雌激素受体基因在乙菧酚诱发的大鼠催乳素瘤中的表达

目的 研究雌激素受体（ER）α、ERβ和断裂的雌激素受体产物－1（TERP－1）在乙Di酚（DES）诱发的大鼠催乳素瘤中的表达。方法 雌性Wistar大鼠摘卵巢后皮下植入含DES20mg的硅胶管,以空白硅胶管作对照。8周后处死动物,用放免法测定大鼠血清催乳素,观察大鼠垂体组织学改变,并用免疫组化方法检测催乳素染色阳性细胞,用逆转录－聚合酶链反应分析垂体组织中ERα、ERβ和TERP－1 mRNA的转录水平。结果 实验组大鼠血清催乳素水平、垂体重量和垂体组织催乳素阳性细胞均明显高于对照组（P＜0.001),ERα、ERβ和TERP－1 mRNA在两组大鼠垂体组织中均有转录,其中ERα和TERP－1 mRNA在实验组中的转录水平比在对照组高（P＜0.001和P＜0.05)。结论 雌激素可以通过雌激素受体直接影响垂体催乳素细胞。正常的雌激素受体与异常的雌激素受体的共同存在提示雌激素调节作用的异质性,它们之间的朴素关系及与垂体肿瘤发生的关系,有待进一步阐明。     

ER、PCNA在老年泌乳素型垂体腺瘤中的表达及临床意义

目的 分析老年泌乳素型垂体腺瘤中雌激素受体（ER）和增殖细胞核抗原（PCNA）与肿瘤侵袭性生长的关系。方法 手术切除的泌乳素型垂体腺瘤标本46例，分为老年组和非老年组，采用免疫组化方法分别测定ER和PCNA蛋白表达；从组织中提取RNA，经RT-PCR方法扩增ER-mRNA；从细胞中提取蛋白，行Western免疫印迹检测。结果 ER、PCNA蛋白及ER-mRNA表达在老年组和非老年组存在明显差异，且免疫组化和Western免疫印迹两种方法检测的ER蛋白表达水平相一致。结论 ER和PCNA与肿瘤的侵袭性密切相关，可以作为临床判定肿瘤侵袭生长的分子标志，为老年泌乳素型垂体腺瘤的综合治疗提供体依据。     

雌激素受体在人类垂体腺瘤中的表达

目的检测雌激素受体(estrogen receptor,ER)在人类不同类型激素垂体腺瘤中的表达,探讨垂体腺瘤中分泌不同类型激素的腺瘤细胞与ER免疫组化阳性细胞之间的关系.方法采用免疫组化S-P法对53例垂体腺瘤标本进行激素分型,检测垂体腺瘤中ER蛋白的表达.采用免疫组化双标法检测多激素分泌型垂体腺瘤中垂体激素合并ER表达的情况.结果53例垂体腺瘤标本中,部分PRL(5/7)、FSH(2/3)、LH(1/1)单激素腺瘤及部分多激素腺瘤有ER蛋白表达,而全部GH、ACTH、TSH单激素腺瘤均无ER蛋白表达,4例无功能腺瘤无ER蛋白表达.在33例多激素型垂体腺瘤标本中,22例有ER蛋白表达,其中PRL ER双标染色阳性标本10例、LH ER双标染色阳性标本9例、FSH ER双标染色阳性标本7例、GH ER双标染色阳性标本2例,33例标本的ACTH ER和TSH ER的双标染色均为阴性.结论垂体腺瘤患者的性别不影响肿瘤组织中ER蛋白的表达.垂体腺瘤中,分泌PRL、LH或FSH的垂体腺瘤细胞可表达ER;分泌ACTH或TSH的垂体腺瘤细胞不表达ER;分泌GH的垂体腺瘤细胞是否表达ER可能与该垂体腺瘤是否同时分泌PRL有关.ER在PRL、LH及FSH垂体腺瘤细胞的发生、发展中发挥作用.     

体外诱导骨髓基质细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的观察大鼠骨髓基质细胞（MSCs）的生长特点及在体外诱导条件下分化为神经元样细胞的能力，并寻找最佳诱导时间。方法无菌条件下，收集大鼠股骨骨髓，分离出MSCs进行培养、扩增、纯化。用神经妥乐平（NT）进行诱导。在不同时间用巢蛋白（Nestin）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学染色鉴定阳性细胞。结果MSCs经诱导后呈神经元样形态。免疫组化鉴定显示Nestin阳性细胞表达在诱导第3天时最多，为48．20％±5．61％，NSE阳性细胞表达在第5天时最多，为31．50％±7．32％。结论MSCs在体外诱导条件下可经神经前体细胞转化为神经元样细胞，且第5天为最佳诱导时间。     

雌激素对去卵巢大鼠不同脑区胆碱乙酰化转移酶表达的影响

目的 观察内外源性雌激素对大鼠脑内不同部位胆碱乙酰化转移酶（ChAT）表达的影响，探讨雌激素与ChAT的关系。方法 21只雌性Wister大鼠随机分为双侧卵巢切除组（OVX组）、雌激素治疗组（E2组）和对照组。免疫细胞化学染色法观察海马CAl区、皮层区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区等部位ChAT蛋白表达阳性细胞，放免法测量血中雌激素含量。结果 与对照组和E2组比较，OVX组大鼠海马CA1区、大脑皮层区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区ChAT阳性细胞数显著减少（t=2．68-5．68，P〈0．01），血中雌激素含量明显降低（t=4．90，P〈0．01）；E2组和对照组比较无显著差异。结论 体内外雌激素含量的变化可影响大鼠脑内多部位ChAT的表达。     

泌乳素腺瘤组织中BMP-4的表达及意义

目的 研究骨形态生成蛋白4 (BMP-4)在泌乳素(PRL)腺瘤发生发展中的作用.方法 PRL腺瘤标本37份,选取10份进行原代培养,用5、10、20、50、100 ng/ml的BMP-4对PRL腺瘤细胞诱导培养,观察细胞形态,放射免疫法测定PRL水平;用免疫组化和原位杂交技术检测37份PRL腺瘤及8份正常垂体组织中BMP-4 mRNA、BMP-4蛋白的表达水平.结果 BMP-4 5 ng/ml可促进PRL分泌,20 ng/ml达最大效应,50 ng/ml时促分泌作用开始下降, 100 ng/ml时细胞开始凋亡;PRL腺瘤组织中BMP-4 mRNA、BMP-4蛋白表达水平与腺瘤侵袭性呈正相关(r=0.885,P＜0.01).结论 BMP-4可能是PRL腺瘤发病机制中重要的一环;可作为判断PRL腺瘤增殖、侵袭性的一个重要指标.     

达那唑诱导的雌性性早熟大鼠GnRH及其受体mRNA的表达

目的 观察达那唑对雌性大鼠下丘脑-垂体-靶腺轴及下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA表达的影响。方法 5天龄雌性大鼠皮下一次注射300μg达那唑以诱导真性性早熟。从25日龄起观察和记录阴门开启鼠龄和从阴门开启日起进行阴道涂片以确定第一个动情周期。检查阴道涂片和体重及垂体、肾上腺、子宫、卵巢器官重量，观察雌激素依赖的阴道脱落细胞的周期性变化和主要器官的发育情况。RT-PCR法观察雌性大鼠下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。结果 5日龄雌性大鼠给予皮下注射达那唑，可诱导大鼠阴门提前开启和建立性周期的时间提前，子宫和卵巢的重量明显增加，下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高。结论 达那唑对雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴有多层次的作用，可诱导雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的功能提前启动。     

Survivin基因在垂体腺瘤中的表达及其与p53基因的关系

应用TUNEL技术和SP法检测8例健康人垂体组织（对照组）和48例垂体腺瘤患者肿瘤组织（观察组）的Survivin和p53基因表达。结果Survivin基因在对照组中不表达；观察组阳性率为66．7％，且侵袭性垂体腺瘤较非侵袭性垂体腺瘤阳性率明显升高，P〈0．05。p53基因在对照组阳性率为12．5％，观察组为62．5％，其中侵袭性阳性率较非侵袭性明显升高，并且垂体腺瘤组织中p53基因和Survivin基因呈正相关性（r=0．63，P〈0．05）。提示Survivin基因在垂体腺瘤的发生、发展中起一定作用，其侵袭性强，预后不良；与p53基因的异常表达密切相关。     

雌激素对去卵巢大鼠不同脑区APPβ位点裂解酶表达的影响

目的观察内外源雌激素对卵巢切除大鼠大脑皮层、海马CA1区APPβ位点裂解酶（BACE）表达的影响。方法21只雌性Wistar大鼠随机分为假手术对照组、卵巢切除组（OVX组）、卵巢切除后补充外源性雌激素组（E2组）。放免法测量大鼠血中雌激素含量。免疫荧光标记细胞化学法计数皮层区、海马CA1区BACE蛋白表达阳性细胞。结果与对照组和E2组比较，OVX组大鼠皮层区、海马CA1区BACE阳性细胞数显著增加（P均〈0．01），血液雌激素含量显著降低（P均〈0．01）。E2组与对照组比较，两组之间各观察部位BACE表达阳性细胞数和血液雌激素含量无显著差异（P均〉0．05）。结论体内外雌激素含量的变化可影响大鼠皮质和海马区域BACE表达。     

垂体腺瘤VEGF和bFGF的表达及相关性研究

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在垂体腺瘤中的表达及其相关性,探讨它们与垂体腺瘤侵袭性生长的关系.方法 垂体腺瘤组织标本55例,其中侵袭性者30例,非侵袭性者25例.运用HE染色方法在光镜下观察垂体腺瘤组织的细胞形态、结构及排列方式,并用免疫组化法检测标本中VEGE和bFGF的表达情况.结果 侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤组织的病理特点在HE染色光镜下不易区分;VEGF和bFGF在侵袭性垂体腺瘤中的表达明显高于在非侵袭性垂体腺瘤(P<0.05),在侵袭性垂体腺瘤中两者的表达存在正相关关系(r=0.508,P<0.05).结论 VEGF和bFGF的过度表达与垂体腺瘤的侵袭性生长有密切的关系,两者具有协同作用,可以反映垂体腺瘤的生物学行为.     

垂体生长激素细胞腺瘤的免疫细胞化学染色与电镜观察50例的结果比较研究

利用伴有肢端肥大症的垂体腺瘤50例手术切除的瘤组织,作电镜观察及免疫细胞化学染色。对比了滴染法与小盒长期浸泡法染色的优缺点。在电镜下看到多分泌颗粒GH细胞和少分泌颗粒GH细胞,分别与免疫细胞化学染色中的GH强阳性细胞和GH弱阳性细胞相当。在电镜下21例GH分泌颗粒与PRL颗粒并存,但在免疫细胞化学染色中,21例都为GH(+),而PRL 19例(+)、2例(一)。免疫细胞化学染色可进一步验证在电镜下看到的腺瘤中分泌颗粒的性质,提高诊断垂体腺瘤性质的准确性。     

垂体泌乳素腺瘤患者的心理分析与护理对策

垂体腺瘤是蝶鞍区最常见的良性肿瘤,发病率为1／10万,好发于青壮年。垂体泌乳素腺瘤占垂体腺瘤的40％～60％,对患者造成了一系列社会心理影响。我们对患者出现的心理问题进行调查分析,并根据其个体的心理状态和问题实施针对性的心理护理,对患者的预后有重要意义。     

老年垂体腺瘤的微侵袭治疗

目的 探讨老年垂体腺瘤患者行经蝶垂体腺瘤切除术的安全性及有效性.方法 回顾性分析21例行经蝶手术治疗的老年垂体腺瘤患者的临床资料.结果 经蝶垂体腺瘤切除术后,71.4％的头痛患者及70％视力改变的患者症状得到明显改善,1例患者围术期死亡.在随访的18例患者中,有14例行MRI检查未见肿瘤复发,1例术后泌乳素增高,口服溴隐亭治疗.术后均无严重近期及远期并发症.结论 在充分的术前准备、精细的手术操作及良好的围术期管理情况下,经蝶垂体腺瘤切除术安全有效,可作为老年垂体腺瘤患者的首选治疗方式.     

人脑胶质瘤干细胞的培养及分离方法

目的探讨人脑胶质瘤干细胞的培养和分离方法。方法取脑胶质瘤手术标本,制成单细胞悬液用无血清培养基培养,加入表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）进行诱导分化;用免疫组化法检测巢蛋白（Nestin）和胶质原性纤维酸蛋白（GFAP）;用免疫磁珠分选系统进行细胞分离,流式细胞仪检测分化前后CD133阳性细胞的比率。结果培养出悬浮生长的人脑胶质瘤干细胞球,Nestin表达呈阳性,分化后GFAP表达呈阳性;分离前CDm阳性细胞百分比为4．66％±0．55％,分离后为87．21％±6．17％,P〈0．05。结论无血清培养法、免疫磁珠分选系统可成功培养和分离人脑胶质瘤干细胞。     

雌激素受体α在大鼠心脏组织的分布

目的 :观察不同性别 ,不同雌激素水平时雌激素受体α（ERα）在大鼠心脏及培养的心肌和心脏成纤维细胞的分布。方法 :通过免疫组织化学方法观察正常雄性及雌性 SD大鼠、卵巢切除大鼠、假手术及雌激素替代治疗大鼠心脏组织 ERα的分布 ,以及雌激素对培养的心肌细胞和心脏成纤维细胞 ERα表达的影响。结果 :ERα免疫反应阳性物质呈部位特异性地分布于大鼠心脏组织中 ;不同性别大鼠未见明显差异 ;卵巢切除大鼠心脏组织 ERα免疫反应阳性物质明显减少 ;雌激素替代治疗组 ERα的表达恢复至正常水平 ;离体培养的心肌细胞及心脏成纤维细胞 ERα染色阳性 ,给予生理剂量雌激素后 ,心肌及心脏成纤维细胞 ERα阳性染色明显增强。结论 :ERα不仅存在于心脏组织中 ,且其表达受雌激素的调控。     

雌激素对去卵巢大鼠不同脑区酪氨酸激酶A表达的影响

目的观察内源性和外源性雌激素变化对大鼠脑内不同部位酪氨酸激酶A（TrkA）表达的影响。方法21只雌性Wistar大鼠随机分为假手术对照组、卵巢切除组（OVX组）、雌激素治疗组（E2组）。免疫细胞化学法计数海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核等部位TrkA蛋白表达阳性细胞数。放免法测量大鼠血清雌激素含量。结果与对照组比较，OVX组大鼠海马CA1区、大脑皮层区、杏仁复合体区TrkA阳性细胞数显著减少（均P〈0．01），Meynert核区无显著差异（P〉0．05），血雌激素含量明显降低（P〈0．01）；E2组脑部各区TrkA表达与OVX组比较显著增多（均P〈0．01），血清雌激素含量显著增高（P〈0．01）。结论内源性和外源性雌激素含量变化可影响大鼠脑内多部位TrkA的表达。     

P53,P185蛋白在大肠绒毛状腺瘤及其癌变组织中的表达

目的探讨p53，p185基因在大肠绒毛状腺瘤及癌变组织中的表达及其诊断价值．方法采用微波炉、免疫组化SP方法，检测55例大肠腺癌标本，其中大肠绒毛状腺瘤癌变20例，大肠浸润性腺癌35例，12例大肠绒毛状腺瘤标本，10例大肠增生性息肉标本中P53，P185蛋白的表达情况．结果10例大肠增生性息肉，p53，p185染色均阴性．55例大肠腺癌和12例大肠绒毛状腺瘤标本中，p53染色阳性率分别为44％（23／55），8．3％（1／12）．p185染色阳性率分别为49％（26／55），17％（2／11）．比较大肠腺癌与绒毛状腺瘤p53和p185的关系，差异均有显著性（P＜0．05）．20例大肠绒毛状腺瘤癌变及35例大肠浸润性腺癌标本中，p53染色阳性率分别为60％（12／20），13％（11／35）．p185染色阳性率分别为35％（11／20），54％（19／35）．比较两者p53的关系，差异具有显著性（P＜0．05），p185的关系，差异无显著性（P＞0．05）．结论p53可作为大肠绒毛状腺瘤癌变诊断的有用指标，p185对大肠绒毛状腺瘤癌变的诊断无意义．     

APP17肽对卵巢去势大鼠学习、记忆功能和海马神经NT-3、NF表达的影响

目的　探讨APP1 7肽是否能提高去卵巢大鼠学习、记忆功能及作用机制。方法　雌性大鼠分三组 :①正常组 ,②去卵巢组 ,③用APP1 7肽保护去卵巢组。通过水迷宫测试 ,观察行为学的改变。而后灌注固定 ,取大脑组织冰冻切片 ,做NT 3、NF免疫组化染色。结果　 (1 )行为学检查 :给予APP1 7肽的卵巢去势大鼠游完全程的时间及错误反应次数均较未给予APP1 7肽的卵巢去势大鼠少 (P<0 0 5)。 (2 )用APP1 7肽保护的卵巢去势大鼠海马区神经元神经营养素 3(NT 3)、神经丝蛋白 (NF)的表达与正常大鼠相似 ,阳性细胞计数及平均灰度 (反映染色强度 )与卵巢去势大鼠比较差异显著 (P <0 0 5)。结论　卵巢去势大鼠存在学习、记忆障碍 ,APP1 7肽具有防治因雌激素缺乏而致神经元退变的功效     

维生素E对老年雌性大鼠雌激素及海马芳香化酶表达的影响

目的 探讨维生素E用于防治绝经后女性中枢神经系统退行性疾病的作用及机制.方法 采用自然衰老雌性大鼠为动物模型,实验组每日注射维生素E 5 mg/kg(小剂量组)、15 mg/kg (中剂量组)、60 mg/kg(大剂量组)(n=8).采用放免法检测血清雌激素含量,用免疫组化法观察维生素E对海马芳香化酶表达的影响,并与成年大鼠(对照组)对比观察.结果 老年对照组较成年对照组雌激素水平下降,中、大剂量组血清雌激素水平回升(P＜0.05),海马芳香化酶表达阳性细胞数目多、表达强,大剂量组呈强阳性.结论 一定剂量维生素E不仅可以提高血中雌激素水平,而且可以通过增强海马芳香化酶的表达使局部雌激素浓度增加而发挥其神经保护作用.     

雌激素对大鼠内脏高敏感形成和P2X3 mRNA表达的影响

背景：雌激素可能与女性肠易激综合征（IBS）的高发病率有关，P2X3受体在介导痛觉中发挥重要作用。目的：探讨雌激素对避水应激大鼠内脏高敏感形成和P2X3 mRNA表达的影响。方法：雌性Wistar大鼠避水或假避水应激10d，每天1h，每次应激或假应激前30min侧脑室注射17β-雌二醇（E2）或0．9％NaCl溶液（NS）1．0μg，以结直肠扩张时的内脏运动反射（VMR）幅度值为指标观察内脏敏感性的变化。取避水应激大鼠的L1和S1背根神经节行P2X3免疫荧光染色，比较P2X3免疫阳性细胞数，荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）比较两组大鼠L1至S2背根神经节P2X3 mRNA的表达。结果：应激或假应激后，E2应激组的VMR幅度值较应激前显著升高，NS应激组以及E2假应激组和NS假应激组均无显著变化。E2应激组的背根神经节P2X3阳性细胞数[（38．38±3．31）％]显著高于NS应激组[（33．20±2．85）％1（P〈0．01），P2X3 mRNA表达（0．97±0．81）亦显著高于NS应激组（0．22±0．14）（P〈0．05）。结论：背根神经节P2X，受体可能参与了雌激素和避水应激所致的内脏高敏感过程。