造血干细胞与免疫活性细胞的沉降特性

应用Simonsen的脾指数测定方法以及体内生成脾结节和体外琼脂培养方法,分别研究了小鼠脾脏和外周血中造血干细胞和免疫活性细胞在自然沉降条件下的沉降特性。在小鼠脾脏细胞的沉降试验中,CFU-S的沉降速度为4.50毫米/小时,CFU-C的沉降速度为6.69毫米/小时,脾指数阳性细胞的沉降速度为3.57毫米/小时。在小鼠外周血白细胞的沉降试验中,CFU-S的沉降速度为4.96毫米/小时,脾指数阳性细胞的沉降速度为5.12毫米/小时。上述沉降试验表明,造血干细胞与免疫活性细胞有不同的沉降速度和分布特性,因此,有可能通过自然沉降,在一定程度上分开这两类细胞,其中,粒系定向造血干细胞(CFU-C)的沉降速度要高于多向性造血干细胞(CFU-S),因而,在沉降分离中CFU-C与免疫活性细胞可以得到较高程度的分离。从造血细胞中分离免疫活性细胞是当前造血干细胞移植中的重要研究课题。本文对于应用速度沉降装置分离免疫活性细胞、减轻造血细胞移植中的移植物抗宿主反应(GVHR)的前景作了讨论。     

DHEA对放、化疗损伤造血功能保护作用的实验研究

目的：研究17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯（DHEA）对137Csγ射线和环磷酰胺（CTX）所致小鼠造血及免疫功能损伤的保护作用。方法分别用8．0 Gy 137Csγ射线和CTX建立C57BL/6小鼠动物模型,观察DHEA低、中、高3个剂量对两个模型小鼠的造血干细胞脾结节形成细胞（CFU-S）数、外周血WBC、骨髓有核细胞数、脾脏指数的影响。结果 DHEA各组对小鼠137Csγ射线照射所致的外周血WBC、CFU-S数、骨髓有核细胞数的降低具有保护作用,并增大了脾脏指数。DHEA各组对环磷酰胺引起的小鼠WBC、CFU-S数、骨髓有核细胞数降低有抑制作用。结论 DHEA能减轻辐射和环磷酰胺对小鼠造血系统的损伤。     

抗小鼠多向造血干细胞(CFUs)的抗血清:抗血清功能性质的进一步研究

异种抗小鼠脑组织的血清,具有抑制小鼠骨髓细胞和脾细胞在受照射受体小鼠脾脏内生成脾结节的能力。为进一步探讨这种抗血清对多向造血干细胞(CFU-s)更全面损害的可能性,作者从受体小鼠的造血重建和活存率等方面,研究了抗血清对 CFU-s增殖能力的影响。实验用 CAF_1,雌性小鼠。实验组用的抗血清为家兔抗小鼠脑组织血清(RAMBS),另用对照家兔     

“抗微1号”对γ—射线照射小鼠多能造血干细胞的保护作用

本实验采用了集落形成单位测定法观察抗微1号(KW-1)对γ-射线照射小鼠多能造血干细胞的保护作用。在照射前后各给KW-15天,能增加照射小鼠脾脏内源性造血灶的形成,同时,使脾脏重量和骨髓有核细胞数(NNBMC)较照射对照组明显增加,从而改善小鼠的整体造血功能;KW-1可显著加快照射小鼠多能造血干细胞(CFU-S)的增殖,使其恢复加快,4Gy照射后第14天,KW-1组CFU-S已恢复到正常水平的67.8%,而照射给水组则仅恢复到正常水平的40.7%;CFU-S剂量—存活曲线的结果表明,KW-1组与照射给水组之D_o(存活曲线上使存活细胞每减少63%所需要的照射剂量)和n(射线对靶子细胞的击中次数)无显著差异,说明KW-1对小鼠CFU-S的放射敏感性无明显影响。因此,KW-1防止照后效应,促进照射后CFU-S的增殖恢复是其抗辐射作用机制之一。     

胸腺素组份5对小鼠造血干细胞的作用

实验采用超滤技术提纯的小牛胸腺素组份5(THF_5),对日龄50～60天、体重22～24g的瑞士纯种正常或照射小鼠,连续腹腔注射50、100、150μg,7和14天后,测造血干细胞(CFU-S)、粒系造血祖系细胞(CFU-C)及骨髓有核细胞。实验证明,THF_5不论对正常或照射小鼠的造血干细胞均有增殖作用,而且在一定范围内,给药剂量和CFU-S、cFU-C呈正相关。THF_5对850rad照射小鼠可提高活存率15～30％,与造血干细胞的变化是一致的。说明THF_5能促进受照射小鼠残存干细胞的增殖分化。     

照射骨髓基质细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响

采用辐照方法将骨髓基质细胞(BMSC)预先强化,再经体外培养、富集后与骨髓细胞(BMC)一起经尾静脉输注给全身致死剂量照射的小鼠。采用股骨BMC计数,CFU-GM和CFU-S测定及股骨切片组织学观察等方法研究了这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响。结果表明输入的BMSC对辐射损伤小鼠造血重建具有促进作用。进一步研究表明,这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的促进作用不是由于其中含有造血干细胞(HSC)所致,而是通过其经血循环迁徒至造血组织后对同时输入BMC中的HSC增殖和向粒系分化发挥支持和刺激作用来实现的。     

小鼠骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤的影响

目的：探讨小鼠骨髓基质细胞（marrow stromal cell,MSC）同种异体移植对接受全身大剂量辐射小鼠造血修复的影响。方法：在体外对小鼠骨髓基质细胞进行培养、扩增,并将第三代细胞通过尾静脉移植到同种接受全身大剂量射线照射的小鼠,测定移植后不同时期小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HGB）值,观测各组脾集落形成单位（colony forming unit,CFU-S）,探讨同种异体骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤修复的影响。结果：经骨髓基质细胞移植的小鼠,其WBC、RBC、PLT、HGB在移植后15-20 d较对照组明显增高（WBC、PLT、HGB：P〈0.01;RBC：P〈0.05）,移植组CFU-S明显高于对照组（P〈0.01）。结论：同种异体小鼠骨髓基质细胞移植,能促进小鼠造血干细胞在脾脏定居,增强造血干细胞形成集落的能力,并能显著提高外周血细胞数量,促进损伤后早期造血功能重建。     

骨髓及脾脏干细胞在致死剂量照射小鼠血小板再生中的作用比较

在啮齿动物,移植多能造血干细胞可减轻致死性全身照射所致的造血系统损伤。已证明从不同的造血组织来的干细胞其性能是不同的。移植脾细胞时,CFUs的再生速度比移植骨髓细胞时快;移植脾细胞所产生的脾巨核细胞是移植骨髓时的三倍。为了确定脾脏的干细胞是否可同样提高照射后血小板的修复,本文通过给小鼠输注等量的这两种类型的细胞,比较这种重建后的小鼠血小板的再生情况。另外,通过将脾切除及多血小鼠与正常小鼠作比较,评价了对红细胞需求增加和降低的情况下血小板的再生。将0、0.5、1、2或4×10~6骨髓细胞或10～64×10~6脾细胞由尾静脉注入给受825～950伦γ射线照射的小     

银耳多糖注射剂保护辐射损伤小鼠造血功能的研究

目的 研究银耳多糖注射剂对辐射损伤小鼠造血功能的防护作用。方法 用内源性脾结节形成,股骨有核细胞计数及脾脏指数等方法观察银耳多糖在6mg/kg、12mg/kg、24mg/kg三个剂量时对137Csγ射线照射7.5Gy后小鼠造血功能的影响。结果 照射前连续3d给药,照后第9天受照小鼠的股骨有核细胞数、脾结节和脾指数与对照组相比有明显的增高,经统计学处理有显著性差异。结论 银耳多糖对辐射损伤小鼠造血系统具有保护作用。     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对骨髓造血干细胞的辐射防护作用

用照射小鼠的骨髓造血干细胞(CFU-S)外源性脾结节形成法,评价人基因工程重组SOD(rhSOD),聚乙二醇(PEG)修饰的长半衰期重组SOD(PEG-SOD)对CFU-S的辐射防护作用.结果显示:rhSOD和PEG-SOD均能明显提高CFU-S产率,其中rh SOD在照射前1h给药效果好,而PEG-SOD在照射前2～3h给药作用更为明显,化学修饰后SOD血浆半衰期延长,将使给药时机及药物作用持续时间得到改善.     

银耳制剂对小鼠骨髓造血干细胞及其放射敏感性的影响

水文研究了银耳制剂对小鼠骨髓及造血干细胞的影响。腹腔注射后早期,骨髓有核细胞数明显下降,而外用血白细胞数未见增多,药物使骨髓CFU-S和GM-CFC生成率显著提高,但对其放射敏感性的影响较小。该制剂对照射动物造血功能的恢复有明显的促进作用,揣测与其改善造血微环境有关。     

造血干细胞辐射敏感性的比较

本文研究了在体内外照射条件下小鼠骨髓多向性造血干细胞(CFU-S)和粒系定向干细胞(CFU-C)的辐射敏感性。它们的D(?)值分别为103.4拉德和173.7拉德,反映了CFU-S和CFU-C是两类在性质上不全相同的干细胞群。在目前尚未建立起除啮齿类动物以外的多向性造血干细胞测定技术的情况下,我们应用体外琼脂培养技术,比较了在体外照射条件下狗与小鼠骨髓CFU-C的辐射敏感性,它们的D_0值分别为58.6拉德和190.2拉德,反映了两者在辐射敏感性上存在着明显的差异,为阐明不同种属动物的不同辐射耐受性提供了一个根据。联系到AET具有降低造血干细胞辐射敏感性以及提高动物的辐射耐受性的事实,进一步论证了在造血型放射病的发生和发展中,造血干细胞的损伤和修复是起着重要作用的。     

CFU-S的不均一性与放射损伤效应的研究

正常(NBM)与3Gy照射(IBM)骨髓细胞形成的7～13天脾结节数量变化过程不同。NBM组: 7～9天脾结节数呈指数性增加I 9～11天呈指数性下降;11～13天再次增加。IBM组: 7～9天脾结节数增加幅度加大, 但9天后脾结节数无明显改变。NBM组：8天脾结节以红系为主, 13天脾结节以混合型为主。IBM组。8天脾结节中, 红系较对照组明显下降, 13天时与对照无明显差别。 8天CFU-S的放射敏感性高于13天CFU-S, D0值分别为1.09和1.48Gy。在8Gy全身照射后, 小鼠骨髓中8天和13天CFU-S的恢复过程大致相似。本文的实验结果表明, CFU-S的放射敏感性也是不均一的。在7～9天的CFU-S中, 可能存在一个趋向红系分化而对射线更敏感的亚群。     

梁金菇多糖对辐射损伤小鼠造血功能的影响

目的：研究梁金菇多糖（LJPS）对造血功能辐射损伤的治疗作用及机理。方法：用造血祖细胞克隆法，内源性脾结节形成法，骨髓有核细胞计数及脾脏指数等方面观察了LIPS对60^Coγ射线照射5．5Gy小鼠造血功能的影响，并用免疫组化法检测辐射骨髓及脾脏细胞的 bcl-2蛋白的表达。结果：LJPS辐射后第7天骨髓CFU－GM，CFU－E，CFU－F数量增加，辐射第14天的骨髓有核细胞数，脾脏指数，CFU－S明显增多，辐射第3，7，14天骨髓，脾脏bcl-2蛋白表达上升。结论：LJPS对小鼠造血功能辐射损伤具有治疗作用，其机理与调节骨髓，脾脏bcl-2蛋白表达有关。     

超氧化物歧化酶的辐射防护作用

本研究甩照射小鼠的活存率和外源性脾结节法评价了牛红细胞SOD的辐射防护作用.小鼠受875拉德γ射线照射前1小时静脉注射200mg/kgSOD可提高活存率50%,照后给药无效.小鼠受350拉德照射前或照射后静脉注射200或35mg/kg SOD,都能明显提高骨髓CFU-S的形成能力与总量,照后给药效果较低.照前与照后各注射一次35mg/kg SOD,可加强SOD对CFU-S的防护效果.照前腹腔注射或皮下注射SOD对骨髓造血干细胞也有良好的辐射防护作用.对SOD的辐射防护效果及其作用机制进行了讨论.     

小鼠脾细胞培养上清中的粒系造血活性及其照射后的改变

观察了小鼠脾脏，胸腺和骨髓细胞培养上清中的粒系造血刺激活性和抑制活性及其在照射后的改变。结果表明，正常小鼠脾细胞培养上清中有一定的造血刺激活性，抑制活性不明显，经３、５、７、８、９Ｇｙ不同剂量照射后早期造血刺激活性随之降低，大剂量照射可降至零。１２￣１４ｄ刺激活性有所恢复。大剂量照后早期小鼠脾细胞培养上清中有一定的抑制活性，照后小鼠的胸腺、骨髓细胞培养上清中未见明显的粒系造血刺激活性，大剂量照射仅     

厌氧棒菌菌苗对造血干细胞增殖的影响——巨噬细胞调控造血的初步探索

本实验表明注射厌氧棒菌菌苗(简称CP菌苗)对正常小鼠多向造血干细胞(CFU-S)和粒巨噬系祖细胞(CFU-GM)的增殖均有明显的促进作用,此外CP菌苗对受750rad照射小鼠的骨髓干细胞也有明显的保护作用。实验中又观察到注射CP菌苗组腹腔巨噬细胞吞噬功能明显增高。     

低剂量率γ线连续照射后造血损伤与恢复的长期观察

小鼠经低剂量率(70拉德/天)γ线连续照射25天后,造血干细胞和造血祖细胞数量大幅度减少。在连续观察的一年期间,虽然骨髓有核细胞数和晚红系祖细胞(CFU-E)很快恢复到了正常水平,但造血干细胞(CFU-S)、祖细胞(BFU-E、CFU-GM)却始终处于低下状态,其水平相当于向年龄正常动物的50～70%.骨髓造血微环境也同时受到不同程度的破坏,停止照射詹半年其CFU-F只恢复至正常的70%.这些结果表明,小鼠经低剂量率γ线连续照射后,造血组织中存在着潜在的损伤,它是产生一系列辐射远后效应的重要原因。     

小牛胸腺素F5对小鼠骨髓造血干细胞辐射损伤的防护作用

小鼠受200～100拉德γ线一次全身照射后连续7天注射胸腺素F₅50微克一天,测定多向性造血干细胞(CFU-S),实验组D₀值为300拉德,对照组为150拉德,根据D₃₇求得的剂量递减系数为2,表明胸腺素对CFU-S有保护作用。小鼠一次全身照射100～400拉德后,骨髓细胞经胸腺素1微克/平皿体外培养48小时,其粒系造血干细胞(CFU-S)存活率高于对照组,说明胸腺素对CFU-S有一定保护作用。如在照射上述剂量后,注射胸腺素140微克/天,连续7天,其CFU-S存活率比对照组明显增高,说明胸腺素对CFU-S有促进增殖、分化,即一定的治疗效果。如给小鼠注射胸腺素100微克/天连续7天后,经125拉德照射,CFU-S的活存率比对照组明显提高;但当剂量增人到375及625拉德时,未见有保护作用。     

亚致死剂量X射线照射的小鼠骨髓粒系祖细胞(CFU—C)的辐射敏感性及其数量的恢复

多能造血干细胞(CFU-S)是造血组织中一组未分化的细胞群,它可根据需要而产生不同的血细胞。这些未分化的增殖细胞通常对电离辐射非常敏感,并且这些细胞的枯竭可造成机体的严重辐射损伤。因此很多学者反复研究了造血干细胞在恢复射线损害造血组织方面的作用。近来一些学者广泛注意到CFU-C的自身更新能力,认为受照射动物的CFU-C是由造血组织中原有活存的但非同一细胞群的CFU-S或CFU-C再生的,活存的CFU-S的子代对X射线