肺炎支原体RNA和DNA检测在儿童支原体感染诊断中的应用评价

目的评价比较肺炎支原体(MP)的RNA和DNA的检测在儿童支原体感染诊断中的应用效果.方法选取2017年10月至2018年12月某院收治的86例肺炎患儿作为研究对象,对所有患儿在入院24 h内进行采集咽拭子标本,并分别用肺炎支原体RNA实时荧光核酸恒温扩增检测技术(MP-SAT)检测RNA和肺炎支原体DNA实时荧光定量PCR(MP-DNA)法检测DNA.并与最终诊断结果对比,比较MP的RNA和DNA的检测在儿童支原体感染诊断中的应用效果.结果经最终诊断,86例患儿中MP感染阳性49例,MP感染阴性37例.其中MP-SAT检测诊断的MP感染阳性者43例,阴性34例;MP-DNA检测的MP感染阳性者31例,阴性27例.MP-SAT检测诊断儿童MP感染的灵敏度、特异度、准确性分别为87.76%,91.89%,89.53%,MP-DNA检测诊断儿童MP感染的灵敏度、特异度、准确性分别为63.27%,72.97%,67.74%,MP-SAT检测诊断的灵敏度、特异度、准确性均高于MP-DNA检测诊断,差异有统计学意义(P<0.05).结论在儿童支原体感染的初期诊断中,RNA实时检测的灵敏度和准确性更高.     

RTFQ-PCR检测儿童肺炎支原体16S rRNA的临床意义

目的研究实时荧光定量聚合酶链反应(RTFQ-PCR)检测儿童肺炎支原体(MP)16SrRNA的临床意义。方法回顾性分析2014年12月至2016年12月在该院接受治疗的肺炎患儿156例,将以上患儿分为MP感染肺炎(MPP)组,非MP感染肺炎(非MPP)组;另选24例健康儿童作为对照组。使用颗粒凝集试验检测血清MP抗体,使用RTFQ-PCR检测患儿MP 16SrRNA基因,并与血清学的检测结果进行对比,分析患儿病情和基因拷贝数量的联系。结果 156例患儿中两份血清MP抗体有4倍以上升高者112例,两份和单份血清MP抗体检测结果差异有统计学意义(P0.05);单份血清检测的阴性预测值为37.11%,阳性预测值为62.02%,MP诊断的正确率为50.89%;112例确诊的MP感染患儿中RTFQ-PCR检测为阳性109例,敏感度为97.30%;对照组和非MPP组检测为阴性68例,其特异度为100.00%;RTFQ-PCR检测阴性预测值为97.10%,阳性预测值为100.00%;难治性MPP检测出基因拷贝数量为(6.32±1.80)copy/mL,高于普通性MPP[(1.51±0.02)copy/mL],差异有统计学意义(P0.05)。结论 RTFQ-PCR检测儿童MP 16SrRNA基因是诊断前期MP感染肺炎的可靠方法,效果好于血清MP抗体的检测,值得临床关注。     

胶体金法检测M P-IgM抗体在儿童早期MP感染中的诊断价值

目的评估胶体金法检测肺炎支原体免疫球蛋白M(MP-IgM)抗体在儿童早期MP感染中的诊断价值。方法以被动凝集法(PPA)作为MP感染的诊断标准,选取PPA检测MP抗体阳性和阴性的儿童标本血清各80例,根据滴度(1∶40～1∶320)分为4组,每组阳性和阴性各20例,同时采用胶体金法测定每份标本血清MP-IgM抗体,分析胶体金法检测MP-IgM抗体诊断MP感染的灵敏度、阴性预测值。结果以不同滴度(1∶40～1∶320)为阳性界值时,胶体金法检测MP-IgM抗体诊断MP感染的灵敏度分别为10.0%、15.0%、65.0%和100.0%,阴性预测值分别为52.6%、54.1%、74.1%和100.0%。结论以PPA检测MP抗体滴度≤1∶160为阳性界值时,胶体金法检测MP-IgM抗体诊断MP感染的灵敏度和阴性预测值均较低,以抗体滴度≥1∶320为阳性界值时才有较高的灵敏度和阴性预测值,因此,胶体金法检测MP-IgM抗体不适合儿童MP感染的早期诊断。     

应用ROC曲线分析颗粒凝集法检测儿童肺炎支原体抗体在近期感染中的效价水平

目的探讨分析颗粒凝集法(PA)检测儿童肺炎支原体抗体在近期感染中的最优诊断界值。方法对260例以干咳和发热为主要症状的疑似肺炎支原体感染患儿,经荧光定量聚合酶链反应(PCR)法确诊肺炎支原体感染160例及非肺炎支原体感染100例,采用颗粒凝集法(PA)检测疑似患儿血清中的肺炎支原体抗体水平,利用受试者工作特征曲线(ROC曲线)判断抗体效价的最优截断值。结果抗体效价水平>1∶160为最佳的阳性截断值,即在判断近期感染时的最优临床诊断界值。此时的灵敏度为67.5%,特异性为95%,阳性预测值95.6%,阴性预测值64.6%,ROC曲线面积为0.868。结论 PA法检测肺炎支原体抗体对儿童肺炎支原体感染具有一定的诊断价值,其抗体水平能反映患儿的近期感染或既往感染。     

快速培养法与实时荧光定量聚合酶链反应检测肺炎支原体的对照研究

目的探讨快速培养法和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)的异同。方法对2011年1～12月住院的218例疑似肺炎支原体肺炎患儿采集咽拭子,同时用快速培养法和实时FQ-PCR法检测MP。结果快速培养法与实时FQ-PCR法诊断肺炎支原体肺炎的灵敏度、阳性预测值、假阴性率及诊断符合率差异无统计学意义(P>0.05);实时FQ-PCR法诊断肺炎支原体肺炎的特异度明显高于快速培养法,假阳性率明显低于快速培养法,差异有统计学意义(P<0.05)。二者联合检测的灵敏度、阴性预测值及诊断符合率分别为93.8%、90.7%和90.8%,均高于快速培养法和实时FQ-PCR法(P<0.05);假阴性率为6.2%,明显低于快速培养法和实时FQ-PCR法(P<0.05);联合检测的特异度为86.7%,明显高于快速培养法(P<0.05)。结论两种方法的敏感度差别不大,而实时FQ-PCR法的特异性优于快速培养法。应用这两种不同方法学原理的检测方法组合检测,取长补短,在提高肺炎支原体感染检出率的同时,还可以互相佐证,减少实验误差,提高检测的准确性。     

肺炎支原体IgM抗体阳性在各年龄段的检测意义

目的探讨血清肺炎支原体Ig M抗体对肺炎支原体感染患者早期诊断的意义及不同年龄段阳性率的意义。方法取患者静脉血,应用肺炎支原体(MP)Ig M抗体试剂盒对1059例呼吸道感染患者进行MP-Ig M检测。结果MP-Ig M阳性率3个月~1岁为24%;1~3岁为30.5%;3~12岁为39.1%;12~18岁为12.4%;18~76岁为9.3%。结论检测血清中MP-Ig M可作为MP的早期诊断指标,MP主要感染3~12岁儿童。     

荧光定量PCR法检测儿童肺炎支原体的分析

为探讨儿童肺炎支原体（MP）感染的早期诊断，用荧光定量PCR（FQ—PCR）检测技术，连续三年对哈尔滨市儿童医院住院12605例疑似MP感染患儿的血、咽拭子进行DNA检测，结果发现患儿中MP—DNA阳性4302例，阳性率33．33％，其中血液标本4292例，阳性率28．23％，DNA平均拷贝数1．37×104；咽拭子标本8313例，阳性率37．17％，DNA平均拷贝数2．22×105。血液与呼吸道标本之间MP—DNA量差异有显著性（P〈0．005）．提示FQ—PCR可快速、敏感、准确地定量检测标本中MP—DNA，了解MP在患儿体内感染和复制情况，有助于临床明确诊断与治疗方案的选择．     

小儿哮喘与肺炎支原体的相关性分析

选取我院收治的54例小儿哮喘患儿,与48例同期参加健康体检的儿童,分别为观察组和对照组,两组均在一定标准下进行空腹静脉血采取,并使用放射免疫法对免疫球蛋白E(Ig E)水平进行测定,并采用酶联免疫吸附分析法对血清中MP特异性抗体(MP-Ig M)滴度进行测定,进行对比分析。观察组MP-Ig M阳性率为55.56%,明显高于对照组的31.25%。且观察组的MP-Ig M阳性血清总Ig E水平和MP-Ig M阳性外周血嗜酸性粒细胞计数明显高于MP-Ig M阴性血清总Ig E水平及MP-Ig M阴性外周血嗜酸性粒细胞计数,经对比,两组差异具有统计学意义(P0.05)。小儿发生哮喘与MP感染有着密切联系,当小儿出现哮喘时应及时对其肺炎支原体进行检查,并使用大环内酯类药物进行治疗,不仅能提高治疗效果,还可促进预后效果提升。     

FQ-PCR技术在儿童支原体肺炎早期诊断中的应用

目的研究荧光定量PCR检测在儿童支原体肺炎(MP)感染早期诊断中的作用。方法利用荧光定量PCR检测呼吸系统受感染儿童咽拭子中肺炎支原体(MP)的DNA含量,并与血清中MP特异性抗体(MP-IgM)检测阳性结果比较。结果共检测540例,在3岁以下患儿组中,咽拭子中MP-DNA阳性率显著高于血清MP-IgM的阳性率(P<0.05),而3岁以上各组中两种方法阳性率无显著差异(P>0.05)。结论荧光定量PCR法可作为早期快速诊断儿童(尤其3岁以下患儿)MP呼吸系统感染的方法。     

单核细胞/中性粒细胞检测、颗粒凝集法、胶体金法诊断儿童肺炎支原体感染的价值比较

目的比较单核细胞/中性粒细胞(MONO/NEUT)指标检测、颗粒凝集法检测肺炎支原体(MP)抗体、胶体金法检测肺炎支原体Ig M抗体(MP-IgM)对儿童MP感染的诊断价值。方法选取高度符合儿童MP感染典型症状的患儿100例作为研究对象,均采用颗粒凝集法检测MP抗体,并采用胶体金法检测MP-IgM。统计颗粒凝集法、胶体金法对不同病程、不同年龄段患儿的阳性检出率,以快速培养鉴定镜检法为"金标准",比较颗粒凝集法、胶体金法的灵敏度、特异度和准确度,并分析MONO/NEUT指标与MP感染的相关性。结果 100例患儿中,68例患儿经"金标准"确诊MP阳性;相同病程患儿中,2种检测方法的阳性检出率比较,差异无统计学意义(P 0.05); 2种方法对病程≥7 d患儿的阳性检出率均高于病程7 d的患儿,差异有统计学意义(P 0.05);相同年龄段患儿中,2种检测方法的阳性检出率比较,差异无统计学意义(P 0.05); 2种方法对7～14岁患儿的阳性检出率均高于60 d～6岁患儿,差异有统计学意义(P 0.05); 68例MP阳性患儿中,颗粒凝集法的阳性检出率为86.76%(59/68),胶体金法为89.71%(61/68),差异无统计学意义(P 0.05); 2种检测方法的灵敏度、特异度和准确度比较,差异均无统计学意义(P 0.05); MP阳性组患儿MONO/NEUT指标水平升高率高于MP阴性组,差异有统计学意义(P 0.01); Kendall's tau-b等级相关性检验结果显示,MONO/NEUT指标水平与MP阳性结果呈正相关(r=0.565,P 0.001)。结论对于儿童MP感染,胶体金法检测MP-IgM可获得与颗粒凝集法检测MP抗体相似的临床诊断结果,且操作方法更简单,耗时更少,对检测人员的专业素质要求更低,而MONO/NEUT指标水平与MP阳性结果呈显著正相关,故推荐将胶体金法联合MONO/NEUT指标检测应用于MP感染的临床诊断中,以获得更优的诊断效能。