡形成.结论肝硬化大鼠胃窦Cajal间质细胞发生明显变化,Cajal间质细胞减少及其超微结构改变可能与肝硬化大鼠胃动力障碍有关.     

胃起搏对大鼠胃窦肌间神经丛5-羟色胺能神经的影响

背景:胃起搏治疗胃动力障碍性疾病已引起广泛关注,但其作用机制尚不清楚。目的:观察胃起搏后胃窦肌间神经丛5-羟色胺(5-HT)能神经的活性变化,探讨胃起搏促胃动力作用的神经化学机制。方法:建立Wistar大鼠胃起搏模型,将大鼠分为起搏组(n=10)和对照组(n=6)。选用适宜的起搏参数以控制起搏组胃电慢波,1h后取胃窦组织,以免疫组化方法结合图像分析技术分析5-HT免疫反应阳性产物的分布、数量和免疫反应强度。结果:对照组大鼠5-HT免疫反应阳性神经纤维以肌间神经丛和节间束中稍多,神经节内阳性神经细胞体少见。起搏组大鼠胃窦组织5-HT免疫反应阳性神经纤维较对照组明显增多,神经节内阳性神经细胞体和带膨体的神经纤维也明显增多,免疫反应增强;肌间神经丛5-HT免疫反应阳性产物面积和平均光密度值均显著高于对照组(P<0.001)。结论:胃起搏后,胃窦肌间神经丛5-HT免疫反应阳性神经纤维和神经细胞体分布增多,5-HT能神经活性增强,表明5-HT能神经可能参与了胃起搏的促胃动力作用。     

非酒精性脂肪肝大鼠结肠Cajal间质细胞超微结构的改变

背景：近年来,非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）已成为我国严重的慢性肝病问题。研究表明肥胖相关NAFLD对胃肠功能有一定影响。目的：观察非酒精性脂肪肝模型大鼠结肠Cajal间质细胞（ICC）超微结构的变化,探讨NAFLD引起胃肠动力异常的可能机制。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和模型组,对照组予基础饲料。模型组予高脂饲料,于第12周末检测血清生化指标．观察肝脏大体、组织学表现。透射电子显微镜观察结肠ICC超微结构。结果：模型组大鼠第12周末体质量、血清ALT、AST、总胆固醇、三酰甘油水平和肝脏脂肪变性程度均显著高于对照组（P〈0．05）,提示造模成功。模型组大鼠有食量偏小、排便次数较多等胃肠功能紊乱的表现。透射电子显微镜下,模型组大鼠结肠ICC数量减少．超微结构明显异常,表现为ICC之间、ICC与平滑肌细胞之间的缝隙连接减少,胞质空泡形成．粗面内质网脱颗粒．线粒体数量减少。结论：ICC数量和超微结构异常可能参与了NAFLD相关胃肠动力异常的发生．     

电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal间质细胞凋亡的影响

目的:探讨电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal间质细胞（ICC）凋亡的影响。方法:取32只SD大鼠,分为空白对照组、模型组、电针组、胃复安组4组,每组8只。采用血糖仪测量大鼠血糖;酚红灌胃法测量计算胃排空率、小肠推进率;提取胃窦ICC原代细胞培养,用Western blot方法检测B细胞淋巴瘤蛋白质2（Bcl-2）、B...     

舒胃汤对功能性消化不良大鼠胃动素及胃窦Cajal间质细胞的影响

[目的]探讨舒胃汤对功能性消化不良( functional dyspepsia,FD)肝郁脾虚证大鼠胃排空、胃动素(Motilin,MOT)、胃窦Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICO的影响.[方法]将60只大鼠随机分为舒胃汤低剂量组(低剂量组)、舒胃汤高剂量组(高剂量组)、木香顺气丸组(中成药组)、莫沙必利组、对照组、模型组,每组10只.采用夹尾刺激方法制造FD模型,造模后第3天各组给予相应药液灌胃,对照组、模型组给予蒸馏水灌胃,持续14d.实验结束后检测胃排空,免疫组化法检测MOT水平,电镜观察胃窦ICC超微结构.[结果]模型组与对照组大鼠比较胃排空延迟,MOT水平明显升高(均P＜0.05).与模型组比较,给药各组大鼠胃排空改善(均P＜0.05);高剂量组和莫沙必利组MOT降低(均P＜0.05);透射电镜观察高剂量组胃窦部ICC与模型组比较结构明显改善,接近对照组.[结论]舒胃汤能够促进胃排空,下调MOT水平,改变胃窦ICC超微结构,恢复胃肠道运动功能可能是舒胃汤治疗FD的作用机制之一.     

调中颗粒对胃肌间Cajal间质细胞功能及数量的影响

[目的]观察功能性消化不良（FD）大鼠胃肌间Cajal间质细胞（ICC）超微形态结构、分布特点和密度变化,探讨调中颗粒治疗FD的机制。[方法]将40只大鼠随机分为5组,各8只,除正常组外,其余采用夹尾法制备FD模型,胃电图的方法检测造模是否成功,电镜观察胃肌间ICC的超微结构。酪氨酸激酶受体c-kit免疫组化法观察不同药物治疗后胃肌间阳性ICC的分布和水平变化。[结果]模型组大鼠胃电参数低于正常组（P〈0．05）;ICC的超微结构证实ICC与胃平滑肌运动具有密切相关性;调中颗粒能明显升高胃窦ICC水平（P〈0．05）,优于多潘立酮（P〈0．05）。[结论]调中颗粒能通过调节ICC的分布和数量,升高胃窦ICC的表达,促进胃蠕动,改善FD大鼠胃电节律。调中颗粒疗效优于半夏泻心汤和多潘立酮,具有整体调节作用。     

实验性脂肪肝大鼠肠道Cajal间质细胞的研究

背景：随着社会经济的飞速发展，脂肪肝的发病率呈逐年增高的趋势。目前关于脂肪肝对胃肠动力影响的研究仍较少，尤其是对并发症的影响因素及其相关机制。目的：观察实验性脂肪肝大鼠空肠Cajal间质细胞数量的变化，探讨其与胃肠动力的相关性。方法：35只Sprague—Dawley（SD）大鼠分为脂肪肝模型组和对照组，其中脂肪肝模型组25只，对照组10只。以高脂饲料喂养大鼠制备脂肪肝模型。造模12周后，以蓝色葡聚糖-2000灌胃，通过检测大鼠小肠推进率评估肠道动力。免疫组化染色检测空肠c—kit阳性Cajal间质细胞的变化。结果：脂肪肝模型制备成功。与对照组相比。脂肪肝模型组肠道动力显著减弱（P〈0．05）。空肠c—kit阳性Cajal间质细胞显著减少（P〈0．05）。结论：脂肪肝大鼠肠道动力减弱可能与空肠CaM间质细胞减少有关。     

胃起搏对大鼠胃窦肌间神经丛单胺氧化酶mRNA表达的影响

目的研究胃窦肌间神经丛中单胺氧化酶mRNA表达,探讨5羟色胺(5-HT)在胃起搏机制中的作用。方法通过手术建立Wistar大鼠胃起搏模型(近远端胃各缝制一对电极),分为起搏组(n=10)和对照组(n=6)。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测起搏组和对照组胃窦肌间神经丛中MAO-A mRNA、MAO-B mRNA的表达量,以恒定表达的β-actin作为内参照。计算MAO-AmRNA、MAO-B mRNA与β-actin mRNA表达积分光密度值的比例(MA/B,MB/B),以反映组织中MAO-AmRNA、MAO-B mRNA的相对表达量。结果RT-PCR研究显示起搏组MAO-A mRNA表达显著弱于对照组,起搏组MA/B比值明显较对照组较少(0.37±0.11vs0.95±0.57,P<0.001);而起搏组MAO-B mRNA表达与对照组无差别,两组间MB/B比值比较也无显著性意义(0.97±0.24vs1.01±0.58,P>0.05)。结论胃起博后胃肌间神经丛内单胺氧化酶mRNA表达量明显减少,表明胃窦肌间神经丛内5-HT可能在胃起搏中发生了重要作用。     

血红素氧合酶与 Cajal 间质细胞在糖尿病大鼠结肠动力障碍中的作用

背景: 血红素氧合酶(HO)催化生成的内源性CO为抑制性神经递质,HO与Cajal间质细胞(ICC)间的相互作用在糖尿病(DM)胃肠动力障碍的研究中备受关注。目的: 探讨HO和ICC在DM大鼠结肠动力障碍中的作用以及其间的关系。方法: 建立DM大鼠结肠慢传输型动力障碍模型,6周后随机分为不予干预的DM组、DM+氯化高铁血红素(Hemin,HO诱导剂)组和DM+锌原卟啉(ZnPP,HO阻滞剂)组,每组8只。9周末测定胃肠推进指数,以蛋白质印迹法检测结肠HO-1、HO-2、c-kit表达情况,间接双重免疫荧光法检测c-kit与HO-1、HO-2共表达情况。结果: DM+Hemin组胃肠推进指数较DM组显著降低,DM+ZnPP组则较DM组显著增高(P均0.05)。正常对照组与DM组近、远端结肠HO-1表达无明显差异,DM+Hemin组较该两组显著增高(P0.05),DM+ZnPP组基本不表达HO-1。DM组、DM+Hemin组和DM+ZnPP组间近端结肠HO-2表达无明显差异,均显著低于正常对照组(P0.05),四组间远端结肠HO-2表达无明显差异。DM组近、远端结肠c-kit表达较正常对照组显著降低(P0.05),DM+Hemin组略低于DM组,DM+ZnPP组较DM组显著增高(P0.05)。除DM+ZnPP组基本不存在c-kit与HO-1共表达外,四组均存在c-kit与HO-1、HO-2共表达,以肌间神经丛区域为著。结论: 结肠ICC减少伴HO表达变化可能是DM大鼠结肠慢传输型动力障碍的机制之一。     

The Relationship between Intestinal Motility and Interstitial Cells of Cajal in Nonalcoholic Fatty Liver Mice

Background

Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is the most common cause of chronic liver disease in western world. However, NAFLD shows an increasing trend in China every year, which has attracted the attention of national health authorities. The previous studies have shown that NAFLD caused severe gastrointestinal motor disorders, but little is known about the interstitial cells of Cajal (ICC) role in gastrointestinal motor disorders.

Objectives

The aim of this study was to observe the ICC in jejunum of nonalcoholic fatty liver mice by immunohistochemistry and assessed the relationship between intestinal motility and ICC.

Materials and Methods

Thirty five Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into nonalcoholic fatty liver (n = 25) and control groups (n = 10), rats were housed individually in cages and had free access to food and water, nonalcoholic fatty liver group was duplicated by high-fat diet (consisted of ordinary food, 20 g/kg cholesterol and 100 g/kg fat) feeding. Dextran blue-2000 was used to monitor the intestinal motility. The proximal small intestine was harvested to investigate the C-kit positive ICC. The hepatic tissue slices were used for pathological observation.

Results

Nonalcoholic fatty liver disease was successfully established. The intestinal motility in nonalcoholic fatty liver group (49.5 ± 10.9) was weaker compared to the control group (57.3 ± 8.9), P < 0.05. The rate of ICC also have shown statistically significant differences between nonalcoholic fatty liver (4.87 ± 2.97/mm ²) and control groups (6.54 ± 3.13/mm ²), P < 0.05.

Conclusions

ICC may be related to the intestinal motility in nonalcoholic fatty liver mice.     

胰岛素、干细胞因子和Cajal间质细胞在糖尿病胃轻瘫中的作用

糖尿病胃轻瘫是糖尿病的常见并发症，严重影响患者的生活质量和血糖控制。胃肠道Cajal间质细胞在维持胃肠功能中发挥重要作用，糖尿病智组织中存在Cajal间质细胞数量和结构的异常改变，从而影响胃动力。胰岛素、干细胞因子对糖尿病胃肠道Cajal间质细胞的病变具有重要调控作用。本文就胰岛素、干细胞因子和Cajal间质细胞在糖尿病胃轻瘫中的作用作一综述。     

Roles of Interstitial Cells of Cajal in Intestinal Transit and Exogenous Electrical Pacing

The aims of this study were to investigate the role of interstitial cells of Cajal (ICCs) on small intestinal transit and its responses to exogenous pacing in W/W^v mice. Eleven W/W^v mice and their controls implanted with four pairs of gastrointestinal electrodes were used for testing the entrainment of slow waves. Another 20 W/W^v mice and their controls equipped with a duodenal catheter and one pair of intestinal electrodes were used to test small intestinal transit represented by the geometric center (GC). Results were as follows. (1) The effect of pacing on slow wave frequency was sustained only in controls, and not in W/W^v mice. (2) Both gastric and intestinal slow waves were completely entrained in controls and W/W^v mice. Higher energy was required for pacing the stomach than the small intestine. (3) There was no significant difference in small intestinal transit between the controls and the W/W^v mice (GC: 5.4 vs. 5.5). (4) Pacing showed no effects on small intestinal transit in either wild-type (GC: 5.4 vs. 5.6) or W/W^v mice (GC: 5.5 vs. 5.7). We conclude that myenteric ICCs may not play an important role in the regulation of small intestinal transit in conscious mice. Gastric and intestinal pacing can be achieved without ICCs.     

高频短波胃电刺激对大鼠强啡肽能神经的影响

背景：以胃电刺激治疗难治性胃轻瘫有一定疗效，但其对中枢神经系统的影响尚不清楚。目的：观察高频短波胃电刺激后大鼠下丘脑和孤束核中强啡肽（Dyn）能、5-羟色胺（5-HT）能神经活性的变化，明确胃电刺激的神经传导通路。方法：10只Wistar大鼠随机分为刺激组和对照组，每组5只。刺激组予高频短波胃电刺激，刺激频率20次／min，刺激能量300μs×2mA，刺激时间30min；对照组仅予假性刺激。刺激结束后30min取脑组织，以免疫组化方法结合图像分析技术分析下丘脑和孤束核中的Dyn、5-HT免疫反应阳性细胞数量。结果：刺激组下丘脑和孤束核中Dyn免疫反应阳性细胞比例显著高于对照组（P〈0．001和P〈0．05），两组下丘脑和孤束核中均未见5-HT免疫反应阳性细胞。结论：大鼠下丘脑、孤束核中的Dyn能神经可能参与了高频短波胃电刺激中枢神经通路的调控，5-HT能神经则不参与此通路。